Hoàn thiện quy trình lên men bacillus sp với quy mô 5 lít mẻ phục vụ cho việc tạo chế phẩm có khả năng chuyển hóa lân và đánh giá hiệu lực của chế phẩm

HCM BÁO CÁO NGHI M THU HOÀN THI N QUY TRÌNH LÊN MEN Bacillus sp VỚI QUY MƠ LÍT/MẺ PHỤC VỤ CHO VI C TẠO CHẾ PHẨM CĨ KHẢ Ă Đ Y N HÓA LÂN U LỰC CỦA CHẾ PHẨM KS Phan Thị Hồng Hải Th nh ph Hồ h inh, h ng 01/2019 BAN QU N LÝ KHU NÔNG NGHI P CÔNG NGH CAO TP.HCM TRUNG TÂM NGHIÊN C U VÀ PHÁT TRI N NÔNG NGHI P CÔNG NGH CAO BÁO CÁO NGHI M THU (Đã chỉnh sửa theo góp ý Hội đồng nghiệm thu) HỒN THI N QUY TRÌNH LÊN MEN Bacillus sp VỚI QUY MƠ LÍT/MẺ PHỤC VỤ CHO VI C TẠO CHẾ PHẨM CÓ KHẢ Ă Đ Y N HÓA LÂN U LỰC CỦA CHẾ PHẨM ƠQ Ủ TRÌ (Ký tên, đóng dấu xác nhận) CHỦ NHI ĐỀ TÀI (Ký tên) Phan Thị Hồng Hải Th nh ph Hồ h inh, h ng 01/2019 TĨM TẮT Lân đóng vai trị quan trọng trình sinh trƣởng phát triển trồng, tham gia vào việc hình thành màng tế bào, axit nucleic, làm nhanh q trình chín làm tăng phát triển rễ Tuy nhiên, lƣợng lớn lân bị cố định đất dạng khó hấp thụ mà thực vật khơng sử dụng đƣợc Vì thế, sử dụng số dịng vi khuẩn có khả chuyển hóa lân đƣợc xem giải pháp đóng vai trị quan trọng việc chuyển hóa lân khó tan thành dạng lân dễ hấp thụ cho trồng sử dụng giúp hấp thụ chất dinh dƣỡng đất tốt Đề tài sử dụng chủng Bacillus licheniformis B68 có số chuyển hóa lân SI 2,86; lên men hệ thống Bioreactor quy mơ lít với tỷ lệ giống 10% môi trƣờng rỉ đƣờng – tinh bột + 1mL/L Ca(NO3)2 M + 1mL/L MnCl2 0,01 M + 1mL/L FeSO4 mM thông số lên men nhƣ pH 7, tốc độ sục khí 0,5 vvm, DO (dissolved oxygen) > 20%, tốc độ khuấy 250 vòng/phút, nhiệt độ 37ºC với thời gian lên men tối ƣu cho hình thành bào tử chủng B68 30 Dịch vi khuẩn sau lên men đƣợc sốc nhiệt tạo bào tử, phối trộn với chất độn phân trùn quế sấy 45ºC 48 giờ, đóng gói túi nilon đƣợc hút chân không Sau tháng, số chuyển hóa lân vi khuẩn giữ đƣợc mức 2,84 với mật độ tế bào 2,54x109 bt/g Thử nghiệm sử dụng chế phẩm bón cho cà chua cho thấy, chế phẩm sinh học từ vi khuẩn B licheniformis B68 có tác dụng hồ tan lân khó tan có đất thành dạng trồng dễ hấp thu Sử dụng chế phẩm với liều lƣợng 5g chế phẩm/cây đƣợc xem thích hợp mang lại kết tốt cho sinh trƣởng phát triển cà chua Từ khóa: vi khuẩn chuyển hóa lân, Bacillus B68, chế phẩm sinh học chuyển hóa lân Trang i BM20-QT.QLKH MỤC LỤC TÓM TẮT i MỤC LỤC ii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH SÁCH BẢNG v DANH SÁCH HÌNH vi THÔNG TIN ĐỀ TÀI MỞ ĐẦU Chƣơng T NG QU N NGHI N CỨU 1.1 Vi khuẩn chuyển hóa lân 1.2 Vai trò lân trồng 1.3 Tổng quan Bacillus sp 1.4 Tổng quan cơng nghệ lên men ngập chìm 10 1.4.1 Phân loại 10 1.4.2 Các giai đoạn phát triển tế bào bình lên men 11 1.4.3 Các yếu tố ảnh hƣởng đến trình lên men 12 1.5 Một số nghiên cứu nhân nuôi sinh khối Bacillus 14 1.6 Một số nghiên cứu khả chuyển hóa lân vi khuẩn Bacillus sp 16 CHƢƠNG NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 20 2.1 Thời gian địa điểm thực 20 2.1.1 Thời gian thực hiện: 12 tháng 20 2.1.2 Địa điểm thực hiện: Thí nghiệm đƣợc thực Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nông nghiệp Công nghệ cao 20 2.2 Vật liệu thiết bị 20 2.2.1 Vật liệu 20 2.2.2 Thiết bị 20 2.3 Nội dung nghiên cứu 20 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 20 Trang ii BM20-QT.QLKH 2.4.1 Nội dung 1: Hoàn thiện quy trình lên men Bacillus sp quy mơ lít 20 2.4.2 Nội dung 2: Khảo sát số yếu tố ảnh hƣởng đến thời gian bảo quản chế phẩm 22 2.4.3 Nội dung 3: Đánh giá hiệu lực chế phẩm Bacillus sp cà chua điều kiện nhà màng 24 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 Nội dung 1: Hồn thiện quy trình lên men Bacillus sp quy mơ lít 27 3.2 Nội dung 2: Khảo sát số yếu tố ảnh hƣởng đến thời gian bảo quản chế phẩm 32 3.2.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng nhiệt độ thời gian sấy tới chất lƣợng chế phẩm 32 3.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng hình thức đóng gói tới chất lƣợng chế phẩm thời gian tháng 34 3.3 Nội dung 3: Đánh giá hiệu lực chế phẩm Bacillus sp cà chua điều kiện nhà màng 38 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 4.1 Kết luận 45 4.2 Kiến nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 50 Trang iii BM20-QT.QLKH DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Thuật ngữ tiếng việt BT Bào tử Ctv Cộng tác viên ĐC Đối chứng KHV Kính hiển vi KL Khuẩn lạc MĐTB Mật độ tế bào MĐBT Mật độ bào tử MT Môi trƣờng NT Nghiệm thức TB Tế bào VK Vi khuẩn VSV Vi sinh vật Trang iv BM20-QT.QLKH DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 Các nghiệm thức khảo sát công thức môi trƣờng tạo bào tử 21 Bảng 2.2 Các nghiệm thức khảo sát ảnh hƣởng nhiệt độ sấy tới chất lƣợng chế phẩm 23 Bảng 2.3 Các nghiệm thức khảo sát ảnh hƣởng hình thức đóng gói tới chất lƣợng chế phẩm 23 Bảng 2.4 Các nghiệm thức thí nghiệm đánh giá hiệu lực chế phẩm Bacillus sp cà chua điều kiện nhà màng 25 Bảng 3.1 Một số tiêu kim loại nặng rỉ đƣờng 28 Bảng 3.2 Ảnh hƣởng MT nuôi cấy khác đến MĐTB MĐBT vi khuẩn Bacillus B68 30 Bảng 3.3 Một số tiêu phân tích mẫu phân trùn quế 33 Bảng 3.4 Mật độ bào tử độ ẩm chế phẩm sau khoảng thời gian sấy 33 Bảng 3.5 Mật độ tế bào sau tháng bảo quản chế phẩm 34 Bảng 3.6 Chỉ số chuyển hóa lân SI sau tháng bảo quản chế phẩm 35 Bảng 3.7 Độ ẩm chế phẩm sau tháng bảo quản chế phẩm 35 Bảng 3.8 Một số đặc tính đất trồng 39 Bảng 3.9 Năng suất yếu tố cấu thành suất cà chua 40 Bảng 3.10 Hàm lƣợng lân đất thời điểm thu hoạch 42 Bảng 3.11 Bảng so sánh kết nghiên cứu 2018 kết nghiên cứu năm 2014 43 Trang v BM20-QT.QLKH DANH SÁCH HÌNH Hình 3.1 Hình thái khuẩn lạc B68 môi trƣờng TSA 27 Hình 3.2 Hình thái tế bào B68 dƣới kính hiển vi 27 Hình 3.3 Hình thái bào tử B68 dƣới kính hiển vi 27 Hình 3.4 Hệ thống lên men Bioreactor quy mô 5L 29 Hình 3.5 Ảnh hƣởng MT nhân giống đến MĐTB chủng VK B68 32 Hình 3.6: Quy trình tạo chế phẩm Bacillus licheniformis B68 37 Hình 3.7 Vƣờn cà chua giai đoạn bắt đầu hoa (a) giai đoạn trái bắt đầu chín (b) 39 Trang vi BM20-QT.QLKH THƠNG TIN ĐỀ TÀI Tên đề tài/dự án: Hoàn thiện quy trình lên men Bacillus sp với quy mơ lít/mẻ phục vụ cho việc tạo chế phẩm có khả chuyển hóa lân đánh giá hiệu lực chế phẩm Chủ nhiệm đề tài/dự án: Phan Thị Hồng Hải Cơ quan chủ trì: Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nông nghiệp Công nghệ cao Thời gian thực hiện: Tháng 1/2018 đến tháng 12/2018 Kinh phí đƣợc duyệt: 152.640.500 đồng Mục tiêu: Hồn thiện quy trình lên men Bacillus sp có khả chuyển hóa lân quy mơ lít/mẻ phục vụ cho việc tạo chế phẩm đánh giá hiệu lực chuyển hóa lân chế phẩm cà chua điều kiện nhà màng Nội dung đề tài: Nội dung 1: Hồn thiện quy trình lên men Bacillus sp quy mơ lít Nội dung 2: Khảo sát số yếu tố ảnh hƣởng đến thời gian bảo quản chế phẩm Nội dung 3: Đánh giá hiệu lực chuyển hóa lân chế phẩm Bacillus sp cà chua điều kiện nhà màng Sản phẩm đề tài /dự án: Quy trình lên men Bacillus sp quy mơ lít báo cáo khoa học BM20 – QT.QLKH Trang MỞ ĐẦU Lân nguyên tố cần thiết trồng, tham gia vào việc hình thành màng tế bào, axit nucleic, làm nhanh q trình chín làm tăng phát triển rễ Thiếu lân phát triển yếu Tuy nhiên, hiệu suất sử dụng lân trồng không 25% lƣợng lớn cịn lại bị cố định đất chuyển thành dạng khó tan Lân đất tồn dạng chính: dạng lân khơng tan nƣớc chiếm phần lớn dạng tan nƣớc Thực vật khơng sử dụng đƣợc dạng lân khó tan: apatite, Ca3(PO4)2, muối phosphate kim loại kiềm thổ đất trung tính kiềm Vì thế, lƣợng phân khó tan nằm đất mà khơng sử dụng đƣợc vấn đề cần giải nhằm tận dụng nguồn sẵn có hạn chế lƣợng phân bón hóa học đƣợc sử dụng Vì thế, số dịng vi khuẩn có khả chuyển hóa lân nhƣ Bacillus megaterium, Bacillus circulans, Bacillus subtilis, Bacillus polymyxa, Bacillus sircalmous, Pseudomonas striata, Pseudomonas fluorescens Enterobacter, … đóng vai trị quan trọng việc chuyển hóa lân khó tan thành dạng lân dễ tan cho trồng sử dụng giúp hấp thụ chất dinh dƣỡng đất tốt Khi sử dụng chủng vi khuẩn chuyển hóa lân, ngƣời dân tiết kiệm đƣợc đến 50% lƣợng lân vô sử dụng mà suất cao tƣơng đƣơng nhƣ bón đầy đủ phân lân vô (Nguyễn Hữu Hiệp Cao Ngọc Điệp, 2012) Xuất phát từ vấn đề trên, năm 2014, nghiên cứu “Xây dựng quy trình tạo chế phẩm sinh học từ giống vi khuẩn Bacillus spp Pseudomonas spp có khả chuyển hóa lân” đƣợc thực thu đƣợc số kết sau: - Tuyển chọn đƣợc dịng vi khuẩn Bacillus B68 có khả chuyển hóa lân cao với số chuyển hóa lân 2,84 đồng thời khơng gây độc trồng - Xác định đƣợc môi trƣờng thích hợp cho việc tăng sinh vi khuẩn Bacillus sp.: Môi trƣờng nhân giống cấp lên men thích hợp lần lƣợt mơi trƣờng TSB môi trƣờng rỉ đƣờng – tinh bột, chất độn phù hợp phân hữu - Bƣớc đầu xây dựng đƣợc quy trình tạo chế phẩm vi khuẩn chuyển hóa lân Tuy nhiên, nội dung nghiên cứu 2014 bƣớc đầu xây dựng quy trình tạo chế phẩm quy mơ phịng thí nghiệm Nhƣ cần hồn thiện quy trình thực tạo BM20 – QT.QLKH Trang B B B BM20 – QT.QLKH 9.89073 NT2 9.88117 NT3 Trang 59 Nội dung – thí nghiệm 2:  Mật độ vi khuẩn chế phẩm sau tháng: mat te bao vi khuan sau thang bao quan Sum of Source DF Model 0.00013333 0.00003333 10 0.00020000 0.00002000 Error Corrected Total Squares 14 Mean Square Coeff Var Root MSE 0.400000 0.045387 0.004472 DF NT 1.67 Pr > F 0.2333 0.00033333 R-Square Source F Value Anova SS 9.853333 Mean Square 0.00013333 Alpha MD Mean 0.00003333 F Value 1.67 Pr > F 0.2333 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 10 0.00002 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0081 Means with the same letter are not significantly different t Grouping A Mean N NT 9.856667 NT3 9.856667 NT4 9.853333 NT5 9.850000 NT2 9.850000 NT1 A A A A A A A A  Chỉ số SI vi khuẩn sau tháng bảo quản chế phẩm: chi so SI sau thang bao quan Sum of BM20 – QT.QLKH Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.00022667 0.00005667 0.77 0.5672 Error 10 0.00073333 Corrected Total 14 0.00096000 0.00007333 R-Square Coeff Var Root MSE HT Mean 0.236111 0.300052 0.008563 2.854000 Trang 60 Source DF NT Anova SS 0.00022667 Mean Square F Value 0.00005667 0.77 Alpha Pr > F 0.5672 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000073 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0156 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 2.856667 NT3 A 2.856667 NT2 2.856667 NT4 2.853333 NT1 2.846667 NT5 A A A A A A BM20 – QT.QLKH Trang 61  Mật độ vi khuẩn chế phẩm sau tháng: mat te bao vi khuan sau thang bao quan Sum of Source DF Model Squares 0.07464000 Mean Square 0.01866000 Error 10 0.01393333 Corrected Total 14 0.08857333 Source DF NT F Value Pr > F 13.39 0.0005 0.00139333 R-Square Coeff Var Root MSE MD Mean 0.842692 0.383422 0.037327 9.735333 Anova SS 0.07464000 Mean Square F Value 0.01866000 13.39 Alpha Pr > F 0.0005 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.001393 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0679 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 9.79667 NT4 9.79333 NT3 A 9.78667 NT2 B 9.66667 NT1 9.63333 NT5 A A A B B  Chỉ số SI vi khuẩn sau tháng bảo quản chế phẩm: chi so SI sau thang bao quan Sum of BM20 – QT.QLKH Source DF Squares Mean Square Model 0.00037333 0.00009333 Error 10 0.00066667 Corrected Total 14 0.00104000 F Value 1.40 Pr > F 0.3025 0.00006667 R-Square Coeff Var Root MSE HT Mean 0.358974 0.286289 0.008165 2.852000 Source DF Anova SS NT 0.00037333 Mean Square 0.00009333 F Value 1.40 Pr > F 0.3025 Trang 62 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000067 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0149 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 2.856667 NT2 2.856667 NT4 2.853333 NT3 2.850000 NT1 2.843333 NT5 A A A A A A A A BM20 – QT.QLKH Trang 63  Mật độ vi khuẩn chế phẩm sau tháng: mat te bao vi khuan sau thang bao quan Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.10302667 0.02575667 965.88 F NT 0.10302667 0.02575667 965.88 F 0.00017333 0.00004333 0.65 0.6398 10 0.00066667 0.00006667 14 0.00084000 R-Square Coeff Var Root MSE SI Mean 0.206349 0.286289 0.008165 2.852000 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.00017333 0.00004333 0.65 0.6398 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000067 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0149 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 2.856667 NT4 A A 2.853333 NT3 A A 2.853333 NT2 A A 2.850000 NT1 A A 2.846667 NT5 Source Model Error Corrected Total Source NT BM20 – QT.QLKH DF Trang 64  Mật độ vi khuẩn chế phẩm sau tháng: mat vi khuan sau thang Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F 0.82390667 0.20597667 2808.77 F NT 0.82390667 0.20597667 2808.77 F 0.00030667 0.00007667 0.68 0.6235 10 0.00113333 0.00011333 14 0.00144000 R-Square Coeff Var Root MSE HT Mean 0.212963 0.373800 0.010646 2.848000 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.00030667 0.00007667 0.68 0.6235 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000113 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0194 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 2.853333 NT3 A A 2.853333 NT4 A A 2.846667 NT2 A A 2.843333 NT1 A A 2.843333 NT5 Source Model Error Corrected Total Source NT BM20 – QT.QLKH DF Trang 65  Mật độ vi khuẩn chế phẩm sau tháng: mat te bao vi khuan sau thang bao quan Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.88389333 0.22097333 90.56 F NT 0.88389333 0.22097333 90.56 F Model 0.88389333 0.22097333 90.56 F NT 0.88389333 0.22097333 90.56 F Model 1.05116000 0.26279000 26.35 F NT 1.05116000 0.26279000 26.35 F Model 0.00096000 0.00024000 4.50 0.0245 Error 10 0.00053333 0.00005333 Corrected Total 14 0.00149333 R-Square Coeff Var Root MSE HT Mean 0.642857 0.257388 0.007303 2.837333 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.00096000 0.00024000 4.50 0.0245 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000053 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.0133 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 2.843333 NT3 A A 2.843333 NT2 A A 2.843333 NT4 A B A 2.833333 NT1 B B 2.823333 NT5 BM20 – QT.QLKH Trang 67 Nội dung 3: Đánh giá hiệu lực chuyển hóa lân chế phẩm Bacillus sp cà chua điều kiện nhà màng  Chiều cao cà chua thu hoạch: chieu cao cay ca chua thu hoach Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 8188.666667 2047.166667 19.98 F NT 8188.666667 2047.166667 19.98 F Model 126.5066667 31.6266667 4.32 0.0275 Error 10 73.1666667 7.3166667 Corrected Total 14 199.6733333 R-Square Coeff Var Root MSE cc Mean 0.633568 10.27190 2.704934 26.33333 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 126.5066667 31.6266667 4.32 0.0275 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 7.316667 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 4.921 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 31.033 NT1 A B A 28.033 NT3 B B C 25.233 NT4 B C B C 24.667 NT5 C C 22.700 NT2 BM20 – QT.QLKH Trang 68  Thời gian bắt đầu thu hoạch: thoi gian bat dau thu hoach Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 365.4026667 91.3506667 8.16 0.0034 Error 10 112.0133333 11.2013333 Corrected Total 14 477.4160000 R-Square Coeff Var Root MSE TH Mean 0.765376 5.392909 3.346839 62.06000 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 365.4026667 91.3506667 8.16 0.0034 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 11.20133 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 6.0888 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 70.467 NT1 B 64.133 NT3 B C B 60.467 NT4 C B C B 59.167 NT5 C C 56.067 NT2  Tổng số trái thu đƣợc cây: tong so trai tren moi cay thu hoach Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 8647.020000 2161.755000 21.62 F NT 8647.020000 2161.755000 21.62 F Model 36.38695573 9.09673893 20.41 F NT 36.38695573 9.09673893 20.41 F Model 1.24670667 0.31167667 16.47 0.0002 Error 10 0.18926667 0.01892667 Corrected Total 14 1.43597333 R-Square Coeff Var Root MSE RT Mean 0.868196 7.086584 0.137574 1.941333 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 1.24670667 0.31167667 16.47 0.0002 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.018927 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.2503 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 2.4000 NT2 B 2.0367 NT5 B B 1.9567 NT4 B B 1.7867 NT3 C BM20 – QT.QLKH 1.5267 NT3 NT1 NT1 Trang 70  Chiều dài trái cà chua thời điểm thu hoạch: chieu dai trai thu hoach Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 2.12269333 0.53067333 8.11 0.0035 Error 10 0.65446667 0.06544667 Corrected Total 14 2.77716000 R-Square Coeff Var Root MSE DT Mean 0.764340 7.813850 0.255825 3.274000 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 2.12269333 0.53067333 8.11 0.0035 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.065447 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 0.4654 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 3.9333 NT2 B 3.2467 NT5 B B 3.2367 NT4 B C B 3.1933 NT3 C C 2.7600 NT1  Độ Brix trái thời điểm thu hoạch: brix trai thu hoach Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 3.50746933 0.87686733 22.68 F NT 3.50746933 0.87686733 22.68 F Model 2728103.187 682025.797 105.19 F NT 2728103.187 682025.797 105.19 F Model 296408.7290 74102.1823 79.58 F NT 296408.7290 74102.1823 79.58 F Model 171373.5831 42843.3958 442.97 F NT 171373.5831 42843.3958 442.97 F Model 21669.94420 5417.48605 26.88 F NT BM20 – QT.QLKH 21669.94420 5417.48605 26.88