Xác định thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của tinh dầu lá trầu không (piper betle)

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN KIM CHI XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU LÁ TRẦU KHƠNG (PIPER BETLE) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Đà Nẵng, năm 2023 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN KIM CHI XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU LÁ TRẦU KHƠNG (PIPER BETLE) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học TS Đỗ Thị Thúy Vân Đà Nẵng, năm 2023 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết luận văn hoàn toàn trung thực Đà Nẵng, ngày tháng năm 2023 Tác giả Nguyễn Kim Chi i Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập, nghiên cứu hồn thành đề tài nghiên cứu khoá luận tốt nghiệp; em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ từ quý thầy cô Trước tiên em xin gởi lời cảm ơn chân thành đến cô Đỗ Thị Thuý Vân, cô giảng viên trược tiếp hướng dẫn em hoàn thành đề tài nghiên cứu khố luận tốt nghiệp Trong q trình làm việc nghiên cứu tận tính hướng dẫn, truyền đại kinh nghiệm bảo tận tình đồng thời cô tạo nhiều điều kiện thuận lợi cho em để em hồn thành đề tài cách trọn vẹn thời hạn Em xin gởi lời cảm ơn đến tất quý thầy Khoa Hố học Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng Trong trình học tập năm đây, thầy cô tận tình truyền đạt cho em kiến thức, kỹ kinh nghiệm Được học tập, rèn luyện nghiên cứu đề tài khóa luận tốt nghiệp trường em vinh dự may mắn Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình, bạn bè động viên tạo điều kiện tốt để em nỗ lực hồn thành tốt nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn! ii Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ACh: Acetylcholine AChE: Acetylcholinesterase ACTI: Acetylthiocholine Iodid DMSO: Dimethyl sulphoxide DTNB: 5,5`-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid) GC-MS: (Gas Chromatography Mass Spectometry) Sắc ký khí ghép khối phổ GC: Sắc ký khí LPS: Lipopolysaccharides MS: Khối phổ NO: nitric oxide iii Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi DANH MỤC HÌNH, BẢNG, SƠ ĐỒ DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Một số loại thuộc họ hồ tiêu .4 Hình 1.2 Cây trầu khơng Hình 1.3 Hệ thống sắc ký khí .23 Hình 1.4 Sắc kí đồ 24 Hình 2.1 Lá trầu không thu hái Quảng Nam – Đà Nẵng 28 Hình 2.2 Chiết suất tinh dầu trầu không phương pháp chưng cất lôi nước .31 Hình 2.3 Lượng tinh dầu trầu khơng thu q trình chưng cất lơi nước .31 Hình 2.4 Tinh dầu trầu không thu 31 Hình 3.1 Sắc ký đồ tinh dầu trầu không 36 iv Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Hiệu suất thu tinh dầu trầu không .35 Bảng 3.2 So sánh hiệu suất thu hồi tinh dầu trầu không Quảng Nam - Đà Nẵng với tinh dầu trầu không Hậu Giang Hải Dương .35 Bảng 3.3 Thành phần hoá học tinh dầu trầu không 37 Bảng 3.4 Công thức phân tử công thức cấu tạo hợp chất có tinh dầu trầu khơng Quảng Nam – Đà Nẵng 38 Bảng 3.5 Thành phần hợp chất hố học tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng, Hải Dương, Hậu Giang Bangla (Ấn Độ) 43 Bảng 3.6 Kết hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu không 47 Bảng 3.7 Hoạt tính ức chế AChE tinh dầu loài thuộc chi Piper 47 Bảng 3.8 Kết hoạt tính ức chế NO tinh dầu trầu khơng 48 Bảng 3.9 Hoạt tính ức chế NO tinh dầu loài thuộc chi Piper 49 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1 Sơ đồ quy trình chưng cất tinh dầu 17 Sơ đồ1.2 Sơ đồ quy trình cơng nghệ trích ly 19 Sơ đồ 1.3 Sơ đồ quy trình phương pháp ngâm .20 Sơ đồ 2.1 Sơ đồ quy trình chưng cất lơi nước trầu không 30 v Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iii DANH MỤC HÌNH .iv DANH MỤC BẢNG .v DANH MỤC SƠ ĐỒ .v LỜI MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Tổng quan tình hình nghiên cứu đề tài Mục tiêu đề tài Đối tượng phạm vi nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu 5.1 Nghiên cứu lý thuyết 5.2 Nghiên cứu thực nghiệm Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài .3 Nội dung nghiên cứu .3 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan họ hồ tiêu .4 1.2 Giới thiệu trầu không 1.2.1 Sơ lược trầu không giới thực vật 1.2.2 Công dụng .6 1.3 Tổng quan tinh dầu [1] 1.3.1 Khái niệm [1] 1.3.2 Phân loại tinh dầu [1] 1.3.3 Tính chất vật lí thành phần hoá học tinh dầu 10 vi Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi 1.3.4 Các số vật lý hoá học tinh dầu trầu khơng [4] 13 1.3.5 Vai trị tinh dầu đời sống thực vật .14 1.3.6 Các phương pháp chiết tách tinh dầu 14 1.4 Phương pháp phân tích sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) [1] 22 1.4.1 Sắc ký khí (GC) 22 1.4.2 Phương pháp khối phổ (MS) .24 1.4.3 Phương pháp phân tích sắc ký khí ghép khối phổ (GC – MS) 25 1.5 Hoạt tính kháng acetylcholinesterase (AChE) 26 1.6 Hoạt tính ức chế nitric oxide (NO) [5] .26 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tượng, dụng cụ, thiết bị hoá chất 28 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị hoá chất .28 2.2 Phương pháp nghiên cứu 29 2.3 Xử lý nguyên liệu .29 2.4 Quy trình chiết xuất tinh dầu trầu không 30 2.4.1 Quy trình chưng cất lơi nước tinh dầu trầu không 30 2.4.2 Hiệu suất thu nhận tinh dầu trầu không 31 2.5 Xác định thành phần hố học tinh dầu trầu khơng 32 2.6 Xác định hoạt tính kháng acetylcholinesterase (AChE) .32 2.7 Xác định hoạt tính ức chế nitric oxide (NO) 33 2.7.1 Phương pháp nuôi cấy tế bào in vitro 33 2.7.2 Phương pháp xác định khả ức chế sản sinh NO tế bào macrophage RAW 264.7 33 2.7.3 Phép thử sinh học xác định khả gây độc tế bào MTT .34 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 3.1 Hiệu suất thu hồi tinh dầu 35 vii Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi 3.1.1 Hiệu suất thu hồi tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng 35 3.1.2 So sánh hiệu suất tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng với địa phương khác nước .35 3.2 Kết xác định thành phần hố học tinh dầu trầu khơng 36 3.2.1 Thành phần hoá học tinh dầu trầu không 36 3.2.2 Khái qt cơng thức cấu tạo hoạt tính sinh học thành phần hố học tinh dầu trầu không phương pháp chưng cất lôi nước .44 3.3 Kết xác định hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng 47 3.4 Kết xác định hoạt tính ức chế nitric oxide (NO) tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng .48 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .50 TÀI LIỆU THAM KHẢO .51 viii Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi 25,359 4-Allyl-1,2-diacetoxybenzene 18 19,8 19 25,555 tau-Muurolol 0,71 20 25,579 Epicubenol 0,73 21 25,642 α-Cadinol 1,63 99,68 Tổng Nhận xét: Kết thu bảng 3.3 cho thấy thành phần hóa học tinh dầu trầu khơng Quảng Nam – Đà Nẵng xác định phương pháp GCMS gồm 21 thành phần (99,68%), thành phần eugenol acetate (32,33%), eugenol (24,56%), 4-allyl-1,2-diacetoxybenzene (19,8%), germacrene D (5,98%), caryophyllene (3,32%) γ-muurolene (2,45%) Công thức phân tử công thức cấu tạo hợp chất có tinh dầu trầu khơng Quảng Nam – Đà Nẵng thể bảng 3.4 Bảng 3.4 Công thức phân tử công thức cấu tạo hợp chất có tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng STT Các hợp chất CTPT Eucalyptol C10H18O Trans-𝛽- Ocimene C10H18 Linalool C10H18O CTCT 38 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi Phenol, 4-(24 propenyl)-, axetat Eugenol C11H12O2 C10H12O2 𝛼-Cubeben C15H24 𝛽- Elemene C15H24 Caryophyllene C15H24 39 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi Humulene C15H24 10 γ-Muurolen C15H24 11 Germacrene D C15H24 12 Eugenol axetat C12H14O3 13 β-Bisabolene C15H24 40 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi 14 δ-Cadinene C15H24 15 Germacrene B C15H24 16 (-)-Globulol C15H26O 17 Viridiflorol C15H26O 41 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi 4-Allyl-1,218 C13H14O4 diacetoxybenzene 19 tau-Muurolol C15H26O 20 Epicubenol C15H26O 21 α-Cadinol C15H26O So sánh thành phần hợp chất hố học tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng với tinh dầu trầu không Hải Dương, Hậu Giang Bangla (Ấn Độ) thể bảng 3.5 42 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi Bảng 3.5 Thành phần hợp chất hố học tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng, Hải Dương, Hậu Giang Bangla (Ấn Độ) Hàm lượng (%) STT Hợp chất Quảng Hải Hậu Nam-Đà Dương Giang Nẵng [4] [3] Bangla [10] Eugenol acetate 32,33 8,67 20,14 0,221 Eugenol 24,56 77,24 - 44,14 4-allyl-1,2- 19,8 2,73 34,55 - diacetoxybenzene Germacrene D 5,98 - - - Caryophyllene 3,32 0,27 - 1,125 γ-muurolene 2,45 - 1,33 0,736 Nhận xét: Căn vào tài liệu tham khảo [3], [4], [10] thành phần hoá học tinh dầu trầu không Hải Dương, Hậu Giang Bangla (Ấn Độ) kết so sánh bảng 3.5 cho thấy, tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng, Hải Dương Bangla có hàm lượng eugenol cao cịn Hậu Giang không thấy xuất chất Hàm lượng chất Quảng Nam – Đà Nẵng thấp so với Hải Dương Bangla Eugenol acetate Quảng Nam – Đà Nẵng chiếm hàm lượng cao tất hợp chất có tinh dầu trầu, đồng thời hàm lượng chất cao hẳn so với Hải Dương, Hậu Giang Bangla Hàm lượng 4-allyl-1,2-diacetoxybenzene tinh dầu Quảng Nam – Đà Nẵng cao Hải Dương, nhiên thấp Hậu Giang Bangla khơng thấy xuất hợp chất Germacrene D tìm thấy tinh dầu trầu khơng Quảng Nam – Đà Nẵng, nhiên chất không xuất tinh dầu Hải Dương, Hậu Giang Bangla Hợp chất caryophyllene xuất tinh dầu Quảng Nam – Đà Nẵng, Hải Dương, Bangla, nhiên không xuất tinh dầu Hậu Giang Hàm lượng chất tinh dầu Quảng Nam 43 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi – Đà Nẵng cao so với nơi lại γ-muurolene xuất tinh dầu trầu Quảng Nam – Đà Nẵng, Hậu Giang Bangla không xuất Hải Dương, hàm lượng chất tinh dầu trầu Quảng Nam – Đà Nẵng cao so với Hậu Giang Bangla Sự khác thổ nhưỡng, điều kiện khí hậu, thời kì sinh trưởng, cách chăm bón tạo khác biệt thành phần hoá học tinh dầu trầu không địa phương quốc gia quốc gia với 3.2.2 Khái qt cơng thức cấu tạo hoạt tính sinh học thành phần hố học tinh dầu trầu không phương pháp chưng cất lôi nước ❖ Eugenol acetat - Eugenol acetate, gọi acetate eugenol, hợp chất hữu tự nhiên Nó ester eugenol acetic acid - Công thức: C12H14O3 - Khối lượng phân tử: 206.241 g.mol−1 - Hoạt tính sinh học: Giống eugenol, tìm thấy số lồi thực vật Acacia nilotica, Piper betle [8], [11], [13] có đặc tính kháng khuẩn kháng nấm tương tự C.albicans S.mutans Nó ức chế kết tập tiểu cầu có hoạt động chủ vận mộ phần AhR ❖ Eugenol - Là guaiacol thay chuỗi allyl, thành viên nhóm hợp chất hóa học allylbenzene Nó chất lỏng dầu thơm, không màu đến vàng nhạt, chiết xuất từ số loại tinh dầu, đặc biệt từ đinh hương, nhục đậu khấu, quế, húng quế nguyệt quế Nó diện nồng độ 80–90% dầu nụ đinh hương 82– 88% dầu đinh hương Eugenol có mùi thơm dễ chịu, cay nồng giống mùi đinh hương [17] 44 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi - Công thức: C10H12O2 - Khối lượng phân tử: 164,204 g.mol-1 - Hoạt tính sinh học Eugenol phenol tìm thấy xá xị, nhựa thơm đặc biệt tinh dầu đinh hương Nó sử dụng rộng rãi, hoạt động chất kích thích dày, tạo mùi thơm sát trùng, đồng thời sử dụng làm thuốc long đờm bệnh viêm phế quản loại gia vị đa ngành công nghiệp nước hoa [14] ❖ 4-allyl-1,2-diacetoxybenzene - Công thức cấu tạo: - Công thức phân tử: C13H14O4 - Khối lượng phân tử: 234.25 g.mol-1 ❖ Germacrene D Là loại hydrocacbon hữu dễ bay hơi, cụ thể sesquiterpenes Germacrene thường sản xuất số lồi thực vật đặc tính kháng khuẩn diệt côn trùng chúng, chúng đóng vai trị pheromone trùng [18] - Công thức: C15H24 45 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi - Khối lượng phân tử: 204,357 g.mol-1 ❖ Caryophyllene Caryophyllene hay (-)-β-caryophyllene, (BCP), sesquiterpene hai vòng tự nhiên thành phần nhiều loại tinh dầu, đặc biệt dầu đinh hương, dầu từ thân hoa Syzygium aromaum (đinh hương), tinh dầu Cần sa sativa, hương thảo hoa bia Nó thường tìm thấy dạng hỗn hợp với isocaryophyllene (chất cis đồng phân liên kết đôi) 𝛼-humulene (tên cũ: α-caryophyllene), đồng phân mở vòng Caryophyllene đáng ý có vịng cyclobutane, liên kết đơi trans vòng cạnh, hai tự nhiên Caryophyllene hợp chất hoá học tạo nên mùi thơm hạt tiêu đen [19] - Công thức: C15H24 - Khối lượng phân tử: 204,357 g.mol-1 - Hoạt tinh sinh học caryophyllene: tên β-caryophyllene hydrocacbon sesquiterpene tự nhiên với số hoạt động dược lý quan trọng, bao gồm chức chống oxy hóa, chống viêm, chống ung thư bảo vệ tim mạch Những đặc tính chủ yếu tương tác chọn lọc với thụ thể cannabinoid biểu ngoại vi Ngồi ra, BCP kích hoạt thụ thể hoạt hóa tăng sinh peroxisome α γ ức chế đường truyền tín hiệu thụ thể Toll-like ❖ γ-muurolene γ-Muurolene synthase enzyme thuộc nhóm terpene synthase (TPS), có chức tham gia vào q trình sản xuất hợp chất terpenoid Enzyme có khả chuyển đổi farnesyl diphosphate (FPP) thành γ-muurolene, loại sesquiterpen hydrocarbon tìm thấy nhiều lồi thực vật Enzyme γ-muurolene synthase cô đọng tinh chế từ nhiều loài thực vật khác nhau, bao gồm bạc hà, mùi 46 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi tây, cam thảo Nó sử dụng rộng rãi nghiên cứu để tìm hiểu chế sản xuất hợp chất terpenoid thực vật, để sản xuất hợp chất terpenoid có giá trị thương mại ngành công nghiệp thực phẩm, mỹ phẩm dược phẩm 3.3 Kết xác định hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng Hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng thể bảng 3.6 Bảng 3.6 Kết hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu không Galantamine Tinh dầu trầu khơng Nồng độ (µg/mL) % ức chế Sai số Sai số % ức chế 500 88,24 2,93 91,07 1,31 100 59,80 1,85 56,56 1,69 20 28,00 1,08 21,83 0,93 9,59 0,53 9,07 0,42 65,94±5,96 1,70±0,12 IC50 Ghi chú: Galantamine chất đối chứng dương thử nghiệm dải nồng độ 10-20,4-0,08 µg/mL Nhận xét: Kết thu bảng 3.6 cho thấy tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng thể hoạt tính kháng AChE với IC50 (µg/mL) = 65,94±5,96 So sánh hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu khơng Quảng Nam – Đà Nẵng với tinh dầu loài khác thuộc chi Piper thể bảng 3.7 Bảng 3.7 Hoạt tính ức chế AChE tinh dầu loài thuộc chi Piper Loài Bộ phận 47 IC50 (µg/mL) Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi Tinh dầu Piper lolot 28,72±2,80 Piper longum Tinh dầu 164,55±13,79 Piper puberulum Tinh dầu thân 4,47±0,37 Piper austrosinense Tinh dầu thân 12,40±0,13 Nhận xét: So sánh hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng với chất đối chứng dương Galantamine loài khác thuộc chi Piper (Bảng 3.7) nhận thấy tinh dầu trầu khơng thể hoạt tính ức chế AChE mức độ trung bình 3.4 Kết xác định hoạt tính ức chế nitric oxide (NO) tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng Hoạt tính ức chế NO tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng thể bảng 3.8 Bảng 3.8 Kết hoạt tính ức chế NO tinh dầu trầu không Tinh dầu trầu khơng Nồng độ (µg/mL) % ức chế NO L-NMMA % tế bào sống % ức chế NO % tế bào sống TB Sai số TB Sai số TB Sai số TB Sai số 100 91,18 1,66 92,18 1,44 95,55 2,30 87,58 1,71 20 25,88 2,50 98,65 1,37 78,37 1,78 92,80 1,30 13,24 1,25 20,28 0,41 0.8 4,71 0,33 10,13 0,63 IC50 46,69±3,57 - 8,42±0,41 48 - Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi Nhận xét: : Kết thu bảng 3.8 cho thấy tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng thể hoạt tính ức chế sinh NO với giá trị IC50 = 46,69±3,57 µg/mL Mẫu đối chứng dương L-NMMA hoạt động ổn định thí nghiệm So sánh hoạt tính ức chế NO tinh dầu trầu khơng Quảng Nam – Đà Nẵng với tinh dầu loài khác thuộc chi Piper thể bảng 3.9 Bảng 3.9 Hoạt tính ức chế NO tinh dầu loài thuộc chi Piper Loài Bộ phận IC50 (µg/mL) Piper lolot Tinh dầu >100 Piper longum Tinh dầu 13,02±0,29 Nhận xét: So sánh hoạt tính ức chế NO tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng với chất đối chứng dương L-NMMA loài khác thuộc chi Piper (Bảng 3.9) nhận thấy tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng thể hoạt tính ức chế NO trung bình 49 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã thu tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng phương pháp chưng cất lôi nước thiết bị chưng cất tinh dầu nhẹ Clevender với 200g trầu không/400mL nước cất thời gian giờ, hiệu suất thu hồi tinh dầu trầu không 0,83% Đã xác định thành phần hố học tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng eugenol acetat, eugenol, 4-allyl-1,2-diacetoxybenzene, germacrene D, caryophyllene γ-muurolene Đây chất có hoạt tính sinh học tốt, cho thấy tinh dầu trầu khơng có chất lượng giá trị thương mại cao Đã xác định hoạt tính kháng AChE tinh dầu trầu khơng Quảng Nam – Đà Nẵng, kết thu cho thấy tinh dầu trầu hoạt tính kháng AChE trung bình với IC50 (µg/mL) = 65,94±5,96 Đã xác định hoạt tính ức chế NO tinh dầu trầu không Quảng Nam – Đà Nẵng, kết thu cho thấy tinh dầu trầu khơng thể hoạt tính ức chế NO trung bình với IC50 (µg/mL) = 46,69±3,57 KIẾN NGHỊ Nghiên cứu phương pháp bảo quản tinh dầu trầu khơng Nghiên cứu phân lập thành phần hố học có hàm lượng cao tinh dầu trầu khơng 50 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT [1] Đoàn Ngọc Dũng, "Chiết xuất tinh dầu Bạch đàn phương pháp chưng cất lôi nước", Đề tài nghiên cứu khoa học 2017, Trường ĐH Bà Rịa - Vũng Tàu [2] Nguyễn Nho Dũng, "Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hoá học tinh dầu dịch chiết từ trầu khơng", Tóm tắt luận văn Thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng, 2011 [3] Nguyễn Thiện Chí, Đỗ Duy Phúc, Nguyễn Thị Ngọc Châm, Phạm Khánh Ngọc, Dương Tùng Kha Nguyễn Thị Thu Thuỷ, “Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dầu trầu không (Piper betel L), họ hồ tiêu (Piperace)”, Tạp chí Khoa học Đại học Cần Thơ, (2016) DOI: 10.22144/ctu.jvn.2016.508 [4] Phạm Thế Chính, Dương Nghĩa Bang, Phan Thanh Phương, Khiếu Thị Tâm, Phạm Thị Thắm, Lê Thị Xuân, Bùi Thị Thúy, "Thành phần hoá học tinh dầu trầu không (Piper betle L) trồng Hải Dương," Trường Đại học Khoa học - Đại học Thái Nguyên [5] Trần Đức Đại, “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học hai lồi ngọc cẩu (balanophora laxiflora hemsl.) vú bò (ficus hirta vahl.)”, Luận án tiến sĩ hoá học, Viên Hàn lâm khoa học Công nghê Việt Nam, 2018 [6] Võ Văn Chi, "Từ điển thực vật thông dụng tập 2," Nxb Khoa học kỹ thuật, 13861387, 2004 [7] Võ Văn Chi, "Cây rau thuốc", Nxb Tổng hợp Đồng Tháp, 2007 TIẾNG ANH [8] Das S, Ray A, Nasim N, Nayak S, Mohanty S (2019) "Effect of different extraction techniques on total phenolic and flavonoid contents, and antioxidant activity of betelvine and quantification of its phenolic constituents by validated HPTLC method" Biotech DOI:10.1007/s13205-018-1565-8 [9] DeFilipps, R A., & Krupnick, G A (2018) “The medicinal plants of Myanmar”, PhytoKeys, 102, 1–341 DOI: 10.3897/phytokeys.102.24380 [10] Madhumita, M., Guha, P., & Nag, A (2019) “Extraction of betel leaves (Piper betle L.) essential oil and its bio-actives identification: Process optimization, GC-MS analysis and anti-microbial activity” Industrial Crops and Products, 138, 111578 DOI: 10.1016/j.indcrop.2019.111578 51 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Kim Chi [11] Prakash B, Shukla R, Singh P, Kumar A, Mishra PK, Dubey NK (2010) "Efficacy of chemically characterized Piper betle L essential oil against fungal and aflatoxin contamination of some edible commodities and its antioxidant activity" International Journal of Food Microbiology DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2010.06.011 [12] Stephen, P Teo & R.A Banka; “PROSEA, No16 – Stimulants”, p.102 – 106, 2000 [13] Tahmasebi A, Hosseini SM, Karami A, Afsharifar A, Sharifi Olounabadi AR (2021) "Variation in essential oil composition of Rydingia michauxii at the three developmental stages" Natural Product Research 342 - 345 DOI: 10.1080/14786419.2019.1622112 [14] Vanin, A B., Orlando, T., Piazza, S P., Puton, B M S., Cansian, R L., Oliveira, D., & Paroul, N (2014) “Antimicrobial and Antioxidant Activities of Clove Essential Oil and Eugenyl Acetate Produced by Enzymatic Esterification”, Applied Biochemistry and Biotechnology, 174, 1286–1298 DOI:10.1007/s12010-014-1113-x TÀI LIỆU WEBSIDE [15] Trầu không [Internet] Lấy từ URL: https://herbeco.vn/pages/trau-khong [16] Lá Trầu không [Internet] Lấy từ URL: https://tambinh.vn/la-trau-khong/ [17] Eugenol [Internet] Lấy từ URL: https://en.wikipedia.org/wiki/Eugenol [18] Germacrene D [Internet] Lấy từ URL: https://en.wikipedia.org/wiki/Germacrene [19] Caryophyllene [Internet] Lấy từ URL: https://en.wikipedia.org/wiki/Caryophyllene 52