Xác định thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của tinh dầu lá lốt (piper lolot)

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ NGỌC HIỆP XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU LÁ LỐT (PIPER LOLOT) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Đà Nẵng, năm 2023 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ NGỌC HIỆP XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU LÁ LỐT (PIPER LOLOT) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học TS Đỗ Thị Thúy Vân Đà Nẵng, năm 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu kết luận văn hoàn toàn trung thực Đà Nẵng, ngày tháng năm 2023 Tác giả Nguyễn Thị Ngọc Hiệp LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập, nghiên cứu hoàn thành đề tài nghiên cứu tốt nghiệp, em nhận vô vàng quan tâm giúp đỡ từ quý thầy cô Lời cảm ơn đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành thân đến cô Đỗ Thị Thúy Vân, cô giảng viên giảng dạy hướng dẫn trực tiếp để em hồn thành đề tài nghiên cứu Nhờ tận tình hướng dẫn bảo tận tâm cô, đồng thời cô tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành đề tài trọn vẹn Em xin gửi lời cảm ơn cô Bùi Ngọc Phương Châu – giảng viên chủ nhiệm lớp 19SHH tồn thể q thầy Khoa Hóa học Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng Trong trình học tập trường, thầy ln tận tình truyền đạt kiến thức, kỹ kinh nghiệm quý thầy cô đến với sinh viên chúng em Việc học tập rèn luyện trường vinh dự hành trang tốt cho trình học tập làm việc sau Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè ln động viên tạo điều kiện để em hồn thành tốt nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn! DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT GC – MS: (Gas Chromatography Mass Spectometry) Sắc ký khí ghép khối phổ GC: Sắc ký khí MS: khối phổ ACh: Acetylcholine AChE: Acetylcholinesterase ACTI: Acetylthiocholine Iodid NO: nitric oxide LPS: Lipopolysaccharides NAFLD: Non - alcoholic fatty liver diseas NASH: Nonalcoholic steatohepatitis FPP: Farnesyl pyrophosphate MRSA: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1 Một số thực vật thuộc họ Hồ tiêu (Piperacese) 11 Hình Bị cuộn lốt 15 Hình Cấu trúc Flavonoids 18 Hình Cấu trúc hóa học Quercetin 19 Hình Cấu trúc hóa học Isoflavonoids 19 Hình Cấu trúc hóa học Neoflavonoids 19 Hình Một số tinh dầu khác 20 Hình Cấu trúc phân tử isopren khung terpenoid 20 Hình Sơ đồ cấu tạo nguyên tắc hoạt động hệ thống sắc ký khí 28 Hình Chiết xuất tinh dầu lốt phương pháp chưng cất lôi nước 35 Hình 2 Lượng tinh dầu thu trình chưng cất 36 Hình Tinh dầu lốt thu 35 Hình Sắc kí đồ GC – MS tinh dầu lốt 40 Hình Cấu trúc phân tử myriscin 46 Hình 3 Cấu trúc phân tử Asarone 47 Hình Cấu trúc phân tử caryophyllene 48 Hình Cấu trúc phân tử β-Bisabolene 50 Hình Cấu trúc phân tử 𝛼 − 𝐶𝑜𝑝𝑎𝑒𝑛𝑒 50 DANH MỤC BẢNG Bảng Hiệu suất thu nhận tinh dầu lốt Quảng Nam - Đà Nẵng Bảng Thành phần hóa học tinh dầu lốt Bảng 3 CTCT CT phân tử có thành phần hóa học tinh dầu lốt Bảng Kết khả ức chế NO tinh dầu lốt Bảng Kết khả ức chế AChE tinh dầu lốt Bảng So sánh với tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng với tinh dầu lốt Cần Thơ Bảng Hàm lượng hợp chất tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng, Cần Thơ Trung Quốc Bảng Hoạt tính sinh học kháng AChE tinh dầu loài thuộc chi Piper Bảng Hoạt tính ức chế sản sinh NO tinh dầu thuộc chi Piper 39 39 41 51 51 52 52 54 54 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ Sơ đồ quy trình chưng cất lơi nước trầu không 34 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN Error! Bookmark not defined LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT .3 DANH MỤC HÌNH ẢNH .4 DANH MỤC BẢNG DANH MỤC SƠ ĐỒ .5 LỜI MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết vấn đề Tổng quan tình hình nghiên cứu đề tài Error! Bookmark not defined Mục tiêu đề tài .Error! Bookmark not defined Đối tượng phạm vi nghiên cứu .Error! Bookmark not defined Phương pháp nghiên cứu Error! Bookmark not defined Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Error! Bookmark not defined Nội dung nghiên cứu 10 CHƯƠNG TỔNG QUAN 11 1.1.Tổng quan lốt 11 1.1.1 Giới thiệu họ hồ tiêu (Piperaceae) 11 1.1.2 Giới thiệu lốt 11 1.1.3 Thành phần hóa học lốt 15 1.2.Tổng quan tinh dầu lốt 19 1.2.1 Giới thiệu tinh dầu [4] 19 1.2.2 Giới thiệu chung tinh dầu lốt công dụng 23 1.2.3 Thành phần hóa học tinh dầu lốt 24 1.3.Các phương pháp thu nhận tinh dầu 24 1.3.1 Phương pháp trích ly 25 1.3.2 Phương pháp chưng cất lôi nước 25 1.4.Xác định thành phần hóa học tinh dầu lốt phương pháp sắc ký khí ghép phối phổ 27 1.4.1 Phương pháp sắc ký khí (GC) 27 1.4.2 Phương pháp khối phổ (MS) 29 1.4.3 Phương pháp sắc ký khí ghép phối phổ (GC – MS) 29 1.5.Tổng quan hoạt tính NO AChE Error! Bookmark not defined 1.5.1 Khả ức chế sản sinh NO [18] [20] 31 1.5.2 Hoạt tính sinh học kháng Acetylcholinesterase (AChE) 31 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT, DỤNG CỤ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .33 2.1.Nguyên liệu .33 2.2.Thiết bị, dụng cụ hóa chất .33 2.2.1 Thiết bị, dụng cụ 33 2.2.2 Hóa chất 33 2.3.Quy trình chưng chất lơi nước tinh dầu lốt 33 2.3.1 Quy trình chưng cất lơi tinh dầu lốt 33 2.3.2 Hiệu suất thu nhận tinh dầu lốt 36 2.4.Xác định thành phần hóa học tinh dầu lốt .36 2.5.Phương pháp xác định khả ức chế sản sinh nitric oxide (NO) 36 2.5.1 Phương pháp nuôi cấy tế bào in vitro 36 2.5.2 Phương pháp xác định khả ức chế sản sinh NO tinh dầu lốt 36 2.6 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học kháng Acetylcholinesterase (AChE) 37 3.CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 39 3.1.Hiệu suất thu nhận tinh dầu lốt .39 Hình Cấu trúc phân tử myriscin ❖ Công thức: C11H12O3 ❖ Khối lượng phân tử: 192,21 g.mol-1 ❖ Một số hoạt tính sinh học myriscin: - Hoạt tính chống tăng sinh: Hoạt động chống tăng sinh myristicin nghiên cứu năm gần, nhiều liệu cho myristicin chịu trách nhiệm hoạt động chống ung ưng số thuốc tác nhân hóa học ngăn ngừa ưng thu [13] - Hoạt tính kháng khuẩn: Hoạt tính kháng khuẩn myristicin nghiên cứu rộng rãi thập lỷ qua, nhiên nhiều khác biệt tác dụng ống nghiệm chế hoạt động Trong số chất nghiên cứu, tinh dầu Myristica fragrans (nhục đậu khấu), Heracleum transcaucasicum, Heracleum anisactis, Anethum Graveolens, (thì là), Apium nodiflorum, Petroselinum crispum (rau mùi tây), Pycnocycla bashagardiana Piper lolot (lá lốt) tất chứa nồng độ cao myristicin, nằm khoảng từ 12% đến 96% thành phần, đáng ý - Hoạt động diệt trùng ấu trùng: Đây đặc tính nghiên cứu năm gần cho thấy kết khả quan thể sống ống nghiệm Nguyên liệu sử dụng nghiên cứu loại tinh dầu chiết xuất từ loại thực vật Piper aduncum, Echinophora spinosa, Clausena anisum-olens, Helosciadium nodiflorum, Ligusticum pteridophyl lum, Trachyspermum ammi, Smyrnium olusatrum, Pimpinella anisum, Myristica fragrans (nut meg) Piper lolot (lá lốt) Myristicin alkylbenzene có rễ, phận khơng số lồi thực vật vơ số quần thể sử dụng nhiều kỷ, vừa làm thực phẩm vừa làm thuốc điều trị tự nhiên Sau khảo sát liệu tài liệu này, rõ ràng phân tử đầy hứa hẹn, với số đặc tính, chẳng hạn kháng khuẩn, thuốc trừ sâu, 46 thuốc diệt ấu trùng, thần kinh trị liệu, bật là: chất chống oxy hóa, chống viêm chống tăng sinh Những liệu chứng minh myristicin tiềm lớn cần khám phá y học để sử dụng phương pháp điều trị lâm sàng cho bệnh lý, chứng minh việc tiến hành nghiên cứu tập trung vào chế hoạt động b) Asarone [8] Asarone hợp chất hóa học thuộc nhóm phenylpropanoid tìm thấy số loại thực vật Hương nhu, Hồi, … loại dầu thơm dễ bay Asarone có đồng phân sau: Hình 3 Cấu trúc phân tử Asarone ❖ Công thức: C12H16O3 ❖ Khối lượng phân tử: 208,25 g.mol-1 ❖ Một số hoạt tính sinh học Asarone: Người ta thấy α − asarone 𝛽 − asarone có tác dụng điều chỉnh tiêu cực dẫn truyền thần kinh glutamatergic Alpha-asarone cho thấy tác dụng giải lo âu mơ hình lo âu động vật 𝛾 − asarone allylbenzene propenylbenzene α − asarone (một loại dầu thơm dễ bay hơi, sử dụng để diệt loại sâu bệnh) c) Caryophyllene [10] [12] [19] [23] [24] Caryophyllene hay 𝛽 − Caryophyllene terpene tìm thấy số loại thực vật, bao gồm tiêu đen, đinh hương số chủng cần sa Nó thường tìm thấy dạng hỗn hợp với isocaryophyllene (cis đồng phân liên kết đơi) αhumulene, đồng phân mở vịng, có cyclobutan Caryophyllene hợp chất hóa học góp phần tạo nên mùi thơm lốt Caryophyllene giúp cải 47 thiện khả chịu lạnh nhiệt độ mơi trường thấp Nó biết đến với hương thơm vị cay, cay, có số tác dụng chữa bệnh tiềm Hình Cấu trúc phân tử caryophyllene ❖ Công thức: C15H24 ❖ Khối lượng phân tử: 204,357 g.mol-1 ❖ Một số tác dụng nghiên cứu báo cáo caryophyllene bao gồm: - Giảm đau: Một số nghiên cứu phát caryophyllene có tác dụng giảm đau - Hỗ trợ phục hồi vết thương, chống viêm: 𝛽 − Caryophyllene chứng minh có tác dụng chống viêm mạnh, giúp giảm đau viêm tình trạng viêm khớp 𝛽 − Caryophyllene có tinh dầu hoa oải hương (Lavender), hương thảo (Rosemary) hoàng lan (ylang ylang) số loại thảo mộc, gia vị hạt tiêu đen hỗ trợ tích cực cho trình phục hồi vùng da bị tổn thương Nghiên cứu tiến hành thử nghiệm mô da chuột phát hợp chất 𝛽 − Caryophyllene hỗ trợ phát triển di chuyển tế bào, đồng thời quan sát biểu gen tăng lên tế bào gốc nang lông điều trị [24] - Bệnh gan: Bệnh gan ngun nhân gây bệnh tồn giới gây nhiễm vi-rút, lạm dụng rượu, tiêu thụ chất béo bất thường chế độ ăn uống Có nhiều chứng khoa học tác dụng có lợi BCP mơ hình thử nghiệm NAFLD NASH Chiết xuất đinh hương (5 µM) chứng minh có khả ngăn chặn tích tụ lipid palmitat gây tế bào gan HepG2 người, sử dụng mơ hình NAFLD ống nghiệm [23] - Bảo vệ thần kinh: Có số chứng cho thấy caryophyllene có tác dụng bảo vệ thần kinh, nghĩa giúp bảo vệ não khỏi bị hư hại thối 48 hóa 𝛽 − Caryophyllene hữu ích mặt lâm sàng điều trị bổ trợ chống lại động kinh – loại bệnh thần kinh có động kinh tái phát bệnh kèm hành vi trầm cảm, lo lắng, rối loạn tâm thần điều ảnh hưởng lớn đến chất lượng sống người bệnh gia đình bệnh nhân [12] hay bệnh Parkinson rối loạn thối hóa chậm tiến triển, đặc trưng run tĩnh trạng, tăng trương lực cơ, giảm vận động vận động chậm, sau ổn định tư và/hoặc dáng - Giảm bệnh tim mạch: 𝛽 − Caryophyllene việc cải thiện bệnh tim mạch nghiên cứu để đánh giá việc tác nhân trị liệu chống lại tổn thương tim mạch Trong nghiên cứu cho thấy rằng, cho chuột tăng cholesterol máu uống 𝛽 − Caryophyllene làm giảm số xơ vữa số rủi động mạch vành, ngăn ngừa tổn thương tim mạch [10] [19] - Chống ung thư: Có số nghiên cứu sơ cho thấy caryophyllene có đặc tính chống ung thư, cần nhiều nghiên cứu để xác nhận điều d) 𝛽 − 𝐵𝑖𝑠𝑎𝑏𝑜𝑙𝑒𝑛𝑒 [26] [28] Bisabolene nhóm hợp chất hóa học tự nhiên có liên quan chặt chẽ phân loại sesquiterpen Bisabolene sản xuất từ farnesyl pyrophosphate (FPP) có mặt tinh dầu bisabol, nhiều loại thực vật khác bao gồm cubeb, chanh oregano Các dẫn xuất khác có chức pheromone lồi trùng khác nhau, chẳng hạn bọ xít ruồi giấm Bisabolene sản xuất số loại nấm, vai trò sinh học chúng nhóm sinh vật chưa rõ ràng Ba đồng phân biết, α-, β-, γ-bisabolene, khác vị trí liên kết đơi 𝛽 − Bisabolene sesquiterpene đơn vòng đơn giản hợp chất có hoạt tính sinh học thường tồn tinh dầu thực vật tự nhiên Bisabolene nói chung hay β-Bisabolene đượ sử dụng rộng rãi hợp chất hương thơm hương liệu có giá trị cao nhiều ngành cơng nghiệp có mùi thơm dễ chịu Như β-bisabolene có mùi tương tự dầu mè sử dụng làm hương liệu thực phẩm Ngồi ra, bisabolene nói chung nghiên cứu chất chống viêm chống ung thư mang lại lợi ích to lớn cho cộng đồng y tế [26] 49 Hình Cấu trúc phân tử β-Bisabolene Trong nghiên cứu gần đây, β-Bisabolene chứng minh đặc tính chống khối u khác biệt ung thư biểu mô phổi tế bào nhỏ e) 𝛼 − 𝐶𝑜𝑝𝑎𝑒𝑛𝑒 Copaene hay 𝛼 − Copaene sesquiterpene ba vịng có nguồn gốc từ thực vật, có nhiều loại tinh dầu sả, gừng, hợp chất tìm thấy tinh dầu nhiều loài thực vật sư dụng tích cực sức khỏe người động vật [15] Hình Cấu trúc phân tử 𝛼 − 𝐶𝑜𝑝𝑎𝑒𝑛𝑒 ❖ Công thức: C15H24 ❖ Khối lượng phân tử: 204,35 g.mol-1 ❖ Một số hoạt tính sinh học α − Copaene xác định cách sử dụng nuôi cấy tế bào lympho người [14]: - Hoạt tính kháng khuẩn, kháng viêm: 𝛼 − Copaene giảm phát triển vi khuẩn virus gây viêm, đặc biệt bệnh viêm khớp Nghiên cứu 𝛼 − Copaene làm giảm phát triển tế bào ung thư có tác dụng kháng oxy hóa Tuy nhiên, cần thêm nhiều nghiên cứu để xác định xác tác dụng 𝛼 − Copaene việc điều trị bệnh viêm - Hoạt tính kháng virus: Nhiều nghiên cứu α-Copaene có khả kháng khuẩn số vi khuẩn, bao gồm loại vi khuẩn gây bệnh 50 Staphylococcus aureus Escherichia coli Đặc biệt, chứng minh có khả chống lại phát triển vi khuẩn methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) - loại vi khuẩn kháng kháng sinh nguy hiểm - Hoạt tính chống ung thư: 𝛼 − Copaene có khả ngăn chặn phát triển tế bào ung thư giúp giảm nguy mắc bệnh ung thư Nhiều nghiên cứu 𝛼 - Copaene có hoạt tính chống oxy hóa, giúp bảo vệ tế bào khỏi tổn thương giảm nguy ung thư Tuy nhiên, cần thêm nhiều nghiên cứu để đánh giá xác hoạt tính chống ung thư 3.3 Khả ức chế sản sinh nitric oxide tinh dầu lốt Khả ức chế sản sinh NO tinh dầu lốt thể bảng 3.3 Bảng Kết khả ức chế NO tinh dầu lốt Nồng độ Tinh dầu lốt (µg/mL) L-NMMA % ức chế NO % tế bào sống % ức chế NO % tế bào sống TB SD TB SD TB SD TB SD 100 24,70 1,88 96,81 2,45 99,39 2,59 90,18 1,15 20 13,11 0,43 97,98 1,44 80,73 1,86 98,56 0,70 6,10 0,32 24,36 0,72 0.8 3,66 0,27 9,57 0,29 IC50 >100 - 7,92±0,79 - Nhận xét: Kết bảng 3.2 cho thấy mẫu tinh dầu lốt chưa thể hoat tính nồng độ nghiên cứu Đối chứng dương L-NMMA hoạt động ổn định thí nghiệm 3.4 Hoạt tính kháng acetylcholinesterase (AChE) tinh dầu lốt Kết hoạt tính kháng acetylcholinesterase tinh dầu lốt trình bày bảng 3.4 Kết cho thấy mẫu nghiên cứu thể hoạt tính ức chế hoạt động AChE với giá trị IC50 = 28,72 ±2,80 µg/mL Chất đối chứng dương galantamine hoạt động ổn định thí nghiệm Bảng Kết khả ức chế AChE tinh dầu lốt Nồng độ (µg/mL) 100 Tinh dầu lốt Tỷ lệ ức chế 79,66 Sai số 1,55 Galantamine Tỷ lệ ức chế 86,43 Sai số 3,22 51 20 42,57 2,49 55,89 0,26 22,82 0,92 26,79 1,31 0.8 8,02 1,75 8,41 0,69 IC50 3.5 28,72±2,80 1,67±0,08 So sánh với nghiên cứu nước giới 3.5.1 Hiệu suất thu nhận tinh dầu lốt Hiệu suất thu nhận tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng so với tinh dầu lốt Cần Thơ thể Bảng 3.5 Bảng So sánh với tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng với tinh dầu lốt Cần Thơ Hiệu suất thu nhận tinh dầu (%) Quảng Nam – Đà Nẵng Cần Thơ 0,68% 0,61% Nhận xét: Qua bảng 3.5 so sánh hiệu suất thu nhận tinh dầu Quảng Nam – Đà Nẵng so với Cần Thơ cho thấy hiệu suất thu nhận tinh dầu Quảng Nam – Đà Nẵng cao so với Cần Thơ [7] 3.5.2 Thành phần hóa học So sánh thành phần hóa học tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng với tinh dầu lốt Cần Thơ Trung Quốc thể Bảng 3.6 Bảng Hàm lượng hợp chất tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng, Cần Thơ Trung Quốc Hàm lượng (X%) STT Hợp chất Quảng Nam – Đà Nẵng Cần Thơ [7] Trung Quốc [27] 𝛼 − Copaene 1,93 0,93 1,814 β-Caryophyllene 2,63 9,11 13,894 Methy eugenol 0,18 1,96 - chất humulen 0,79 0,89 0,913 52 Germacrene D 0,44 2,35 0,318 Myristicin 72,7 36,03 65,222 Asarone 5,16 4,78 0,185 Apioline 1.80 2,18 - Germacrene B 3,602 10 𝛼 -Cadinene 1,26 1,207 Nhận xét: Căn vào tài liệu tham khảo thành phần hóa học tinh dầu lốt Cần Thơ [7] Trung Quốc [27] kết cho thấy bảng 3.6 cho thấy, tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng, Cần Thơ Trung Quốc có hàm lượng Myristicin, βCaryophyllene cao, nhiên Quảng Nam – Đà Nẵng hàm lượng Myristicin có tinh dầu lốt cao tất hợp chất cao so với Bình Định Trung Quốc, cịn β-Caryophyllene thấp Methy eugenol xuất với hàm lượng thấp tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng Cần Thơ không xuất tinh dầu lốt Trung Quốc Germacrene D tìm thấy tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng, Cần Thơ có hàm lượng thấp so với tinh dầu lốt Trung Quốc Ngồi ra, Germacrene B tìm thấy trong tinh dầu lốt Trung Quốc không xuất tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng Cần Thơ Kết phân tích GC – MS thành phần tinh dầu lốt cho thấy, cấu tử chiếm hàm lượng cao Myristicin (72,7%), Caryophyllene (2,63%), 𝛽 − Bisabolene (3,59%), Asarone (5,16%) Những thành phần có tác dụng dược lý Myristicin thuộc nhóm tâm thần, dụng để làm giảm căng thẳng thần kinh chống viêm loét đại tràng [22] [13], asarone (euasarone) có tác dụng chống trầm cẩm, lo âu chống động kinh [23] Tuy nhiên, độc chất gây khối u gan, gây đột biến gen dị ứng β-Caryophyllene có tinh dầu lía tơ có tác dụng kháng viêm chống nhiểm trùng hiệu [3] Sự khác cách gieo trồng, điều kiện khí hậu, thổ nhưỡng thời kỳ sinh trưởng tạo khác thành phần hóa học tinh dầu lốt địa phương quốc gia quốc gia với Kết luận: Tinh dầu lốt thực phương pháp chưng cất lôi nước, đa phần chứa hợp chất Caryophyllene, myristicin, Asarone, 𝜷 − 𝐁𝐢𝐬𝐚𝐛𝐨𝐥𝐞𝐧𝐞 Đây 53 chất có hoạt tính sinh học cao kết phù hợp với công bố thành phần tinh dầu lốt Việt Nam giới 3.5.3 Hoạt kháng Acetylcholinesterase Hoạt tính kháng AChE tinh dầu lồi khác thuộc chi Piper thể bảng 3.7 [10] Bảng Hoạt tính sinh học kháng AChE tinh dầu loài thuộc chi Piper Loài Bộ phận IC50 (µg/mL) Piper longum Tinh dầu 164,55±13,79 Piper betle Tinh dầu 65,94±5,96 Piper puberulum Tinh dầu thân 4,47±0,37 Tinh dầu thân 12,40±0,13 Piper austrosinense Nhận xét: So sánh hoạt tính kháng AChE tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng với chất đối chứng dương tinh dầu loài thuộc chi Piper (Bảng 3.7) cho thấy tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng có hoạt tính kháng AChE tốt Kết luận: Tinh dầu lốt thể hoạt tính kháng AChE tốt, khai thác sử dụng y học thực tế nhằm cải thiện bệnh Alzheimer 3.5.4 Hoạt tính ức chế sản sinh nitric oxide Hoạt tính ức chế sản sinh NO tinh dầu loài khác thuộc chi Piper thể Bảng 3.8 Bảng Hoạt tính ức chế sản sinh NO tinh dầu thuộc chi Piper Loài Bộ phận IC50 (µg/mL) Piper longum Tinh dầu 13,02± 0,29 Piper betle Tinh dâu 46,69±3,57 Nhận xét: Mặc dù tinh dầu lốt khơng thể hoạt tính khả ức chế sinh sản NO so sánh với chất đối chứng dương, loài khác thuộc chi Piper 54 thể hoạt tính mức độ khác Có thể thành phần hóa học tinh dầu khác 55 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã tìm điều kiện chưng cất tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng phương pháp chưng cất lôi nước, cho hiệu suất thu nhận tinh dầu lốt đạt 0,68% với tỉ lệ rắn/lỏng 250g lốt/500mL nước cất, thời gian chưng cất Đã xác định thành phần hóa học tinh dầu lốt Quảng Nam – Đà Nẵng Myristicin, Caryophyllene, 𝛽 − Bisabolene, Asarone, …Đây chất có hoạt tính sinh học tốt, cho thấy tinh dầu lốt lốt có chất lượng giá trị thương mại cao Đã đánh giá tinh dầu lốt thể hoạt tính kháng AChE mức tốt hoạt tính ức chế sản sinh NO KIẾN NGHỊ Nghiên cứu phương pháp bảo quản tinh dầu lốt Nghiên cứu phân lập thành phần hóa học có hàm lượng cao tinh dầu lốt 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Lê Đông Hiếu (2017), “Nghiên cứu số đặc điểm sinh học , phân bố thành phần hóa học lồi thuộc họ Hồ tiêu”, Học viện Khoa Học Công Nghệ, Hà Nội Phạm Thu Huệ, Nguyễn Văn Bình, Phạm Thị Phương (2021), “Nghiên cứu chiết tách tinh dầu lốt để chữa bệnh đau xương khớp”, Tạp chí Khoa học Đại học Tân Trào, (7/2021), 57 – 53 Nguyễn Thị Hoàng Lan, Bùi Quang Thuật, Lê Danh Tuyên, Nguyễn Thị Ngọc Duyên (2015), “Khả kháng khuẩn tinh dầu tía tơ”, Tạp chí Khoa học Phát triển, (3/2015), 12 Đỗ Tất Lợi (1986), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Kỹ Thuật, Hà Nội,516-517 Kiều Thị Mai (2019), “Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu Bưởi (Citrus grandis L.) tinh dầu Long não (Cinnamomum camphora) phương pháp chưng cất lôi nước” Trường đại học Lâm Nghiệp Trịnh Xuân Thủy (2006), “Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học lốt Nghệ An” Đại học Vinh Nguyễn Thị Bích Thuyền, Cao Lưu Ngọc Hạnh, Trần Thị Ngọc Trâm (2020) “Khảo sát thông số tối ưu cho trình chưng cất thành phần hóa học tinh dầu lốt (piper lolot C.DC)” Tạp Chí Khoa học Và Công nghệ - Đại học Đà Nẵng, 18(11), 7–10 Truy vấn từ https://jst-ud.vn/jst-ud/article/view/3442 Trương Đình Xuân Tịnh (2012), “Nghiên cứu tách xác định thành phần hóa học dịch chiết lốt huyện Hòa Vang - Đà Nẵng”, Đại học Sư phạm Đại học Đà Nẵng Lê Văn Vàng, Lê Chí Hùng, Huỳnh Phước Mẫn, Lê Thị Ngọc Xuân (2013) “Thành phần hóa học cấu hình Asarone dung dịch trích thân thân rễ thủy xương bồ (Acoruss sp.)”, Tạp chí Khoa học Đại học cần Thơ, (27), 104110 Truy vấn từ https://ctujsvn.ctu.edu.vn/index.php/ctujsvn/article/view/1596 57 TIẾNG ANH 10 CP Xiang, JX Han, XC Li, et al (2017) Chemical Composition and Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Essential Oils from Piper Species Journal of agricultural and food chemistry, 65(18), 3702–3710 https://doi.org/10.1021/acs.jafc.7b01350 11 Dareen A Youssef, Hassan M El-Fayoumi, Mona F Mahmoud (2019) Betacaryophyllene protects against diet-induced dyslipidemia and vascular inflammation in rats: Involvement of CB2 and PPAR-γ receptors Chemicobiological interactions, 297, 16–24 https://doi.org/10.1016/j.cbi.2018.10.010 12 Fisher RS, W van Emde Boas , et al (2005) Epileptic seizures and epilepsy: definitions proposed by the International League Against Epilepsy (ILAE) and the International Bureau for Epilepsy (IBE) Epilepsia, 46(4), 470–472 https://doi.org/10.1111/j.0013-9580.2005.66104.x 13 Gehan Badr, Hany Elsawy, Mohammed A Amalki, Manal Alfwuaires (2020) Protective effects of myristicin against ulcerative colitis induced by acetic acid in male mice Food and Agriultural Immunology (31) doi.org/10.1080/09540105.2020.1739626 14 Geoff Plumb, Stepphen J Chambers, Nigel Lambert, Begona Bartolome (1996) Antioxidant actions of fruit, herb and spice extracts International Journal of Food Science & Technology (3) 171 – 188 15 Gordon M Cragg, David J Newman (2013) Natural products: a continuing source of novel drug leads Biochimica et biophysica acta, 1830(6), 3670–3695 https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2013.02.008 16 Jadwiga Hamułka, Agata Wawrzyniak, Agnieszka Sulich (2012) The assessment of beta-carotene, lycopene and lutein intake selected group of adults Roczniki Panstwowego Zakladu Higieny, 63(2), 179–185 17 Hasan Türkez, K Ç (2014) Effects of copaene, a tricyclic sesquiterpene, on human lymphocytes cells in vitro Cytotechnology, 66(4), 597–603 https://doi.org/10.1007/s10616-013-9611-1 18 O A Olajide, F F Ajayi, A I Ekhelar, S O Awe, J M Makinde, A R Alada 1999 Biological effects of Myristica fragrans (nutmeg) extract Phytotherapy 58 research: PTR, 13(4), 344–345 https://doi.org/10.1002/(SICI)1099- 1573(199906)13:43.0.CO;2-E 19 Mai Thanh Nguyen, Suresh Awale, Yasuhiro Tezuka, Jun-ya Ueda, Quan le Tran, Shigetoshi Kadota (2006) Xanthine oxidase inhibitors from the flowers of Chrysanthemum sinense Planta medica, 72(1), 46–51 https://doi.org/10.1055/s-2005-873181 20 M D Baldissera, C F Souza, T H Grando (2017) β-caryophyllene reduces atherogenic index and coronary risk index in hypercholesterolemic rats: The involvement of cardiac oxidative damage Chemico-biological interactions, 270, 9–14 https://doi.org/10.1016/j.cbi.2017.04.008 21 Pramote Mahakunakorn, Michihisa Tohda, Yukihisa Murakami, Kinzo Matsumoto, Hiroshi Watanabe (2004) Antioxidant and free radical-scavenging activity of Choto-san and its related constituents Biological & pharmaceutical bulletin, 27(1), 38–46 https://doi.org/10.1248/bpb.27.38 22 Quanlai Zhao, C L (2017) Cytoprotective effects of myristicin against hypoxia-induced apoptosis and endoplasmic reticulum stress in rat dorsal root ganglion neurons Molecular medicine reports, 15(4), 2280–2288 https://doi.org/10.3892/mmr.2017.6258 23 Ranjithkumar Chellian, V P (2017) Pharmacology and toxicology of α- and βAsarone: A review of preclinical evidence Phytomedicine: international journal of phytotherapy and phytopharmacology, 32, 41–58 https://doi.org/10.1016/j.phymed.2017.04.003 24 Ryosuke Kamikubo, Kenji Kai, Kentaro Tsuji-Naito, Mitsugu Akagawa (2016) β-Caryophyllene attenuates palmitate-induced lipid accumulation through AMPK signaling by hepatocytes Molecular activating nutrition CB2 & food receptor in human research, 60(10), HepG2 2228–2242 https://doi.org/10.1002/mnfr.201600197 25 Sachiko Koyama , Anna Purk, Manpreet Kaur , Helena A Soini , Milos V Novotny, Keith Davis, C Cheng Kao, Hiroaki Matsunami, Anthony Mescher (2019) Beta-caryophyllene enhances wound healing through multiple routes PloS one, 14(12), e0216104 https://doi.org/10.1371/journal.pone.0216104 59 26 Wan Mohd Nuzul Hakimi Wan Salleh, Farediah Ahmad, Hasnah Mohd Sirat,1 and Khong Heng Yen (2012) Chemical compositions and antibacterial activity of the leaf and stem oils of Piper porphyrophyllum (Lindl.) N.E Br EXCLI journal, 11, 399–406 27 Weiquan Qin; Shanchun Huang; Chaoxu Li (2010) Biological activity of the essential oil from the leaves of Piper sarmentosum Roxb (Piperaceae) and its chemical constituents on Brontispa longissima (Gestro) (Coleoptera: Hispidae) Pesticide Biochemistry and Physiology, 96, 132-139 28 Yu-Jen Jou, CHHua, Chen-Sheng Lin, CY Wang, Lei Wan, Ying-Ju Lin, S.H Huang, C.W Lin (2016) Anticancer Activity of γ-Bisabolene in Human Neuroblastoma Cells Apoptosis Molecules via Induction (Basel, of p53-Mediated Mitochondrial Switzerland), 21(5), 601 https://doi.org/10.3390/molecules21050601 60