Xác định thành phần hoá học tinh dầu cây xương sông (blumea myriocephala dc) ở nghệ an và ninh bình

Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Lời cảm ơn Luận văn đ-ợc hoàn thành phòng thí nghiệm Hoá hữu cơ, khoa Hoá, tr-ờng Đại học Vinh; trung tâm Kiểm định an toàn Thực Phẩm - Môi tr-ờng, tr-ờng Đại học Vinh Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: - ThS Nguyễn Thị Chung, cán giảng dạy khoa Hoá đà trực tiếp giao đề tài, tận tình h-ớng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện cho trình nghiên cứu hoàn thành luận văn - Các thầy cô tổ hoá Hữu cơ, khoa Hoá, tr-ờng Đại học Vinh đà có nhiều ý kiến đóng góp quý báu cho luận văn - Cô Lê Thị Thu Hiệp, cô Chu Thị Thanh Lâm cán phòng thí nghiệm đà tạo điều kiện giúp đỡ trình làm thí nghiệm, phân tích kết Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô khoa Hoá, gia đình, bạn bè đà quan tâm động viên giúp đỡ suốt trình học tập hoàn thành luận văn Vinh, tháng 05 năm 2010 Sinh viên Đinh Thị Thuận Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Mở Đầu Lý chọn đề tài Ngày nay, nghiên cứu hợp chất thiên nhiên nói chung, hợp chất có hoạt tính sinh học nói riêng thu hút đ-ợc quan tâm, ý nhiều nhà khoa học n-ớc ứng dụng vô quý giá chúng lĩnh vực y học, công nghiệp, nông nghiệp Việt Nam n-ớc thuộc khu vực nhiệt đới gió mùa, nhiệt độ độ ẩm hàng năm cao, l-ợng m-a t-ơng đối nhiều, nên có hệ thực vật phát triển phong phú đa dạng, nguồn tài nguyên thực vật chứa tinh dầu có tiềm lớn Theo điều tra nhà thực vật học, n-ớc ta có khoảng 10386 loµi thuéc 2257 chi vµ 305 hä [1, 5], có 1850 loài thuốc phân bố 244 họ thực vật Số có tinh dầu khoảng 657 loµi thuéc 357 chi vµ 144 hä [2,3,4,5,6] Tinh dầu có phạm vi sử dụng rộng lớn, gắn liền với sống hàng ngày ng-ời, trùc tiÕp phơc vơ cho nhu cÇu thc men, thùc phẩm h-ơng liệu, đồng thời có ứng dụng nhiều ngành quan trọng khác nh- d-ợc phẩm, mỹ phẩm Mặt khác nhu cầu tinh dầu cho ngành công nghiệp n-ớc ta nh- giới ngày nhiều, việc nghiên cứu, khai thác sản xuất chế biến tinh dầu n-ớc ta hạn chế Do vậy, việc sâu nghiên cứu phát nguồn tài nguyên tinh dầu, thành phần hoá học tìm hiểu hoạt tính sinh học loài mang ý nghĩa lớn mặt khoa học nh- thực tiễn Ngày nay, víi sù ph¸t triĨn nhanh chãng cđa khoa häc công nghệ, kỹ thuật, đời sống xà hội, ng-ời đà khám phá chất tinh dầu nh- biến đổi tinh dầu cây, đồng thời đà áp dụng công nghệ khai thác, chế biến sử dụng tinh dầu với hiệu cao lĩnh vực chế biến thực phẩm, d-ợc phẩm, mỹ phẩm, h-ơng liệu Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Họ Cúc (Compositae) Việt Nam đ-ợc xếp vào nhóm cho tinh dầu có giá trị nhiều đ-ợc sử dụng làm thuốc chữa bệnh Cây x-ơng sông (Blumea myriocephala DC) thuộc họ Cúc, mọc hoang đ-ợc trồng phổ biến n-ớc ta nhiều n-ớc giới Nhân dân ta th-ờng dùng chữa ho, sốt, sởi trẻ em, trúng phong hàn, cầm khẩu, nôn mửa, phï thịng, chèng mèc Tuy vËy, cho ®Õn công trình nghiên cứu thành phần hoá học loài Xuất phát từ tình hình thực tế tầm quan trọng tinh dầu, chọn đề tài: Xác định thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông (Blumea myriocephala DC) thuộc họ Cúc Nghệ An Ninh Bình nhằm mục đích xác định hàm l-ợng tinh dầu, định tính, định l-ợng thành phần hoá học nó, qua góp phần tìm kiếm phát thêm hợp chất có giá trị cho ngành công nghiệp h-ơng liệu, y d-ợc, mỹ phẩm bổ sung kiện x-ơng sông Nhiệm vụ nghiên cứu Trong luận văn có nhiệm vụ: - Thu mẫu cây, định danh mẫu thực vật - Tách bảo quản tinh dầu, xác định hàm l-ợng % so với mẫu t-ơi - Xác định thành phần hoá học tinh dầu Đối t-ợng nghiên cứu Tinh dầu phận thân x-ơng sông (Blumea myriocephala DC) thc hä Cóc (Compositae hay Asteraceae) ë NghƯ An Ninh Bình Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Phần tổng quaN 1.1 Đặc điểm thực vật họ Cúc Họ Cúc (Compositae hay Asteraceae) họ lớn thực vật hạt kín Đó họ quan trọng hƯ thùc vËt thÕ giíi cịng nh- hƯ thùc vËt ViƯt Nam Theo M.E Kirpieznikov (1981), hä Cóc cã kho¶ng 1150 - 1300 chi với 20.000 loài, phân bố rộng rÃi toàn giới vùng khí hậu nhiệt đới ôn đới Việt Nam họ Cúc có phân họ, 13 tông, 114 chi 336 loài, đ-ợc phân bố khắp nơi Trong số 336 loài có đến 161 loài đà biết giá trị kinh tế, chiếm gần 50% số loài, thuốc chiếm 96 loài, cảnh 28 loài, làm rau ăn 30 loài; cho tinh dầu dầu béo 12 loài, làm phân xanh loài, có tác dụng trừ sâu diệt côn trùng loài [16,17] vùng đất hoang hay dạng loại hình thoái hoá, họ Cúc tạo nên cảnh quan đặc biệt với chi Eupatorium, Erigeon, Artemisia Các chi có nhiều loài nhÊt ë n-íc ta lµ Blumea, Vernonia, Latuca, Euparium, Ginura, Sencio Gần số chi đ-ợc nghiên cứu nhiều là: Arstemisia, Agretum, Eupatorium, Pluchea, Blumea Các họ th-ờng thuộc thảo, to, rễ th-ờng phồng lên thành củ, đơn th-ờng mọc so le, mọc đối, có thành hình hoa thị, kèm, phiến nguyên, th-ờng khía hay chia thuỳ Cụm hoa đầu gồm nhiều hoa mọc kẽ vảy bao bọc tổng bao bắc, hoa đều, hình ống hay không Năm cánh hoa liền thành tràng hình ống hay hình l-ỡi nhỏ Năm nhị dính liền bao phấn thành ống Hai noÃn, bầu hạ ô đựng noÃn, vòi dài, đầu nhụy xẻ đôi, có lông mu, bé nhiều có mào lông hay có móc Một số khác có ống nhựa mủ, số loài khác có ống tiết Chất dự trữ củ insulin [17] Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Họ Cúc chia làm hai phân họ: Phân họ Hoa ống (Asteroideae hay Tubiliflorace) phân họ Hoa thìa lìa (Cichorioideae hay Lliguliflorace) Phân họ hoa ống có đặc điểm tất hoa cụm hoa đầu hình ống, hai môi hình ống xung quanh hoa thìa lìa giả Những phân họ hầu nh- nhũ dịch, có chúng tế bào túi riêng biệt Trong họ có nhiều chi (gần 740 chi), nhiều có ý nghĩa kinh tế lớn Chi : Arstemisia (có gần 50 loài), vài loài chi làm thức ăn gia súc có giá trị dinh d-ỡng cao (chủ yếu cừu, ngựa phần nhỏ có sừng lớn ăn chồi non) Vài loài dùng làm thuốc nh- ngải cứu (Arstemisia vulgaris L.var.indica (Willd)DC), th-ờng dùng làm thuốc điều kinh, chữa ho, d-ợc liệu châm cứu đông y Cây cao (Arstemisia carviflolia Wall) dùng để chữa sốt, cầm máu, chữa mụn nhọt lở ngứa Từ cao hoa vàng (Arstemisia annua L) đà chiết xuất hợp chất artemisinin, biệt d-ợc chống sốt rét đặc hiệu [9] Cây (Arstemisia cina) có chất santonin dùng làm thuốc chữa giun sán, ngải áp sanh có tác dụng kích thích tiêu hoá dùng để chữa cảm sốt Một chi có nhiều loài n-ớc ta chi Blumea, có đại bi (Blumea balsamifera) mọc khắp nơi, cất lấy chất mai hoa băng phiến để xông mồ hôi Cây sương xông (Blumea myriocephala DC) có ăn đ-ợc thân làm thuốc ho, giải nhiệt làm toát mồ hôi Gần với chi Blumea, có chi Pluchea, chúng có hoa khác vòng hoa cái, vòng hoa l-ỡng tính, th-ờng xếp theo kiểu tán kép hai thuỳ tổng bao gồm nhiều hàng bắc màu lục, nh-ng Blumea bắc hình trứng rộng, bắc dài hoa th-ờng màu vàng Cây cúc tần (Pluchea indica Less) hầu nh- phân bố khắp toàn quốc bÃi biển n-ớc mặn nh- n-ớc ngọt, dùng để tắm ghẻ, rễ dùng để làm thuốc giải nhiệt toát mồ hôi Cây Sài hå nam (Pluchea pterogoda Hemsl) mäc hoang ë vïng n-íc mặn có rễ làm thuốc hạ nhiệt chữa sốt Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Trên vùng đồng miền núi có loài mọc dại cỏ lào (Eupatorium odoratum L) nguyên gốc quần đảo Ăng Ti đ-ợc di thực vào n-ớc ta qua Lµo vµ hiƯn mäc phỉ biÕn ë nhiều nơi N-ớc sắc mần t-ới tía (Eupatorium ayapana Vent) có tác dụng giải nhiệt mồ hôi Cây có vị đắng thơm, dùng làm thuốc bổ nhuận tràng Nó chứa chất ayapanin ayapin có tác dụng cầm máu, mần t-ới trắng (Eupatorium stoechadosmum Hance) đ-ợc trồng khắp nơi, có hoa thơm, toàn dùng xông cho mồ hôi, làm thuốc điều kinh, chữa mụn nhọt, lở loét, hôi thối Hai loại đ-ợc sử dụng nhân gian để phòng côn trung phá hoại ngũ cốc, trừ sâu bọ Phân họ Hoa thìa lìa có đặc điểm tất cụm hoa hoa thìa lìa có nhựa mủ Phân họ Hoa thìa lìa nhóm có hoa phân họ Hoa ống [2] 1.2 Một số nghiên cứu thành phần hoá học họ Cúc Gần số chi họ Cúc Việt Nam đà đ-ợc nghiên cứu nhiều nh- : Artemisia, Ageratum, Eupatorium, pluchea, Blumea 1.2.1 Chi Artemisia L Artemisia vulgaris L Nguyễn Xuân Dũng cộng đà nghiên cứu thành phần hoá học tinh dầu Artemisia vulgaris L Hà Nội cho kết 25 cấu tử đ-ợc nhận diện nh-: - pinen, camphen, β - pinen, 7- octen - 4- ol, myrcen, - octanol, p - cymen, 1,8 - cineol, limon, γ - terpinen, campho, menthofuran, iso hc endo- bocneol, tecpinen - - ol, myrtenol, metylthymyl ete, bocnyl axetat, geranyl format, α - copaen, β - boucbonen, β - elemen, iso caryophylen, β - caryophylen, α - humulen, β - farnesen, β - cubeben, germacren, β - selinen, α - farnesen, β - cadinen, β - secquiphelandren, caryophyllen oxit, juniper camphor, β - eudesmol vµ phytol  Artemisia vulgaris var indica (Willd) Maxim - Ngải cứu rừng Nguyễn Xuân Dũng cộng đà nghiên cứu tinh dầu phần mặt đất ngải cứu rừng (Artemisia vulgaris var indica), cho kết hàm l-ợng tinh dầu Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu 0,2 % Thành phần hoá học tinh dầu - caryophyllen (24,1 %); β - cubeben (12 %) (thµnh phần chính) butylfuran; - pinen; camphen; - octen - - ol; β - pinen; myrcen; α - phellandren; α - terpinen; p - cymen; 1,8 - cineol; - metyl oct - - en; terpinolen; linalool; camphor; trans - pinocarveol; carvon; bornyl axetat; geranyl format; α - copaen; δ - elemen; β - elemen; α - gurjunen; α - humulen; allo - aromadendren; γ - muurolen; 5βH,7β,10 α - selina - 4,11 dien; γ - elemen; α - muurolen; α - farnesen; γ - cadinen; calamen; nerolidol; spathulenol; caryophylen oxit; globubol; viridiflorol; δ - cadinen; α - cadinen  Artemisia carvifolia Buch - Ham in Roxb - Thanh hao Phan Tống Sơn cộng đà phân lập từ phần mặt đất hao (Artemisia carvifolia) hai hỵp chÊt cumarin míi : 5,8 - dimetoxycoumarin vµ - dimetoxy - - dimetylallyloxycoumarin  Artemisia annua L- Thanh cao hoa vµng Ngun Xuân Dũng cộng đà nghiên cứu thành phần hoá học tinh dầu Artemisia annua L có 19 hợp chất đ-ợc xác định, thành phần tinh dầu campho (23,75 %); 1,8 - cineol (15,44 %) - fanesen (9,59 %) Kết đ-ợc dẫn bảng Bảng : Thành phần hoá học tinh dầu Artemisia annua L TT 10 Hỵp chÊt α- pinen Camphen Sabinen β –pinen β - myrcen 1,8 - cineol artemisia xeton Linalool limonen oxit Campho TØ lÖ % TT 0.74 11 1,78 1,10 0,44 4,38 15,44 4,42 0,46 2,93 23,75 12 13 14 15 16 17 18 19 Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá Tỉ lệ % Hợp chất - metyl - - isopropenyl 2,91 cyclohecxanol 2,67 artemisia ancol 2,27 terpinen - - ol 1,01 geranyl axetat 0,97 α - cubeben 6,29 β - caryophyllen 9,59 β - farnesen 0,63 - cadinen 5,59 - cubeben Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Nguyễn Văn Bời [9] nghiên cứu thành phần hoá học tinh dầu cao hoa vàng Artemisia annua L trồng Hà Nội số giai đoạn sinh tr-ởng tinh dầu cao mọc Lạng Sơn Trong tinh dầu cao trồng Hà Nội, campho thành phần chính, tuỳ theo giai đoạn sinh tr-ởng mà thành phần có germacren - D (khi có nụ) trans - - farnesen (khi tàn, nhiều quả) 1.2.2 Chi Ageratum L Ageratum conyzoides L : Cây cứt lợn, bù xích, cỏ hôi Nguyễn Xuân Dũng cộng nghiên cứu tinh dầu phần mặt đất Ageratum conyzoides L thu đ-ợc 0,7 - 2,0 % tinh dầu Thành phần hoá học đ-ợc xác định, thành phần ageratochromen (31,10 %), δ dehydroxyageratochromen (29,04 %) vµ β - caryophyllen (16,99%) Kết đ-ợc dẫn bảng Bảng : Thành phần hoá học tinh dầu phần mặt đất cứt lợn Ageratum conyzoides L TT Hợp chÊt α – pinen TØ lÖ % 0,41 TT 12 TØ lÖ % 29,04 13 14 15 16 17 18 Hỵp chÊt δ- dehydroxy ageratochromen β-selinen β-cubeben β-farnesen MW=204 β-farnesol oxit caryophylen Camphen β – pinen β - myrcen α - terpinen endo - bocneol MW=154 2,40 0,40 0,91 1,92 0,26 0,18 endo - bornyl axetat 1,15 19 ageratochromen 31,10 Cubeben 0,40 20 0,37 Elemen β - caryophyllen 1,00 16,99 21 22 6-vinyl-dimetoxy ageratochromen hợp chất khác 10 11 Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 1,99 2,03 2,34 1,11 0,23 0,52 6,50 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu 1.2.3 Chi Eupatorium Eupatorium ayapana Vent : B· dét, mÇn t-íi mÝa Ngun Xuân Dũng cộng [24] nghiên cứu tinh dầu phần mặt đất Eupatorium ayapana Vent thu đ-ợc hàm l-ợng tinh dầu 0,09 % Thành phần tinh dầu thymolhydroquinon dimetylete (72,6%), selina - 4,11 - dien (11,0%) - caryophyllen (8,9%) Kết đ-ợc dẫn bảng Bảng : Thành phần hoá học tinh dầu phần mặt đất mÇn t-íi tÝa (Eupatorium ayapana Vent) TT Hỵp chÊt α – pinen β – pinen α - phellandren α - terpinen 1,8 - cineol campho terpinen - - ol metylthymol metylcarvol Tû lÖ % 0,10 TT 10 0,20 VÕt 0,20 0,20 0,10 0,20 0,30 0,20 11 12 13 14 15 16 17 18 Hỵp chÊt β - elemen thymolhydroquinon dimetylete β - caryophyllen α - humulen β - selinen selina - 4,11- dien - selinen caryophyllen oxit Các hợp chÊt kh¸c Tû lƯ % 1,20 73,6 8,90 0,40 0,10 11,0 0,50 0,40 2,40 Nguyễn Thị Diễm Trang, Nguyễn Xuân Dũng cộng phân lập từ mần t-ới mía Chi Eupatorium ayapana hợp chất cumarin, ayapin, thymolquinon, metylthymyl ete Công thức cấu tạo chất đ-ợc tách từ mần t-ới tía Eupatorium ayapana là: O O O cumarin Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá O O O ayapin Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu CH3 CH3 O CH3 O CH3 CH3 H3C H3C O CH3 O thymolquinol thymolquinon CH3 CH3 O CH3 H3C metylthymyl ete  Eupatorium stoechadosmum Hance : Mần t-ới trắng, trạch lan, lan thảo Các cấu tử tách từ phần mặt đất mần t-ới trắng (Eupatorium stoechadosmum Hance) là: O O O O O cumarin O ayapin CH3 CH3    - hydroxy- mety l-   8,10 - epoxy - - axetyloxy - axetophenon Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá thymol - angelat 10 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Hỡnh 4: S dng cụ tách tinh dầu phương pháp cất lôi hi nc 3.3.1 Hoạt động dụng cụ cất tinh dầu Cho 2,5 kg nguyên liệu t-ơi đà đ-ợc thái nhỏ, lít n-ớc cất vào nồi áp suất (d-ới đáy có úp rá tre để ngăn cách n-ớc với nguyên liệu) Vặn khoá an toàn nồi áp suất để tránh tinh dầu thoát vµ tranh nguy hiĨm lµm thÝ nghiƯm Dïng bÕp ga đun nồi áp suất để tinh dầu n-ớc sang phận làm lạnh ng-ng tụ chảy xuống bình định l-ợng tinh dầu Tinh dầu nhẹ n-ớc lên trên, hàm l-ợng tinh dầu không tăng ta ngừng đun dùng bơm tiêm để lấy tinh dầu 3.3.2 Cách làm khô bảo quản tinh dầu Vì l-ợng tinh dầu thu đ-ợc lẫn n-ớc, nên phải làm khô cách cho tinh thể Na2SO4 khan vào lọ đựng tinh dầu để vòng ngày hút tinh dầu vào lọ tiêu chuẩn bảo quản tủ lạnh nhiệt độ kông 50C Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 34 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu 3.4 Xác định thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông Các mẫu tinh dầu phân tích máy sắc ký khí - khối phổ ký liên hợp (GC-MS) cđa h·ng Agilent Technologies HP 6890N Agilent Technologies HP 6890N/ HP 5973 MSD đ-ợc lắp với cột tách mao quản vận hành sắc ký vi nhiệt độ buồng bơm mẫu 250oC Nhiệt độ detectơ 260oC Ch-ơng trình nhiệt độ buồng điều nhiệt: 60oC (2 min), tăng 4oC/min 220oC, dừng nhiệt độ 10 với He làm khí mang Việc xác nhận cấu tử đ-ợc thực cách so sánh kiện phổ MS chúng với phổ chuẩn đà đ-ợc công bố có th- viện Willey/Chemstation HP Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 35 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Phần Kết thảo luận 4.1 Kết tách tinh dầu 4.1.1 Xác định hàm l-ợng tinh dầu x-ơng sông Nghệ An (mẫu XS1) Tinh dầu x-ơng sông thu ngày tháng 11 năm 2009 H-ng Hoà, thành phố Vinh, Nghệ An đ-ợc tách ph-ơng pháp ch-ng cất lôi n-ớc với số liệu: Khối l-ợng mẫu t-ơi: 2,7kg Thời gian ch-ng cất: 120 phút Thể tích tinh dầu thu đ-ơc: 3,9 ml Hàm l-ợng tinh dầu: 0,144% Tinh dầu thu đ-ợc nhẹ n-ớc, không màu lúc cất, để lâu có màu vàng nhạt, có mùi thơm đặc tr-ng Hàm l-ợng tinh dầu thu đ-ợc từ mẫu x-ơng sông xà H-ng Hoà, thành phố Vinh, Nghệ An 0,144% thấp l-ợng tinh dầu mẫu x-ơng sông đà xác định tác giả tr-ớc đó, (Nguyễn Xuân Dũng- hàm l-ợng tinh dầu 0,24%, Nguyễn Thị Lan Ph-ơng - Mẫu x-ơng sông Đức Thọ, Hà Tĩnh 0,26 % Mẫu X-ơng sông H-ng Nguyên, Nghệ An 0,22%) 4.1.2 Xác định hàm l-ợng tinh dầu x-ơng sông Ninh Bình (mẫu XS2) Mẫu XS2 thu thu ngày 12 tháng 12 năm 2009 xà Gia Phú, huyện Gia Viễn, tỉnh Ninh Bình đ-ợc cất ph-ơng pháp ch-ng cất lôi n-ớc Kết thu đ-ợc nh- sau: Khèi l-ỵng mÉu: 2,5 kg Thêi gian ch-ng cÊt: 105 phút Thể tích tinh dầu: 3,5 ml Hàm l-ợng tinh dầu: 0,14% Tinh dầu thu đ-ợc nhẹ n-ớc, không màu lúc cất, để lâu có màu vàng nhạt, có mùi thơm đặc tr-ng Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 36 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Hàm l-ợng tinh dầu thu đ-ợc từ mẫu x-ơng sông thu xà Gia Phú, huyện Gia Viễn, Ninh Bình 0,14% thấp l-ợng tinh dầu mẫu x-ơng sông H-ng Hoà, Nghệ An 0,144% mẫu x-ơng sông đà xác định tác giả tr-ớc đó, (Nguyễn Xuân Dũng- hàm l-ợng tinh dầu 0,24%, Phan Thị Lan Ph-ơng - mẫu x-ơng sông Đức Thọ, Hà Tĩnh 0,26 % Mẫu X-ơng sông H-ng Nguyên, Nghệ An 0,22%) Qua thí nghiệm tách xác định hàm l-ợng tinh dầu mÉu XS1 vµ mÉu XS2 víi bé dơng vµ điều kiện ch-ng cất giống ta rút ra: Hàm l-ợng tinh dầu mẫu XS1 0,144% xấp xỉ hàm l-ợng tinh dầu mẫu XS2 0,14% L-ợng tinh dầu thấp nhiều so với kết tác giả Nguyễn Xuân Dũng Phan Thị Lan Ph-ơng ( mẫu đ-ợc lấy vào mùa hè mùa thu), điều giải thích điều kiện đất đai khí hậu, tuổi cây, thời kì lấy mẫu đà ảnh h-ởng đến hàm l-ợng tinh dầu 4.2 Kết phân tích sắc kí khối phổ 4.2.1 Xác định thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông ( Mẫu XS1) Thành phần hóa học tinh dầu x-ơng sông đ-ợc phân tích ph-ơng pháp sắc ký khí (GC) sắc ký khí - khối phổ ký liên hợp (GC/MS) Sắc kí đồ GC thu đ-ợc nh- hình 5: Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 37 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Hình 5: Sắc kí đồ tinh dầu thân x-ơng sông H-ng Hoà, Nghệ An Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 38 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Dựa vào thời gian l-u giữ liệu th- viện phổ điện tử đà xác định đ-ợc hợp chất có tinh dầu x-ơng sông H-ng Hoà, Vinh, Nghệ An nh- bảng 8: Bảng 8: Tỉ lệ phần trăm chất tinh dầu x-ơng sông H-ng Hoà, NghÖ An TT 10 H/C α – pinen α – phellandren p – cimen Limonen methyl thymol ete β – caryophylen Ceten α – caryophylen – octadecen C¸c chÊt kh¸c TØ lÖ % 0,14 0,2 2,5 0,28 95,22 0,5 0,34 0,08 0,08 0,66 Tõ b¶ng ta thÊy tinh dầu x-ơng sông H-ng Hoà, Vinh, Nghệ An (mẫu XS1) có hợp chất đ-ợc phát chiếm đến 99,34%, thành phần methylthymol ete (95,22%) Ngoài có số hợp chất khác nh-: α - pinen 0,14%, α - phellandren 0,2%, p - cymen 2,5%, limonen 0,28%, β - caryophylen 0,5%, ceten 0,34%, α - caryophylen 0,08%, 1- octadecen 0,08% 4.2.2 X¸c định thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình (Mẫu XS2) Thành phần hóa học tinh dầu x-ơng sông Ninh Bình đ-ợc phân tích ph-ơng pháp sắc ký khí (GC) sắc ký khí - khối phổ ký liên hợp (GC/MS) Sắc kí đồ GC thu đ-ợc nh- hình Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 39 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Hình 6: Sắc kí đồ tinh dầu thân x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 40 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Dựa vào thời gian l-u giữ liệu th- viện phổ điện tử đà xác định đ-ợc hợp chất có tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình nh- bảng Bảng 9: Tỉ lệ phần trăm chất tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình TT Hợp chất Tỉ lÖ % α - pinen 0,15 α - phellandren 0,2 p - cimen 15,71 limonen 0,28 methyl thymol ete 80,74 β - caryophylen 0,45 ceten 0,98 α - caryophylen 0,08 - octadecen 0,24 10 α - farnesen 0,07 11 phytol 0,09 12 Các chất khác 1,01 Cấu tạo số hợp chất tinh dầu x-ơng sông nh- sau: CH3 H3C CH3 - pinen Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá - phellandren 41 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu CH3 CH3 CH3 CH3 H3C CH3 p - cimen limonen CH3 O CH3 CH3 CH3 H2C H CH3 H CH3 H3C methyl thymol ete 1- octadecen H2C CH3 Ceten CH3 H3C CH2 H3C CH3 α - farnesen Tõ b¶ng ta thấy tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình (mẫu XS2) có 11 hợp chất đ-ợc xác định chiếm đến 98,99%, thành phần lµ methyl thymol 80,74%, p - cimen 15,71% Ngoµi có số hợp chất khác nh-: - pinen 0,15%, α - phellandren 0,2%, limonen 0,28%, β - caryophylen 0,45%, ceten 0,98%, α - caryophylen 0,08%, - octadecen 0,24%, α - farnesen 0,07%, phytol 0,09% Khèi phæ đồ hợp chất tronh tinh dầu x-ơng sông đ-ợc trình bay hình 7,8: Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 42 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Hình 7: Khèi phỉ ®å cđa methylthymol ete hay - methoxy, - methyl - 1(1 - methylethyl), benzen H×nh 8: Khèi phỉ ®å cđa p - cimen hay - isopropyl,1- methyl bezen Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 43 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu 4.2.3 Nhận xét chung Từ kết bảng ta lập bảng so sánh thành phần hóa học tinh dầu x-ơng sông H-ng Hoà, Nghệ An tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình bảng 10: Bảng10: Tỷ lệ % chất có tinh dầu x-ơng sông Nghệ An Ninh Bình Hợp chất Nghệ An Ninh B×nh α - pinen 0,14 0,15 α - phellandren 0,2 0,2 p - cimen 2,5 15,71 limonen 0,28 0,28 methyl thymol ete 95,22 80,74 β - Caryophylen 0,5 0,45 Ceten 0,34 0,98 α -caryophylen 0,08 0,08 1- octadecen 0,08 0,24 α - farnesen Kh«ng cã 0,07 phytol Kh«ng có 0,09 So sánh với kết nghiên cứu tác giả Nguyễn Xuân Dũng, Phan Thị Lan Ph-ơng ta thấy thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông Việt Nam có thành phần hoá học methylthymol, thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông ấn Độ lại là: p cimen (99%) Điều đáng l-u ý thành phần tinh dầu x-ơng sông thu Ninh Bình có hàm l-ợng p - cimen chiếm l-ợng đáng kể (15,71%), cho thấy có t-ơng đồng với kết nghiên cứu tinh dầu x-ơng Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 44 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu sông ấn Độ Điều cho ta thấy với loài x-ơng sông đà xuất chemotyfile khác Tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình có thành phần hóa học phong phú so với mẫu tinh dầu H-ng Hoà, Nghệ An Ngoài thành phần chung: - pinen, - phellandren, p - cymen, limonen, methyl thymol ete, β caryophylen, ceten, α - caryophylen, 1- octadecen, tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình có thêm - farnesen, phytol Kết cho thấy điều kiện vị trí địa lý, khí hậu, đất đai, tuổi cây, thời điểm lấy mẫu không ảnh h-ởng đến hàm l-ợng tinh dầu mà ảnh h-ởng đến thành phần hoá học chúng Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 45 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Kết luậN Từ kết nghiên cứu tinh dầu x-ơng sông (Blumea myriocephala DC) rút số kết luận: Đà xác định hàm l-ợng tinh dầu x-ơng sông xà H-ng Hoµ, Vinh, NghƯ An lµ 0,144% so víi mÉu t-ơi, xà Gia Phú, huyện Gia Viễn, Ninh Bình 0,14% so với mẫu t-ơi Tinh dầu x-ơng sông vùng chất lỏng, nhẹ n-ớc có mùi thơm đặc tr-ng, màu lúc cất, để lâu chuyển sang màu vàng nhạt Đà xác định đ-ợc thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông H-ng Hoà, thành phố Vinh, Nghệ An (mÉu XS1) vµ ë Gia Phó, Gia ViƠn, Ninh Bình (mẫu XS2) chủ yếu dẫn xuất thymol, monotecpen, secquitecpen Thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông Nghệ An (mẫu XS1) có hợp chất, thành phần methylhymol chiếm 95,22% Thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông Ninh Bình (mẫu XS2) có 11 hợp chất thành phần methylthymol 80,74% p - cimen chiếm 15,71% chiếm tổng l-ợng 96,45% Methylthymol chất có khả kháng khuẩn, kháng nấm Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 46 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu Tài liệu tham khảo D-ợc điển Việt Nam I (1971) NXB Y học Vũ Ngọc Lộ, Nguyễn Thái An (1993) Những tinh dầu Việt Nam Tr-ờng Đại học D-ợc, Hµ Néi ViƯn Y häc cỉ trun ViƯt Nam (1996) 100 vị thuốc nam th-ờng dùng NXBYH, Hà Nội Vũ Văn Chuyên, Lê Trần Chấn, Trần Hợp (1987) Địa lí họ Việt Nam NXB KHKT Hà Néi Đỗ Huy Bích cộng (2002) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập Nhà xuất khoa học kỹ thuật Võ Văn Chi (1999) Từ điển thuốc Việt Nam NXB Y học Lê Văn Hạc, Nguyễn Thị Chung, Nguyễn Xuân Dũng Piet A.Leclercq (1999) Thành phần hoá học tinh dầu cúc tần (Pluchea indica Less) Nghệ An Tuyển tập công trình Hội nghị khoa học công nghệ hoá hữu cơ, trang 180-183 Hội hoá học Việt Nam Phân hội hoá hữu cơ- Hội nghị toàn quốc lần thứ nhất- Quy Nhơn, 09-11/9/1999 Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng (1985) Các ph-ơng pháp sắc ký NXB KHKT, Hà Nội Nguyễn Văn Bời (1999) Nghiên cứu số thành phần hoá học Thanh Cao (Artemisia annua L) phế thải trình chiết xuất artemisinin ë ViƯt Nam Ln ¸n TiÕn sü Ho¸ häc 10 Đỗ Tất Lợi (1999) Những thuốc vị thc ViƯt Nam NXB Y häc, Hµ Néi 11 Hoµng Văn Lựu (2000) Hợp chất thiên nhiên Tr-ờng ĐHSP Vinh 12 Đoàn Thanh T-ờng (2000) Nghiên cứu số thành phần hoá học sài hồ nam (Pluchea pteropoda Hemsl.,) cúc tần (Pluchea indica Less.,) Việt Nam Luận án TS KH hoá học, Hà Nội 13 Hoàng Văn Lựu (2000) Ph-ơng pháp sắc ký khối phổ ký Tr-ờng ĐHSP Vinh Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 47 Luận văn Tốt nghiệp Đại học - Chuyên ngành Hoá hữu 14 Lê Khả Kế, Võ Văn Chi, Vũ Văn Chuyên, Phan Nguyên Hồng, Trần Hợp, Đỗ Tất Lợi, L-ơng Ngọc Toản, Thái Văn Trừng (1973) C©y cá th-êng thÊy ë ViƯt Nam NXB KHKT 15 Vũ Văn Chuyên (1976) Tóm tắt đặc điểm c©y hä thc NXB Y häc 16 Vị ViƯt Nam, Trần Ngọc Ninh, J.Me.Leod, Nguyễn Xuân Dũng (1999) Các kết nghiên cứu số thuốc họ Cúc Tạp chí D-ợc liệu, 4(2), 44- 47 17 Lê Kim Biên (1991) Kết nghiên cứu họ Cúc Việt Nam Tạp chí sinh học, 13(4), 15 18 Đoàn Thanh T-ờng, Phạm Hoàng Ngọc, Đỗ Đình RÃng (1999) Nghiên cứu mét sè cÊu tư chÝnh cđa tinh dÇu Cóc TÇn Thông báo khoa học số 4- 1999 Tr-ờng ĐHSP- ĐHQG Hà Nội 19 Đỗ Tất Lợi (1985).Cây tinh dầu Việt nam NXB Y học,Hà Nội 20 Đỗ Tất Lợi (1992) Các ph-ơng pháp chế tinh dầu NXB KHKT, Hà Nội 21 Shimona F, Kondo H, Yuuyas, Suzuki T, Hagiwara H Enantioselective total Syntheses of (-) 7 - H - Endesman - 4 - H diol and (+) - ent 7 H- Eudesman - 4 - H diol Nalprod (1), 22, 28 (1998) 22 Loagza I.D, Helen J.F, Colin G Volatile constituents of the Essentian oil of the Pluchea fastigiata Griseb, J.Essent oil Res 4(2) 191 - 193 CA 23 Nguyễn Xuân Dũng, Đỗ Tất Hùng, Đỗ Tờt Lợi, Leclerq, P.A.(1991) The chemical composition of the oil of Blumea lanceolaria (Roxb) Druce from Vietnam Journal of Essential Oil Reaseach, 3(1991)285 24 Nguyễn Xuân Dũng, Phạm Tr-ơng Thị Thọ, Nguyễn Văn Đàn, Leclercq, P.A (1898) The chemical composition of the Ageratum conyzoides L.from Vietnam Journal Essential Oil Reseach, 1(3) :135-136 25 Nguyễn Xuân Dũng, Lê Kim Biên, Leclercq, P.A (1992) The constituents of the leaf Oil of the Chromolaena odorata (L).R.M Kinh and H.Robinson from Vietnam Journal Essential Oil Reseach, :309-310 Sinh viên: Đinh Thị Thuận - 47B Hoá 48 ... cứu thành phần hoá học loài Xuất phát từ tình hình thực tế tầm quan trọng tinh dầu, chọn đề tài: Xác định thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông (Blumea myriocephala DC) thuộc họ Cúc Nghệ An Ninh. .. giả Nguyễn Xuân Dũng, Phan Thị Lan Ph-ơng ta thấy thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông Việt Nam có thành phần hoá học methylthymol, thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông ấn Độ lại là: p cimen... caryophylen 0,08%, 1- octadecen 0,08% 4.2.2 Xác định thành phần hoá học tinh dầu x-ơng sông Gia Viễn, Ninh Bình (Mẫu XS2) Thành phần hóa học tinh dầu x-ơng sông Ninh Bình đ-ợc phân tích ph-ơng pháp sắc