Xác định thành phần hóa học tinh dầu và xác định cấu trúc một số hợp chất từ lá và cành nhỏ của cây vối ( cleistocalyx operculatus (roxb) mer et pery ) ở triệu sơn thanh hóa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO UBND TỈNH THANH HÓA TRƯỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC LÊ ĐÌNH LÂM XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TINH DẦU VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ LÁ VÀ CÀNH NHỎ CỦA CÂY VỐI ( CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY ) Ở TRIỆU SƠN THANH HÓA LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÓA HỌC THANH HÓA, NĂM 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO UBND TỈNH THANH HÓA TRƯỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC LÊ ĐÌNH LÂM XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TINH DẦU VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ LÁ VÀ CÀNH NHỎ CỦA CÂY VỐI ( CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY ) Ở TRIỆU SƠN THANH HÓA LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HĨA HỌC Chun ngành: Hóa hữu Mã số: 844.01.14 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Ngô Xuân Lương THANH HÓA, NĂM 2022 Danh sách Hội đồng chấm luận văn Thạc sỹ khoa học (Theo Quyết định số 1502 / QĐ- ĐHHĐ ngày 05 tháng 07 năm 2022 Hiệu trưởng Trường Đại học Hồng Đức) Học hàm, học vị Cơ quan Công tác Họ tên Chức danh Hội đồng TS Trịnh Thị Huấn Trường Đại học Hồng Đức Chủ tịch HĐ TS Ngũ Trường Nhân Trường Đại học Tây Nguyên UV Phản biện TS Lê Thị Hoa Trường Đại học Hồng Đức UV Phản biện PGS.TS Trần Quốc Toản Viện HCTN – Viện Hàn lâm KH&CN VN Uỷ viên TS Nguyễn Thị Ngọc Vinh Trường ĐH Hồng Đức Thư ký Xác nhận Người hướng dẫn Học viên chỉnh sửa theo ý kiến Hội đồng Ngày tháng năm 2022 PGS.TS Đinh Ngọc Thức LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn khơng trùng lặp với khóa luận, luận văn, luận án cơng trình nghiên cứu cơng bố Người cam đoan Lê Đình Lâm i LỜI CẢM ƠN Trong q trình hồn thành luận văn này, tơi nhận hướng dẫn tận tình PGS TS Ngô Xuân Lương tạo điều kiện thầy cô môn; tạo điều kiện ban chủ nhiệm khoa Khoa học tự nhiên, Trường Đại Học Hồng Đức động viên khuyến khích gia đình, anh em bạn bè động nghiệp Từ đáy lịng tơi xin gửi lời tri ân sâu sắc Chắc chắn luận văn không tránh khỏi khiếm khuyết, mong nhận đóng góp nhà khoa học, thầy giáo, cô giáo người quan tâm Tác giả Lê Đình Lâm ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC SƠ ĐỒ viii MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 Đại cương họ Sim 1.1.1 Thực vật học 1.1.2 Thành phần hoá học 1.1.3 Cây Vối : 1.1.3.1 Mô tả thực vật 1.1.3.2 Thành phần hố học vối 1.1.3.3 Hoạt tính sinh học sử dụng vối 1.1.3.4 Thành phần hóa học vối Chương 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 2.1 Phương pháp lấy mẫu 10 2.2 Phương pháp xác định thành phần hóa học tinh dầu 10 2.2.1 Thiết bị 10 2.2.2 Hóa chất 10 2.2.3 Nguyên liệu 10 2.2.4 Phương pháp chưng cất 11 iii 2.2.5 Phương pháp xác định thành phần hóa học 11 2.3 Phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập chất 11 2.3.1 Phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất 11 2.3.2 Phương pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 12 2.4 Cơ sở lý thuyết phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR 12 2.4.1 Spin hạt nhân cộng hưởng từ hạt nhân 13 2.4.2 Cơ sở vật lý thực nghiệm NMR 14 2.4.3 Sự kích thích tượng hồi phục 15 2.4.4 Tác nhân phân giải 16 2.4.5 Hiệu ứng hạt nhân overhauser – phổ NOE 17 2.4.6 Từ trường mạnh – kĩ thuật đa xung 19 2.4.7 Phổ DEPT INEPT 20 2.5 Các phương pháp sắc ký 22 2.6 Phương pháp vật lý 22 2.7 Phương pháp thử hoạt tính kháng khuẩn 24 2.8.Nghiên cứu hợp chất từ Vối (cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr et Perry.) 24 2.8.1 Nguồn nguyên liệu: 24 2.8.2 Tách tinh dầu: 24 2.8.3 Phân tích tinh dầu 24 2.8.4 Phân lập hợp chất : 25 2.8.5 Số liệu số vật lý số liệu phổ chất LL1, LL2 LL3 27 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 3.1 Định lượng tinh dầu 29 3.2 Phân tích thành phần hố học tinh dầu Lá cành nhỏ cây Vối (cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr et Perry.) 29 3.3.Biện luận xác định cấu trúc chất hợp chất LL1, LL2, LL3 31 3.3.1 Hợp chất LL1 31 3.3.2 Xác định cấu trúc hợp chất LL2 32 iv 3.3.3 Hợp chất LL3 34 3.4 Kết thử hoạt tính sinh học chất tách 36 KẾT LUẬN 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 PHỤ LỤC P1 v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học tinh dầu vối Quảng Châu, Trung Quốc Bảng 3.1: Thành phần hóa học tinh dầu cành nhỏ Vối (cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr et Perry.) Triệu Sơn, Thanh Hóa 30 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ DEPT LL1 31 Bảng 3.3 Số liệu phổ NMR hợp chất 33 Bảng 3.4 Dữ liệu phổ NMR LL3 34 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây vối Triệu Sơn Thanh Hóa Hình 2.1 Sự định hướng electron 13 Hình 2.2 Các moment từ hạt nhân từ trường Bo 15 Hình 2.3 Sự tách lượng trạng thái spin 16 Hình 2.4.a Phổ 1H NMR n – hexanol đo bình thường 17 Hình 2.4.b Phổ 1H NMR n – hexanol thêm tác nhân phân giải 17 Hình 2.5 Thực nghiệm NOE vi sai dẫn xuất nitrobenzo diazepinon 18 Hình 2.6 Phổ 1H NMR dẫn xuất adamantan 19 Hình 2.7 Phổ 13C DEPT 3- axetyl oleanolat metyl Khử bỏ hoàn toàn tương tác spin – spin hiệu CH CH3 dương, CH2 21 Hình 2.8 a Phổ 13 C NMR vanilin 21 Hình 2.8b Phổ INEPT với xung chiếu lên H5 lựa chọn 21 vii TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Nguyễn Xuân Dũng, Trần Đình Thắng, Hồng Văn Lựu,"Nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu hoa sim ", Tạp chí dược liệu, 4(4), Tr 108 – 109 Nguyễn Xuân Dũng, Đào Hữu Vinh cộng (1985), phương pháp sắc ký, NXB Khoa học Kỹ thuật Nguyễn Hữu Đĩnh, Trần Thị Đà (1999), Ứng dụng số phương pháp nghiên cứu cấu trúc phân tử, Nhà xuất giáo dục Lê Thị Anh Đào, Nguyễn Xuân Dũng, Hoàng Văn Lựu (1997), "Nghiên cứu thành phần hóa học vối Nghệ An", Tạp chí hóa hóa học, 35(3), Tr 47 – 51 Nguyễn Văn Đậu, Nguyễn thị Thuận, Đỗ Thị Thanh (2007), "Phân lập số hợp chất từ vối , " Tuyển tập công trình hội nghị khoa học cơng nghệ hóa học hữu toàn quốc lần thứ IV, Hà Nội, Tr 311 – 315 Phan Minh Giang, Trần Thị Hà, Nguyễn Hồng Anh, Phan Tống Sơn (2007), "Nghiên cứu hóa thực vật sim (rhodomyrtus tomentosa (Ait) Hassk Myrtaceae", Tuyển tập cơng trình hội nghị khoa học cơng nghệ hóa học hữu tồn quốc lần thứ IV, Hà Nội, Tr 340 – 345 Nguyễn Quang Huy, Phan Tuấn Nghĩa, Ngô Văn Quang, Phan Văn Kiên (2007), "Axit asiatic phân lập từ sắn thuyền (syzygium resinosum) có tác dụng lên vi khuẩn streptoccus mutans", Tạp chí Dược học số Đỗ Tất Lợi (2005), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học Hoàng văn Lựu (1996), Nghiên cứu thành phần hóa học số thuộc họ Sim (Myrtaceae) Nghệ An, Luận án Phó tiến sĩ khoa học Hóa học - ĐHQGHN, Trường ĐHSP Hà Nội 40 10 Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Xuân Dũng, Lê Thị Anh Đào (1994), "Đặc trưng hóa học tinh dầu hoa vối (cleistocalyx operculatus Roxb Merr et Perry) Việt Nam", Thông báo khoa học, Đại học sư phạm Hà Nội I, (4), 32 - 34 11 Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Quang Tuệ (2004), "Thành phần hóa học gioi", Tạp chí phân tíc hóa, lý sinh học, 9(1), tr 20 – 23 12 Nguyễn Đức Minh (1975), Tính kháng khuẩn thuốc Việt Nam, NXB Y học 13.Nguyễn Duy Như (2008), "Trị tiêu chảy ổi", Tạp chí Khoa học phổ thông, 87, tr 14 – 16 14.Ts Lê Thanh Phước, Bài giảng phương pháp phổ nghiệm, Đại học Cần Thơ 15 Nguyễn Văn Thanh, Hoàng Văn Lựu, Chu Đình Kính, Phạm Thị Thanh Mỹ (2008), "Xác định cấu trúc số hợp chất từ rễ sắn thuyền (syzygium resinosum Gagnep Merr et Perry)", Tạp chí Hố học, 46(5A) 16 Nguyễn Văn Thanh, Hoàng Văn Lựu, Chu Đình Kính (2009), "Nghiên cứu thành phần cấu trúc hoá học số hợp chất tách từ rễ vối (cleistocalyx operculatus Roxb Merr et Perry)", Tạp chí Hố học, 47(4A) 17 Nguyễn Văn Thanh (2008), Tách xác định cấu trúc số hợp chất từ vối cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr et Perry Nghệ An sắn thuyền syzygium resinosum (Gagnep) Merr et Perry Thanh Hoá, Luận văn Thạc sĩ Hoá học - Trường Đại học Vinh 18.Trịnh Thị Thuỷ, Trần Văn Sung (1993 - 1994), "Kết nghiên cứu hóa học số thuốc Việt Nam" ,Tuyển tập báo cáo Khoa học - Viện Hóa học, 213 Tài liệu Tiếng Anh 19 B Sintayehu, K Asres, and Y Raghavendra (2012), “Radical scavenging activities of the leaf extracts and a flavonoid glycoside isolated from Cineraria abyssinica Sch Bip exA Rich,” J Appl Pharm Sci., vol 2, no 4, pp 44–49 41 20 E C Torres-Santos, D L Moreira, M A C Kaplan, M N Meirelles, and B Rossi-Bergmann (1999), “Selective effect of 2’,6’-dihydroxy4’-methoxychalcone isolated from Piper aduncum on Leishmania amazonensis,” Antimicrob Agents Chemother., vol 43, no 5, pp 1234–1241 21 Văn Ngọc Hướng, Nguyễn Xuân Sinh (2003), "Isolasion and Identification of two triterpenoids from the leaves of syzygium resinosum Gagnep", 8th Eurasia comference on chemical sciences, Ha Noi, october 21 - 24, p.p.355 22 J F O Couto et al.(2021), “HSCCC separations of rutin esters obtained by enzymatic reaction catalyzed by lipase,” J Braz Chem Soc., vol 32, no 3, pp 523–533 23 S N A Malek, C W Phang, H Ibrahim, N A Wahab, and K S Sim (2011), “Phytochemical and cytotoxic investigations of Alpinia mutica rhizomes” , Molecules, vol 16, no 1, pp 583–589 24 Y L Li, J Li, N L Wang, and X S Yao (2008), “Flavonoids and a new polyacetylene from Bidens parviflora Willd.”, Molecules, vol 13, no 8, pp 1931–1941 42 PHỤ LỤC Hình 3.1: Phổ 1H-NMR chất LL1 Hình 3.2: Phổ DEPT chất LL1 P1 Hình 3.3 : Phổ HMBC chất LL1 Hình 3.4: Phổ HSQC chất LL1 P2 Hình 3.5: Phổ COSY chất LL1 Hình3.6 : Phổ 1H-NMR hợp chất (LL2) quercetin P3 Hình 3.7: Phổ giãn 1H-NMR hợp chất (LL2) quercetin Hình 3.8: Phổ 13C-NMR hợp chất quercetinLL2 P4 Hình 3.9: Phổ giãn 13C-NMR hợp chất quercetin LL2 Hình 3.10: Phổ DEPT hợp chất quercetin ll2 P5 Hình3.11 : Phổ HMBC hợp chất quercetin LL2 Hình 3.12: Phổ HSQC hợp chất quercetin LL2 P6 Hình 3.13: Phổ 1H-NMR hợp chất LL3 Hình 3.14: Phổ 13C-NMR hợp chất LL3 P7 Phụ lục 4.1: Phổ 1H-NMR chất rutin – LL3 Phụ lục 4.2: Phổ 1H-NMR chất rutin – LL3 P8 Phụ lục 4.3: Phổ 1H-NMR chất rutin – LL3 Phụ lục 4.4: Phổ 13C-NMR chất rutin – LL3 P9 Phụ lục 4.5: Phổ 13C-NMR chất rutin – LL3 Phụ lục 4.6: Phổ 13C-NMR chất rutin – LL3 P10 Phụ lục 4.7: Phổ DEPT chất rutin – LL3 Phụ lục 4.8: Phổ HMBC chất rutin – LL3 P11 Phụ lục 4.9: Phổ HSQC chất rutin – LL3 Phụ lục 4.10: Phổ COSY chất rutin – LL3 P12