Nghiên cứu bào chế viên phóng thích kéo dài chứa metoprolol 50 mg và amlodipin 5 mg

BỘ GIÁODỤCVÀĐÀOTẠO BỘ Y TẾĐẠIHỌCYDƢỢCTHÀNHPHỐHỒCHÍMINH NGUYỄNTHỊ LINHTUYỀN NGHIÊNC Ứ U B À O C H Ế VI ÊNPHĨNGTHÍCHKÉODÀICHỨA METOPROLOL50MG VÀAMLODIPIN5MG Ngành: Cơng nghệ dược phẩm bào chếMãsố: 9720202 TĨMTẮTLUẬNÁNTIẾNSĨDƢỢCHỌC Thành phố Hồ ChíMinh–Năm2018 Cơngtrìnhđược hồn thành tại: ĐẠIHỌCYDƢỢCTHÀNHPHỐHỒCHÍMINH Người hướngdẫnkhoa học: PSG.TS Nguyễn Đức TuấnGS.TS.LêQuanNghiệm Phảnbiện1: Phảnbiện2: Phảnbiện3: Luận ánsẽ đượcbảo vệtạiHộiđồng đánhgíaluậnáncấp trườnghọptại: ĐẠIHỌCYDƯỢCTHÀNHPHỐHỒCHÍMINH vàohồi…… giờ……….ngày…….tháng…… năm……… Có thểtìmhiểuluậnántại: - ThưviệnQuốc giaViệtNam - ThưviệnKhoa họcTổnghợpThành phố Hồ ChíMinh - Thưviện Đạihọc Y DượcThành phố Hồ ChíMinh GIỚITHIỆULUẬNÁN Đặtvấnđề Metoprolol succinat chất đối kháng chọn lọc β 1-adrenergic vàamlodipin besilat chất ức chế kênh calci thuộc nhóm dihydropyridinthường lựa chọn phối hợp điều trị tăng huyết áp kèm bệnhmạchvành.Tuynhiên,nhượcđiểmcủametoprololsuccinatlàb ị chuyển hóa mạnh enzym gan, thời gian bán thải ngắn 3-4 giờ, sinhkhả dụng thấp khoảng 40% gây bất tiện phải dùng thuốc nhiều lầntrong ngày Ngược lại, amlodipin besilat thuốc có thời gian bán thảidài3 g i Đ ể p h ố i h ợ p h a i d ợ c c h ấ t c ó t h i g i a n b n t h ả i k h c nhautrongcùngsản phẩm với hai cơchếphóngthíchhoạt chất khácnhau, đó, thành phần metoprolol succinat phóng thích kéo dài vàamlodipin besilat phóng thích nhanh biện pháp tối ưu giúp kiểm soáthuyết áp ổn định suốt 24 giờ, giảm tác dụng phụ không mongmuốn Về bào chế amlodipin besilat hoạt chất dễ bị hút ẩm, không ổnđịnh dễ bị biến đổi tiếp xúc trực tiếp với ánh sáng, đồng thờimetoprolol succinat hoạt chất tan tốt nước nên việc lựa chọnpolyme thích hợp để kiểm sốt phóng thích kéo dài khó khăn.Những lý gây nhiều bất lợi nghiên cứu bào chế dạng viênphối hợp chứa metoprolol succinat phóng thích kéo dài amlodipinbesilat phóng thích nhanh Hiện nay, Việt Nam chưa có nghiên cứudạng viên có phối hợp thành phần trên, đề tài “Nghiên cứu bàochế viênphóngthíchkéodàichứametoprolol50mgvàamlodipin5mg“ (gọi tắt viên phóng thích kéo dài MET-AMLO) thực hiệnnhằm bào chế viên chứa metoprolol succinat phóng thích kéo dài vàamlodipinbesilatphóng thíchnhanhđạttiêuc h u ẩ n v t n g đ n g sinh học với viên đối chiếu SelomaxTM50/5, góp phần phát triển cácdạng thuốcmớiđ ợ c s ả n x u ấ t t r o n g n c , đ p ứ n g n h u cầu cao, đ a dạngt r o n g đ i ề u t r ị v t h a y t h ế t h u ố c n g o i n h ậ p L u ậ n n đ ợ c t i ế n hànhvớicác mục tiêu cụ thể sau: - Nghiêncứubàochếviên hai lớpchứa metoprolol 50mgphóngthíchkéodàivà amlodipin mgphóngthích nhanh - Nghiêncứunângcấpvàxácđịnhquytrìnhbàochếquymơ10.000viên/ lơ - Xâyd ự n g t i ê u c h u ẩ n c s v n g h i ê n c ứ u đ ộ ổ n đ ị n h v i ê n p h ó n g thíchkéo dàiMET-AMLO - Đánh giá tương đương độ hòa tan, xác định sinh khả dụng tươngđương sinh học viên phóng thích kéo dài MET-AMLO so với viênđối chiếuSelomaxTM50/5 Tínhcấpthiếtcủa đềtài Bệnh cao huyết áp bệnh lý thường gặp cộng đồng vàg i a tăng theo tuổi Bệnh dễ gây tử vong để lại di chứng nặng nề liệtnửa người, hôn mê vớiđờis ố n g t h ự c v ậ t , đ n g t h i c ó t h ể t h ú c đ ẩ y bệnh mạch vành, suy tim, bệnh mạch máu não bệnh thận mãn tínhlàm ảnh hưởng nhiều đến chất lượng sống Theo Hiệp hội tănghuyết áp Châu Âu (ESH) Hiệp hội tim mạch Châu Âu (ESC) 2013,hầu hết bệnh nhân cần hai thuốc để đạt mục tiêu, điều trị có thểbắtđầu bằngđơn trịliệu hayphốihợp haithuốc ởliềuthấp Lợi điểm việc phối hợp thuốc giúp tăng hiệu hạ huyết áp,giảmtácdụngphụ,giảmbiếncốtimmạch,trongđó,phốihợpmetoprolol succinat amlodipin besilat lựa chọn hàng đầu trongđiềutrịbệnh tănghuyếtápkèmsuytim, bệnhmạch vành Nhữngđóng gópmới luận án - Xây dựng cơng thức quy trình bào chế viên hai lớp chứa hai hoạtchấtmetoprolol50mg phóng thíchkéodàivàamlodipin5m g phóng thích nhanh quy mô 10.000 viên/lô phương pháp khảosát thực nghiệm kết hợp tối ưu hóa Viên ổn định, đạt tiêu chuẩn cơsở tương đương sinh học so với viên đối chiếu SelomaxTM50/5.Lần thuốc có kết hợp hai thành phần với hai chếphóng thích khác công bố Việt Nam Hỗn hợp polymeđượcs d ụ n gt o k h u n g m a t r i x k i ể m s oá t đ ộ g i ả i p h ó n g hoạtchất suốt 20 hoạt chất tan tốt nước nhưmetoprolol succinat Đây thành công lĩnh vực bào chế.Từ quy trình 10.000 viên/lơ sử dụng thiết bị nghiên cứu,cóthểnângcấpđể ứngdụngtrongsản xuấtcơngnghiệp - Đã xây dựng thẩm định quy trình định định lượng đồng thờimetoprolol succinat amlodipin besilat huyết tương bằngphương pháp LC-MS/MS Quy trình ứng dụng để đánh giá sinhkhả dụng viên nghiên cứu tình trạng đói so với tình trạngnovàxác địnhtươngđươngsinhhọcsovới viênSelomaxTM50/5 Bốcụcluậnán Luận án gồm 141 trang: mở đầu trang, tổng quan tài liệu 28 trang, đốitượngv p h n g p h p n g h i ê n c ứ u t r a n g , k ế t q u ả n g h i ê n c ứ u trang,bànluận16trang,kếtluậnvàkiếnnghị3trang.Luậnáncó104bảng, 22 hình, sơ đồ, 105 tài liệu tham khảo gồm 19 tài liệu tiếng Việtvà86 tàiliệutiếngAnh,38phụlục thể hiệncác kếtquảthựcnghiệm Chƣơng1.TN G QUANTÀILIỆU 1.1 Tổngquanmetoprololsuccinatvàamlodipinbesilat Metoprolol succinatt n t i d i d n g b ộ t t i n h t h ể t r ắ n g h o ặ c g ầ n trắng, tan vơ hạn nước methanol, tan ethanol, íttantrongalcolisopropylicvà ethyl acetat Amlodipin besilatdạng bột màu trắng gần trắng; Dễ tantrongmethanol,hơitantrongethanol,khótantrongnướcvà2–propanol Một vài chế phẩm có chứa metoprolol succinat amlodipin besilattrênthịtrường:SelomaxTM, Betafit-AM®,Amlong-MT®,SitelolAM® 1.2 Hệtrịliệuphóngthích kéodài Trong hệ thống phóng thích kéo dài theo chế khuếch tán kiểukhung xốp, hoạtchấtdạng hòatanhay tiểu phânrắn đượcp h â n t n đồng khối polyme khơng tan thân dầu thân nước Sựphóng thích hoạt chất phụ thuộc vào độ tan hoạt chất khuếchtánhoạtchấtra ngoàiqua đườngmao dẫn trongkhungxốp Một số tá dược phóng thích kéo dài có cấu trúc khung xốp thườngdùng:hydroxylpropylmethylcellulose(HPMC),eudragit,x a n t h a n gum 1.3 Phương pháptốiưuhóatrong xâydựng cơng thức vàquy trình Sử dụng phần mềm Design Expert để thiết kế mơ hình thực nghiệmvà phần mềmBCPharSoftđể tốiưuhóa cơngthức 1.4 Sinhkhảdụngvà tương đươngsinhhọccủadạng thuốcp h ó n g thíchkéo dài Các phương pháp xác định sinh khả dụng tương đương sinh họccủa thuốc gồm: đo nồng độ thuốc huyết tương, đo lượng thuốc bàitiếttrongnướctiểu,đophản ứngdượclựccấp,quansátlâm sàng, đo sựphóngthích thuốcin vitro 1.5 Mộtsốnghiêncứuvềmetoprolol succinat,amlodipinbesilat Chƣơng2.ĐỐITƢỢNGVÀPHƢƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 2.1 Đốitượngnghiêncứu 2.1.1 Nguyênvậtliệu Metoprolol succinat (Polpharma-Ba Lan), Amlodipin besilat (CadilaHealthcare-ẤnĐộ) 2.1.2 Chấtchuẩnđốichiếu,thuốcđốichiếu Metoprololsuccinat(100,4%;99,8%)doFineChemicalsBUvàUSPcung cấp Amlodipin besilat(100,26%;100,43%)-ViệnKiểmNghiệmthuốcTPHCMcungcấp SelomaxTM50/5 ( C D G 1 , C D G 1 F , C D G 001)của AstraZenecasảnxuấtnhượngquyềntạiIPCALaboratoriesLtd 2.1.3 Trangthiết bị Máy trộn siêu tốc (ViệtNam),máy trộn lậpphương (ViệtN a m ) , máy sấy tầng sôi (Việt Nam), máy dập viên 2-DV-5 (Thái Lan), máyHPLC(Hitachi,Nhật), hệthốngmáyLC-MS/MS (Shimadzu,Nhật) 2.2 Phương phápnghiêncứu 2.2.1 Nghiên cứu bào chế viên hai lớp chứa metoprolol 50 mg phóngthíchkéo dàivà amlodipin5 mgphóngthích nhanh Bào chế lớp amlodipin besilat phóng thích nhanh phương phápdập trực tiếp điều kiện tránh ánh sáng với loại tá dược siêu rãnatri starch glycolat natri croscarmellose tỷlệ 2%và 4% Bào chế lớp metoprolol succinat phóng thích kéo dài phươngpháp dập thẳng phương pháp xát hạt ướt với khảo sát loạipolyme phối hợp loại polyme eudragit RSPO 100, HPMCK4M,HPMCK100M, xanthan gum Bảng2.1.Thànhphầncơng thứcviên phóngthích kéodàiMET-AMLO Thànhphần Tỉlệ(%) Khốilƣợng(mg) Metoprololsuccinat 11,875 47,5 Tádượcđộn khảosát khảosát Metoprolol Hỗnhợp polymePTKD PVP K30 1,25 succinat Aerosil 0,625 2,5 Magnesistearat 0,625 2,5 Amlodipinbesilat 1,73 6,935 Tablettose 31,641 126,565 Natricrosscarmellose 0,75 Amlodipinb Glucidex 2,625 10,5 esilat Aerosil 0,375 1,5 Magnesistearat 0,375 1,5 Tổngcộng 100 400 Cácthôngsố đầu vàođượckhảo sátlà: X1: hỗnhợp polymevới mức35%, 40%và45% X2: hỗn hợp tá dược độn với tỉ lệ 1:1 2:1 (S - Starch 1500, D –Di-tab,AAvicel) X3: độ cứngvới2mức 80-110Nvà 100-120N Kết độ giải phóng hoạt chất viên đối chiếu Selomax TM50/5 làmcơ sở độ giải phóng hoạt chất phóng thích kéo dài MET-AMLOvới cácthôngsố đầu gồm: Y1: hàm lượng metoprolol succinat phóng thích thời điểm giờ0%-25% Y2: hàm lượng metoprolol succinat phóng thích thời điểm giờ30%-50% Y3:h m l ợ n g m e t o p r o l o l s u c c i n a t p h ó n g t h í c h t h i đ i ể m g i 50% -70% Y4:hàmlượngmetoprololsuccinatphóngthíchởthời điểm20giờ≥80% Bảng2.2.Thiếtkếmơhình thựcnghiệmvớiphầnmềmDesignExpert X1 X2 X3 X1 X2 M1 35% S:D(2:1) 100-120 N M10 40% S:A(1:1) M2 35% S:D(2:1) 80-100 N M11 40% S:A(1:1) M3 35% S:A(1:1) 100-120 N M12 40% S:D(1:1) M4 35% S:D(1:1) 100-120 N M13 45% S:A(2:1) M5 35% S:A(2:1) 80-100 N M14 45% S:D(2:1) M6 35% S:A(1:1) 80-100 N M15 45% S:A(2:1) M7 40% S:A(2:1) 100-120 N M16 45% S:A(1:1) M8 40% S:A(2:1) 80-100 N M17 45% S:D(1:1) M9 40% S:D(2:1) 80-100 N M18 45% S:D(1:1) X3 100-120 N 80-100 N 100-120 N 100-120 N 100-120 N 80-100 N 100-120 N 80-100 N 100-120 N Xác định công thức bào chế tối ưu: sử dụng phần mềm tối ưu hóaBCPharSoft OPT Thực nghiệm kiểm chứng: bào chế theo công thức tốiưu,kếtquảthực nghiệmđược sosánhvớikếtquả dựđốn BaophimviênphóngthíchkéodàiMETAMLOvớihỗndịchOpadryII,khảosátcácthơngsố:tốcđộnồibao,nhiệtđộkhív ào,khíra,nhiệtđộviên,tốcđộphundịchbao,ápsuấtkhínén…trênmáybaophim 2.2.2 Nghiênc ứ u n â n g c ấ p v x c đ ị n h q u y t r ì n h b o c h ế q u y m ô 10.000viên/lô Bào chế quy mô 10.000 viên/lô thiết bị: máy trộn cao tốc,máy trộn lập phương máy sấy tầng sôi Xác định thông số thờigian trộn thiết bị Tiến hành dập viên dùng biểu đồShewhart để kiểm soát khối lượng trung bình viên trình dậpviên 2.2.3 Xây dựng tiêu chuẩn sở nghiên cứu độ ổn định viên phóngthíchkéo dàiMET-AMLO Tiêu chuẩn sở viên phóng thích kéo dài MET-AMLO xâydựng dựa theo DĐVN IV gồm: hình thức cảm quan, độ đồng khốilượng, độ đồngđều hàmlượng,độ hịatan, địnhtính,địnhlượng Nghiên cứu độ ổn định thực lô điều kiện bảo quảndàihạn(nhiệt độ30±2oC, độ ẩm tương đối 75 ± 5%) thời gian lấymẫu 0, 1, 3, 6, 9, 12, 18, 24 Các tiêu khảo sát gồm cảm quan, độhòa tan hàmlượnghoạtchấttrongviên 2.2.4 Đánh giá tương đương độ hòa tan, xác định sinh khả dụng vàđánh giá tương đương sinh học viên phóng thích kéo dài METAMLOsovớiviên đối chiếu SelomaxTM50/5 Đánh giá tương đương độ hòa tan:thử độ hòa tan viên nghiêncứu viên đối chiếu môi trường pH 1,2; pH 4,5 pH 6,8.Xác định phần trăm giải phóng hoạt chất, so sánh tương đương củathuốc thử thuốc đối chiếu thông qua hệ số tương đồng f2trong mỗimơi trường Thẩm định quy trình định lượng đồng thời metoprolol amlodipintronghuyếttương phương pháp LC-MS/MStheoUSFDAvàEMA Xác định sinh khả dụng đánh giá tương đương sinh học:thiết kếnghiên cứu, tuyển chọn người tình nguyện, uống thuốc, lấy mẫu máu,chiết xuất định lượng đồng thời metoprolol amlodipin huyếttương,phântíchcácthơngsốdượcđộnghọcCmax,Tmax,AUC0-t,AUC0∞ So sánh thơng số dược động học AUC0-t, AUC0-∞, Cmax, Tmaxcủathuốc thử với thuốc đối chiếu theo hướng dẫn nghiên cứu sinh khả dụngvàđánhgiá tươngđươngsinh học hiệphội nướcASEAN Chƣơng3.KẾTQUẢNGHIÊNCỨU 3.1 Nghiêncứubàochếviênhailớpchứametoprolol50mgphóngthíchkéodàivà amlodipin5mgphóngthíchnhanh Bảng3.1.Phần trămmetoprololsuccinatđượcgiảiphóngtheo18cơngthức %metoprololsuccinat Cơng Cơng %metoprololsuccinat 4giờ 20giờ giờ thức thức M1 18,96 44,36 64,04 85,08 M10 22,1 50,2 70,7 M2 17,03 45,23 64,71 87,77 M11 17,51 42,59 61,6 M3 20,33 48,17 73,19 94,96 M12 19,22 48,88 71,22 20giờ 93,09 93,18 92,31 %metoprololsuccinat Công Công % metoprololsuccinat 4giờ 20giờ thức giờ thức M4 17,21 42,24 63,66 86,18 M13 14,69 37,08 54,2 M5 17,96 43,86 65,7 85,56 M14 13,65 35,61 54,27 M6 16,33 37,81 56,44 80,35 M15 16,38 44,27 63,04 M7 15,84 39,54 57,96 89,26 M16 18,13 45,03 63,72 M8 21,29 51,34 73,68 93,27 M17 21,22 47,05 63,37 M9 15,89 39,66 59,67 85,52 M18 20,76 43,69 65,86 Bảng3.2.CơngthứctốiưudựđốnbởiphầnmềmBCPharSoftOPT 20giờ 69,87 83,93 75,02 73,95 91,97 89,78 X1 X2 X3 Dự đốn Thơngsố dự đốn 45% S:D(2:1) 100-120 N Bảng3.3.%metoprololgiảiphóng cơng thứctốiưusocơngthứcdựđốn Phầntrămmetoprolol succinat(%) Dự đốn giờ 20giờ Cơngthứcdự đốn 13,75 36,53 57,05 84,03 Côngthức tốiưuthựcnghiệm 13,90 37,90 55,36 85,26 SelomaxTM50/5 13,25 35,37 59,50 89,26 Kết cho thấy viên phóng thích kéo dài MET-AMLO viên đốichiếukhơngkhác cóýnghĩa thốngkê (f2= 69,482) Thơng số bao phim viên phóng thích kéo dài MET-AMLO: tốc độ nồi10-15 vịng/phút, nhiệt độ khí vào 60-70 oC, nhiệt độ viên nhân 40-45oC,tốc độ phun dịch bao 1-2 ml/phút, áp suất khí nén 1,5 Pa, bề rộng dải phunphủhếtbềrộngkhốiviên,khoảngcách từsúngphunđếnbềmặtkhốiviên17cm,sấysau khibao30phútở50oC Bảng3.4.Độhòatan viênPTKDMET-AMLOsau bao phim(n =6) Độ hịa tan(%) Amlodipinbesilat Metoprololsuccinat Lơ 30phút giờ 96,74 13,77 38,58 56,30 97,79 13,33 37,59 56,97 103,43 14,36 37,60 57,73 TB 99,32 13,82 37,92 57,00 RSD% 2,97 3,59 1,35 1,13 20giờ 87,39 88,30 85,76 87,15 1,24 Viên sau bao có độ giải phóng hoạt chất cho lớp metoprololsuccinat vàlớpamlodipin besilattại cácthời điểmđạt theoTCCS giantheodõi(tháng) 12 ±0,96 ±1,19 ±2,80 ±2,10 ±2,17 ±2,89 82,65 85,16 86,83 87,51 88,13 88,61 Lô2 ±1,68 ±2,16 ±2,78 ±2,46 ±1,89 ±2,49 86,22 86,02 85,62 86,68 86,28 87,82 Lô3 ±0,96 ±1,07 ±1,91 ±2,28 ±3,01 ±3,02 Bảng3.8.Kếtquảthửđộhòatan amlodipin besilatởđiều kiện dàihạn (n =12) Thờigiantheodõi(tháng)ởđiều kiệndàihạn Thời 12 điểmđánhgiá(p hút) 93,70± 94,68± 95,83± 97,04± 98,28± 100,18 Lô1 2,01 2,89 2,05 1,67 2,79 ±2,84 94,25± 95,33± 97,39± 98,55± 100,63 100,65 30 Lô2 1,79 2,78 2,01 2,15 ±1,59 ±1,07 94,08± 94,71± 95,57± 98,11± 99,07± 103,65 Lô3 1,93 3,13 2,88 2,89 3,27 ±2,47 Bảng 3.9.Sự biến đổi hàm lượng metoprolol succinat amlodipin besilattrongđiềukiệndàihạn (%) Hàmlƣợngmetoprololsuccinat (%)Hàmlƣợngamlodipinbesilat Tháng Lô1 Lô2 Lô3 Lô1 Lô2 Lô3 100,56 100,46 100,57 100,72 100,69 101,02 99,94 99,90 99,85 100,24 100,43 99,82 99,80 99,35 99,69 99,13 98,70 98,84 99,60 98,72 99,19 98,57 97,21 97,94 98,84 97,35 98,69 96,43 96,40 97,75 12 98,30 97,24 98,39 96,11 96,14 97,50 Thời điểm đánhgiá(giờ) 3.4 Đánh giá tương đương độ hòa tan, xác định sinh khả dụng đánhgiá tương đương sinh học viên phóng thích kéo dài METAMLO sovới viênđốichiếu SelomaxTM50/5 3.4.1 Đánh giátươngđươngđộ hòatan Bảng3.10.Phầntrămgiảiphóngmetoprololsuccinattrong3mơitrường Viênnghiêncứu Viênđốichiếu Thời Mơitr TB ± e (%) TB ± e (%) gian(gi RSD% RSD% ƣờng (n=12) (n=12) ờ) 18,53±0,56 3,02 16,73±0,70 4,21 45,21±0,96 2,12 43,69±1,17 2,68 pH 1,2 63,65±1,29 2,03 64,05±1,42 2,21 20 87,76±1,96 2,22 91,76±1,10 1,19 Viênnghiêncứu Viênđốichiếu Thời TB ± e (%) TB ± e (%) gian(gi RSD% RSD% (n=12) (n=12) ờ) 15,33±0,90 5,86 15,48±0,82 5,29 37,34±1,43 3,82 35,15±0,67 1,89 pH 4,5 55,53±1,48 2,67 55,16±1,15 2,09 20 85,38±1,70 1,99 86,50±0,89 1,03 13,91±0,55 3,94 13,30±0,45 3,41 37,90±0,79 2,09 35,58±1,15 3,22 pH 6,8 55,36±0,95 1,72 59,50±1,51 2,54 20 85,26±1,22 1,44 89,23±1,49 1,67 Bảng3.11.Phầntrămgiảiphónga m l o d i p i n besilattrong 3môitrường Viênnghiêncứu Viênđốichiếu Môit Thời TB ± e TB ±e rƣờng điểm(phú RSD% RSD% (%)n=12 (%)n=12 t) Môitr ƣờng pH 1,2 15 90,15±1,01 1,13 85,74±0,75 0,87 pH 4,5 15 90,22±2,25 2,50 87,53±2,44 2,78 pH 6,8 15 91,78±2,00 2,18 90,87±2,48 2,73 TM Độhòatanamlodipinbesilatcủaviênnghiêncứuvàv i ê n Selomax môi trường lớn 85% thời điểm 15phút, khơngcần tínhhệ sốtươngđồngf2 Bảng 3.12.Hệ số tương đồng f2của viên nghiên cứu viên đối chiếu trongcácmôitrường Môitrƣờng pH1,2 pH4,5 pH6,8 f2 75,06 66,68 69,48 3.4.2 Thẩmđịnhquytrìnhđịnhlượngđồngthờimetoprololvàamlodipin huyết tương phương pháp sắc ký lỏng ghép nốikhốiphổ Đãxâydựngvàthẩmđịnhquytrìnhđịnhlượngđồngt h i metoprolol amlodipin huyết tương phương pháp sắc kýlỏng ghép nối khối phổ đạt yêu cầu phương pháp phân tích dịchsinhhọctheoUSFDAvàEMA.Phương phápnày đượcứ n g d ụ n g nghiên cứu đánh giá tương đương sinh họcin vivovà sinh khảdụngcho chế phẩmchứa metoprololvàamlodipin 3.4.3 Xácđịnhsinhkhảdụngvàtươngđươngsinhhọccủaviênphóngthíchk éodàiMET-AMLOsovớiviênđốichiếuSelomaxTM50/5Thốngkêthơngsố dƣợcđộnghọc Bảng3.13.Cácthơngsốdượcđộnghọctrungbìnhcủaamlodipintrongthuốcthửvàt huốcđốichiếutrongtìnhtrạngđói TB Độ Độ Khoảng( Thôngsố Thuốc TBnhân cộng lệchchu phântá min–max) ẩn* n* Thử 146,910 140,891 40,46 27,54 65,855 –197,304 AUC0-t 42,38 30,31 60,750 –196,081 (ng.giờ/ml) Chứng 139,832 133,102 Thử 162,001 154,600 46,54 28,73 67,816 –221,824 AUC0-∞ 48,61 31,31 64,198 –213,235 (ng.giờ/ml) Chứng 155,251 147,114 Thử 3,758 3,674 0,80 21,18 2,160– 4,978 Cmax( Chứng 3,450 3,316 0,97 28,14 1,609– 5,211 ng/ml) Thử 7,69 7,43 5,00–12,00 Tmax(giờ) Chứng 7,92 7,64 5,00–12,00 Thử 35,18 34,15 24,20– 52,37 T1/2(giờ) Chứng 37,04 36,40 29,06– 56,17 Thử 0,0209 0,0203 0,0132–0,0286 Ke Chứng 0,0194 0,0190 0,0123–0,0239 * Độlệchchuẩn(SD)vàđộ phântán(CV)đượctính vớigiátrịTB cộng Bảng3 C c t h ô n g s ố d ợ c đ ộ n g h ọ c t r u n g b ì n h c ủ a m e t o p r o l o l t r o n g thuốcthửvàthuốcđốichiếutrongtìnhtrạng đói Độ Độ Khoảng( Thôngsố Thuốc TBcộng TBnhân lệchchu phântá min–max) ẩn* n* Thử 718,336 535,554 479,26 66,72 103,697– 1705,877 AUC0-t 503,108 342,43 56,69 144,891– 1223,920 (ng.giờ/ml) Chứng 604,097 Thử 730,569 547,639 483,00 66,11 106,198– 1727,012 AUC0-∞ 517,711 340,35 55,33 150,952– 1232,768 (ng.giờ/ml) Chứng 615,081 Thử 48,280 40,488 25,59 53,01 11,321–99,064 Cmax( Chứng 40,945 35,262 19,42 47,44 8,743– 75,673 ng/ml) Thử 5,31 4,97 3,00–8,00 Tmax(giờ) Chứng 6,15 5,46 2,00–12,00 Thử 6,72 6,57 3,85–8,37 T1/2(giờ) Chứng 7,07 7,00 5,85–9,60 Thử 0,1087 0,1056 0,0828–0,1802 Ke Chứng 0,1000 0,0990 0,0722–0,1185 * Độlệchchuẩn(SD)vàđộ phântán(CV)đượctính vớigiátrịTB cộng Bảng3.15.Cácthơngsốdượcđộnghọctrungbìnhmetoprololcủathuốcthửtro ngtìnhtrạngđóivàno TB TB Độ Độ Khoảng( Thơngsố Thuốc cộng nhân lệchchu phântá min–max) ẩn* n* Đói 718,336 535,554 479,26 66,72 103,697– 1705,877 AUC0-t No 702,808 511,059 466,68 66,40 101,834– 1523,373 (ng.giờ/ml) Đói 730,569 547,639 483,00 66,11 106,198– 1727,012 AUC0-∞ No 725,127 527,187 484,84 66,86 106,982– 1534,304 (ng.giờ/ml) Đói 48,280 40,488 25,59 53,01 11,321–99,064 Cmax( No 57,121 46,947 29,07 50,90 11,491–98,423 ng/ml) Đói 5,31 4,97 3,00–8,00 Tmax(giờ) No 4,85 4,67 3,00–8,00 Đói 6,72 6,57 3,85–8,37 T1/2(giờ) No 6,96 6,37 3,20–15,69 Đói 0,1087 0,1056 0,0828–0,1802 Ke No 0,1180 0,1088 0,0442–0,2169 * Độlệchchuẩn(SD)vàđộ phântán(CV)đượctính vớigiátrịTB cộng Bảng3.16.TỷsốAUC0-t/AUC0-∞ Amlodipin Metoprolol Đói Đói No TỷsốAUC0-t/AUC0-∞củathuốcthử 90,68% 98,33% 96,92% TỷsốAUC0-t/AUC0-∞củathuốcđốichiếu 90,07% 98,21% Bảng3.17.Kếtquả sosánh sinhkhảdụngvớikhoảngtincậy90% Amlodipin Metoprolol Thông Tỷsố(%) Khoảng tin Tỷ số (%) Khoảng tin số (Thử/chứng) cậy90% (Thử/chứng) cậy90% AUC0-t 106,02 97,05– 115,82 106,61 91,55– 124,14 AUC0-∞ 105,33 97,35– 113,98 105,90 90,42– 124,03 Cmax 110,32 100,40–121,21 114,60 107,27–122,43 Nhận xét:khoảng tin cậy 90% tỷ số thông số dược động họcCmax,A U C 0-t, AUC0-∞của hai chế phẩm chênh lệch không 80-125% chuyển qua logarit Đối với metoprolol amlodipin có T maxcủa thuốc thử so với thuốc đối chứng khác khơng có ý nghĩa thốngkê.Thơngsốdượcđộnghọctrungbình metoprolol Cmax,AUC0-t,AUC0-∞của thuốc thử tình trạng đói no khơng khác biệt nênthứcăn khôngảnh hưởngđến sinh khả dụngcủa metoprolol Chƣơng4.BÀNLUẬN 4.1 Nghiên cứu bào chế viên hai lớp chứa metoprolol 50 mg phóngthíchkéo dàivà amlodipin5 mg phóngthích nhanh Qua khảo sát viên đối chiếu Selomax TM50/5 cho thấy viên đối chiếulàviênnéndàihailớpbaophim:lớpmàutrắngchứahoạtchấtmetoprolol succinat, lớp lại màu cam chứa hoạt chất amlodipinbesilat Viên có kích thước khối lượng trung bình khơng q lớn(365,05 mg ± 3,32) nên phù hợp để sử dụng đường uống cho bệnh nhânvàítgâytrở ngạikhinuốt Viên SelomaxTM50/5 có phần trăm metoprolol succinat giải phóng ởcácthờiđiểm1 giờ,4giờ,8giờvà20giờlầnlượtlà13,25%;35,37%;59,50% 89,29% phần trăm amlodipin besilat giải phóng thờiđiểm 15 phút 88,12% Viên sau đo độ hịa tan nhận thấy có vùngrõrệtlàvùnglõibộtchứanhânrắnbêntrongvàvùnggelbênngồihồn tồn giống với khung matrix thân nước, phù hợp với đặc điểm tantốt nước metoprolol succinat Đồng thời, viên có trương nởlênnhiềuởthờiđiểm20giờsovớibanđầu cho thấy viên đối chiếuSelomaxTM50/ 5c ócấutrúc khungm a t r i x, phóngthíchhoạtc hấ tt he o chếkhuếchtán.ĐâycũngchínhlàcơsởđểđềtàilựachọndạngviênnénhailớpbaophimchoviênnghiêncứuMET-AMLO lớpmetoprolol succimat phóng thích kéo dài phương pháp tạo khungmatrix theo chế khuếch tán nhằm mục đích tạo cho viên nghiên cứuvà viên đối chiếu có sinh khả dụng tương đương kết phầntrăm độ phóng thích hoạt chất viên Selomax TM50/5 sở để xâydựng tiêu chuẩn sở độ hịa tan cho viên phóng thích kéo dài MET-AMLO Thêm vàođó, dạngviênnénhailớpcũng làdạng viênphổb i ế n nhiều tác giả lựa chọn bào chế nghiên cứu ArupRatan Deb cộng sự, Atram SC cộng sự, Hajare P.P cộng sự,Iswariya V T cộng sự, Kumar A.S cộng phù hợp với điềukiệnmáy móc thiếtbịcủađề tài Thành lập cơng thức xem tảng giai đoạn nghiêncứuvà phát triểnthuốc Việcthànhlậpcôngthức cần xe m xétc c vấ nđềnhưthànhphầnngunliệuvàtỷlệcủangunliệutrongcơngthức điều kiện sản xuất tính chất chất lượng sảnphẩm bị ảnh hưởng yếu tố Vấn đề thiết kế mô hìnhthực nghiệm chiếm vai trị quan trọng q trình thành lập cơngthức Trước đây, hầu hết việc xây dựng công thức dựa thay đổigiá trị biến (yếu tố) thời điểm cách ngẫu nhiên giữlại nhữngbiếnkháckhông đổi đểnghiêncứusự ảnhhưởng đếnnhữngbiến đặc trưng lên cơng thức quy trình, thử nghiệm theophương phápnày thường saisố.Ngày nayviệcsửdụng phầnm ề m thông minh thiết kế tối ưu hóa cơng thức giúp khắc phục đượcnhững nhược điểm Các yếu tố khảo sát lựa chọn lượngpolyme,l o i t d ợ c đ ộ n v đ ộ c ứ n g vi ê n l ê n t ố c độ g i ả i p h ó n g h o t ch ấttrongviên nghiên cứu Ảnhhưởng polyme: làthànhphần quan trọng vàquyếtđ ị n h q trình giải phóng hoạt chất, lượng polyme tăng tốc độgiải phóng hoạt chất viên giảm ngược lại Tuy nhiên, mộtsốtrườnghợpnếulượngpolymetrongcơng thứcqcaosẽkhơngcịnkhả năngkiểmsốttốc độgiảiphónghoạtchất Ảnh hưởng tá dược độn: theo nghiên cứu Marina Levina đãchứng minh HPMC phối hợp với tá dược độn Starch 1500 kiểmsốt độ giải phóng hoạt chất tốt sử dụng HPMC với tá dượcđộn avicel lactose với tỷ lệ tương đương Starch 1500 có khả năngtạo lớp gel bề mặt viên gây cản trở cho phóng thích nên cho tácdụng kiểm soát hoạt chất tốt Avicel pH101 tá dược độn cókhảnăngchịunénvàmềmdẻotốt,hútnướctheocơchếvimaoquảnvà trương nở tạokênhgiúpgiảiphóngdượcchất,vìthếkhiaviceltrương nở với HPMC làm tăng độ dài kênh khuếch tán làmgiảm phóng thích thuốc Ditab tá dược độn đảm bảo khối lượngviênđồngthờikiểmsốtgiảiphónghoạtchấttheocơ chếhệkhungxốp trơ khơng tan, sơ nước khảnăng trương nở thấp, bịb o m ò n nên làm chậm tốc độ giải phóng hoạt chất Đây ba loại tá dược độn sơnước,giúplàmgiảmtốc độgiảiphónghoạtchấtđượcđềxuấttrongđềtài Tuy nhiên, tỷ lệ HPMC sử dụng cơng thức cao cóđộ nhớt lớn (HPMC K4M, K100M) ảnh hưởng tá dược độn lênđộ giải phóng hoạt chất Chính vậy, việc phối hợp tá dượcđộnnhưStarch1500:avicelpH101vàStarch1500:ditabvớitỷlệlầnlượtlà2:1và1:1được nghiên cứu đề nhằm khảo sát ảnhhưởngcủa hỗn hợp lên độgiảiphónghoạtchất Ảnh hưởng độ cứng: thông số quan trọng bắt buộc trongnghiên cứu viên phóng thích kéo dài Các tài liệu cho độ cứngtăng, độ bền cơhọc viên tăng, độ xốp hệthống vim a o q u ả n viên giảm, viên khó thấm nước kéo dài thời gian rã dẫn đếnphầntrămgiảiphónghoạtchấtra khỏiviên giảm Phần mềm BCPharSoft OPT phần mềm tối ưu hóa cơng thức vàquy trình thẩm định Sở Khoa học cơng nghệ thành phố HồChí Minh Kết tối ưu hóa cho phần mềm BCPharSoft OPT tỷlệ hỗn hợp polyme phóng thích kéo dài 45%, tỷ lệ tá dược độn starch1500 di - tab 2:1 độ cứng 100 120 N giá trị R2luyện vàR2thửdùngđểđánhgiácácmơhìnhliênquannhânquả.T h n g thường,giátrịR2luyện > 95% R2thử > 70% mơ hình chấp nhậnđược, giá trị R2thử tiến tới 100 khả dự đốn mơ hìnhcàngtốt Phần mềm dự đốn phần trăm metoprolol succinat phóngthích cơng thức tối ưu thời điểm 13,75%; là36,53%; 57,05% 20 84,03% dùng làm sở để tiếnhành thực nghiệm kiểm chứng Kết khảo sát độ hòa tan lơ đềuđạt u cầu độ giải phóng hoạt chất cho metoprololsuccinatvàamlodipinbesilat 4.2 Nghiên cứu nâng cấp xác định quy trình bào chế quy mơ 10.000viên/lơ Thiếtbịvàthờigian trộn bộtảnhhưởng nhiềuđ ế n đ ộ đ n g n h ấ t khối bột độđồngnhấtcủaviên.Thiếtbịxáthạtvàthiếtbịsấycóảnhhưởngrấtlớntớicácđặctínhcủahạtnhưphânbốkíchthướchạt,tỷtrọng biểu kiến độ trơn chảy hạt Ngoài ra, độ ẩm hạt cũngảnhhưởngđếnđộtrơn chảyvàmứcđộliên kếttiểuphânkhidậpviên Như vậy, tiến hành bào chế quy mơ 10.000 viên/lơ, sử dụngmáy móc thiết bị với suất lớn giúp ngắn thời gian bào chế, màchất lượng cốm metoprolol succinatvàhỗn hợpbột amlodipinbesilat không thay đổi đạt yêu cầu cho tiêu kiểm nghiệmbán thành phẩm (độ ẩm, tỷ trọng biểu kiến tốc độ chảy) Quy trìnhnày giúp cho q trình bào chế viên phóng thích kéo dài MET-AMLOcho suất hiệu cao sản xuất quy mơ lớn, giúp rútngắn thờigian giảmchiphícho sảnxuất 4.3 Xây dựng tiêu chuẩn sở nghiên cứu độ ổn định viên phóngthíchkéo dàiMET-AMLO 4.3.1 Xây dựng tiêuchuẩncơsởviênphóng thíchkéodàiMET-AMLO Trong DĐVNIV,BP2015hay USP38cũng phiên bảnm i nhấtcủa2dượcđiển nàylàBP2017vàUSP40vẫnchưacóchuyênluận riêng cho chế phẩm viên nén bao phim chứa metoprolol succinatphóng thích kéo dài amlodipin besliat phóng thích nhanh Qua thamkhảo chuyên luận hoạt chất, việc xây dựng tiêu chuẩn kiểmnghiệm cho thành phẩm viên nén bao phim chứa metoprolol succinatphóng thích kéo dài amlodipin besliat phóng thích nhanh gồm chỉtiêu: hình thức cảm quan, độ đồng khối lượng, độ đồng hàmlượng, độ hịa tan, định tính định lượng Mức chất lượng đề nghị củacác tiêu tham khảo theo dược điển thuốc đốichiếu Kết kiểm nghiệm cho thấy chế phẩm nghiên cứu đạt cácchỉtiêu kiểmnghiệm