Nghiên cứu bào chế và đánh giá sinh khả dụng hỗn dịch nano piroxicam dùng cho nhãn khoa

BỘ GIÁODỤCVÀĐÀOTẠO TRƯỜNGĐẠIHỌCDƯỢCHÀNỘI BỘYTẾ ********** NGUYỄNTHỊMAIANH NGHIÊNCỨUBÀOCHẾVÀĐÁNHGIÁ SINH KHẢ DỤNG HỖN DỊCH NANO PIROXICAMDÙNGCHO NHÃN KHOA LUẬNÁNTIẾNSĨDƯỢCHỌC HÀNỘI2014 NGUYỄNTHỊMAIANH NGHIÊNCỨUBÀOCHẾVÀĐÁNHGIÁ SINH KHẢ DỤNG HỖN DỊCH NANO PIROXICAMDÙNGCHO NHÃN KHOA LUẬNÁNTIẾNSĨDƯỢCHỌC CHUYÊNNGÀNHCÔNGNGHD Ư CPHAMVÀ BÀOCHETHUOC MÃSO:62.72.04.02 Ngườihướngdẫnkhoahọc:PGS.TS.NguyễnVănLong PGSTS.TrịnhVănLẩu HÀNỘI2014 LỜICẢMƠN Tơi xin bàytỏlịngbiết ơn sâu sắcđến: PGS TS Nguyễn Văn LongPGS.TS.TrịnhVănLẩu Những người thày nhiệt tình hướng dẫn hết lịng giúp đỡ tơi trongthời gianlàmluậnánvừaqua Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới GS TS Võ Xuân Minh,PGS.TS.Nguyễn Đăng Hòa, PGS TS Phạm Thị Minh Huệ,TS.N g u y ễ n T r ầ n L i n h c ù n g t o n t h ể c c t h y , c ô g i o , k ỹ t h u ậ t v i ê n b ộ m ô n Bàochế,bộmônDượclựcbộmônô n g nghiệpư ợ c đãnhiệttìnhgiúpđỡ, tạo điềukiệnthuậnlợichotơihồnthànhluậnánnày Tơixintrântrọngcảmơn: ViệnKiểmnghiệm thuốcTrungương Trungtâm Kiểm nghiệmvà nghiêncứudượcqnđội Đã nhiệt tình giúp đỡ tơi hồn thành nội dung thực nghiệm trongq trìnhhọctậpvànghiên cứukhoahọc Tơixinchânthànhcảmơn Nhtrường,PGS.T S N g u y ễ n T h a n h Ban Giám Bình, hiệu c h u y ê n iên phòng Đ o tạosauđạihọcđãquantâm giúpđỡtơitrongqtrìnhcơngtác,họctập vànghiên cứu Cuốic ù n g , t x i n c ả m n n h ữ n g ngườ it hânt r o n g g i a đìnhb n b è đãlnởbên,g i ú p đ ỡ , đ ộ n g v i ê n , t o m ọ i đ i ề u k i ệ n t h u ậ n l ợ i đ ể t ô i hoànthànhluậnán Hà Nội, ng y 10 tháng năm 2013Nguyễn ThịMai Anh LỜICAMĐOAN Tơi xincam đoanđây làcơngtrình nghiênc ứ u c ủ a r i ê n g t ô i Cácsốliệu,kếtquảnêutrongluậnánlàtrungthựcvàchưatừngđược aicôngbố bấtkỳcông trìnhnàokhác Nguyễn Thị MaiAnh DANHMỤCCÁCKÝHIỆU,CHỮVIẾTTẮT AUC : Areaunderthecurve(Diệntíchướiđườngcong) BP : BritishPharmacopoeia(DượcđiểnAnh) Cmax : Maximumconcentration(Nồngđộthuốctốiđa) Na2EDTA : Dinatriedetat FDA : FoodandDrugAdministration(ơquanquảnlýthuốc–thựcphẩm) HPLC : Highperformanceliquidchromatography (Sắcký lỏnghiệunăng cao) HPMC : Hydroxypropylmethylcellulose HQC : Highqualitycontrolsample(Mẫukiểmchứngnồngđộcao) KTTP : Kíchthướctiểuphân L.A.F : LaminnarflowBnthikhíơkhuẩn LLOQ : Lowerlimitofquantification(Giớihạnđịnhlượngưới) LQC : Lowqualitycontrolsample(Mẫukiểmchứngnồngđộthấp) MQC : Middlequalitycontrolsample(Mẫukiểmchứngnồngđộtrungbình) MRT : Meanresidencetime(Thờigianlưuthuốctrungbình PDI Polydispersityindex(hsốđaphântán) PEG : Polyoxyethylenglycol PLGA : Poly(lactic-co-glycolicacid) PVA : Alcolpolyvinic PVP : PolyvinylpyrolidonK.30 Px : Piroxicam RSD : Relativestandarddeviation(Độlệchchuẩntươngđối) SD : Standarddeviation(Độlệchchuẩn) SEM : Scanningelectronmicroscope(Kínhhiểniđiệntửquét) USP : TheUnitedStatesPharmacopoeia(DượcđiểnMỹ) Tmax : Maximumtime(Thờigianđạtnồngđộthuốctốiđa) TEM : Transmissionelectronmicroscope(Kínhhiểniđiệntửtruyềnqua) MỤCLỤC ĐẶTVẤN ĐỀ CHƯƠNGI: TỔNGQUAN 1.1 PIROXICAM 1.1.1 Côngthức 1.1.2 Một sốđặc điểm .3 1.1.3 Tácdụng,chỉđịnh 1.1.4 Cácdạngbàochế có trênthịtrường 1.2 CÔNGNGHNA NO TRONG NGÀNH DƯC 1.2.1 Vài nétvềhệnano 1.2.2 Ưu,nhượcđiểmcủa dạngthuốc nano 1.2.3 Một sốchếphẩmthuốc nanotrênthịtrường .14 1.3 HỖNDỊCH NANOỨNGDỤNGTRONGBÀOCHE THUOC 15 1.3.1 Kháiniệmvềhỗndịchnano .15 1.3.2 Phân loạihỗndịchnano 15 1.3.3 Độổnđịnhvậtlýcủahỗndịchnano 15 1.3.4 Thành phầnhỗndịchnano .18 1.3.5 Kỹthuậtbàochếhỗndịchnano 21 1.4 THUOCNHÃN KHOABÀOCHETỪ HN AN O 25 1.4.1 Đặcđiểmsinhlýliênquanđếnhấpthuthuốcởmắt 25 1.4.2 Thuốctác dụngtạimắtbàochếtừhệnano 26 1.4.3 Đánhgiá tácdụngcủa thuốc nanotrên mắt 28 CHƯƠNG II:NGUYÊNLIỆU,THIẾTBỊ VÀPHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU 35 2.1 NGUYÊNLIU VÀTHIETBỊ 35 2.1.1 Nguyên liệu 35 2.1.2 Thiếtbị 36 2.2 PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU 37 2.2.1 Phươngphápbàochế piroxicamnano 37 2.2.2 Phươngphápđánhgiá hệtiểuphânnano 40 2.2.3 Phươngphápbàochếhỗn dịch nhỏmắt chứa piroxicamnano 44 2.2.4 Phươngpháptheodõiđộổnđịnh 45 2.2.5 Phươngphápđánhgiásinhkhả dụnghỗndịchnano 45 2.3 CƠSỞNGHIÊNCỨU 50 CHƯƠNG III: KẾTQUẢNGHIÊNCỨU 51 3.1 BÀOCHEP I R O X I C A M N A N O TINHTHỂ 51 3.1.1 Nghiêncứubàochếpiroxicamnanotinhthể .51 3.1.2 Đánhgiá mộtsố đặc tính piroxicamnanotinhthể 63 3.2 BÀOCHEPIROXICAM NANOPOLYME 67 3.2.1 Nghiên cứubàochếpiroxicamnanopolyme .67 3.2.2 Đánhgiá mộtsốđặctínhhệtiểuphânpiroxicamnanopolyme .80 3.2.3 Độổnđịnhcủa piroxicamnanopolyme đôngkhô 84 3.3 BÀOCHEHỖNDỊCHNANOPIROXICAM 0,5% DÙNGCHONHÃN KHOA 89 3.3.1 Nghiên cứulựachọnthành phần hỗndịch nano piroxicam 89 3.3.2 Khảosát số yếu tốảnhhưởngđến tínhthấmcủapiroxicam 94 3.3.3 Quytrìnhbàochếhỗn dịchnhỏmắt chứapiroxicamnano 99 3.3.4 Theo dõiđộổnđịnh củahỗndịchnanopiroxicam .101 3.4 ĐÁNHGIÁSINHKHẢDỤNGHỖNDỊCH CHỨAPIROXICAM NANO TRÊNMATTHỎ 101 3.4.1 Thẩmđịnhphươngphápđịnhlượngpiroxicamtrongthủydịch.101 3.4.2 Đánh giásinhkhảdụng củahỗndịch nano piroxicam 110 CHƯƠNGIV.BÀNLUẬN 115 4.1 VỀPIROXICAM 115 4.2 VỀKỸTHUẬT BÀOCHEPIROXICAM NANO 116 4.2.1 Môi trườngphântán 117 4.2.2 Dung mơihịa tandược chất 118 4.2.3 Chất mangEudragit .120 4.2.4 Chất diệnhoạt 122 4.2.5 Chất chốngtạobọt 123 4.2.6 Tádược tạokhungtrongđôngkhô 124 4.2.7 Nhiệtđộ 126 4.2 .Điềukiệnkhuấytrộn 127 4.2.9.Kỹthuậtbốc hơidungmôi .128 4.3 VỀHT I Ể U PHÂNNANOPIROXICAM 129 4.4 VỀBÀOCHE HỖNDỊCHNANODÙNGCHONHÃN KHOA 131 4.5 VỀĐÁNHGIÁSINHKHẢDỤNGCỦAHỖNDỊCHNANO 134 4.5.1 Phươngphápđánhgiásinhkhả dụng .134 4.5.2 Quytrìnhđánhgiásinhkhảdụng 137 4.6 ĐỊNHHƯỚNGPHÁTTRIỂNCÁC KET QUẢNGHIÊNCỨU 140 KẾTLUẬNVÀĐỀXUẤT 141 DANHMỤC CÁCCƠNGTRÌNHĐÃCƠNGBỐ LIÊNQUANĐẾN LUẬNÁN .143 DANHMỤCCÁCHÌNHV, ĐTHỊ Hình 1.1 Hiệntượngkết tinhlại 16 Hình 1.2.Mơhìnhlớp điện kép xungquanhtiểu phân tíchđiện 16 Hình 1.3.Mơhìnhđánh giá khảnăngthấmcủadượcchấtquagiácmạc bằngphương pháp vithẩmtích .32 Hình3.1.Hiệntượngkết tụtiểu phân piroxicamnanotinh thể 55 Hình3.2.Hìnhảnhtiểu phân piroxicamnanosau khiđơngkhơ 56 Hình 3.3.Phân bốKTTPpiroxicamnanotinhthể .59 Hình 3.4.Phân bố KTTPpiroxicamnanotinhthể (sửdụngnatridesoxycholat) 61 Hình 5.Hìnhảnhhệnanopiroxicamqua kính hiểnviđiệntửqt .63 Hình 3.6.PhổnhiễuxạtiaXcủa piroxicamnguyên liệu 64 Hình 3.7.PhổnhiễuxạtiaXcủapiroxicamnanotinh thể .64 Hình Đt h ị biểudiễn độhịatan củapiroxicamnanotinhthể 66 Hình Hìnhảnhtiểu phânpiroxicamquakính hiển vi điện tửqt (SEM) .80 Hình3.10.Hìnhảnhtiểuphânpiroxicamnanopolyme quakính hiển vi điệntửtruyền qua(TEM) 81 Hình 3.11.P h ổ nhiễu xạtiaXcủacácmẫunghiên cứu .82 Hình3.12.Đt h ị biểudiễnđộhịatancủapiroxicam nanopolymev nguyênliệu .83 Hình3.13.Hình ảnhtiểuphânpiroxicamnano polymesau1năm bảoquảnởđiềukiệnthực(TEM) 87 Hình 3.14.Phổnhiễu xạtiaXcủapiroxicamnanopolymeđơng khơ sau1nămbảoquảnởđiềukiệnthực 87 Hình3.15.Đt h ị b i ể u diễnđộ hòatan củapiroxicamnanopolyme saubào chế vàsau 1nămbảoquản ởđiềukiệnthực 89 Hình3 16.Đánhgiákhảnăngthấmcủa piroxicamquamàngthẩmtích 95 Hình 3.17.Ảnh hưởng củađộnhớtđếntínhthấmcủa piroxicam quagiácmạc mắt thỏ 96 Hình3.1.Ảnhhưởngcủakíchthướctiểuphânđ ế n tínhthấmpiroxicamquagiác mạc mắt thỏ .97 Hình .Ảnh hưởngcủachất diện hoạt tớitínhthấmcủapiroxicam quagiácmạc mắt thỏ 98 Hình 20 Ảnh hưởngcủa Tween 80 Na2EDTA đến tính thấm piroxicamquagiácmạc mắt thỏ 98 Hình 3.21.Sơđoquytrìnhbàochếmơi trườngphântán củahỗn dịch 99 Hình3 22.Sơđoquytrìnhbàochếbộtđơngkhơvơkhuẩn chứapiroxicamnanopolyme 100 Hình 3.23.Sắckýđocủathủydịchmẫu trắng 102 Hình 24.Sắckýđocủamẫuchứa piroxicamtrongthủydịch, nongđộ200ng/ml .102 Hình3.25.Đothị biểudiễn mối tươngquan giữanongđộpiroxicam thủydịchvà diện tích pic 104 Hình3.26.Đothị biểu diễn mứcđộ thấmcủapiroxicam quagiácmạc mắt thỏ 112 Hình 27.Đo thịsosánh mức độ thấmpiroxicamqua giácmạc mắt thỏ từhỗndịchnanopolymevàhỗndịch nanotinhthể 114