Độc tính tể bào của các loại cao và các hợp chất tinh khiểt cỗ lập được từ cao eter dầu hỏa và butanol được thừ nghiệm trên dòng tế bào ung thư ruột kết DLD-1. Từ khóa: Premna serratifo[r]
(1)NGHIÊN c ứ u BÀO CHÉ VÀ KHẢ NĂNG ứ c CHÉ
TÉ BÀO UNG THƯ IN VITRO CÙA HỆ NANO ARTESUNAT
CHỨA PLGA VÀ CHITOSAN
HỒ Hoàng Nhân - NCS, T rường Đ ại họ c D ược Hà Nội, Trân Tm nn QỊân, c \ / T't't fvvn/f rỉâ / Ạnn nfiUtA LỊA ki À: ^ ÍÍMỈS ỉỉy ỉỉ^ i M iuiir V í itww, /íU v /íý ầ-/ài í/oo úư ưv I ía /vu; Trần Tuấn Hiệp - NCS, Trường Đ ại họ c Yeungnam, Hàn Quổc PGS TS Nguyên Ngọc Chiến - Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gĩa, T rương Đ i h ọ c Dược Hà N ôi GS TS Chúi Soon Yong - K ỉio a Dược, T rương Đ ại họ c Yeungnam, Hàn Quoc TÓM TẮT
Đặt vấn đề: Artesunat (ART) thuốc điểu trị bệnh sốt rét nghiên cứu tốc dung dòng iế bào ung thư.
Mục tiêu nghiên cứu: Tối ưu hóa cơng thức đảnh giả càc đặc tính lý hóa, khả ứv chế tế bào ung thư in vitro tiểu phân nano A R T chứa PLGA chitosan (CS).
Đối tượng phương phốp nghiên cứu: Tiểu phân nano ART/PLGA-CS bào chế phương pháp bốc hơi dung môi từ nhũ tương.
Kết quà: Công thức ưu thề tương quan kết dự đoán kết thí nghiệm Thế zeta dương phổ hồng ngoại FT-IR đă chứng tỏ có mặt c s Tiếu phân nano có dạng hình cầu với kích thước khoảng 190nm Lớp bao c s giúp làm giảm khà giải phóng thuốc ạt ban đâu môi ỉruờrtg đệm phosphatpH 6.8 Hệ nano bao bờ iC S làm tăng khả thấm vào tề bào độc tính tế bào so VỚI hệ không bao c s dạng thuốc tự hai dòng tế bào ung thư nguời MCF-7 A549
Kết luận: Tiểu phân nano PLGA thay đỗi bề mặt bời c s hẹ mang thuốc chứa ART có triển vọng góp phẩn nâng cao hiệu tế bào ung thư.
Từ khóa: Artesunat SUMMARY
STUDY ON FORMULATION AND IN VITRO ANTINEOPLASTIC ACTIVITY OF ARTESUNATE-LOADED CHITOSAN-DECORATED PLGA NANOSYSTEM
Ho Hoang Nhan (PhD student, Hanoi University of Pharmacy;, Tran Trong Bien (Student K65, Hanoi University of Pharmacy), Tran Tuan Hiep (PhD student, Yeungnam University, South Korea)
Nguyen Ngoc Chien (National Institute of Pharmaceutical Technology, Hanoi University of Pharmacy) Chul Soon Yong (Yeungnam University, South Korea)
Background: Artesunate (ART), one o f potential antimalarial treatments, has recently been the subject for various studies about its effects on cancer cell lines due to its strong cytotoxicity Objectives were to optimize the formulation o f artesunate-loaded chitosan- (CS-) decorated poly(D,L-lactide-co-glycoiide) acid nanoparticles as well as evaluate their characteristics.
Materials and method: PLGA-CS nanoparticles were prepared by using a single emulsion solvent evaporation method.
Results: The optimized formulation showed the close agreement between predicted and experimental values The presence o f c s was confirmed by positive surface charge and Fourier transform infrared spectroscopy A spherical-like shape o f particles was around 190ũnm This c s layer restricted initial burst release o f drug from carriers in phosphate buffer o f pH 6.8 CS-coated NPs enhanced the intracellular uptake, in vitro cytotoxicity compared with CS-uncoated NPs as well as free drug in MCF-7 and A549 cancer cells.
Conclusion: These results suggested that the use o f CS-surface modified PLGA NPs as a carrier for ART could be promising for better effects on cancer cells.
K eyw ords: Artesunate ĐẶT VẤN ĐÈ
Artesunat (ART) không sử dụng rộng rãi trị bệnh sốt rét, mà nghien cứu tác dụng chống ung thư nhiều dỏng tế bào ung thư thuộc biểu mô, phổi, bạch cầu, gan, [4] Nhằm tăng hiệu điều trị ung thư dược chất, công nghệ nano triền khai Acid poly(iactic-co-glycolic) (PLGA) polyme có khả phân hủy sinh học, giúp bảo vệ dược chất khỏi tác động enzym, kéo dài thời gian giải phóng dược chất [5, 7] bào chế dạng nano Tuy nhiên, nano polyme PLGA có hạn che khả bám dính màng nhầy khả
nhận diện cao bời hệ ỉhống miễn dịch thể Do đó, chitosan (CS) polysaccharỉd có khả phân hủy sinh học sư dụng để iàm thay đổi đặc tính bề mặt tiểu phân nano PLGA (ART-PLGẦ) thay đổi íhế zeta từ điện âm sang dương, giúp làm íăng khả bám dính tế bào bảo vệ hệ mang thuốc đển tận đích tác dụng [7j Vỉ vậy, nghiên cứu thực với mục tiêu tối ưu hóa cơng thức đồng thời đánh giá đặc tính lý hóa khả ức chế ung thư in vitro hệ nano ART chứa PLGA c s (ART/PLGA-CS)
(2)Đánh giá hiệu suất mang thuốc khả nạp thuốc
Định lượng hàm lượng dược chất tự sử dụng ống ly tâm lọc màng (MWCO 10kDa, Millipore, Mỹ) Hút xác 2mL hon dịch nano, ly tâm 4500 vòng/phút 30 phút Lấy phần dịch bên dưới, sau tien hành chạy HPLC với điều kiện: cột C18 (150 X 4,6mm, 5pm), pha động ACN:đệm phosphat pH 3,0 (55:45), bước sóng 2Ĩ6nm , thể tích ỉiêm mẫu 50ịjL, íố c độ dịng 1mL/phút, sử dụng hệ
ỉhống HPLC Agilent 1260 (My) Lượng ART tồng xác định cách húỉ 1mL hỗn dịch nano vào bình định mức 5mL, thêm 3mL ACN, lắc'kỹ, siêu âm 10 phút, bổ sung ACN đến vạch, sáu đó, tiến hành chạy HPLC với điều kiện Hiệu suất mang thuốc (EE) khả nạp thuốc (LC) tính theo cơng íhức sau [5]:
E E ( % ) = ^ ^ ĩ ^ x l 0 % XKttếng
Artesunat (ART) từ Sao Kim Pharma (Hà Nội, Việt Nam) PLGA (Lakeshore 50:50 DLG 2A) từ Enovik, Đức Chitosan (trọng lượng phân tử thấp), dimetyí sulfoxid (DMSO, dùng cho tế bào) Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromid (MTT) từ Sigma Aidrich, Mỹ Tween 80 từ Duksan Chemical Co (Hàn Quốc) Aceĩonitrii (ACN), kaíi dihydrophosphat (KH
2
PO4
), diclorometan (DCM), aceton: đạt tiêu chuẩn phân tích Tế bào ung thư vú người MCF-7 tế bào ung thư phổi npười A549 (ngân hàng íế bào Hàn Quốc) nuôi cay ỉrong môi trường DMEM với nồng độ glucose cao (HyCỉone Lab., Mỹ) bồ sung với 10 % huyết thanh bò % penicillin/streptomycin 37°c chứa % CPhương pháp nghiên cứu
Phương pháp bào chế tiểu phân nano ART/PLGA-CS
Tiểu phân nano PLGA chứa ART bào chế phương pháp bốc dung môi từ nhũ tương [5] Cụ thề, nhỏ giọt pha dầu (5mL DCM) chứa PLGA (50mg) ART (20mg) vào pha nước (50mL dung dịch Tween 1,5%) Nhũ tương dầu/nước đồng máy siêu âm đầu dò (với tần số 20kHz, Sonics & Materials, Mỹ) cường độ 100W phút nhiệt độ 5-10°C, khuấy từ giờ, tốc độ 1000 vòng/phúỉ nhiệt độ phịng ổể loại đung mơi Tiểu phân nano chửa coumarín-6 (C6) nghiên cứu khả thấm vào tế bào bào chế tương íự Tiểu phân ART-PLGA bao gói c s cách phối hợp dung dịch c s dung địch acid acetic 1% (tt/tt) điều kiện pH khác ịđiều chỉnh NaOH 3N) vào hỗn dịch trên, khuầy từ [2] Tiến hành ly tâm tốc độ 12000 vịng/phút (máy ly íâm Centrifuge 5415 R, Eppendorf, Đức) írong 30 phút 4°c để thụ tiểu phân nano, sáu rửa cắn nano lần nước cất, iy tâm để loại bỏ dịch rửa
Phương pháp thiết kế thí nghiệm tối ưu hóa Các thí nghiệm thiết ke dựa vào mơ hình D- optimal việc sử dụng phần mềm MODDE 8.0 Phương pháp phân tích mặt đáp sử dụng để tối ưu hóa cơng thức tiểu phân nano ART/PLGA-CS Các biến đầu vào ià tỉ lệ CS PLGA, pH dung dịch c s , nhiệt độ thí nghiệm Các biến đầu !à kích thước tiều phân, hệ số đa phân tán PDi, zeta tiểu phân
Phương pháp đảnh giá đặc tính lý hóa tiều phân nano ART/PLGA-CS
Đánh già phân bố kích thước tiểu phân (KTTP) thế zeta
KTTP xác định phương pháp tán xạ ánh sáng (DLS) sử dụng thiết bị Zetasizer Nano 90 (Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, Anh) Lấy 2mL hỗn dịch nano tạo thành, tiến hành pha ioãng lần nước cất, sau đo KTTP zeta
Đảnh giá hình thài tiểu phân
Hình thái cùa tiểu phân nano đánh giá kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM H7600, Hitachi, Tokyo, Nhật Bản) điện the 100kV Tiểu phân nano ART/PLGA-CS nhỏ lên lưới đồng bao với màng phim carbon, nhuộm với acid phosphungstic 2% để khơ nhiẹt ổộ phòng trước quan sát [6].
£ Q Ọ / K h ó i lưọ-gg AR-T i r o a s tiề-u p h ấ n 2Q Q C Ị/ K h ô i l u ọ i i s iĩấ u p h â n
Đành giẩ tương tác lý hóa
Thành phần hóa học tương tác vật lý polyme ART xac đính phổ hồng ngoại (FT-IR) Mầu phân tích vùng íừ 550-4000 cm'1 sử đụng thiết bị phân tích hồng ngoại Thermo Scientific Nicolet Nexus 670 (Mỹ)
Đánh giá khà giải phóng thuốc in vitro
Nghiên cứu khả rìang giải phóng thuốc in vitro tiến hành dựa vào túĩ thảm tích (với thơng số MWCO 10 kDa, Membrane-Cei, Mỹ) chứa mL hỗn dịch ART/PLGA-CS Túi thẩm tích đặt ống ly tâm 50 mL chứa 10 mL dung dịch đẹm phosphaí pH 6.8 (PBS) Ống iy tâm đạt bể lac đieu nhiệt (HST-205 s w , Hanbaek ST Co., Hàn Quốc) nhiệt độ
37°c với tốc độ 100 vịng/phút Sau íừng thời điểm
nhất định, m i mẫu húỉ để định lượng hàm lượng dược chất giải phóng thay thề thể tích mơi trường tương ứng [5]
Phương pháp đanh giá khả ức chế tế bào ung thư in vitro
Đánh giá khả thấm vào tế bào
Hai dong tế bào nuôi cấy đĩa giếng với mạt độ 2x1 ũ5 íế bào/giếng 24 Tế bào rưa bẳng dung địch PBS, sau mL hỗn địch nano C6-PLGA C6/PLGA-CS với nồng độ MQ/niL thêm vào giếng ủ 37°c 60 phút Tế bào trypsin hoa va ly tâm tổc độ 1000 vịng ìrong phut đế thu iấy tế bào Tiếp tục rưa tế bào phân tán lại dung dịch PBS, tiển hành đo cường độ tỉn hiệu huỳnh quãng dựa vào kỹ thuậí phân tích tề bào dịng chày (flow cytometry analysis) máy BD FACS Verse (BD Biosciences, Mỹ) [2,6]
Đánh già độc tính tế bào in vitro
(3)ART-PLGA ART/PLGA-CS thêm vào giếng ủ 24 Sau đó, loại bỏ mơi trường thêm 100 ịjL dung dịch MTT nồng độ 1,25 mg/mL môi trường DMEM vào giếng tương ứng, tiến hành ù Tiến hành hút bỏ mơí trường MTT thêm 100 ụ l DMSO vào giếng Rồi ù 15 phút đo độ hắp thụ bước sóng 570 nm ( O Đ ) sử dụng íhiết bị đọc đĩa (Muitiskan EX,
Thermo Scientific, Mỹ) Khả sống sót íế bào tính tốn dựa vào cơng thức sau [6j:
, í , , ODyjn(diủ) — ODsvtCrin?)
Kkả sắng sót (% } = .“ ? ; ■ X 100
UDj7CCchứng) - OĐị^Ctráng)
KẾT QUẢ
Bào chế tố i ưu hóa n g th ứ c tiểu phân nano ART/PLGA-CS
Bảng Cơng thức đặc tính lý hóa cùa tiễu phân ART/PLGA-CS
tilệCSíPV-OA
Ơ i o ỉ , ị'
CT Tỉíệ
CS/PL GA (kl/kl)
pH (dd CS)
Nhiệt độ Í°C)
KTTP (nm)
PDÍ Thé
zeta (mV )
1,00 3,0 10 252,0 0,287 56,9
2 0,20 5,0 10 289,8 0,284 33,0
3 1,00 5,0 10 278,5 0,22 33,9
4 0,20 3,0 40 198,5 0,233 45,3
5 1,00 3,0 40 272,2 0,299 64,9
6 0,20 5,0 40 321,3 0,263 39,2
7 1,00 5,0 40 317,4 0,263 38,6
8 0,20 3,0 20 190,5 0,205 34,9
9 0,20 3,0 30 189,5 0,228 28,3
10 I 0,20 3,7 10 187,8 0,192 23,1
11 0,20 4,3 10 246,8 0,231 31,4
12 0,47 3,0 10 200,0 0,265 40,8
13 1,00 4,0 25 237,2 0,264 30,9
14 0,60 5,0 25 263,5 0,235 36,4
15 0,60 U 4.0 4 0 253,6 0,247 38,8
16 0,60 4,0 2 5 213,0 0,227 35,3
17 0,60 4,0 2 5 212,1 0,219 31,5
18 0,60 4,0 2 5 205,7 0,211 32,1
ổược với KTTP, PDI zeta íần lượt nằm khoảng 187 đến 321 nm, < 0,300 íừ 23 đến 65 mV
Dựa vào mặt đáp hỉnh cho thấy íăng tỉ lệ CS/PLGA KTTP cùa tiểu phân ART/PLGA-CS tăng đáng kể, ngược lại KTTP giảm giảm pH dung dịch
c s
(hình 1A) Thế zeta tăng tăng tỉ lệ CS/PLGA tăng nhiệt độ (hình 1B)- <
B
>S
3 ■ ầ
h ữ
Nh
\ ^ Ĩ :^Ỉ5 K>\.0*
Hình Hình ảnh phân tích mặt đáp KTTP
25°c
^ ? (A)
và cua thê zeta pH=4 (B) tiếu phân nano ART/PLGA-CS
v * c5iP
Hình Hình ành TEM tiểu phân nano
ART/PLGA-c s
Công thức tối ưu rút với biến đầu sau: íì lệ CS/PLGA 0,4; pH dung dịch c s 3,2; nhiệt độ íhí nghiệm 21,5°c Độ sai lệch kểt dự đốn kết qua thực tế íấn lưọi 2,22% KTTP 3,43% đoi với zeta
Đánh giá đặc tính /ý hóa
Kích thước tiểu phân, zeta hình thâi
Tiểu phân nano thu từ công thức tối ưu có hình cầu, đa phân tán với kích thước tiểu phân khoảng 190 nm (hình 2), phù hợp với kết ghi nhận phương pháp tán xạ ánh sáng DLS (KTTP = 193,1 ±1,012 rim, PDI = 0,221 ±0,015) Thế zeta thay đổi từ âm (-19,9 ± 0,289 mV) tiểu phân nano ART/PLGA sang dương (+36,2 ± 1,040 mV) tiểu phân nano ART/PLGA-CS Ngoài rạ, hiệu suất bẫy hiệu suất mang thuốc trì mức cao tương ứng 77,30% 19,97% [5],
Đành giá tương tốc lý hóa
Hình 3A cho thấy phồ hồng ngoại ART/PLGA- c s có pic tương tự với pic írên phổ hồng ngoại ART, PLGA c s chứna tỏ khơng có tương tác ART thành phan cơng íhức
Khả giải phóng thuốc in vitro
(4)Đành giá độc tính tế bào in vitro
i000 3500 50 3000
S ó s ó n g (cm-1)
B
Thỏ-i gian (giờ)
Hình Phồ hồng ngoại cua ART,
cs,
PLGA tiểu phân nano ART/PLGA-CS (A);Đồ thị giải phóng dược chẩt từ tiểu phân nano ART/PLGA ART/PLGA-CS (B)
Đánh già khả ức chế tế bào ung thư in vitro
Đánh giá khả thẩm vào tế bào
Tiểu phân nano PLGA-CS giúp cải thiện khả thấm vào tế bào (cường độ huỳnh quang dịch chuyển sang phải) so với tiểu phân nano PLGA khơng bao gói Đồng thời, khả nhập bào cùa C6/PLGA-CS phụ thuộc vào nồng độ sư dụng (hình 4)
B
It*!*1—
RTC-A
ÀỉiV.«ỊỊ-
i M i —L
teh.ovtSí-ĩíi
5»? i ■
■o 120
3
'100
o>3° ■*1 60
o -ífi
i - 20 £*
M C F-7 A
6 ,2 ỉ;j P L G A -C S
120 -Ị 100 • •oi<Ã
Ol so ã ãC ôo
<s> 60 -o
40' •
■m S3
lữ) 20 !0>
0 -1 1—
1 ,5 5 0 N n g đ ộ ( p g /m L )
I A R T E JAR T-PLG A - A R T /P L G A -C S
A
625 12.S 25 50
N n g đ ộ ị ụ g t m L)
100 a P LG A -C S a A R T ỉaART-PLGA aART/PLGA-C S
Hình Khả thấm vào tế bào tiều phân nano C6-PLGA C6/PLGA-CS tế bào MCF-7 (A) tế bào A549 (B)
Hình Tỷ lệ tế bào sống s ó t dòng tế bào, (A) MCF-7, (B) Â549
Hình cho thấy hệ giả dược khơng có ảnh hường đáng kể đến khả sống sổt tế bào, tức khơng gây độc tính sau 24 (>80%) Đối vớì ngun íiệu ART hai hệ nano chứa ART, phát triển tế bào MCF-7 A549 bị ức chế đáng kể phụ thuộc vào liều sử dụng So với ART nguyên liệu, hệ nano chứa ART cho thay mức độ độc tính cao (p<0,05), đặc biệt đổi với tể bào ung thư A549 Ngoai ra, hệ tiểu phân nano thay đổi đặc tính bề mặt bang CS cho kết độc tính cao tế bào MCF-7 A549 so với hệ nano ART/PLGA (p<0,05)
BÀN LUẬN
Trong nghiên cứu này, mơ hình D-optim phân tích mặt đáp phần mềm MODDE sử dụng để thiết kế tối ưu hóa cơng thức Khi iặp lại thí nghỉẹm để thầm định mơ hinh, độ sai lệch nhỏ 5% chứng tỏ phù hợp mơ hình tương quan chặt chẽ gia trị tiên đoán thực nghiệm [1Ị
Sự có mặí cùa c s bề mặt tiểu phân nano ART/PLGA đầ chứng tỏ thông qua thay đổi zeta từ điện âm công thức nano PLGẢ sang dương công thửc nano PLGA-CS [2] xuất picđặc trưng nhóm amỉn amid phồ hồng ngoại FT-IR tiều phân nano ART/PLGA-CS (Hình 3A)
Việc thay đổi bề mặt c s có hiệu írong việc thay đoi vị trí ART bề mặt PLGA giồng rào cản vật lý, lam giảm khả giải phóng thuốc từ hệ nano (Hình 3B) Ngồi ra, giai phóng thuốc chậm q trình tương tẩc ion ART lớp bao cs [7]
(5)thiện bề mặt tiểu phân c s giúp iàm tăng khả comparing two experimental designs", Int J Biol nhập bào, dẫn đến độc tính căo ỉế Macromoĩ, 64, pp 334-40.
bào MCF-7 A549 [6] Chen H„ Wang Y., Zhou p., et a i (2014),
Đồng thời, độc tính cao sử dụng c s "Chitosan Surface-Modified PLGA Nanoparíicies: tác dụng hệ nano giúp mang thuoc vào írong Preparation, Characterization, and Evaluation of their In tế bào thơng qua q trình ẩm bào chất điện Vìtro Drug-Release Behaviors and Cytotoxicities”, Curr dương tiều phân nano ART/PLGA-CS íăna Nanosci, 10(2), pp 255-62.
iên xung quanh vỉ môi trường acid tế bào 3- ctluns Ỵ' !" Kĩm J- C ’ Kim Y H-, et al (2010),
ung thư so với vi mơi trường trung tính tế bào , o í, Surface functionahzation of PLGA
thường [3], Những két cho thấy VỚI việc sử nanopartiol68 by heparin- or chitosan-conjugated Pluronic dung hệ nano PLGA thay đồi đặc tĩnh bề mặt “ tumor tar9etin9 ■ J Contml 143(3), pp
374-S r ê n R cTá í v i ệ c n â n g c a h l ệ u ci e s p o -£ S ,_ M - w * 2 ' “A n t i t u m ° r
qua tren cac te bao unp thư [2] KÉT I IIẢN VÀ K1PK1 K ir u i oouvity UI cJiieniibiniii anu US uenvatives: ĩrom a weii-activity of artemisinin and its derivatives: from a
well-M? L U Ạ N V A iM tỊN NWH| known antimaiarial agent to a potential anticancer drug", J £t Như nghiên cứu thiết kế công thức BiomedBiotechnol, 2012, pp 247597
tôi ưu tiếu phân nano chứa ART cách íhay 5 Nguyen H I , Tran T, H „ Kim J o., et a i (2014) đối đặc tính bề mặt hệ nano ART/PLGA c s "Enhancing the in vitro anti-cancer efficacy of ariesunate Sự thay đối điện zeta thành phần hóa học by loading into poly-D.L-iactide-co-glycolide (PLGA) chứng tỏ diện c s bề mặt tiểu nánoparỊicỉếs",/\rc/í Pharm Res, 38(5), pp, 716-24 phân nano PLGA Công thức sử dụng c s giúp lồm 6 Tran T H., Nguyen T D,, Pouđe! B K., et ai. giảm giải phóng thuốc ổ ạt ban đầu so với công (2015), "Development and Evaluation of Artesunate-thức ban đầu Ngoài ra, với lực cao Loaded Chiỉosan-Coated Lipid Nanocapsule as a tế bào ung thư, cơng thức góp phần làm tăng Potential Drug Delivery System Against Breast Cancer", độc tính tê bào in vitro dẫn đen trình chết iế bào AAPS PharmSciTech, 16(6) pp 1307-16.
trên hai dòng tế bào ung thư MCF-7 A549 „ J - Zhao K > Zhang Y., Zhang X., et a i (2014) TÀI LIỆU THAM KHẢO "Chiíosan-coated poly(iactic-co-giycolic) acid Abdel-Hafez S M., Haíhouí R M., Sammour o A !?,anoPaĩ cies_„ as an efficietĩ delivery system for (2014), "Towards better modeiing of chitosari Newcastle disease virus DNA vaccine", Int J nanoparticies production: screening different factors and Nanomedicme, 9, pp 4609-19.
HOẠT TÍNH CỦA MỘT SĨ HỢP
CHÁT
ĐƯỢC
CƠ
LẬP
T Ừ L Á PREMNA SERRATIFOLIA L„ HỌ c ố ROI NGỰA
(VERBENACEAE) TRÊN TÉ BÀO UNG THỮ RUỘT KÉT DLD-1
Phạm Thị Bích Van3, Ole Vangb, Hoàng Minh Hảoc* aKhoa Khoa hoc, Đai hoc Nơng Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh, Viêt Nam
b Í V * „ !Af _I _ r\ - « I M I .
Khoa Khoa học, Đại học Roskilde, Đan Mạch cKhoa Dược, Đại học Lạc Hồng, Việt Nam TÓM TÂT
Việc sử dụng cày cỏ làm dược liệu đă có từ lâu đời naỵ Tuy nhiên việc sử dụng chủ yếu dựa vào kinh nghiệm dân gian, khơng đ i sâu tìm hiểu hoạt tính hoạt chất cỏ cỏ định Hiện nghiên cứu thành phần hóa học dược tính hợp c h tinh khiết lập từ cỏ ngày cang được thực đầy đủ hệ thống Trong nghiên cứu này, tiến hành điếu chế cấc loại cao từ cay Premna serratifolia L , họ cò roi ngựa (Verbenaceae) Thành phần hóa học cao eter dầu hỏa butanol khảo sảt Độc tính tể bào loại cao hợp chất tinh khiểt cỗ lập từ cao eter dầu hỏa butanol được thừ nghiệm dòng tế bào ung thư ruột kết DLD-1.
Từ khóa: Premna serratifolia L , Verbenaceae, cinnamate, dịng tế bào ung thư ruột kết DLD-1. SUMMARY
Bioactivity Of Extracts And Isolated Compounds From Premna Serratifolia L On Human Colon Cancer Cell Line DLD-1
Pham Thi Bich Van3, Ole Van<f, Hoang Minh Hao°* aFaculty o f Sciences, Nong Lam University, Vietnam bFaculty o f Sciences, Roskilde University, Denmark cFaculty o f Pharmacy, Lac Hong University, Vietnam
The extracts and chemical constituents from the leaves of Premna serratifolia L have been prepared and investigated The chemicai structures of isolated compounds were determined by using rH, 13C-NMR spectroscopic techniques Moreover, the cytotoxicity of the extracts and pure compounds has been tested on human colon cancer cell line DLD-1