0009 xây dựng quy trình định lượng viên nén chứa metoprolol 50 mg ptkd và amlodipin 5 mg để khảo sát ổn định

i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ LÝ HỮU TIẾN XÂY DỰNG QUI TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG VIÊN NÉN CHỨA METOPROLOL 50MG PTKD VÀ AMLODIPIN 5MG ĐỂ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: Ths LỮ THIỆN PHÚC Ds CKI LÊ THỊ CẨM THÚY Cần Thơ – 2015 ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Thầy Thạc sĩ Lữ Thiện Phúc, người Thầy ln tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình thực hồn thành đề tài tốt nghiệp Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Cô Thạc sĩ Nguyễn Thị Linh Tuyền, Thầy Tiến sĩ Đỗ Châu Minh Vĩnh Thọ, Cô Nguyễn Thị Tường Vi, Cô Trần Thị Thanh Thúy, Thầy Cơ liên mơn Hóa phân tích - Kiểm nghiệm Độc chất, nhiệt tình giúp đỡ, truyền đạt kinh nghiệm tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành đề tài tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình tơi bạn Phạm Phước Ngọc Thạch, bạn Võ Tuấn Vũ, bạn Chu Ngọc Tố Quyên, bạn Trần Thị Kiều Hân, bạn Nguyễn Phương Minh Thảo, bạn Nguyễn Hiền Việt Anh, bạn Đặng Hồng Bửu, bạn Võ Thị Bích Ngun, bạn Huỳnh Lâm Tú Anh, bạn Phan Quốc Duy,…những người bạn hỗ trợ tơi, nguồn động viên, khích lệ to lớn giúp tơi vượt qua khó khăn thời gian nghiên cứu thực đề tài iii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài nghiên cứu riêng tơi Các kết khóa luận trung thực chưa báo cáo đề tài nghiên cứu khác Cần Thơ, ngày 20 tháng 06 năm 2015 Sinh viên Lý Hữu Tiến iv MỤC LỤC Trang Phụ bìa i Lời cám ơn ii Lời cam đoan iii Mục lục iv Danh mục ký hiệu chữ viết tắt ix Danh mục bảng x Danh mục hình, sơ đồ đồ thị xii ĐẶT VẤN ĐỀ …………………………………………………………………… Chƣơng 1- TỔNG QUAN………………………………………………………….3 1.1 Tổng quan metoprolol succinat………………………………………… .3 1.1.1 Công thức cấu tạo …………………………………………………………… 1.1.1.1 Danh pháp……………………………………………………………… .3 1.1.1.2 Cơng thức cấu tạo……………………………………………………………3 1.1.2 Tính chất lý hóa …………………………………………………………… 1.1.3 Tính chất dược lý ………………………………………………………… 1.1.3.1 Tác dụng dược lý………………………………………………………… 1.1.3.2 Dược động học………………………………………………………………4 1.1.3.3 Chỉ định…………………………………………………………………… 1.1.3.4 Chống định………………………………………………………………4 1.1.3.5 Liều lượng cách dùng ………………………………………………… 1.1.4 Kiểm nghiệm metoprolol succinat………………………………………… 1.1.4.1 Định tính…………………………………………………………………….4 1.1.4.2 Định lượng chế phẩm ……………………………………………………….5 1.2 Tổng quan amlodipin besilat …………………………………………… 1.2.1 Công thức cấu tạo ………………………………………………………… …6 1.2.1.1 Danh pháp………………………………………………………………… 1.2.1.2 Cơng thức cấu tạo ………………………………………………………… 1.2.2 Tính chất lý hóa……………………………………………………………… v 1.2.3 Tính chất dược lý …………………………………………………………… 1.2.3.1 Tác dụng dược lý…………………………………………………………….7 1.2.3.2 Dược động học …………………………………………………………… 1.2.3.3 Chỉ định…………………………………………………………………… 1.2.3.4 Chống định………………………………………………………………7 1.2.3.5 Liều lượng cách dùng ……………………………………………………7 1.2.4 Kiểm nghiệm amlodipin besilat…………………………………………… 1.2.4.1 Định tính………………………………………………………………… 1.2.4.2 Định lượng chế phẩm …………………………………………………… 1.3 Đại cƣơng thuốc phóng thích kéo dài …………………………………… 1.3.1 Khái niệm…………………………………………………………………… 1.3.2 Ưu điểm dạng phóng thích kéo dài……………………………………….9 1.3.3 Nhược điểm dạng thuốc phóng thích kéo dài ………………………… 1.3.4 Các cấu trúc chế kiểm soát phóng thích kéo dài……………………13 1.4 Nghiên cứu độ ổn định thuốc ……………………………………… 10 1.4.1 Khái niệm độ ổn định thuốc………………………………………… 10 1.4.1.1 Định nghĩa………………………………………………………………….10 1.4.1.2 Mục tiêu ………………………………………………………………… 10 1.4.1.3 Tiêu chuẩn đánh gía độ ổn định……………………………………………10 1.4.1.4 Phân vùng khí hậu …………………………………………………………10 1.4.2 Xác định độ ổn định thuốc ………………………………………………11 1.4.2.1 Lấy mẫu ………………………………………………………………… 12 1.4.2.2 Phương pháp lão hóa cấp tốc………………………………………………12 1.4.2.3 Phương pháp thử dài hạn ………………………………………………….12 1.4.2.4 Cách xác định tuổi thọ thuốc ………………………………………….13 1.5 Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) ………………………….15 1.6 Thẩm định quy trình định lƣợng phƣơng pháp HPLC theo hƣớng dẫn ICH đánh giá theo hồ sơ đăng ký thuốc ……………………….… 15 1.6.1 Tính đặc hiệu……………………………… ……………………………….15 vi 1.6.2 Tính tuyến tính miền giá trị……………………………………………….15 1.6.2.1 Tính tuyến tính quy trình phân tích……………………………………15 1.6.2.1 Miền giá trị quy trình phân tích … ……….………………………… 15 1.6.3 Độ xác…………………………………….………………………… 16 1.6.3.1 Độ lặp lại………………………………………………………………… 16 1.6.3.2 Độ xác trung gian……………………………………………………16 1.6.4 Độ đúng…………………………………………….……………………… 16 1.6.5 Giới hạn phát giới hạn định lượng ……….………………………….16 1.6.5.1 Giới hạn phát hiện………………………………………………………….16 1.6.5.2 Giới hạn định lượng……………………………………………………… 16 1.7 Các cơng trình nghiên cứu định lƣợng đồng thời metoprolol amlodipin 17 Chƣơng 2- ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Địa điểm đối tƣợng nghiên cứu 18 2.1.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu……………………………………………18 2.1.2 Đối tượng nghiên cứu……………………………………………………… 18 2.2 Chuẩn đối chiếu, dung môi trang thiết bị……………………………… 18 2.2.1 Chuẩn đối chiếu …………………………………………………………….18 2.2.2 Hóa chất dung môi ……………………………………………………….19 2.2.3 Dụng cụ thiết bị………………………………………………………… 19 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 20 2.3.1 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu………………………………… ……………20 2.3.2 Thăm dò bước sóng định lượng………………………………… …………21 2.3.3 Thăm dị điều kiện sắc ký tối ưu ………………………………… ……… 22 2.3.4 Thẩm định quy trình định lượng đồng thời metoprolol amlodipin ………22 2.3.4.1 Tính đặc hiệu …………………………………………………………… 22 2.3.4.2 Tính tuyến tính miền giá trị …………………………………………….23 2.3.4.3 Độ ……………………………………………………………………24 2.3.4.4 Độ xác ………………………………………………………………25 vii 2.3.4.5 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) ……………… 26 2.3.5 Khảo sát độ ổn định viên nén ……………………………………… 26 2.3.5.1 Nguyên tắc 26 2.3.5.2 Tiến hành 27 Chƣơng 3- KẾT QUẢ 28 3.1 Khảo sát điều kiện sắc ký tối ƣu .28 3.1.1 Điều kiện xử lý mẫu ……….……… …………………… ……………….28 3.1.2 Chọn bước sóng …………………………………………………………… 30 3.1.3 Khảo sát pha động ……….………………………………………………… 31 3.2 Thẩm định quy trình 33 3.2.1 Tính đặc hiệu metoprolol succinat amlodipin besilat mẫu thử………………………………………………………………………………….33 3.2.2 Tính tuyến tính miền giá trị 35 3.2.3 Độ …………………………………………………………………… 37 3.2.4 Độ xác ……………………………………………………………… 38 3.2.4.1 Độ lặp lại ………………………………………………………………… 38 3.2.4.2 Độ xác trung gian ………………………………………………… 41 3.2.5 Giới hạn phát giới hạn định lượng ………………………………… 43 3.3 Độ ổn định viên nén………………………… …………………… … 43 3.4 Tuổi thọ thuốc theo phƣơng pháp lão hóa tự nhiên ……………………… 64 Chƣơng 4- BÀN LUẬN ………………………………………………………… 45 4.1 Khảo sát điều kiện sắc ký tối ƣu…………………………………………… 45 4.1.1 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu …………………… …………………… …45 4.1.1.1 Quy trình xử lý mẫu với metanol, hỗn hợp acetonitril nước axit……….45 4.1.1.2 Sử dụng hỗn hợp pha động acetonitril nước axit……………………….45 4.1.1.3 Khảo sát trình tự xử lý mẫu hỗn hợp pha động acetonitril nước axit………………………………………………………………………………….45 4.1.2 Chọn bước sóng để định lượng ………………………… …………………46 4.1.3 Chọn hệ pha động thích hợp……………………………… ……………….46 viii 4.2 Thẩm định quy trình định lƣợng ……………………………………………48 4.2.1 Tính đặc hiệu……………………… ……………………………………… 48 4.2.2 Tính tuyến tính miền giá trị ………………………………………………49 4.2.3 Độ ……………………………….…………………………………… 51 4.2.4 Độ xác ………………………….…………………………………… 52 4.2.4.1 Độ lặp lại………………………………………………………………… 52 4.2.4.2 Độ xác trung gian ………………………………………………… 53 4.2.5 Giới hạn phát giới hạn định lượng ……….………………………….55 4.3 Áp dụng quy trình định lƣợng vào xác định tuổi thọ chế phẩm ………… 55 4.4 Áp dụng quy trình định lƣợng vào định lƣợng độ hịa tan ……………… 56 4.4.1 Xử lý mẫu môi trường pH 1,2…………………………………………… 56 4.4.2 Xử lý mẫu môi trường pH 6,8 …………………………………………… 57 KẾT LUẬN 58 KIẾN NGHỊ 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC PHỤ LỤC ix DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Ý nghĩa STT Chữ tắt Chữ nguyên ACN Acetonitril As Asymmetric factor Hệ số bất đối BP British Pharmacopoeia Dược điển Anh BĐM Bình định mức DĐVN Dược điển Việt Nam ER Extended Release Phóng thích kéo dài HPLC High performance Sắc ký lỏng liquid chromatography hiệu cao IR Infrared Hồng ngoại k’ Capacity factor Hệ số dung lượng 10 KH2PO4 Kali dihydrophosphat 11 LOD Limit of detection Giới hạn phát 12 LOQ Limit of quantitation Giới hạn định lượng 13 MeOH Methanol 14 N Number of theoretical plates Số đĩa lý thuyết 15 PDA Photodiode array Dãy diod quang 16 Rs Resolution Độ phân giải 17 RSD% Relative standard deviation % Độ lệch chuẩn tương đối 18 S Peak area Diện tích đỉnh 19 tR Retention time Thời gian lưu 20 USP United States Pharmacopeia Dược điển Mỹ 21 UV Ultraviolet – Visible Tử ngoại – khả kiến 22 XTB Giá trị trung bình x DANH MỤC BẢNG Bảng Nội dung Trang 1.1 Mục tiêu nghiên cứu độ ổn định thuốc 10 1.2 Tóm tắt giá trị trung bình thơng số vùng khí hậu 11 1.3 Thơng số khí hậu tính tốn điều kiện bảo quản cho thử dài hạn 11 1.4 Điều kiện thử lão hóa cấp tốc cho vùng IV 12 1.5 Bảng giá trị K 14 2.1 Danh mục chất chuẩn đối chiếu 18 2.2 Hóa chất dung mơi thí nghiệm 19 2.3 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 19 2.4 Các hệ pha động dự kiến thăm dò điều kiện sắc ký tối ưu 22 2.5 2.6 2.7 2.8 3.1 3.2 3.3 3.4 Khảo sát tính tuyến tính miền giá giá trị metoprolol succinat amlodipin besilat Số lượng lô sử dụng để khảo sát độ ổn định viên nén chứa metoprolol 50mg phóng thích kéo dài amlodipin 5mg Điều kiện bảo quản khoảng thời gian lấy mẫu viên nén chứa metoprolol 50mg phóng thích kéo dài amlodipin 5mg Các tiêu áp dụng thử nghiệm độ ổn định viên nén chứa metoprolol 50mg phóng thích kéo dài amlodipin 5mg Kết khảo sát điều kiện xử lý mẫu thử hỗn hợp acetonitril axit phosphoric Kết khảo sát trình tự xử lý mẫu Kết xác định phương trình hồi quy hệ số tuyến tính metoprolol succinat amlodipin besilat Kết xác định phương trình hồi quy hệ số tuyến tính amlodipin besilat 24 27 27 27 29 30 35 53 3.5 Kết khảo sát độ phương pháp 37 3.6 Kết tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn 38 59 KIẾN NGHỊ Áp dụng qui trình định lượng nhằm góp phần đánh giá tiếp độ ổn định chế phẩm chứa metoprolol phóng thích kéo dài amlodipin bào chế Bộ môn Công nghiệp Dược trường Đại Học Y Dược Cần Thơ Ứng dụng quy trình vào đánh giá tiêu độ hòa tan chế phẩm hai môi trường pH 1,2 pH 6,8 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Bộ Môn Bào Chế (2010), Bào chế sinh dược học, tập 2, Nhà xuất Y Học, Tp Hồ Chí Minh, 87 - 90 Bộ Y Tế (2009), Dược Điển Việt Nam IV, Nhà xuất Y học Hà Nội, 46 - 47 Bộ Y Tế (2009), Dược Thư Quốc Gia Việt Nam, Nhà Xuất Bản Y Học, Hà Nội, 50 - 51 Bộ Y tế (2013), Sổ tay hướng dẫn đăng ký thuốc – phụ lục 8: Thẩm định phương pháp phân tích, tr 30 – 35 Bộ Y Tế (2005), Vụ Khoa Học Đào Tạo, Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất Y Học Hà Nội, 65 - 66 Hội Tim Mạch Học Quốc Gia Việt Nam (2011), Các Yếu Tố Nguy Cơ Thường Gặp Của Bệnh Tim Mạch, Hội Tim Mạch Học Quốc Gia Việt Nam (2014), Rối Loạn Lipid Máu, - 13 Hoàng Thị Kim Tuyền, J.R.B.T Brouwers ( 2012), Những Nguyên Lý Cơ Bản Sử Dụng Thuốc Trong Điều Trị, Tập 2, NXB Y Học Lê Quan Nghiệm (2007), Sinh dược học hệ thống trị liệu mới, Nhà xuất Y Học 10 Liên Bộ mơn Hóa Phân Tích - Kiểm nghiệm - Độc chất (2010), Giáo trình lý thuyết Hóa phân tích 2, Khoa Dược - Đại học Y Dược Cần Thơ,166 - 200 11 Liên Bộ mơn Hóa Phân Tích - Kiểm nghiệm - Độc chất (2010), Giáo trình lý thuyết Kiểm nghiệm Dược Phẩm 1, Khoa Dược - Đại học Y Dược Cần Thơ, 87 - 130 12 Lương Phúc (2009), Hướng dẫn sử dụng thuốc, Nhà xuất Từ Điển Bách Khoa, 13 Mai Phương Mai (2011), Dược lý học tập 2, Nxb Y học Hà Nội, 50 - 51 - 79 14 Nguyễn Hồng Bích Trâm (2013), Xây dựng quy trình định lượng đồng thời metoprolol amlodipin dược phẩm đa thành phần phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao với đầu dò dãy diod quang, khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học, Trường Đại học y Dược TP HCM 15 Trần Thị Thu Hằng (2013), Dược lực học, tái lần thứ 17, Nhà xuất phương Đông, 493 - 494 16 Võ Xuân Minh (2005), Một số chuyên đề bào chế đại, Nxb Y Học TÀI LIỆU TIẾNG ANH 17 C Moffat Anthony, M David Osselton, Brian Widdop (2011), Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons, 4th edition, Pharmaceutical Press, Londdon, p.889,p.1700 18 ASEAN (2013), Asean guideline on stability study of drug product 19 Sundara Raj Behin, Punitha I.S.R and Suraj Dube (2012), Formulation and Characterization of Fast Disintegrating tablets of Amlodipine using Superdisintegrants, Journal of Applied Pharmaceutical Science, 2(8),118-123 20 Bristish Pharmacopoeia 2013 CD, England 21 CH.M.M Prasada Rao, S.A Rahaman,Y Ragjendra Prasad, P Gangi Reddy (2010), Rp-Hplc Method Of Simultaneous Estimation Of Amlodipine Besylate And Metoprolol In Combined Dosage Form, IJPRD, 2(9), 09749446 22 Hajare P.P (2012), Analytical Method Development And Validation Of Bilayer Tablet Dosage Form Containing Amlodipine Besylate (Immediate Release Layer) & Metoprolol Succinate (Extended Release Layer),2249-0329 23 Introduction to organic chemistry – Streitwieser and Healthcock (1981), MacMillan Publishing Trang web nói pKa 24 Introduction to Protein and Peptide HPLC, TP Bradshaw, Phenomenex, (1998) 25 Jadhav A S., Tarkase K N and Deshpande A P.(2012), Quantitative Determination Of Metoprolol Succinate In Bulk And Tablet, Dosage Form Through Comparative Study Of UV And Derivative Spectroscopy, Der Pharmacia Lettre, 763-767 26 European Pharmacopoeia (2007), p1448 27 Jaimini Manish, Sonam Ranga, Amit Kumar, Sanjay Kumar Sharma, Bhupendra Singh Chauhan (2013), A Review On Immediate Release Drug Delivery System By Using Design Of Experiment, Journal of Drug Discovery and Therapeutics, 21-27 28 L Kukin Marrick, Ronald S Freudenberger (2000), Hemodynamic Comparison of Twice Daily Metoprolol Tartrate With Once Daily Metoprolol Succinate in Congestive Heart Failure, Journal of the American College of Cardiology, 35(1) 29 N.Kulkarni Moreshwar, Rajeshwar V.Kshirsagar, and Dinesh M.Sakarkar Development And Validation Of Spectrophotometric Method For Determination Of Metoprolol Succinate, International Journal of ChemTech Research CODEN( USA),1(4), 1273-1277 30 Latha Subramanya Mosdahadu, N Srinivasa Rao, Abraham Oomman, P L Bindumathi, Vikram Sharma, Satish Rao, Ashis Patnaik, and B R Naveen Kumar (2013), Efficacy And Tolerability Of Fixed Dose Combination Of Metoprolol And Amlodipine In Indian Patients With Essential Hypertension, J Midlife Health,4(3), 160-166 31 Sandeep Nyol, Dr M.M Gupta (2013), Immediate Drug Release Dosage Form: A Review, Journal of Drug Delivery & Therapeutics,155-161 32 Practical HPLC Method Development L.R Snyder, JJ Kirkland and JL Glajch Wiley Interscience (1997) 33 PSRCHNP Varma D, A Lakshmana Rao and SC Dinda (2012), Validated Stability Indicating Hplc Method For Simultaneous Determination Of Amlodipine And Metoprolol In Bulk Drug And Pharmaceutical Formulations, 2231-2781 34 Pharmacist’s Letter, Prescriber’s Letter (2009), Alternatives for Metoprolol Succinate, Detail - Document accompanies the related article published, 25, 250-302 35 Hussain Sayyed , Rashid R Munjewar , Mazahar F arooqui (2012), Development and Validation of a Simultaneous HPLC Method for Quantification of Amlodipine Besylate and Metoprolol Tartrate in Tablets, Journal of PharmaSciT ech, 1(2), 1-5 36 Sigamani A, Xavier D, Pais P*, Devi PD, Thomas T, Rao M, Sharma J, Xaiver F, Girish P, Nisha G, Pandey S., A Study to Compare the Efficacy, Safety and Tolerability of Selomax TM with Its Individual Components 37 Kartik Hargovandas Suthar (2011), Stability Indicating RP - HPLC Method For Simultaneous Determination Of Amlodipine Besylate And Metoprolol Succinate In Pharmaceutical Dosage Form, Submitted For The Degree Of Master Of Pharmacy In Quality Assurance, Nargund College of Pharmacy, Bangalor, pp.2,3,42 38 The Merck index (2001), pp.491, 6172 39 United States Pharmacopoeia (2012), p.1783 40 Vaijanath G Dongre, Sweta B Shah, Pravin P Karmuse, Manisha Phadkeb, Vivek K Jadhav (2008), Simultaneous determination of metoprolol succinate and amlodipine besylate in pharmaceutical dosage form by HPLC, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 46, 583-586 TÀI LIỆU WEBSITE 41 Trang web Viện Tim Mạch Việt Nam http://vientimmach.org.vn/tin-y-te/ty-le-nguoi-mac-tang-huyet-ap-o-viet-nam-giatang-rat-nhanh Hệ thống sách tham khảo điện tử: 42 https://drugs-pharmaceuticals.knoji.com/selomax-metoprolol-succinateextendedrelease-amlodipine-besilate-tablets/ 43 http://www.mims.com/India/drug/info/BETAFIT-AM/BETAFITAM%20bilayer%20coated%20tab 44.http://www.mims.com/India/drug/info/SELOMAX%2050/SELOMAX%2050% 20film-coated%20tab 45.http://www.mims.com/India/drug/info/SITELOL-AM/SITELOL-AM%20cap 46.http://www.mims.com/India/drug/info/VINICOR-AM/VINICOR-AM%20tab DANH MỤC PHỤ LỤC PHỤ LỤC TÊN PHỤ LỤC TRANG PHỤ LỤC KẾT QUẢ TÍNH TƯƠNG THÍCH HỆ THỐNG PL-1 PHỤ LỤC KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH TÍNH TUYẾN TÍNH PL-3 PHỤ LỤC KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH ĐỘ ĐÚNG PL-5 PHỤ LỤC KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH ĐỘ LẶP LẠI PL-7 PHỤ LỤC CÁC SẮC KÝ ĐỒ TÍNH ĐẶC HIỆU PL-8 PHỤ LỤC CÁC SẮC KÝ ĐỒ TÍNH TUYẾN TÍNH PL-14 PHỤ LỤC CÁC SẮC KÝ ĐỒ ĐỘ ĐÚNG PL-19 PHỤ LỤC PHỤ LỤC PHỤ LỤC 10 PHỤ LỤC 11 CÁC SẮC KÝ ĐỒ TÍNH TƯƠNG THÍCH HỆ THỐNG CÁC SẮC KÝ ĐỒ ĐỘ LẶP LẠI CÁC SẮC KÝ ĐỒ ĐỘ CHÍNH XÁC TRUNG GIAN PHỔ UV CỦA METOPROLOL SUCCINAT, AMLODIPIN BESILAT PL-22 PL-24 PL-25 PL-27 PHỤ LỤC PL.1.1 Tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn metoprolol sucinat TR S H (phút) (mAU*s) (mAU) 2,1 2835272 550810 1,2 3681 2,1 2838241 552248 1,2 3703 2,1 2771512 551152 1,2 3850 2,1 2843055 560545 1,2 3798 2,1 2843260 560042 1,2 3758 Trung bình 2,1 2826268 554959 1,2 3758 SD 30794,38 4901,46 68,95 RSD (%) 1,09 0,88 0,0 1,83 Metoprolol As N PL.1.2 Tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn amlodipin besilat TR S H (phút) (mAU*s) (mAU) 3,3 389036 3,3 Amlodipin As N 64303 1,1 6881 388892 64151 1,1 6858 3,3 381419 63232 1,1 6890 3,3 393267 64780 1,1 6798 3,3 389008 64424 1,1 6882 Trung bình 3,3 388324 64178 1,1 6862 SD 0,0 4283,97 577,54 0,0 37,61 RSD (%) 0,0 1,10 0,90 0,0 0,55 PL-1 PL.1.3 Tính tương thích hệ thống mẫu thử metoprolol sucinat TR S H (phút) (mAU*s) (mAU) 2,1 2686024 2,1 Metoprolol As N 492354 1,2 3334 2667756 491522 1,2 3369 2,1 2667756 491522 1,2 3369 2,1 2709607 508048 1,2 3474 2,1 2660972 507670 1,2 3620 Trung bình 2,1 2678423 498223 1,2 3433 SD 0,0 19763,12 8803,81 0,0 116,88 RSD (%) 0,0 0,74 1,77 0,0 3,40 PL.1.4 Tính tương thích hệ thống mẫu thử amlodipin besilat TR S H (phút) (mAU*s) (mAU) 3,3 373240 3,3 Amlodipin As N 62123 1,1 6940 372330 62096 1,1 6956 3,3 372330 62096 1,1 6959 3,3 375220 62037 1,1 6786 3,3 367769 60789 1,1 6760 Trung bình 3,3 372178 61828 1,1 6880 SD 0,0 2732,54 581,78 0,0 98,56 RSD (%) 0,0 0,73 0,94 0,0 1,43 PL-2 PHỤ LỤC PL.2.1 Kết tính tuyến tính Metoprolol succinat Nồng độ S (µg/mL) (mAU*s) 1404335 25,02 Amlodipin besilat Nồng độ S (µg/mL) (mAU*s) 193990 2,50 35,03 1979859 3,50 267352 50,04 2835257 5,00 389036 60,05 3415288 6,00 467462 75,06 4258788 7,50 580484 Phương trình hồi quy: Phương trình hồi quy Y = 77833X – 1880,2 Y = 57092X - 21156 Hệ số R2 =1,000 Hệ số R2 = 0,9998 PL.2.2 Kết xử lý phần mềm Microsoft Excel 2013 dựa vào kết trung bình diện tích đỉnh metoprolol Xử lý thống kê Giá trị thống kê Hệ số tương quan Hệ số B 57091.95 Giá trị t hệ số B 380.50 Hệ số B0 -21156.07 Giá trị t hệ số B0 -2.7037 Giá trị F 144779.83 PL-3 Sử dụng “phân tích hồi quy” với trắc nghiệm t trắc nghiệm F thu  phương trình hồi quy nồng độ metoprolol : Y = 57092X (hệ số tương quan R2=1) PL.2.3 Kết xử lý phần mềm Microsoft Excel 2013 dựa vào kết trung bình diện tích đỉnh amlodipine Xử lý thống kê Giá trị thống kê Hệ số tương quan 0,9998 Hệ số B 77832.66 Giá trị t hệ số B 113.6329 Hệ số B0 -1880.22 Giá trị t hệ số B0 -0.526 Giá trị F 12912.43 Sử dụng “phân tích hồi quy” với trắc nghiệm t trắc nghiệm F thu  phương trình hồi quy nồng độ amlodipin là: Y = 77833x (hệ số tương quan R2 = 0,9998) PL-4 PHỤ LỤC PL.3.1 Độ phương pháp metoprolol succinat Khối Mẫ u lượng giả STT dược tương ứng (mg) 80% 100 % 120 % Lượng chất chuẩn thêm vào tương ứng (mg) Diện tích pic (mAU*s) Lượng hoạt chất tìm lại (mg) Tỷ lệ thu hồi (%) 16,03 38,048 2251816 37,47 98,48 16,03 38,048 2252888 37,49 98,53 16,03 38,048 2241811 37,30 98,04 TB 98,35 RSD % 0,27 20,04 47,56 2893648 48,15 101,24 20,04 47,56 2869349 47,75 100,39 20,04 47,56 2879595 47,79 100,75 TB 100,79 RSD % 0,42 24,08 57,072 3441593 57,62 100,34 24,08 57,072 3421716 57,29 99,76 24,08 57,072 3424676 57,34 99,85 TB 99,98 RSD % 0,31 PL-5 PL.3.2 Độ phương pháp amlodipin besilat Khối lượng giả Mẫu STT dược tương ứng (mg) 80% 100% 120% Lượng chất chuẩn thêm vào tương ứng (mg) Diện tích pic (mAU*s) Lượng hoạt chất tìm lại (mg) Tỷ lệ thu hồi (%) 16,03 55,50 309093 55,08 99,24 16,03 55,50 308008 54,89 98,89 16,03 55,50 305462 54,43 98,07 TB 98,73 RSD % 0,61 20,04 69,38 382350 68,14 98,21 20,04 69,38 384503 68,52 98,76 20,04 69,38 389483 69,41 100,04 TB 99,00 RSD % 0,95 24,08 83,26 462929 82,49 99,09 24,08 83,26 472576 84,21 101,15 24,08 83,26 468710 83,53 100,32 TB 100,19 RSD % 1.04 PL-6 PHỤ LỤC Độ lặp lại phương pháp Lượng STT cân mẫu Diện tích pic (mAU*s) % Hàm lượng hoạt chất mẫu thử (mg) Metoprolol Amlodipin Metoprolol Amlodipin 19,97 2853540 363480 99,71 93,17 19,79 2838020 363025 98,28 92,21 20,08 2868958 369956 100,80 95,35 20,03 2875783 368107 100,79 94,64 19,99 2851476 355512 99,74 91,22 19,82 2827262 365748 98,05 93,04 2852507 364305 99,56 93,27 SD 18230,31 5061,76 1,19 1,52 RSD (%) 0,64 1,39 1,19 1,63 Trung bình TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA DƯỢC Độc lập – Tự – Hạnh phúc GIẤY XÁC NHẬN ĐÃ BỔ SUNG, SỬA CHỮA LUẬN VĂN THEO Ý KIẾN ĐÓNG GÓP CỦA HỘI ĐỒNG CHẤM LUẬN VĂN DSĐH Họ tên sinh viên: Lý Hữu Tiến Tên đề tài luận văn: Xây Dựng Qui Trình Định Lượng Viên Nén Chứa Metoprolol 50mg PTKD Và Amlodipin 5mg Để Khảo Sát Độ Ổn Định Người hướng dẫn khoa học: Ths Lữ Thiện Phúc, Ds CKI Lê Thị Cẩm Thúy Luận văn bổ sung sửa chữa điểm sau: Thay đổi tên đề tài luận văn Hình thức, bố cục luận văn theo qui định nhà trường Sắp xếp thứ tự tài liệu tham khảo phù hợp với nội dung Cần Thơ, ngày 25 tháng năm 2015 Thầy hướng dẫn Họ tên sinh viên Xác nhận Trưởng bàn chấm luận văn