i LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất đến cô ThS Nguyễn Thị Linh Tuyền, giảng viên tại Bộ môn Công Nghiệp Dƣợc trƣờng Đại Học Y Dƣợc Cần Thơ, ngƣời đã luôn tận tình hƣớng dẫn, ch[.]
i LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô ThS Nguyễn Thị Linh Tuyền, giảng viên Bộ môn Công Nghiệp Dƣợc trƣờng Đại Học Y Dƣợc Cần Thơ, ngƣời tận tình hƣớng dẫn, dạy cho chúng tơi Ln ln bên cạnh chúng tơi lúc khó khăn nhất, tạo điều kiện tốt cho chúng tơi suốt q trình thực hồn thành đề tài tốt nghiệp Tơi kính gửi lời cảm ơn đến cô TS Phạm Thị Tố Liên, giảng viên Bộ mơn Hóa Dƣợc Trƣờng Đại Học Y Dƣợc Cần Thơ dành thời gian quý báu để góp ý, chỉnh sửa cho luận văn tơi đƣợc hồn chỉnh Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy cô Bộ môn Công Nghiệp Dược, Bào Chế, Liên Bộ mơn Hóa Phân Tích – Kiểm Nghiệm – Độc Chất, Ban Giám Đốc anh chị kỹ thuật viên Trung Tâm Kiểm Nghiệm Thuốc – Mỹ phẩm –Thực phẩm thành phố Cần Thơ hết lòng giúp đỡ, truyền đạt kinh nghiệm tạo điều kiện thuận lợi cho chúng tơi q trình thực đề tài Tơi xin ghi nhận tình cảm bạn Võ Tuấn Vũ bạn Chu Ngọc Tố Quyên bạn thực luận văn môn Công Nghiệp Dƣợc đồng hành sẵn sàng giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Cuối tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến gia đình, bạn bè ln nguồn động viên, khích lệ to lớn giúp tơi vƣợt qua khó khăn thời gian nghiên cứu thực đề tài Cần Thơ ngày 10 tháng năm 2015 Sinh viên Phạm Phƣớc Ngọc Thạch ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài nghiên cứu riêng tơi Các kết khóa luận hoàn toàn trung thực chƣa đƣợc báo cáo đề tài nghiên cứu khác Cần Thơ ngày 10 tháng năm 2015 Sinh viên Phạm Phƣớc Ngọc Thạch iii MỤC LỤC MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC BIỂU ĐỒ VÀ HÌNH VẼ viii ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ METOPROLOL SUCCINAT 1.2 TỔNG QUAN VỀ AMLODIPIN BESYLAT .5 1.3 THỬ NGHIỆM ĐỘ HÕA TAN 1.4 THỬ NGHIỆM TƢƠNG ĐƢƠNG IN-VITRO BẰNG PHƢƠNG PHÁP ĐO ĐỘ HÕA TAN 1.5 ĐỘNG HỌC GIẢI PHÓNG HOẠT CHẤT 10 1.6 THẨM ĐỊNH ĐỘ HÒA TAN BẰNG PHƢƠNG PHÁP HPLC VỚI ĐẦU DÒ PDA 12 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU .16 2.2 HĨA CHẤT, DUNG MƠI VÀ TRANG THIẾT BỊ DÙNG TRONG NGHIÊN CỨU .17 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .18 Chƣơng KẾT QUẢ .23 3.1 THẨM ĐỊNH ĐỘ HÕA TAN METOPROLOL VÀ AMLODIPIN BẰNG PHƢƠNG PHÁP HPLC VỚI ĐẦU DÕ PDA .23 3.2 THỬ NGHIỆM ĐỘ HÕA TAN CỦA VIÊN NÉN BAO PHIM PTKD CHỨA METOPROLOL VÀ AMLODIPIN TRONG CÁC MÔI TRƢỜNG PH 1,2; PH 4,5; PH 6,8 VÀ SO SÁNH VỚI VIÊN ĐỐI CHIẾU SELOMAX® .35 iv 3.3 NGHIÊN CỨU MƠ HÌNH ĐỘNG HỌC GIẢI PHÓNG METOPROLOL RA KHỎI DẠNG BÀO CHẾ PTKD TRONG CÁC MÔI TRƢỜNG pH 1,2; pH 4,5 VÀ pH 6,8 39 Chƣơng BÀN LUẬN 46 4.1 THẨM ĐỊNH ĐỘ HÕA TAN METOPROLOL VÀ AMLODIPIN BẰNG PHƢƠNG PHÁP HPLC VỚI ĐẦU DÕ PDA .46 4.2 THỬ NGHIỆM ĐỘ HÕA TAN CỦA VIÊN NÉN BAO PHIM PTKD CHỨA METOPROLOL VÀ AMLODIPIN TRONG CÁC MÔI TRƢỜNG PH 1,2; PH 4,5; PH 6,8 VÀ SO SÁNH VỚI VIÊN ĐỐI CHIẾU SELOMAX® 50 4.3 NGHIÊN CỨU MƠ HÌNH ĐỘNG HỌC GIẢI PHÓNG METOPROLOL RA KHỎI DẠNG BÀO CHẾ PTKD TRONG CÁC MÔI TRƢỜNG pH 1,2; pH 4,5 VÀ pH 6,8 54 KẾT LUẬN .55 KIẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 PHỤC LỤC v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt Từ nguyên Ý nghĩa ACN Acetonitrile Acetonitril BYT Bộ Y Tế Bộ Y Tế FDA Food and Drug Administration Cục Quản Lý Thực Phẩm Dƣợc Phẩm Hoa Kỳ GPHC Giải phóng hoạt chất Giải phóng hoạt chất HPLC High-Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Chromatography PDA Photodiode array Dãy điot quang PTKD Phóng thích kéo dài Phóng thích kéo dài RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tƣơng đối SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn USP United States Pharmacopeia Dƣợc Điển Mỹ UV-Vis Ultraviolet-Visible Tử ngoại-khả kiến WHO World Health Organization Tổ chức y tế giới tR Retention time Thời gian lƣu As Asymmetry factor Hệ số bất đối N Column efficiency Số đĩa lý thuyết S Diện tích đỉnh Diện tích đỉnh Rs Resolution factor Hệ số phân giải h Hour Giờ t Time Thời gian vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Chỉ tiêu kiểm nghiệm viên nghiên cứu 16 Bảng 2.2 Hóa chất, dung mơi dùng nghiên cứu .17 Bảng 2.3 Các trang thiết bị dùng nghiên cứu 17 Bảng 2.4 Các giai mẫu hỗn hợp chuẩn 20 Bảng 3.5 Kết tính tƣơng thích hệ thống mẫu thử 23 Bảng 3.6 Kết tính tƣơng thích hệ thống mẫu chuẩn 24 Bảng 3.7 Khảo sát tính tƣơng quan nồng độ diện tích đỉnh .27 Bảng 3.8 Xử lý thống kê tính tuyến tính 29 Bảng 3.9 Độ xác quy trình phân tích metoprolol pH 1,2 .30 Bảng 3.10 Độ xác quy trình phân tích metoprolol pH 6,8 30 Bảng 3.11 Độ xác quy trình phân tích amlodipin pH 1,2 31 Bảng 3.12 Độ xác quy trình phân tích amlodipin pH 6,8 31 Bảng 3.13 Độ quy trình phân tích metoprolol pH 1,2 32 Bảng 3.14 Độ quy trình phân tích metoprolol pH 6,8 33 Bảng 3.15 Độ quy trình phân tích amlodipin pH 1,2 34 Bảng 3.16 Độ quy trình phân tích amlodipin pH 6,8 35 Bảng 3.17 Phần trăm giải phóng metoprolol môi trƣờng 36 Bảng 3.18 Phần trăm giải phóng amlodipin mơi trƣờng .38 Bảng 3.19 Hệ số tƣơng đồng f2 đồ thị giải phóng metoprolol viên nghiên cứu viên đối chiếu môi trƣờng 38 Bảng 3.20 Hệ số tƣơng đồng f2 đồ thị giải phóng metoprolol viên nghiên cứu cặp môi trƣờng 38 Bảng 3.21 Hệ số tƣơng quan mơ hình động học giải phóng metoprolol viên nghiên cứu viên đối chiếu môi trƣờng .39 Bảng 4.22 Phƣơng trình hồi quy truyến tính 48 Bảng 4.23 RSD theo thời điểm đo hòa tan metoprolol 48 Bảng 4.24 RSD theo thời điểm đo hòa tan amlodipin 49 Bảng 4.25 Tỷ lệ phục hồi phần trăm .49 vii Bảng 4.27 Phần trăm metoprolol giải phóng mơi trƣờng 51 Bảng 4.28 Yêu cầu phần trăm hòa tan metoprolol pH 6,8 .52 Bảng 3.29 Hệ số tƣơng đồng f2 viên nghiên cứu cặp môi trƣờng 53 Bảng 4.30 Phần trăm amlodipin giải phóng mơi trƣờng .53 Bảng 4.31 Mơ hình động học giải phóng metoprolol 54 viii DANH MỤC BIỂU ĐỒ VÀ HÌNH VẼ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo metoprolol succinat Hình 1.2 Phổ IR chuẩn metoprolol .3 Hình 1.3 Amlodipin besylat Hình 1.4 Phổ IR chuẩn amlodipin Hình 3.5 Sắc ký đồ tính đặc hiệu pH 1,2 .25 Hình 3.6 Sắc ký đồ tính đặc hiệu pH 6,8 25 Hình 3.7 Phổ UV-Vis thời gian lƣu pic metoprolol 26 Hình 3.8 Phổ UV-Vis thời gian lƣu pic amlodipin 26 Hình 3.9 Đƣờng chuẩn metoprolol pH 1,2 27 Hình 3.10 Đƣờng chuẩn metoprolol pH 6,8 28 Hình 3.11 Đƣờng chuẩn amlodipin pH 1,2 28 Hình 3.12 Đƣờng chuẩn amlodipin pH 6,8 28 Hình 3.13 Đồ thị phần trăm giải phóng metoprolol pH 1,2 37 Hình 3.14 Đồ thị phần trăm giải phóng metoprolol pH 4,5 37 Hình 3.1 Đồ thị phần trăm giải phóng metoprolol pH 6,8 .37 Hình 3.16 Mơ hình bậc .40 Hình 3.17 Mơ hình bậc .40 Hình 3.18 Mơ hình Higuchi 40 Hình 3.19 Mơ hình Hixson-Crowel 40 Hình 3.20 Mơ hình Korsmeyer-Peppas 40 Hình 3.21 Mơ hình bậc .41 Hình 3.22 Mơ hình bậc .41 Hình 3.23 Mơ hình Higuchi 41 Hình 3.24 Mơ hình Hixson-Crowel 41 Hình 3.25 Mơ hình Korsmeyer-Peppas 41 Hình 3.26 Mơ hình bậc 42 Hình 3.27 Mơ hình bậc .42 ix Hình 3.28 Mơ hình Higuchi 42 Hình 3.29 Mơ hình Hixson-Crowel 42 Hình 3.30 Mơ hình Korsmeyer-Peppas 42 Hình 3.31 Mơ hình bậc .43 Hình 3.32 Mơ hình bậc .43 Hình 3.33 Mơ hình Higuchi 43 Hình 3.34 Mơ hình Hixson-Crowel 43 Hình 3.35 Mơ hình Korsmeyer-Peppas 43 Hình 3.36 Mơ hình bậc .44 Hình 3.37 Mơ hình bậc .44 Hình 3.38 Mơ hình Higuchi 44 Hình 3.39 Mơ hình Hixson-Crowel 44 Hình 3.40 Mơ hình Korsmeyer-Peppas 44 Hình 3.41 Mơ hình bậc .45 Hình 3.42 Mơ hình bậc .45 Hình 3.43 Mơ hình Higuchi 45 Hình 3.44 Mơ hình Hixson-Crowel 45 Hình 3.45 Mơ hình Korsmeyer-Peppas 45 ĐẶT VẤN ĐỀ Nhằm đáp ứng nhu cầu điều trị nƣớc phát triển ngành công nghiệp dƣợc phẩm quốc gia, thuốc generic đƣợc sản xuất ngày nhiều Để chứng minh chất lƣợng điều trị tƣơng đƣơng thuốc generic với thuốc gốc việc thử tƣơng đƣơng sinh học đƣợc quan tâm thực nhiều Hai dƣợc phẩm đƣợc gọi tƣơng đƣơng sinh học có dạng bào chế, chứa loại hoạt chất hàm lƣợng hoạt chất nhƣ có sinh khả dụng không khác điều kiện thử nghiệm, hai chế phẩm đƣợc chấp nhận tƣơng đƣơng trị liệu, thay điều trị [12], [53] Tƣơng đƣơng sinh học thử nghiệm bắt buộc tất thuốc generic trƣớc lƣu hành nƣớc phát triển (Mỹ, Öc, Cộng đồng Châu Âu…) [40] Tuy nhiên nƣớc ta, khái niệm phổ biến năm gần Theo thống kê cục quản lý dƣợc, thị trƣờng dƣợc phẩm Việt Nam đến tháng 01/2015 có 396 dƣợc phẩm đƣợc thử tƣơng đƣơng sinh học, vấn đề tƣơng đƣơng sinh học ngày trở nên cần thiết để góp phần thúc đẩy công nghiệp dƣợc phẩm Việt Nam phát triển hội nhập với công nghiệp dƣợc phẩm đại giới [4] Tƣơng đƣơng in-vitro giai đoạn tƣơng đƣơng sinh học đƣợc thử nghiệm phƣơng pháp đo độ hòa tan Đây bƣớc cần thực việc thử tƣơng đƣơng sinh học nhằm mục đích định hƣớng cho việc thử nghiệm in-vivo Phép thử in-vitro đƣợc lựa chọn để tiến hành nhƣ phép sàng lọc ban đầu cho thử in-vivo giúp tiết kiệm thời gian chi phí phép thử tƣơng đƣơng in-vivo khơng phải lúc thực đƣợc địi hỏi phải tốn chi phí lớn Ngồi kết thử in-vitro đƣợc sử dụng thay cho phép thử in-vivo số trƣờng hợp Do đó, kết luận thử tƣơng đƣơng in-vitro phép thử trung gian quan trọng đƣợc thực nghiên cứu sinh khả dụng thuốc Metorpolol thuốc trị tăng huyết áp thuộc nhóm chẹn beta amlodipin thuốc trị tăng huyết áp thuộc nhóm chẹn kênh canxi Chế phẩm phối hợp thuốc để tăng khả kiểm soát huyết áp bệnh nhân đƣợc sử dụng rộng rãi PL-3 Phụ lục Kết tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn Metoprolol succinat pH 1,2 Chuẩn tR S N k’ As Rs Chuẩn 4,133 6590719 4326 0,043 0,997 - Chuẩn 4,133 6565364 4325 0,043 1,019 - Chuẩn 4,127 6551267 4297 0,045 1,004 - Chuẩn 4,133 6522437 4386 0,043 0,994 - Chuẩn 4,133 6589842 4442 0,043 0,98 - Chuẩn 4,12 6589777 4206 0,046 1,014 - TB 4,13 6568234 4330,3 0,044 1,001 - SD 0,005 27676,9 80,231 0,001 0,014 - RSD 0,13 0,421 1,853 3,032 1,417 - Amlodipin besylat pH 1,2 Chuẩn tR S N k’ As Rs Chuẩn 6,547 1521788 9930 0,515 1,252 - Chuẩn 6,547 1514392 10008 0,515 1,246 - Chuẩn 6,553 1516316 9956 0,512 1,256 - Chuẩn 6,553 1511468 9838 0,512 1,275 - Chuẩn 6,527 1511880 9908 0,511 1,237 - Chuẩn 6,513 1508778 9764 0,508 1,298 - TB 6,54 1514104 9900,7 0,512 1,261 - SD 0,016 4566,85 87,294 0,003 0,022 - RSD 0,25 0,302 0,882 0,515 1,764 - PL-4 Metoprolol succinat pH 6,8 Chuẩn TR S As N k’ Rs Lần 4,54 6720989 1,605 8009 0,055 - Lần 4,533 6721556 1,526 8029 0,054 - Lần 4,56 6734552 1,533 8110 0,056 - Lần 4,567 6725423 1,539 8221 0,057 - Lần 4,567 6732583 1,571 8303 0,057 - Lần 4,567 6716639 1,535 8389 0,057 - TB 4,556 6725290 1,552 8176,8 0,056 - SD 0,014 6406,66 0,028 139,87 0,001 - RSD% 0,33 0,1 1,97 1,87 2,26 - Amlodipin besylat pH 6,8 Chuẩn TR S As N k’ Rs Lần 7,933 1288964 1,561 11277 0,836 - Lần 7,947 1284003 1,502 11608 0,839 - Lần 7,953 1279246 1,511 11804 0,841 - Lần 7,967 1277274 1,498 11249 0,844 - Lần 7,973 1273633 1,498 11365 0,846 - Lần 7,973 1272559 1,502 11606 0,846 - TB 7,958 1279280 1,512 11485 0,842 - SD 0,015 5732,54 0,022 202,03 0,004 - RSD% 0,2 0,49 1,62 1,93 0,48 - PL-5 Phụ lục Độ hòa tan Độ hòa tan metoprolol (viên selomax môi trƣờng) Môi trƣờng pH 1,2 pH 4,5 pH 6,8 Viên Diện tích đỉnh giờ 12 16 20 1064645 2861724 4201409 5072746 5867602 6235982 902694 1311522 3328981 4787178 5721571 6310069 6510548 1133448 3025563 4529582 5521774 6113172 6594404 1221088 3112751 4599466 5567260 6085021 6282652 1276369 3197824 4684298 5647635 6136403 6458681 874506 1276000 3144274 4628389 5678059 6192591 6544196 2701480 4306078 5291976 6067034 6498088 2582278 4058450 5176896 5948065 6500688 57954 104726 194533 239281 275814 358776 64228 102584 181763 253770 309118 340951 74464 106350 191013 213523 282393 324396 68760 120407 209406 258058 329011 340636 47272 124983 186308 239941 282840 290517 64804 100014 167387 186618 291691 326966 64104 92794 177623 234447 291890 325491 845870 2311307 4170336 5156387 5852855 6212300 961827 2548730 4321985 5437838 6174268 6610999 1000474 2558658 4264795 5379075 6075633 6498849 940847 2546723 4391698 5571546 6223828 6707881 862329 2496668 4372688 5508869 6223002 6738616 943662 2559649 4038268 5235009 5846182 6267456 PL-6 Độ hòa tan metoprolol (viên nghiên cứu) môi trƣờng Môi trƣờng pH 1,2 pH 4,5 pH 6,8 Viên Diện tích đỉnh giờ 12 16 20 1180953 3081823 4401082 5191197 5750807 6156543 1150382 2973083 4263271 5029443 5583054 6025472 1276671 3107780 4456527 5301208 5880895 6307021 1277423 3121178 4421516 5170211 5646000 5973692 1271589 3089964 4422724 5188192 5782768 6108482 1300358 3059718 4328837 5079447 5702835 6036500 1386731 3242641 4584834 5435856 6037460 6442125 1263355 3095555 4294769 5258726 5830738 6233989 85144 212906 334115 427126 462509 533322 93071 225702 331802 400945 490363 541867 92929 228718 347970 441295 480402 564857 104583 250170 366986 441890 494654 562108 104606 242538 365065 436933 505744 559028 95656 237586 352665 444155 483014 555572 97413 244342 360088 445751 494245 564954 89080 226132 346130 426667 486930 539303 982210 2568124 3771448 4736038 5382447 5885562 968720 2644238 3846222 4820949 5496890 5960888 884718 2509493 3786616 4817507 5509620 6052904 883134 2492411 3645991 4620922 5257586 5749770 889423 2509388 3711384 4714431 5390268 5925646 952523 2601482 3821549 4780770 5427630 5904758 871150 2460566 3651514 4656772 5281405 5790281 928217 2541619 3725490 4688993 5341028 5816609 PL-7 Độ hịa tan amlodipin mơi trƣờng Mơi trƣờng pH 1,2 pH 4,5 pH 6,8 Viên Diện tích đỉnh Diện tích đỉnh Viên Selomax Viên nghiên cứu 15 phút 30 phút 60 phút 15 phút 30 phút 60 phút 973402 1110596 1218322 1260760 1367026 1402737 969564 1101368 1262175 1353144 1409904 1400604 959030 1103776 1247033 1237260 1282957 1291065 1034986 1118887 1219896 1362191 1426505 1433091 1037075 1136259 1252067 1236386 1284234 1295085 1019089 1126917 1227038 1240779 1284826 1283651 1431061 1420411 1402438 1160128 1192838 1208307 1353591 1389959 1384286 1365076 1407703 1415171 77934 75916 83261 84655 87374 90536 82371 88800 90482 88478 93039 94868 85294 92049 91316 89975 91680 89622 83576 94662 86732 87566 90746 94120 85404 92159 91417 90032 93790 106674 83677 94772 87732 80122 83988 82776 77355 84444 89230 65784 66010 67602 78447 82252 83439 71003 64296 77132 75732 80010 85873 66410 79240 52402 79010 80202 88078 68604 80765 58950 75006 83152 91260 77242 71340 57892 81171 85919 90657 65750 67636 58530 PL-8 Phụ lục Phổ UV-Vis tính đặc hiệu Phổ UV-Vis tính đặc hiệu pH 1,2 Phổ UV-Vis-tính đặc hiệu pH 4,5 Phổ UV-Vis-tính đặc hiệu pH 6,8 PL-9 Trong đó: a phổ đồ metorpolol b phổ đồ amlodipin c phổ đồ tá dƣợc Phụ lục Sắc ký đồ tính đặc hiệu mơi trường pH 4,5 Phụ lục Sắc ký đồ tính tuyến tính metoprolo l amlodipin l Sắc ký đồ tính tuyến tính pH 1,2 PL-10 metoprolol amlodipin l Sắc ký đồ tính tuyến tính pH 6,8 Phụ lục Độ ổn định dung dịch metorpolol succinat môi trường hòa tan nhiệt độ phòng 20 pH 1,2 T(giờ) pH 4,5 pH 6,8 Diện tích % Diện tích % Diện tích % đỉnh nồng độ đỉnh nồng độ đỉnh nồng độ 0h 6690817 100,00 461238 100,00 6747622 100,00 4h 6690462 99,99 472569 102,46 6743382 99,94 8h 6686883 99,94 455031 98,65 6732398 99,77 20h 6624023 99,00 453952 98,42 6724218 99,65 RSD 0,49 - 1,85 0,16 PL-11 Phụ lục Kết thống kê tính tương thích phương trình hồi quy Metoprolol pH 1,2 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R R Square 0,999964 0,999929 Adjusted R Square Standard 0,999915 Error Observations 30513,96 ANOVA df SS MS F Regression 6,55E+13 6,55E+13 70333,11 Residual 4,66E+09 9,31E+08 Total 6,55E+13 Intercept X Variable Coefficients Standard Error -8133,38 65761,93 21433,67 247,9674 t Stat P-value -0,37947 0,719923 265,2039 1,45E-11 Significance F 1,45E-11 Lower 95% Upper 95% Lower 95.0% Upper 95.0% -63230,4 46963,61 -63230,4 46963,61 65124,51 66399,35 65124,51 66399,35 PL-12 Amlodipin pH 1,2 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0,999845 R Square 0,999689 Adjusted R Square 0,999612 Standard Error 0,083374 Observations ANOVA df SS Regression Residual Total Coefficients 89,4722 MS F 89,4722 12871,5 Significance F 3,62E-08 0,027805 0,006951 89,5 Standard Error t Stat P-value Lower 95% Upper Lower Upper 95% 95.0% 95.0% Intercept 0,332711 0,07963 4,178226 0,013938 0,111623 0,553798 0,111623 0,553798 X Variable 6,42E-06 5,66E-08 113,4526 3,62E-08 6,26E-06 6,58E-06 6,26E-06 6,58E-06 PL-13 Metoprolol môi trƣờng pH 6,8 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0,999905 R Square 0,999811 Adjusted R Square Standard Error 0,999773 50483,88 Observations ANOVA df SS MS F Significance F Regression 6,74E+13 6,74E+13 26444,17 Residual 1,27E+10 2,55E+09 Total 6,74E+13 Coefficients Standard Error 37162,48 35460,97 1,047983 0,342639 -53992,8 128317,8 66713,5 410,2502 162,6166 1,67E-10 65658,92 67768,08 65658,92 67768,08 Intercept X Variable t Stat P-value 1,67E-10 Lower 95% Upper Lower Upper 95% 95.0% 95.0% -53992,8 128317,8 PL-14 Amlodipin môi trƣờng pH 6,8 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0,999674 R Square 0,999348 Adjusted R Square 0,999184 Standard Error 15268,21 Observations ANOVA df SS MS F Regression 1,43E+12 1,43E+12 6126,931 Residual 9,32E+08 2,33E+08 Total 1,43E+12 Coefficients Standard Error Intercept -2868,91 15067,87 X Variable 126327,6 1613,9 t Stat P-value -0,1904 0,858269 78,27472 1,6E-07 Significance F 1,6E-07 Lower 95% Upper Lower Upper 95% 95.0% 95.0% -44704 38966,21 -44704 38966,21 121846,7 130808,5 121846,7 130808,5 PL-15 Phụ lục Quy định thử độ hòa tan dược điển Dƣợc điển Việt Nam Thiết bị - Giỏ quay cánh khuấy Dƣợc điển Anh - Giỏ quay cánh khuấy Dƣợc điển Mỹ - Giỏ quay, cánh khuấy, hình trụ chuyển động lên xuống, dịng thƣờng dùng chảy, cánh khuấy đĩa, hình trụ quay giá đựng chuyển động lên xuống Tốc độ quay - Tạo dòng chảy lien tục với tốc - Tạo dòng chảy liên tục với tốc độ - Tạo dòng chảy lien tục với tốc độ độ quy định theo chuyên quy định theo chuyên luận quy định theo chuyên luận luận riêng (± 5%) riêng riêng (± 5%) - (± 5%) Cách tiến hành - Cho thể tích mơi trƣờng Cho thể tích mơi trƣờng hịa - Cho thể tích mơi trƣờng hịa hịa tan đuổi khí vào cốc đo - Cân mơi trƣờng hịa tan tan đuổi khí vào cốc đo Cân mơi trƣờng hịa tan tan đuổi khí vào cốc đo - Cân mơi trƣờng hòa tan - Cho viên cần đo độ hòa tan vào Cho viên cần đo độ hòa tan vào - Cho viên cần đo độ hòa tan vào cốc đo cốc đo cốc đo - Sau thời gian quay quy định, - Sau thời gian quay quy định, hút - Sau thời gian quay quy định, hút hút dung dịch mơi trƣờng hịa dung dịch mơi trƣờng hịa tan dung dịch mơi trƣờng hịa tan tan viên để định viên để định lƣợng viên để định lƣợng PL-16 lƣợng Các quy định - Thể tích mơi trƣờng hịa tan - Thể tích mơi trƣờng hịa tan - Thể tích mơi trƣờng hịa tan thử độ hịa tan đuổi khí: ± 1% theo chuyên đuổi khí: ± 1% theo chuyên luận luận - Nhiệt độ môi trƣờng hịa tan: 37 ± - Nhiệt độ mơi trƣờng hịa tan: 37 ± - Nhiệt độ mơi trƣờng hịa tan: 0,5oC 37 ± 0,5oC - Thời gian lấy mẫu: ± 2% 0,5oC - pH dung dịch đệm ± 0,05 đơn vị - pH dung dịch đệm ± 0,05 đơn vị - pH dung dịch đệm ± 0,05 đơn - Thời gian lấy mẫu: ± 2% vị đuổi khí: ± 1% theo chuyên luận - Thời gian lấy mẫu: ± 2% - Vị trí lấy mẫu: khoảng cách - Vị trí lấy mẫu: khoảng cách bề mặt mơi trƣờng hịa tan mặt bề mặt mơi trƣờng hịa tan mặt - Vị trí lấy mẫu: khoảng cách giỏ quay hay cạnh trên giỏ quay hay cạnh bề mặt mơi trƣờng hịa tan cánh khuấy; phải cách thành cánh khuấy; phải cách thành mặt giỏ quay hay cốc đo 10mm cạnh cánh khuấy; phải - Lọc mẫu: giấy lọc thích hợp cốc đo 10mm - Lọc mẫu: giấy lọc thích hợp cách thành cốc đo - Thêm mơi trƣờng hịa tan phải - Thêm mơi trƣờng hịa tan phải 10mm xác xác - Lọc mẫu: giấy lọc thích hợp - Thêm mơi trƣờng hịa tan phải xác Môi trƣờng thử - Acid hydrochloric 0,1N - Acid hydrochloric 0,1N - Acid hydrochloric 0,1N PL-17 độ hòa tan - Đệm phosphate 6,8 - Đệm phosphate 6,8 - Đệm phosphate 6,8 Đánh giá kết - Mỗi viên đƣợc thử phải có - Mỗi viên đƣợc thử phải có lƣợng - Nếu thử lần với viên (viên viên nang nén) lƣợng hoạt chất vào dung hoạt chất vào dung dịch không viên phải đạt ≥ 80% dịch khơng đƣợc 70% đƣợc 70% lƣợng hoạt chất - Nếu thử lần lần viên khơng có chuyên lƣợng hoạt chất quy định quy định tùy vào chuyên giá trị trung bình 12 viên ≥ luận riêng quy tùy vào chuyên luận riêng luận riêng có viên khơng 80% khơng viên < 65% định có viên khơng đáp ứng yêu đáp ứng yêu cầu phải thử lại - Nếu thử ba lần (6,6,12 viên) cầu phải thử lại với viên với viên khác, lần tất giá trị trung bình 24 viên phải khác, lần tất viên phải viên phải đạt yêu cầu ≥ 80% viên < đạt yêu cầu 65% không viên < 55%