NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH CHÉ BIẾN TRÀ TÚI LỌC TỪ QUÁ SUNG (FICUS GLOMERATA) VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA SẢN PHÁM

B ăGIÁOăD CăVẨă ẨOăT O TR NGă IăH CăM ăTHẨNHăPH ăH ăCHệăMINH BÁOăCÁOăKHịAăLU NăT TăNGHI P Tên đ tài: NGHIÊNăC UăQUYăTRỊNHăCH ăBI N TRÀ TÚI L CăT ăQU ăSUNG (FICUS GLOMERATA) VẨăKH OăSÁTă HO TăTệNHăSINHăH CăC AăS NăPH M KHOAăCỌNGăNGH ăSINHăH C CHUYÊNăNGẨNH:ăTH CăPH M GVHD:Th.SăNguy năTh ăL ăTh y SVTH:ăăTr năTh ăNg căLy MSSV: 1053012425 Khóa: 2010-2014 Tp H Chí Minh, tháng 05 n m 2014 L IăC Mă N Bu i đ u m t tân sinh viên vào nh p h c, b m l n đ u tiên đ t chân vào sân tr ng v i bao c m xúc v a vui m ng v a h i h p lo l ng, không bi t v i ki n th c 12 n m ng i gh nhà tr ng nh ng kinh nghi m non n t cu c s ng có th giúp cho b n thân nh ng ngày tháng s ng xa gia đình nh ng ngày tháng xa nhà hay khơng Th m n m trơi qua gi sinh viên n m cu i B n n m không dài nh ng c ng không ng n, kho ng th i gian quý báu giúp cho em có đ nghi m, k n ng nh ng ki n th c vô c n thi t đ em tr b c cu c s ng sau Ki n th c đó, k n ng có đ c nh ng kinh ng thành h n t tin c s d y d , h ng d n t n tình c a th y cô, s chia s , giúp đ c a th y cơ, gia đình, b n bè,… L i đ u tiên em xin chân thành c m n Ban giám hi u tr ng i h c M thành ph H Chí Minh t o u ki n v v t ch t c ng nh tinh th n đ em có c h i h c t p t t L i ti p theo em xin c m n đ n th y b n bè mà em có c h i ti p xúc h c h i su t quãng th i gian em ng i gh nhà tr ng, đ c bi t th y cô khoa Công ngh sinh h c nói chung th y chun ngành th c ph m nói riêng c a tr nh ng ng ng i h c M Em xin chân thành c m n kính chúc th y cô c ng nh i b n thân d i s c kh e, đ t đ c nhi u thành công cu c s ng ngày có nhi u đóng góp cho xã h i Em c ng xin chân thành c m n cô Nguy n Th Ph ng Khanh – gi ng viên khoa Công ngh sinh h c ph trách phịng thí nghi m phịng thí nghi m sinh hóa C m n Cơ t o m i n ki n v v t ch t c ng nh tinh th n đ giúp đ em hoàn thành t t th i gian th c t p nghiên c u Em xin chúc Cô kho m nh, h nh phúc g t hái đ c nhi u thành công h n cu c s ng Em xin dành l i c m n sâu s c chân thành c a đ n cô Nguy n Th L Th y – gi ng viên khoa Công ngh sinh h c, chuyên ngành Công ngh th c ph m c ng gi ng viên h ng d n em th c hi n đ tài th c t p Cô dành th i gian đ đ ng hành em, giúp đ h ng d n em t n tình đ em hồn thành t t đ tài c a Khơng nh ng ch d y nh ng ki n th c chun ngành mà Cơ cịn chia s cho em nh ng kinh nghi m làm vi c, d y cách làm vi c nh th cho đ t hi u qu cao Em xin chúc Cô kh e m nh, h nh phúc đ t đ c nhi u thành công cu c s ng Và cu i em xin dành l i tri ân sâu s c đ n b m - ng gi i Ng i sinh thành, nuôi n ng d y d em nên ng i cho em đ n v i th i, lo l ng cho em đ em có c h i h c h i ti p xúc v i cu c s ng Con xin c m n ba m cơng n sinh thành nuôi d ng c a Ng i Em xin chân thành c m n anh, ch c a em,đã bên c nh đ ng viên, giúp đ cho em Con c u mong ba m kh e m nh, bình an s ng v i đ có c h i đ c đ n đáp công n bi n th i c a ba m Em xin chúc anh, ch h nh phúc thành công h n M CL C DANHăM CăB NG i DANHăM CăHỊNH iii TăV Nă PH NăI:ăT NGăQUANăTẨIăLI U 1.T ngăquanăv ăcơyăsung 1.1.Phân lo i th c v t 1.2 c m hình thái 1.3.Giá tr dinh d 1.4 ng ng d ng c a qu sung đ i s ng 1.5.M t s nghiên c u v sung 2.ăT ngăquanăv ătrƠ 2.1.L ch s v trà 2.2.Gi i thi u v trà 2.3.Phân lo i trà 2.4.M t s s n ph m trà th tr ng 2.5.Quy trình ch bi n trà túi l c 10 3.T ngăquanăv ăg căt ădo 13 3.1.Khái ni m 13 3.2.S hình thành g c t 13 3.3.C u trúc đ b n c a g c t 14 3.4.Vai trò g c t c th 15 4.T ngăquanăv ăm tăs ăviăkhu năgơyăb nh 19 4.1 Tr c khu n Escherichia coli 19 4.2.Tr c khu n Bacillus cereus 20 PH NăII:ăV TăLI UăVẨăPH NGăPHÁPăNGHIÊNăC U 22 1.V tăli uănghiênăc u 22 1.1 a m nghiên c u 22 1.2.Nguyên li u 22 1.3.Hóa ch t thi t b thí nghi m 22 2.Ph ngăphápănghiênăc u 23 2.1.S đ nghiên c u 23 2.2.Quy trình ch bi n trà túi l c t sung d ki n 24 2.3.N i dung nghiên c u 26 2.3.1.Kh o sát thành ph n tính ch t nguyên li u 26 2.3.2 Kh o sát s nh h ng c a trình ch n đ n ch t l ng trà 27 2.3.3 Kh o sát s nh h ng c a trình s y s b đ n ch t l 2.3.4.Kh o sát s nh h ng c a trình s y hoàn thi n đ n ch t l 2.3.5.Kh o sát s nh h ng c a trình đ n ch t l 2.3.6.Kh o sát s nh h ng c a q trình trích ly đ n ch t l ng trà 29 ng trà 31 ng trà 33 ng trà 36 2.3.7.Kh o sát s nh h ng c a công đo n ch bi n đ n hàm l ng polyphenol ho t tính ch ng oxy hóa c a trà 38 2.3.8.Kh o sát kh n ng kháng khu n c a trà 39 2.3.9 ánh giá ch t l ng trà thành ph m 40 PH NăIII:ăK TăQU ăVẨăTH OăLU N 42 1.K t qu kh o sát thành ph n tính ch t nguyên li u 42 2.K t qu kh o sát s nh h ng c a trình ch n đ n ch t l 3.K t qu kh o sát s nh h ng c a trình s y s b đ n ch t l 4.K t qu kh o sát nh h ng trà 43 ng trà 45 ng c a trình s y hồn thi n đ n ch t l 5.K t qu kh o sát s nh h ng c a trình đ n ch t l 6.K t qu kh o sát s nh h ng c a q trình trích ly đ n ch t l ng trà 47 ng trà 50 ng trà 52 7.K t qu kh o sát s nh h ng c a công đo n ch bi n đ n hàm l ng polyphenol ho t tính ch ng oxy hóa c a trà 55 8.K t qu kh o sát kh n ng kháng khu n c a s n ph m 57 9.K t qu đánh giá ch t l ng trà thành ph m 60 K TăLU NăVẨăKI NăNGH 64 TẨIăLI UăTHAMăKH O 67 PH ăL C I DANH M C B NG B ng 1.1: Giá tr dinh d B ng 1.2: nh h ng c a qu sung ng c a s stress oxy hóa lên phân t c th 16 B ng 2.1: Thành ph n hóa lý c a qu sung 27 B ng 2.2 B trí thí nghi m nhi t đ th i gian trình ch n 28 B ng 2.3: Ch tiêu c m quan qu sung sau trình ch n 29 B ng 2.4: B trí thí nghi m nhi t đ th i gian kh o sát trình s y s b 30 B ng 2.5 Ch tiêu c m quan nguyên li u sung sau s y s b 31 B ng 2.6 B trí thí nghi m nhi t đ th i gian kh o sát q trình s y hồn thi n 32 B ng 2.7: Ch tiêu c m quan qu sung sau s y hoàn thi n 33 B ng 2.8 B trí thí nghi m nhi t đ th i gian kh o sát trình 34 B ng 2.9 Ch tiêu c m quan c a b t trà thành ph m 35 B ng 2.10 Ch tiêu c m quan d ch trà thành ph m 35 B ng 2.11 Ch tiêu c m quan d ch trà thành ph m 37 B ng 2.12 B trí thí nghi m đ nh l ng polyhenol 39 B ng 2.13 B trí thí nghi m ho t tính ch ng oxy hóa 39 B ng 2.14 Thang m đánh giá c m quan ch t l ng trà thành ph m 40 B ng 3.1 Các thơng s hóa lý c a qu sung 42 B ng 3.2 : K t qu đánh giá m u ch đ ch n khác 43 B ng 3.3: K t qu đánh giá m u ch đ s y s b khác 45 B ng 3.4: K t qu đánh giá m u ch đ s y hoàn thi n khác 48 B ng 3.5: K t qu đánh giá c m quan b t trà thành ph m 50 B ng 3.6: K t qu đánh giá c m quan d ch trà thành ph m 51 B ng 3.7 B ng k t qu kh o sát t l trích ly 53 B ng 3.8 B ng k t qu kh o sát th i gian trích ly 54 B ng 3.9 N ng đ đ ng kính vịng kháng khu n 58 i B ng 3.10 Các ch tiêu hóa lý c a s n ph m 60 B ng 3.11 B ng k t qu c m quan s n ph m hoàn thi n theo TCVN 3218 : 1993 61 B ng 3.12: B ng m ch t l ng s n ph m theo TCVN 3215-79 62 B ng 3.13: B ng k t qu ch tiêu vi sinh trà thành ph m 62 B ng 3.14 B ng ho t tính sinh h c c a trà thành ph m 63 B ng 4.1.B ng hi u su t s n xu t 65 B ng 4.2 B ng t ng h p so sánh ho t tính sinh hoc 65 B ng 4.3 B ng ho t tính sinh h c c a trà thành ph m 66 ii DANH M C HÌNH Hình 1.1 Cây sung Hình 1.2 Trà Tam th t Hình 1.3 Trà hịa tan Hà th Hình1.4 Trà g ng Hình 1.5 Trà đ ng S đ 1.1 Quy trình ch bi n trà túi l c 10 Hình 1.6: Hi n t ng c ng h ng p- -tocopherol 15 Hình 1.7: Quá trình peroxid hóa lipid 17 Hình 1.8 Hình thái vi khu n Escherichia coli 19 Hình 1.9 Hình thái Bacillus cereus d i kính hi n vi 20 S đ 2.1: S đ nghiên c u s n ph m trà túi l c t qu sung 23 S đ 2.2 Quy trình d ki n ch bi n trà túi l c t qu sung 24 S đ 2.3 Quy trình thu cao t ng 38 Hình 3.1 Qu sung 42 Hình3.2 Các m u sau trình ch n 45 Hình 3.3 Bi u đ so sánh hàm l Hình 3.4 Bi u đ th hi n s ng polyphenol sau công đo n ch bi n 55 nh h ng c a công đo n ch bi n đ n ho t tính ch ng oxy hóa c a s n ph m 56 Hình 3.5 So sánh ho t tính ch ng oxy hóa c a trà thành ph m v i nguyên li u, acid ascorbic BHT 57 Hình 3.6 Kh n ng kháng khu n c a cao sung 58 Hình 3.7 Kh n ng kháng khu n c a trà thành ph m 59 Hình 3.9 Trà túi l c t qu sung 62 S đ 4.1 S đ quy trìnhch bi n trà túi l c 64 iii Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y T V Nă Trà m t lo i s n ph m r t quen thu c v i ng ơng nói chung Trà đ i Vi t Nam nói riêng ng c s d ng toàn th gi i đ c xem m t lo i n mang tính tồn c u Do lo i th c u ng ph bi n th hai sau n iÁ c u ng c l c Hi n nay, vi c dùng trà khơng ch thói quen m th c mà dùng đ h tr cho s c kh e th th tr ng s n ph m trà r t đa d ng nguyên li u ch bi n trà khơng cịn bó h p trà xanh mà đ c đa d ng hóa t nguyên li u khác nh kh qua, hoa cúc, hoa artiso, c ng t, di p h châu, hà th ô, v.v… Qu sung (Ficus Glomerata) m t lo i qu dân dã vô quen thu c v i ng i Vi t Nam, có kh p ba mi n đ t n c Qu sung có v ng t, tính bình, có cơng d ng ki n t ích v , nhu n ph l i h u, nhu n tràng thông ti n, tiêu th ng gi i đ c đ c dân gian truy n mi ng v i nh ng thu c ch a ch ng b nh nh táo bón, đau h ng, s i m t, ung th , ti u đ ng, béo phì, v.v….Trong qu sung ch a nhi u khoáng ch t nh calcium, phosphor, vi l ng s t, ch t x vitamin nhóm B, C, A, E, K,v.v… acid béo thi t y u cho c th nh omega 3, omega phytosterol M c dù qu sung có nhi u l i ích nh ng giá tr s d ng ch a cao hi n th tr ng nh ng m t hàng v qu sung xanh r t h n ch Qu sung xanh đ c s d ng nhi u nh t ch đ làm sung chua ng t hay n u n Do nh m nâng cao giá tr s d ng c a lo i qu đ ng th i đa d ng hóa s n ph m trà th tr ng, đ tài ắNghiên c uăquyătrìnhăch ăbi nătrƠătúiăl căt ăqu ăsungă(Ficus Glomerata) kh oăsátăho tătínhă sinhăh căc aăs năph m” đ ng nhu c u h ng ngày c a ng c đ xu t nh m t o s n ph m ti n l i, ch t l ng t t đáp i tiêu sùng hi n M c đích: s n ph m trà túi l c đ c nghiên c u v i quy mơ phịng thí nghi m v i tr ng tâm gi i quy t v n đ liên quan đ n ch t l ng, t đ xu t quy trình hồn thi n v i thông s t i u SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y PH N I: T NG QUAN TÀI LI U T NGăQUANăV ăCÂYăSUNG 1.1 Phân lo i th c v t [3][14] Qu sung có tên khoa h c Ficus Glomerata thu c h dâu t m Phân lo i khoa h c:  Gi i: Plantae  B : Rosales  H : Moraceae  Chi: Ficus  Lồi: F.Race Hình 1.1 Cây sung căđi m hình thái [3][14] 1.2 Cây sung hay g i u đàm th ho c t qu đ ng, thu c h dâu t m Cây m c hoang d i vùng nhi t đ i c n nhi t đ i t i nh ng n i đ t m bìa r ng, nhi u nh t ven b ao, h sông su i 1.2.1 Thân Là thân g , thân to cành sum xuê, có cao t i 25-30m, đ ng kính thân t i 60-90cm V thân màu xám, nh n có ch a ng nh a m v i màu tr ng s a, d o v i g m m 1.2.2 Lá Lá đ n có kích th bánh t th c nh , mép nguyên ho c m t vài r ng c a Trên già ng có nh ng u l i ký sinh gây Các kèm hình tr ng m i mác, dài 1,5-2 cm, có màng lơng t Các r ng s m, m c so le, cu ng dài 2–3 cm, phi n có hình elip – tr ng ng c, elip hay elip h p, kích th c 10-14 x 3-4,5 cm, có lơng t cịn non, khơng lơng h i xù xì v già, màu l c s m g n tr c nh n nh i, g c hình nêm h i cùn, mép nguyên, nh n đ nh t i h i cùn Lá đ t đ SVTH: Tr n Th Ng c Ly c tu i th cao Trang Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ng34: ANOVA Table for CQ by ty le Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 28.3333 9.44444 43.12 Within groups 12.2667 56 0.219048 0.0000 Total (Corr.) 40.6 59 B ng 35: Table of Means for CQ by ty le with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error ty le Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -1:15 15 3.66667 0.120844 3.49549 3.83784 1:25 15 4.73333 0.120844 4.56216 4.90451 1:50 15 3.6 0.120844 3.42882 3.77118 1:75 15 2.8 0.120844 2.62882 2.97118 -Total 60 SVTH: Tr n Th Ng c Ly 3.7 Trang XXXI Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ng 36: Multiple Range Tests for CQ by ty le -Method: 95.0 percent Duncan ty le Count Mean Homogeneous Groups -1:75 15 2.8 X 1:50 15 3.6 X 1:15 15 3.66667 X 1:25 15 4.73333 X B ngă3.7.ăB ngăk tăqu ăhƠmăl HƠmăl ngăch tăkhơăhịaătan ng ch t khơ hịa tan % T l LL1 LL2 LL3 1:15 0.5 0.5 0.5 1:25 0.4 0.4 0.4 1:50 0.4 0.4 0.4 1:75 0.2 0.2 0.2 B ngă38 ANOVA Table for ck by ty le Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups 0.1425 0.0475 0.0 0.0 *********** 0.0000 Total (Corr.) SVTH: Tr n Th Ng c Ly 0.1425 11 Trang XXXII Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ngă39: Table of Means for ck by ty le with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error ty le Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -1:15 0.5 0.0 0.5 0.5 1:25 0.4 0.0 0.4 0.4 1:50 0.4 0.0 0.4 0.4 1:75 0.2 0.0 0.2 0.2 -Total 12 0.375 B ngă40:ăMultipleăRangeăTestsăforăckăbyătyăle -Method: 95.0 percent Duncan ty le Count Mean Homogeneous Groups -1:75 0.2 X 1:50 0.4 X 1:25 0.4 X 1:15 0.5 X Kh oăsátăth iăgianătríchăly B ng 41 K tăqu ăđánhăgiáăc măquanăc aăh iăđ ngătheoăch ătiêuăchoăđi măthangă 6ăb că5ăchoăth iăgianătríchăly i măthƠnhăviên Th iăgiană (phút) 10 11 12 13 14 15 3 3 3 3 3 3 4 4 4 4 5 SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang XXXIII Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y 4 5 5 4 4 5 4 5 4 5 4 4 4 4 4 3 3 3 4 4 3 B ng 42: ANOVA Table for CQ by thoi gian Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups 22.8556 4.57111 18.8 84 0.22381 20.42 0.0000 Total (Corr.) 41.6556 89 B ngă43 Table of Means for CQ by thoi gian with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error thoi gian Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -2 15 3.13333 0.12215 2.96157 3.3051 15 4.26667 0.12215 4.0949 4.43843 15 4.4 0.12215 4.22824 4.57176 15 4.4 0.12215 4.22824 4.57176 15 3.66667 0.12215 3.4949 3.83843 15 3.4 0.12215 3.22824 3.57176 -Total 90 SVTH: Tr n Th Ng c Ly 3.87778 Trang XXXIV Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ng 44: Multiple Range Tests for CQ by thoi gian -Method: 95.0 percent Duncan thoi gian Count Mean Homogeneous Groups -2 15 3.13333 X 15 3.4 XX 15 3.66667 15 4.26667 X 15 4.4 X 15 4.4 X X B ngă45:ăB ngăk tăqu ăhƠmăl HƠmăl ngăch tăkhơăhịaătan ng ch t khơ hịa tan % Th i gian (phút) LL1 LL2 LL3 0.2 0.2 0.2 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang XXXV Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ngă46:ăANOVA Table for ck by thoi gian Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.1 0.02 Within groups 0.0 12 0.0 *********** 0.0000 Total (Corr.) 0.1 17 B ngă47:ăTableăofăMeansăforăckăbyăthoiăgian with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error thoi gian Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -2 0.2 0.0 0.2 0.2 3 0.4 0.0 0.4 0.4 0.4 0.0 0.4 0.4 0.4 0.0 0.4 0.4 0.4 0.0 0.4 0.4 0.4 0.0 0.4 0.4 -Total 18 SVTH: Tr n Th Ng c Ly 0.366667 Trang XXXVI Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ngă48:ăMultipleăRangeăTestsăforăckăbyăthoiăgian -Method: 95.0 percent Duncan thoi gian Count Mean Homogeneous Groups -2 0.2 X 0.4 X 0.4 X 0.4 X 0.4 X 3 0.4 X PH ăL C 6:ăHO TăTệNHăCH NGăOXYăHịAăTHEOăPH NGăPHÁP ÁNHăB Tă G CăT ăDOăDPPH• [12][15][20] Ph Ph ng pháp đánh b t g c t DPPH• ph ng pháp đ n gi n, d th c hi n ng pháp dùng đ th c hi n ph n ng mang tính ch t sàng l c tác d ng ch ng oxy hóa c a m u nghiên c u th nghi m ban đ u Nguyênăt c: DPPH• (1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl ) g c t n đ nh, không t k t h p đ t o nh nhân t G c t có màu tím nh vào n t N • ch a ghép đơi Ch t có tác d ng ch ng oxy hóa s làm gi m màu c a DPPH• S m t màu g c t DPPH• k t h p v i m t H c a ch t nghiên c u đ t o thành DPPH d ng nguyên t Ho t tính đánh b t g c t c a ch t nghiên c u t l thu n v i đ m t màu c a DPPH• Xác đ nh b ng cách h p th b c sóng 516 nm (tìm tltk huhu) SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang XXXVII Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y Hình ăC ăch ăb tăg căt cădo Ho t tính ch ng oxy hóa đ HTCO(%)  c tính theo cơng th c: OD0  ODt x100 % OD0 Trong  ODo giá tr ODch ng: m t đ quang c a dung d ch DPPH• MeOH  ODt giá tr ODth : m t đ quang c a DPPH• m u th Chu năb ăthu căth ăvƠăcácăm uăđ iăch ng Dung d ch DPPH•: pha dung dich DPPH• 0,1mM ethanol b ng cách hịa tan 3,94 mg DPPH• ethanol cho vào bình đ nh m c đ nh m c cho đ 100ml sau đem bóng t i 30phút đ n đ nh dung d ch M u: kh o sát ho t tính đánh b t g c t gi a acid ascorbic BHT v i m u trà sung thành ph m cao ethanol Pha dung d ch có n ng đ g c 400µg/ml b ng cách cân 40mg m u pha ethanol đ nh m c t i 100ml, sau ti n hành pha loãng 2; 4; 16 l n B ngă36.ă ăphaăloưngăvƠăn ngăđ ăc aăm uăchu nă(acid ascorbic BHT) ăphaăloưngă(l n) SVTH: Tr n Th Ng c Ly N ngăđ ăm uăchu nă(µg/ml) 200 100 50 16 25 Trang XXXVIII Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y Ti n hành đo dung dich m u chu n (acid ascorbic BHT) theo b ng sau ti n hành l p l i l n đ i v i t ng dung d ch chu n: B ngă37:ăB ngăb ătríăthíănghi măkh oăsátăho tătínhăch ngăoxyăhóaăc aăd chă 2ml dung d ch chu n (µg/ml) 25 50 100 200 DPPH• 0,1mM (ml) 2 2 ngănghi m L c đ u, đ bóng t i nhi t đ phòng 30 phút o OD517nm SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang XXXIX Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y K tăqu : B ngă38:ăK tăqu ăđoăA(OD517nm) vƠă%ăđánhăb tăg căt ădo Nguyên li u A(OD517nm) M u tr ng 1.386 25 0.195 85.93 50 0.071 94.88 100 0.058 95.82 200 0.054 96.10 M u tr ng 1.097 25 0.988 9.936 50 0.976 11.03 100 0.955 12.94 200 0.810 21.16 M u tr ng 0.354 25 0.162 54.24 50 0.046 87.01 100 0.031 91.24 200 0.018 94.92 M u tr ng 0.939 25 0.818 12.87 50 0.749 20.23 100 0.653 30.46 200 0.540 42.49 Acid ascorbic BHT Cao t ng n %ăđánhăb t g c t N ngăđ (µg/ml) c Cao t ng c n SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang XL Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y M u tr ng 0.570 25 0.279 51.05 v i thông s t i 50 0.087 84.74 u 100 0.055 90.35 200 0.050 91.23 M u tr ng 0.525 25 0.258 50.86 s b v i thông 50 0.086 83.63 s t i u 100 0.056 89.33 200 0.048 90.86 M u tr ng 0.558 25 0.418 25.09 hoàn thi n v i 50 0.324 41.94 thông s t i u 100 0.153 72.58 200 0.065 88.35 M u tr ng 0.550 25 0.404 26.55 v i thông s t i 50 0.240 56.36 u 100 0.124 77.45 200 0.059 89.27 M u sau ch n M u sau s y M u sau s y M u sau SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang XLI Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y PH ăL C 7.QUÁăTRỊNHăTRệCHăLYăTHUăCAOăT NG Sung xanh sau phân lo i làm s ch S y/ph i khô C n 700 Trích ly L c chân khơng Bã Cơ đu i dung mơi Cao t ng Hình ăQuyătrìnhătríchălyăthuăcaoăt ng Cáchăti năhƠnh: nguyên li u sung xanh sau đ c thu hái đem v phân lo i theo màu lo i b qu h h i hay d p nát ti n hành ph i khơ trích dung môi c n 700 v i t l ngun li u dung mơi 1:6, trích l n m i l n ti ng, sau thu d ch đem quay đu i dung môi đ thu cao t ng B ngă39.ăHi uăsu tăph iăkhôănguyênăli u Kh i l ng t i (kg) 11 SVTH: Tr n Th Ng c Ly Kh i l ng khô (kg) 1.52 Hi u su t (%) 13.818 Trang XLII Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ngă40.Hi uăsu tătríchăcao Kh i l ng khô (g) Kh i l ng cao (g) Hi u su t (%) 12.364 17.31 140 PH ăL Că8 PH NGăPHÁPăFOLINậCIOCALTEUă NHăL NGăPOLYPHENOLă T NG Nguyên t c: Trong thành ph n thu c th Folin-Ciocalteu có ph c h p phospho-wolfarm- phosphomolybdat Ph c h p s b kh b i h p ch t phenol t o thành s n ph m ph n ng có màu xanh d t l thu n v i c ng, h p th c c đ i b c sóng 756nm Hàm l ng phenol m u ng đ màu Hóa ch t: - Thu c th Folin-Ciocalteu 10% - Dung d ch Na2CO3 2% - Ch t chu n acid gallic Cách ti n hành b trí thí nghi m: nh l ng polyphenol c a nguyên li u t cao t ng sau đ 700 Cân 10 mg cao t ng, đ nh m c xác 25ml b ng n c c t, đ c trích c n c dung d ch có n ng đ 400µg/ml, v i m u sung sau công đo n ch bi n trà thành ph m cân kh i l ng thích h p trích n ng c sơi đ đ t n ng 400µg/ml Ti n hành đ nh l polyphenol nh b ng sau: SVTH: Tr n Th Ng c Ly Trang XLIII Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ng 41:ăB ngăb ătríăthíănghi măđ nhăl ngănghi m dd m u 0,5 (mg/ml) Folin 10% (ml) ngăpolyphenolăc aănguyênăli u ngă0 LL1 LL2 LL3 1 2,5 2,5 2,5 2,5 2 L c đ u , đ yên 10 phút Na2CO3 2% (ml) L c đ u, bóng t i nhi t đ 450C 15 phút L c đ u trình o OD765nm D a vào đ m u Hàm l ng chu n acid gallic đ xác đ nh hàm l ng polyphenol t ng có m u đ (GAE) có 1mg cao đem đ nh l ng polyphenol t ng có c tính b ng đ ng polyphenol t ng c a cao nguyên li u theo hàm l m: kh i l ng cao đem đ nh l W: đ ng trình đ ng acid gallic ng, theo công th c sau: P: hàm l f(A): ph ng l ng ch t khô (%w/w) ng (mg) ng chu n m cao (%) V: th tích d ch đem đ nh l ng k: h s pha loãng K tăqu : ng chu n polyphenol y = 12.711x - 0.0103 R² = 0.9988 ng chu n polyphenol Giáătr ăOD765 0.8 0.6 0.4 0.2 -0.2 0.02 0.04 0.06 N ng đ acid gallic (mg/ml) Hình SVTH: Tr n Th Ng c Ly ăth ăđ Linear ( ng chu n polyphenol) ngăchu năpolyphenol Trang XLIV Báo cáo khóa lu n t t nghi p GVHD: Th.S Nguy n Th L Th y B ngă42.ăK tăqu ăđoăOD Nguyên li u Cao ethanol n A (OD c M u sau trình ch n v i thông s t i u M u sau q trình s y s b v i thơng s t i u M u sau trình s y hồn thi n v i thơng s t i u M u sau q trình v i thơng s t i u SVTH: Tr n Th Ng c Ly 765nm) Hàm l ng polyphenol (%w/w) 0.290 6.528 0.694 1.783 0.632 0.889 0.350 0.743 0.495 1.159 Trang XLV