Khảo sát hoạt tính sinh học và khả năng kháng khuẩn của tinh dầu từ cây sả chanh Cymbopogon citratus trồng tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam

Nghiên cứu này đã tiến hành khảo sát chất lượng và khả năng kháng khuẩn của tinh dầu từ cây Sả chanh (Cymbopogon citratus) trồng tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam như: Hòa Bình, Hà Nam, Nam Định. Kết quả cho thấy hàm lượng citral dao động từ 75,35 - 79,71% (thân Sả chanh) và 77,10 - 80,73% (lá Sả chanh).

BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM - HỘI NGHỊ KHOA HỌC QUỐC GIA LẦN THỨ DOI: 10.15625/vap.2020.00084 KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU TỪ CÂY SẢ CHANH Cymbopogon citratus TRỒNG TẠI MỘT SỐ TỈNH MIỀN BẮC VIỆT NAM Nguyễn Thị Thanh Mai1*, Trần Bảo Trâm1, Đỗ Thị Kim Trang1, Trần Văn Quảng1, Trương Thị Chiên1, Mai Thị Đàm Linh2 Tóm tắt: Nghiên cứu tiến hành khảo sát chất lượng khả kháng khuẩn tinh dầu từ Sả chanh (Cymbopogon citratus) trồng số tỉnh miền Bắc Việt Nam như: Hịa Bình, Hà Nam, Nam Định Kết cho thấy hàm lượng citral dao động từ 75,35 - 79,71% (thân Sả chanh) 77,10 - 80,73% (lá Sả chanh) Tinh dầu Sả chanh thu có khả chống oxy hóa với hàm lượng DPPH đạt 89,31% (thân Sả chanh) 69,31% (lá Sả chanh) Hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh thực phương pháp khuếch tán đĩa thạch, sử dụng 07 chủng vi sinh vật kiểm định: Enterococcus faecalis (ATCC33186), Shigella flexneri (ATCC- 12022), Escherichia coli (ATCC- 25922), Streptococcus pneumoniae (ATCC- 49619), Staphylococcus aureus (ATCC- 25923), Salmonella typhi (ATCC- 14028), Klebsiella pneumoniae (ATCC- 70063) Theo thực nghiệm cho thấy tinh dầu Sả chanh C citratus có khả ức chế phát triển vi khuẩn Gram (-) Gram (+) Trong đường kính vịng kháng khuẩn E faecalis, S flexneri, E coli, S pneumoniae, S aureus K pneumoniae, tinh dầu Sả chanh cao đạt 20 mm (D-d, mm) chủng vi khuẩn S flexneri S pneumoniae 20,5 mm Tinh dầu Sả chanh C citratus mẫu thu thập thí nghiệm trồng Hịa Bình có hoạt tính sinh học khả kháng khuẩn tốt cao so với tinh dầu Sả chanh C citratus trồng Hà Nam Nam Định Từ khóa: Hoạt tính kháng khuẩn, Sả chanh, thành phần hóa học, tinh dầu MỞ ĐẦU Sả chanh (Cymbopogon citratus) thuốc lâu năm thuộc họ Poaceae, phân bố toàn giới, đặc biệt nước khu vực nhiệt đới cận nhiệt đới (Wagdi et al., 2017) Trong y học cổ truyền, Sả chanh có vị the, cay, mùi thơm, tính ấm, có tác dụng làm mồ hôi, sát khuẩn, chống viêm, thông tiểu, hạ khí, tiêu đờm (Đỗ Tất Lợi, 2006) Do đó, Sả chanh sử dụng y học cổ truyền loại thuốc kháng khuẩn, chống viêm, ho, táo bón, tiêu chảy, cúm, sốt rét, đau dày (Đỗ Tất Lợi, 2006) Thành phần hóa học tinh dầu Sả chanh khác phụ thuộc nhiều vào yếu tố đất trồng, nhiệt độ, độ ẩm, khí hậu (Tajidin et al., 2012; Paviani et al., 2006), đó, ảnh hưởng đến chất lượng hoạt động kháng khuẩn tinh dầu thu Mặc dù có khác thành phần tinh dầu Sả chanh hàm lượng citral- hoạt chất tinh dầu Sả chanh dao động khoảng 30,0 - 93,76% (Negrelle & 1Trung tâm Sinh học thực nghiệm, Viện Ứng dụng Công nghệ Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội *Email: thanhmai193@yahoo.com 2Trường PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 681 Gomes, 2007) neral aldehyde (25 - 38%) - thành phần tạo mùi hương đặc trưng cho tinh dầu Sả chanh (Vyshali et al., 2016) Một đặc tính ưu việt tinh dầu Sả chanh có khả kháng lại số vi sinh vật, đặc biệt vi khuẩn gây bệnh Việc sử dụng loại tinh dầu chất chiết từ thực vật để kiểm soát mầm bệnh xu hướng phát triển tất yếu phù hợp với phát triển xã hội đại Nhiều nghiên cứu khả kháng khuẩn kháng nấm tinh dầu Sả chanh giới công bố (Tatiana et al., 2017, Vyshali et al., 2016) Tính kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh chứng minh diện số hoạt chất citral, phenol, terpen aldoketone (Tatiana et al., 2017) Để bắt kịp xu ứng dụng sản phẩm nguồn gốc tự nhiên, thân thiện môi trường an tồn cho người sử dụng, chúng tơi tiến hành nghiên cứu xác định số thành phần hóa học chính, hàm lượng hoạt chất đặc trưng khả kháng số vi khuẩn gây bệnh tinh dầu Sả chanh trồng số tỉnh miền Bắc Việt Nam như: Hịa Bình, Hà Nam Nam Định từ đưa kết so sánh chất lượng tinh dầu vùng trồng Sả chanh khác đề xuất hướng ứng dụng tinh dầu sả sản phẩm dược phẩm, mỹ phẩm, thực phẩm VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Mẫu Sả chanh (Cymbopogon citratus) thu hái tỉnh Hịa Bình (SHB), Hà Nam (SHN) Nam Định (SNĐ) sau 4-6 tháng trồng năm 2019 Các chủng vi sinh vật kiểm định Enterococcus faecalis (ATCC-33186), Shigella flexneri (ATCC-12022), Escherichia coli (ATCC-25922), Streptococcus pneumoniae (ATCC-49619), Staphylococcus aureus (ATCC-25923), Salmonella typhi (ATCC-14028), Klebsiella pneumoniae (ATCC-70063) cung cấp Bộ môn Vi sinh vật học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội 2.2 Phương pháp nghiên cứu Phương pháp tách chiết tinh dầu Thân củ tươi, tươi tách riêng cắt nhỏ Chưng cất phương pháp chưng cất lôi nước thời gian 3-5 áp suất thường (Bộ Y tế, 1974) thu tinh dầu thân Sả chanh làm khan Na2SO4 Xác định thành phần hóa học tinh dầu Sả chanh Sử dụng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS): Việc phân tích tinh dầu Sả chanh thực hệ thống thiết bị sắc ký khí GC/MS hãng Agilent Technologies HP 6890N Agilent Technologies HP 6890N ghép nối với Mass Selective Detector Agilent HP 5973 MSD Cột HP5 MS có kích thước 0,25 m x 30 m x 0,25 mm HP1 có kích thước 0,25 m x 30 m x 0,32 mm Chương trình nhiệt độ với điều kiện 60 oC/2 phút; tăng nhiệt độ oC/1 phút 220 oC, sau lại tăng nhiệt độ 20 oC/phút 260 oC; với He làm khí mang Xác định thời gian lưu chất sắc ký đồ BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM 682 giống với thời gian lưu chất biết, thực cách so sánh kiện phổ MS chúng với phổ chuẩn cơng bố có thư viện Willey/Chemstation HP (Adams., 2001) Mặt khác dựa tỷ lệ diện tích peak cấu tử xác định tỷ lệ % chất có mẫu phân tích Kết phân tích tiến hành Phịng thí nghiệm Hóa sinh Mơi trường - Trung tâm Sinh học Thực nghiệm, Viện Ứng dụng Công nghệ, Bộ Khoa học Công nghệ Khảo sát khả quét gốc tự DPPH Khả quét gốc tự tinh dầu Sả (thân, lá) thực theo phương pháp DPPH (2,2 - Diphenyl - - picrylhydrazyl): tinh dầu pha thành nồng độ 50, 100, 150, 200, 250 µL methanol Lượng mẫu sử dụng vào phản ứng 250 µL DPPH 0,006% 250 µL Hỗn hợp phản ứng ủ nhiệt độ phịng 60 phút tối, sau đo độ hấp thu quang phổ bước sóng 517 nm Khả quét gốc tự tính dựa vào hiệu suất phản ứng hàm lượng chất kháng oxy hóa tính tương đương vitamin C (Molyneux., 2004) Xác định hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh Khả kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh thực phương pháp khuếch tán đĩa thạch Nhỏ 100 µL dịch vi khuẩn kiểm định (đã ni qua đêm) vào đĩa petri chứa môi trường MPA (agar 20 g/l; cao thịt g/l; pepton g/l; NaCl g/l), trải Tiến hành khoan lỗ thạch đĩa, sau cho 100 µL tinh dầu Sả chanh vào giếng thạch đĩa petri, ủ °C để hoạt chất kháng khuẩn từ giếng thạch khuếch tán vào mơi trường, sau ủ đĩa petri 37 °C 24 h Hoạt tính kháng khuẩn xác định theo cơng thức: D - d (mm), D: đường kính vịng kháng khuẩn (mm), d: đường kính lỗ khoan (mm) Đối chứng sử dụng kháng sinh vancomycin (ĐC1) µg/mL ampicillin (ĐC2) 40 µg/mL Phương pháp xử lý số liệu Kết xử lý phần mềm Excel 2010, thí nghiệm lặp lại lần (n=3) KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khảo sát thành phần hóa học tinh dầu Sả chanh trồng số tỉnh miền Bắc Việt Nam Chất lượng dầu Sả chanh đánh giá dựa hàm lượng citral Citral kết hợp geranial (α-citral) aldehyde đồng phân (β-citral) Bằng phương pháp GC/MS nghiên cứu xác định số thành phần tinh dầu Sả chanh chiết xuất từ thân sả trồng số tỉnh phía Bắc Hịa Bình, Hà Nam Nam Định Kết thể Bảng Kết Bảng cho thấy hàm lượng citral tổng số tinh dầu Sả chanh dao động khoảng 75,35 - 79,71% (thân) 77,10 - 80,73% (lá) β-myrcene 2,6octadien-1-ol 3,7-dimethyl-acetate khơng tìm thấy thân Sả mà có dao động từ PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 683 9,96 - 11,15% 0,98 - 1,12% Một số thành phần cịn lại khơng tìm thấy lại có thân Sả chanh eudesm-7(11)-en-4-ol, caryopyllene, β-pinene 1,3,6octatriene 3,7-dimethyl Kết phù hợp với nghiên cứu Tajidin et al., 2012 với hàm lượng citral đạt 79,69%, myrcene 8,05% Và đồng thời phù hợp với TCVN 11425:2016 (Tiêu chuẩn tinh dầu Sả chanh), hàm lượng citral tối thiểu phải đạt 75% Theo Nguyễn Thị Huyền nnk (2015) cho thấy tinh dầu Sả chanh Nghệ An có hàm lượng Z-citral (61,62-66,66%), β-myrcene (4,98-16,99%) có hàm lượng citral thấp hàm lượng β-myrcene tương đương với kết nghiên cứu Bảng Thành phần hóa học tinh dầu Sả chanh SHB SHN SNĐ Thành phần Thân Lá Thân Lá Thân Lá hóa học (%) (%) (%) (%) (%) (%) α-citral 32,15 33,48 30,44 34,12 31,45 32,59 β-citral 47,56 48,25 44,91 42,98 44,19 45,99 β-myrcene 10,22 11,15 9,96 α-verbenol 2,97 5,18 3,12 4,85 2,58 4,17 Eudesm-7(11)-en-4-ol 9,12 9,09 9,02 Caryopyllene 4,08 3,92 3,87 β-pinene 2,05 1,94 1,3,6-octatriene 3,71,28 1,19 1,10 dimethyl 2,6-octadien-1-ol 3,71,12 0,98 1,05 dimethyl-acetate (-): Không xác định được, Tỉ lệ (%): Tính theo diện tích peak sắc kí Kết Bảng cho thấy hàm lượng hoạt chất tinh dầu Sả chanh trồng Hịa Bình cao so với tinh dầu Sả chanh trồng Hà Nam Nam Định Kết phản ánh khác chất lượng Sả vùng trồng khác 3.2 Khảo sát khả quét gốc tự DPPH tinh dầu Sả chanh Tiến hành khảo sát khả quét gốc tự DPPH (2,2-diphenyl-1 picrylhydrazyl) tinh dầu Sả chanh, kết thu Hình Hình Hình Khả quét gốc tự tinh dầu thân Sả chanh Hình Khả quét gốc tự tinh dầu Sả chanh 684 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM Kết Hình Hình cho thấy tất nồng độ thí nghiệm tinh dầu Sả chanh có khả quét gốc tự thân Sả chanh Tuy nhiên, khả quét gốc tự đạt cao 89,31% (thân Sả chanh) 69,31% (lá Sả chanh) nồng độ tinh dầu bão hòa Kết nghiên cứu phù hợp với kết Rao et al., 2009 báo cáo cho thấy khả quét gốc tự DPPH tinh dầu Sả chanh 85% Qua đó, cho thấy khả quét gốc tự tinh dầu thân Sả chanh trồng Hịa Bình cao Hà Nam Nam Định 3.3 Hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh Tiến hành nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu sả với 07 chủng vi khuẩn kiểm định: E faecalis, S flexneri, E coli, S pneumoniae, S aureus, S typhi, K pneumoniae Kết thể Bảng Chủng vi khuẩn ĐC1 ĐC2 E faecalis S flexneri E coli S pneumoniae S aureus S typhi K pneu Bảng Hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh Đường kính vịng vơ khuẩn D-d(mm) SHB SHN SNĐ Thân Lá Thân Lá Thân Lá 14,4±0,81 14,4±0,81 14,4±0,81 14,4±0,81 14,4±0,81 14,4±0,81 18±0,95 18±0,95 18±0,95 18±0,95 18±0,95 18±0,95 14±0,64 13±0,79 12±0,95 12±0,82 12±0,89 10±0,94 20±0,58 17±0,84 18±0,90 15±0,99 17±1,21 15±0,90 18±0,51 15±0,66 18±0,69 17±0,53 16±0,61 17±0,75 20,5±0,97 19±1,03 19±0,97 17±1,15 16,5±0,79 15±0,86 14±0,88 11±0,64 15±0,65 14±0,76 10±0,54 8±0,81 11±0,72 10±0,77 10±0,83 10±0,94 (-): Khơng có hoạt tính kháng khuẩn Kết Bảng cho thấy tinh dầu Sả chanh có khả ức chế phát triển 06/07 chủng vi khuẩn kiểm định bao gồm E faecalis, S flexneri, E coli, S pneumoniae, S aureus, K pneumoniae, khả ức chế phát triển S typhi Tinh dầu SHB có khả ức chế mạnh phát triển 02 chủng vi khuẩn S flexneri S pneumoniae với đường kính vịng kháng khuẩn đạt 20 mm 20,5 mm Ở tinh dầu thân Sả chanh tinh dầu Sả chanh 19 mm vi khuẩn S pneumoniae Đặc biệt, số tinh dầu sả có khả kháng khuẩn cao đối chứng - chất kháng sinh thường dùng nhiều trị nhiễm khuẩn (như đường kính vịng vơ khuẩn SHB với vi khuẩn S flexneri 20 mm kháng sinh ampicilin 18mm) Nghiên cứu Tatiana et al., 2017 cho thấy tinh dầu Sả chanh có khả ức chế phát triển V cholera, S paratyphi, E coli, B subtilus, S aureus Các nghiên cứu nước cho thấy khả kháng khuẩn nhiều loại tinh dầu sả khác nhau, kháng vi khuẩn Gram âm, vi khuẩn Gram dương, nấm men nấm mốc (Tatiana et al., 2017, Vyshali et al., 2016) Kết cho thấy tiềm ứng dụng loại tinh dầu Sả chanh thích hợp cho việc sản xuất loại nước rửa tay diệt khuẩn - sản phẩm có nhu cầu lớn PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI S pneumoniae E coli S aureus 685 S flexneri Hình Khả kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh KẾT LUẬN Hàm lượng số hoạt chất tinh dầu Sả chanh trồng Hịa Bình cao so với tinh dầu thu từ Sả chanh trồng Hà Nam Nam Định với hàm lượng citral đạt 79,71% (thân) 80,73% (lá) Tinh dầu thu thân Sả chanh có khả quét gốc tự với hàm lượng DPPH đạt 89,31% (thân) 69,31% (lá) Tinh dầu Sả chanh trồng Hịa Bình có khả ức chế mạnh phát triển 02 chủng vi khuẩn S flexneri S pneumoniae với đường kính vịng vô khuẩn đạt 20 mm 20,5 mm; vi khuẩn S pneumoniae 19 mm mẫu tinh dầu thân Sả chanh Tinh dầu Sả chanh có khả kháng 06/07 chủng vi khuẩn kiểm định sử dụng bao gồm vi khuẩn Gram âm Gram dương Lời cảm ơn: Nghiên cứu thực với hỗ trợ kinh phí từ nhiệm vụ KH&CN cấp Bộ Khoa học Công nghệ: “Đánh giá chất lượng tinh dầu sả thu hồi từ phương pháp chưng cất khác nhau” TÀI LIỆU THAM KHẢO Adams R.P., 2001 Identification of essential oil components by Gas Chromatography/ Quadrupole Mass Spectrometry Allured Publishing Corp, Carol Stream, IL Bộ Y tế, 1974 Dược điển Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội Nguyễn Thị Huyền, Trần Thị Phương Chi., 2015 Các cấu tử dễ bay từ loài Sả chanh (Cymbopogon citratus) Nghệ An Báo cáo khoa học Hội nghị Khoa học toàn quốc Sinh thái Tài nguyên sinh vật lần thứ 6: 1145-1149 Đỗ Tất Lợi, 2006 Cây thuốc vị thuốc Việt Nam NXB Y học, Hà Nội, Molyneux P., 2004 The use of the stable free radical diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity Songklanakaric Journal of Science Technology, 26: 211-219 Negrelle R R., Gomes E C., 2007 Cympopogon citratus (DC) Stapf chemical composition and biological activities Revista Brasileira de Plantas Medicinais, 9(1): 80-92 Paviani L, Pergher S B C., Dariva C., 2006 Application of molecular sieves in the fractionation of lemongrass oil from high-pressure carbon dioxide extraction Brazilian Journal of Chemical Engineering, 23(2): 219-225 Prakash A., Rigelhof F., Miller E., (2000) Antioxidant activity Medallion laboratories analytical progress, Minnesota, 19(2): 1-4 BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM 686 Rao B S., Shanbhoge R, Rao B N., Adiga S K., Upadhya D., Aithal B K., Kumar M R., 2009 Preventive efficacy of hydroalcoholic extract of Cymbopogon citratus against radiationinduced DNA damage on V79 cells and free radical scavenging ability against radicals generated in vitro Human & experimental toxicology, 28(4): 195-202 Tajidin N E., Ahmad S H., Rosenani A B., Azimah H., Munirah M., 2012 Chemical composition and citral content in lemongrass (Cymbopogon citratus) essential oil at three maturity stages African Journal of Biotechnology, 11(11): 2685-2693 Tatiana M T., Paco N R., Juan C C., María de L P., 2017 Biological activity of Cymbopogon citratus (DC) stapf and its potential cosmetic activities International Journal of Phytocosmetics and Natural Ingredients, 3(1): 1-7 Vyshali P., Suchetha M., Thara Saraswathi K J., 2016 Evaluation of antioxidant and antimicrobial properties in Cymbopogon citratus (DC.) International Journal of Botany Studies, 1(7): 35-41 Wagdi S S, Sabri S., Heba M A., 2017 Chemical composition evaluation of Egyptian lemongrass, Cymbopogon citratus, essential oil International Journal of Scientific & Engineering Research, 8(11): 630-634 DETERMINATION OF BIOLOGICAL ACTIVITIES AND ANTIMICROBIAL ABILITY OF Cymbopogon citratus ESSENTIAL OIL GROWN IN NORTHERN VIETNAM Nguyen Thi Thanh Mai1,*, Tran Bao Tram1, Do Thị Kim Trang1, Tran Van Quang1, Truong Thi Chien1, Mai Thi Dam Linh2 Abstract: This study assesses the quality and antibacterial ability of cymbopogon citrates essential oil extract Samples were collected from Northern provinces in Vietnam such as: Hoa Binh, Ha Nam, and Nam Dinh The results showed that the citral concentration of Cymbopogon citratus essential oil ranged from 75.35 to 79.71% (in stems) and 77.10 - 80.73% (in leaves) By using a DPPH assay, antioxidant capacity of Cymbopogon citratus essential oil was tested resulting in a DPPH radical scavenging content of 89.31% (in stem) and 69.31% (in leaves) Cymbopogon citratus essential oil had antibacterial effect on both Gram negative and Gram positive bacteria This study reported that oil extract from Cymbopogon citratus had an antibacterial effect against E faecalis, S flexneri, E coli, S pneumoniae, S aureus and K pneumoniae (the inhibition zones of plant extracts were 20.5 mm, higher than those of antibiotics) but did not have this effect against S typhi Biological activity and antibacterial ability of Cymbopogon citratus essential oil grown in Hoa Binh is especially good and higher quality than in Ha Nam and Nam Dinh Keywords: Cymbopogon citratus, antibacterial, chemical composition, essential oil 1Centre for Experimental Biology, National Center for Technological Progress of Science, Vietnam National University, Hanoi *Email: thanhmai193@yahoo.com 2University ... vi khuẩn gây bệnh tinh dầu Sả chanh trồng số tỉnh miền Bắc Việt Nam như: Hịa Bình, Hà Nam Nam Định từ đưa kết so sánh chất lượng tinh dầu vùng trồng Sả chanh khác đề xuất hướng ứng dụng tinh dầu. .. aureus 685 S flexneri Hình Khả kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh KẾT LUẬN Hàm lượng số hoạt chất tinh dầu Sả chanh trồng Hịa Bình cao so với tinh dầu thu từ Sả chanh trồng Hà Nam Nam Định với hàm lượng... cho thấy khả quét gốc tự DPPH tinh dầu Sả chanh 85% Qua đó, cho thấy khả quét gốc tự tinh dầu thân Sả chanh trồng Hịa Bình cao Hà Nam Nam Định 3.3 Hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu Sả chanh Tiến