Nghiên cứu sự lưu hành của Avian Metapneumovirus (aMPV) ở gà nuôi tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam

Avian Metapneumovirus (aMPV) là một trong những nguyên nhân gây hội chứng sưng phù đầu ở gà. Mục tiêu của nghiên cứu này nhằm khẳng định sự có mặt của aMPV tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam. Bằng kỹ thuật ELISA và RT-PCR đã phát hiện được kháng thể kháng aMPV và virus trong đàn gà.

Vietnam J Agri Sci 2020, Vol 18, No 7: 520-528 Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 2020, 18(7): 520-528 www.vnua.edu.vn NGHIÊN CỨU SỰ LƯU HÀNH CỦA AVIAN METAPNEUMOVIRUS (aMPV) Ở GÀ NUÔI TẠI MỘT SỐ TỈNH MIỀN BẮC VIỆT NAM Cao Thị Bích Phượng1*, Lê Bá Hiệp2, Huỳnh Thị Mỹ Lệ1, Nguyễn Văn Giáp1 Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Công ty Cổ phần Thú y Xanh - Greenvet * Tác giả liên hệ: phuong.caotb@gmail.com Ngày chấp nhận đăng: 24.06.2020 Ngày nhận bài: 18.05.2020 TÓM TẮT Avian Metapneumovirus (aMPV) nguyên nhân gây hội chứng sưng phù đầu gà Mục tiêu nghiên cứu nhằm khẳng định có mặt aMPV số tỉnh miền Bắc Việt Nam Bằng kỹ thuật ELISA RT-PCR phát kháng thể kháng aMPV virus đàn gà Kết kiểm tra 85 gà từ 5-12 tuần tuổi chưa tiêm phịng vacxin aMPV cho thấy có lưu hành kháng thể aMPV cao (25,88%) Kết RT-PCR phát 3/85 mẫu dương tính với aMPV (3,53%) Các kết tìm hiểu triệu chứng bệnh tích cho thấy gà nhiễm aMPV có biểu tập trung đường hô hấp Biểu sưng phù xung quanh mắt thường gặp Kết nghiên cứu sở cho cơng tác chẩn đốn bệnh, khuyến cáo người chăn ni sử dụng vacxin phịng bệnh phù hợp để hạn chế thiệt hại kinh tế aMPV Từ khóa: ELISA, RT-PCR, avian pneumovirus aMPV, Việt Nam Prevalence of Avian Metapneumovirus (aMPV) in Chickens in some Northern Provinces of Vietnam ABSTRACT Avian Metapneumovirus (aMPV) is one of the etiological agents of the swollen head syndrome (SHS) in chickens The aim of this study was to confirm the presence of aMPV in some northern provinces of Vietnam By using ELISA and RT-PCR techniques, the study detected molecular and serology of aMPV in chickens A result of testing 85 chickens aged from to 12 weeks without aMPV vaccination showed that 22 chickens (25.88%) had aMPV antibody In contrast, out of 85 swab samples tested only (3.53%) were positive to aMPV by RT-PCR Clinical signs and gross pathology indicate that chickens suspected to be infected with aMPV are concentrated in the upper respiratory tract Swelling of the periorbital and infraorbital is the most common The research result is providing a scientific basis for diagnosing and recommending to use proper vaccines to reduce the economic losses due to aMPV Keywords: ELISA, RT-PCR, avian pneumovirus aMPV, Vietnam ĐẶT VẤN Bnh v ỵng hụ hỗp thỵng gõy thit họi kinh tế đáng kể cho ngành chën nuôi gà lm giõm sc khỏng, giõm sinh trỵng v nởng suỗt tht trng, tởng t l t vong (Sid & cs., 2015; Furian & cs., 2018) Một số nguyên nhân gõy bnh ỵng hụ hỗp gia cổm nhỵ cỳm gia cỉm, Newcastle disease, viêm khí qn 520 truyền nhiễm (Infectious Laryngotracheitis ILT), viêm phế quân truyền nhiễm (Infectious Bronchitis - IB), viờm ỵng hụ hỗp mọn tớnh (Chronic Respiratory Disease CRD), Ornithobacterium rhinotracheale (ORT), sổ müi truyền nhiễm (Infectious Coryza - IC)… cò nhiều nghiên cĀu đề cêp (Đào Thð Hâo, 2008; Nguyễn Thð Lan & cs., 2016; Nguyễn Thð Loan & cs., 2016) Cao Thị Bích Phượng, Lê Bá Hiệp, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Nguyễn Văn Giỏp Trong nhng nởm gổn ồy, vỗn ni cm nhúm bnh hụ hỗp phc hp g l hi chng sỵng phự ổu (Swollen Head Syndrome SHS) avian metapneumovirus (aMPV) gây Bệnh cịn có tên gọi khác Turkey rhinotraccheitis (TRT), avian pneumovirus (APV), avian rhinotracheitis (ART) (Jones & Rautenschlein, 2013) ỵc phỏt hin lổn ổu tiên vào nhĂng nëm 1970 ć Nam Phi (Buys & cs., 1980) nhĂng nëm gæn đåy, báo cáo hi chng sỵng phự ổu g tởng nhanh nhiu quc gia trờn th gii nhỵ Hy Lọp (Tucciarone & cs., 2017), Ethiopia (Hutton & cs., 2017), Ai Cêp (Abdelmoez & cs., 2019)… aMPV virus thuộc họ Paramyxoviridae, họ phý Pneumoviridae, giống Metapneumovirus Đåy virus có ARN sợi đĄn åm, khơng phån độn vĆi hệ gen dài không 14kb, có vó bọc ngồi (Cook & cs., 1993) Virus gõy nhim trựng ỵng hụ hỗp trờn din rng đối vĆi gà tây, gà số loài chim khỏc Mc nghiờm trng cỷa cỏc dỗu hiu lõm sng b õnh hỵng phổn ln bi s k phỏt cỷa mổm bnh th cỗp (Jones & cs., 1988; Cook & Cavanagh, 2002) Hi chng sỵng phự ổu cú th xõy g mi la tui, c trỵng bi hin tỵng sỵng cỏc mụ quanh hc mớt v xoang ổu mt, tro c, mỗt phỵng hỵng (Morley & Thomson, 1984) Bnh khụng chợ lm giõm nởng suỗt g tht m cũn lm giõm sõn lỵng v chỗt lỵng trĀng ć gà đẻ (Cook & Cavanagh, 2002) Theo hiểu biết cûa chúng tôi, thąi điểm này, täi Vit Nam chỵa cũ bỏo cỏo no v hi chng sỵng phự ổu g aMPV gõy Vỡ vờy, nghiờn cu ny ỵc thc hin nhỡm khợng nh s diện cûa aMPV ć đàn gà nuôi täi số tỵnh miền Bíc Việt Nam bìng kỹ tht ELISA v RT-PCR - Sinh phốm, húa chỗt dựng cho phõn Āng RT- PCR: (i) TRIzol™ Reagent (15596026, Invitrogen); Chloroform (102445, Merck Millipore); 2-propanol (109634, Merck Millipore); Ethanol 75%; nỵc 3D (Deionized Double Distilled Water); (ii) Random hexamers (N8080127, Invitrogen); kit M-MLV Reverse Transcriptase (28025013, Invitrogen); (iii) Kit MaximeTM PCR PreMix (i-Taq) (25025, iNtRON Biotechnology, Hàn Quốc); (iv) Dung dðch nhuộm RedsafeTM Nucleic Acid Staining Solution (21141, iNtRON Biotechnology, Hàn Quốc); cp mi c hiu gen G (kớch thỵc 448bp) cỷa virus theo nghiên cĀu công bố (Bayon-Auboyer & cs., 2000) vĆi thông tin ć bâng 2.2 Nội dung nghiờn cu - Nghiờn cu s lỵu hnh khỏng th kháng aMPV ć gà ni täi số tỵnh miền Bíc Việt Nam - Phát aMPV méu bệnh phèm bìng phân Āng RT-PCR - Nghiên cĀu triệu chĀng bnh tớch cỷa g mớc bnh sỵng phự ổu aMPV gây 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Thu thp mu Mộu nghiờn cu ỵc lỗy ngộu nhiờn t nhng n g 5-12 tuổn tui, chỵa ỵc s dýng vacxin phòng bệnh aMPV bao gồm huyết thanh; dðch swab ỵng hụ hỗp trờn Vi nhng g cú triu chng sỵng phự ổu cũn thu thờp thờm mộu xỵng ng cun mỹi, khớ quõn, phi Mộu ỵc vờn chuyn v phịng thí nghiệm để thăc nghiên cĀu PHNG PHP NGHIấN CU Phỵng phỏp kim tra triệu chĀng lâm sàng mổ khám quan sát bệnh tích đäi thể theo Tiêu chuèn Việt Nam mã số TCVN 8402:2010 2.1 Vật liệu 2.3.2 Kỹ thuật ELISA - Huyết bệnh phèm tÿ gà thu thêp tÿ nởm 2019 ti thỏng 02 nởm 2020 Qui trỡnh ỵc thc hin theo hỵng dộn cỷa nh sõn xuỗt, túm tớt gm cỏc bỵc sau: (i) pha loóng mộu vi Dilution Buffer, thêm vào đïa; (ii) û 30 phút ć nhiệt độ phịng, rāa bìng Wash solution; (iii) thêm Conjugate 1X; Kit ELISA ID Screen avian metapneumovirus Indirect 5P (IDVET_MPVS5P, IDvet) 521 Nghiên cứu lưu hành Avian Metapneumovirus (aMPV) gà nuôi số tỉnh miền Bắc Việt Nam Bâng Mồi đặc hiệu để phát aMPV Tên mồi Trình tự 5’- 3’ Vị trí nucleotide Ga CCGGGACAAGTATCTCTATGG 2-19 Gy TCTCGCTGACAAATTGGTCCTGA (iv) û 30 phút ć nhiệt độ phòng, rāa; (v) thêm Substrate Solution; (vi) û 15 phút ć nhiệt độ phòng, ý tránh ánh sáng; (vii) thêm Stop solution để dÿng phân Āng Kt quõ ỵc c bỵc súng 450nm S cú mặt cûa kháng thể kháng aMPV méu huyết ỵc xỏc nh bỡng mờt quang (OD- optical density) trờn c s tớnh toỏn t s dỵng tớnh (S/P) Nu S/P 0,20 ỵc xem l mộu õm tớnh, S/P >0,20 ỵc xem l mộu dỵng tớnh 2.3.3 Phng phỏp RT-PCR a Tỏch ARN tng s ARN ỵc tỏch chit bỡng TRIzol Reagent (theo hỵng dộn cỷa nh sõn xuỗt) vi cỏc bỵc chớnh nhỵ sau (i) Giõi phúng ARN bìng cách bổ sung 750µl dung dðch Trizol vào 250àl huyn dch mộu 10%, ng nhỗt bỡng cỏch vortex; (ii) Tách pha ARN bìng 200µl Chloroform, vortex để đồng nhỗt; (iii) tỷa ARN thu ỵc bỵc (ii) Bỡng 500µl 2-propanol, giĂ ć -20C/10 phút; (iv) rāa tûa ARN bỡng 1ml ethanol 75% Cỏc bỵc t (ii) n (iv) ỵc ly tõm iu kin 12.000 vũng/phỳt 10 phỳt 4C Hũa tan tỷa ARN bỡng 30àl nỵc 3D bâo quân ć -70C b Phương pháp tổng hp cDNA cDNA ỵc tng hp s dýng b Kit MMLV Reverse Transcriptase sā dýng mồi Random hexamer theo quy trỡnh cỷa nh sõn xuỗt nhỵ sau: Trn 10àl ARN vĆi 2µl mồi Random hexamer, ly tâm nhẹ để máy PCR vĆi chu trình nhiệt 70C vđng phỳt, sau ũ lỗy thờm vo 4àl 5X First Strand buffer, 2µl DDT, 1µl dNTP, 1µl M-MLV RT ng nhỗt mộu v mỏy PCR vi chu trình nhiệt 37C gią 70C - 15 phút c Phương pháp PCR Phân Āng PCR vĆi cặp mồi Ga/Gy ó ỵc ti ỵu nng mi v nhit mi, s dýng i 522 449-427 chng dỵng l vacxin Nemovac Thnh phổn phõn ng PCR (20àl) ỵc phi trn theo hỵng dộn cỷa nh sõn xuỗt, ũ: 17àl nỵc 3D + 1àl mi Ga + 1àl mi Gy + 1µl cDNA méu tách chiết Chu trình nhiệt cho phõn ng PCR ỵc túm tớt nhỵ sau: (i) 94C phút; (ii) 35 chu kì (94C 20 giây, 50C 30 giây, 72C 30 giây); (iii) 72C phỳt Sõn phốm PCR ỵc phõn tớch bỡng phỵng phỏp in di thọch agarose 1,5%, có bổ sung dung dðch nhuộm RedsafeTM 2.3.4 Phân tích trỡnh t gen Sõn phốm PCR tinh sọch ỵc giõi trỡnh t theo hai chiu (xuụi v ngỵc) bỡng phỵng pháp Sanger (thăc täi Công ty 1st BASE, Malaysia) Trỡnh t nucleotide ỵc phõn tớch bỡng chỵng trỡnh BioEdit v7.1.3.0 (Hall, 1999) cĄ sć đối chiếu so sánh (i) Gia trỡnh t nucleotide ỵc giõi trỡnh t theo chiu xuụi v chiu ngỵc v (ii) Vi trỡnh t gen mã hóa protein G tham chiếu 2.3.5 Xử lý s liu S liu ỵc tớnh toỏn v x lý qua phæn mềm Microsoft Excel 2016 So sánh tỷ l bỡng phỵng phỏp Chi square test (2) s dýng phæn mềm Minitab 16 2.4 Địa điểm nghiên cứu Bộ môn Vi sinh vêt - Truyền nhiễm, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tỷ lệ lưu hành kháng thể kháng aMPV gà nuôi số tỉnh miền Bắc Việt Nam Để phát kháng thể kháng aMPV, nghiên cĀu khâo sát 85 gà thuộc trang träi täi Gia Bình (Bíc Ninh), Läc Thûy (Hđa Bình) ụng Triu (Quõng Ninh) thu ỵc kt quõ bõng Cao Thị Bích Phượng, Lê Bá Hiệp, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Nguyễn Văn Giáp Bâng Lưu hành huyết học kháng thể kháng aMPV số địa phương Địa phương Tổng số mẫu Số mẫu dương Tỷ lệ (%) Số trại Số trại dương tính Tỷ lệ (%) Đông Triều 36 11,11 66,67 Gia Bình 19 31,58 2 100,00 Lạc Thủy 30 12 40,00 2 100,00 Tổng 85 22 25,88 85,71 Bõng cho thỗy ó phỏt hin kháng thể kháng aMPV 22/85 méu huyết gà thu thờp, chim 25,88% Tỗt cõ cỏc g khõo sỏt u trờn tuổn tui v khụng ỵc tiờm vacxin phịng bệnh aMPV gåy đị să có mặt cûa kháng thể đặc hiệu ć nhĂng gà kết quâ cûa việc phĄi nhiễm virus tă nhiờn S lỵu hnh huyt hc cỷa aMPV cỹng ỵc bỏo cỏo nhiu quc gia trờn th gii Bangladesh, t l dỵng tớnh huyt hc vi kháng thể kháng aMPV đàn gà 53,29% (Ali & cs., 2019), cao hĄn hỵn so vĆi báo cáo cûa nghiên cĀu Tuy nhiên, tỷ lệ thu ỵc khỏ tỵng ng vi cỏc ghi nhờn tọi Jordan (Gharaibeh & Algharaibeh, 2007) Ai Cêp (Nagy & cs., 2018) 21,7% Trong khâo sát xác đðnh 6/7 trang trọi thu thờp cú ớt nhỗt mt mộu huyt dỵng tớnh (giỏ tr S/P 0,2) vi khỏng th khỏng aMPV, tỵng ỵng 85,71% c bit, Gia Bỡnh, Lọc Thỷy, 2/2 trang trọi (100%) dỵng tớnh huyt hc vi aMPV ũ t l dỵng tớnh cá thể cao tÿ 31,58-40% Tuy nhiên, hän chế cỷa nghiờn cu ny l s lỵng mộu thu thờp chỵa ỷ ln nờn mc dỵng tớnh huyt hc khụng phõn ỏnh chớnh xỏc t l lỵu hnh khỏng th khỏng aMPV thc tọi cỏc a phỵng cũ kớch thỵc 448bp, ỳng vi kớch thỵc ó ỵc cụng b trỵc ồy cỷa (Mayahi & cs., 2017) Vỡ chỵa cị cơng bố să có mặt cûa aMPV täi Việt Nam, để khỵng đðnh tính đặc hiệu cûa phõn ng, sõn phốm PCR ỵc giõi trỡnh t gen (Hình 1B) Kết quâ giâi trình tă gen sân phèm RT- PCR cho đỵnh tín hiệu rõ ràng Phân tớch trỡnh t nucleotide thu ỵc kt quõ tỵng ng ~96% vĆi chûng aMPV ngân hàng gen (Hình 2) Nhỵ vờy, phõn ng RT-PCR l c hiu, cũ độ tin cêy cao, có giá trð chèn đốn Vi 85 mộu kim tra chợ cú mộu dỵng tính vĆi aMPV, chiếm tỷ lệ 3,53% Kết quâ phù hợp vĆi công bố cûa Abdelmoez & cs (2019) cỹng chợ phỏt hin ỵc aMPV 12,5% mộu swab bệnh phèm gà täi Ai Cêp Kết quâ RT-PCR giâi thích đặc điểm thâi virus chợ xõy thi gian tỵng i ngớn (3-4 ngày) ć gà nhiễm aMPV (Cook & cs., 1993; Naylor & cs., 1997; Catelli & cs., 1998) Kết quâ cỹng ó ỵc chng minh bỡng gõy nhim thc nghim aMPV ć gà cûa số tác giâ, chỵ phát hin ỵc virus ti a sau ngy gõy nhim (Majo & cs., 1995; Htut Aung & cs., 2008; Gharaibeh & Shamoun, 2012) 3.2 Xác định có mặt aMPV mẫu bệnh phẩm 3.3 Xác định lưu hnh ca aMPV bng Kt quõ huyt hc nhỵ ó trỡnh by trờn chng tú cú s lỵu hành cûa aMPV đàn gà Tuy nhiên, để khỵng đðnh chíc chín să có mặt cûa virus này, chúng tơi sā dýng phân Āng RT-PCR Hình 1A cho thỗy cú mộu dỵng tớnh vi aMPV, sõn phốm PCR thu ỵc Vi mi g nghiờn cu, mỏu v dch swab hổu hng (hoc bnh phốm ỵng hụ hỗp trờn) ng thi ỵc lỗy kim tra s lỵu hnh kháng thể să có mặt cûa virus Kết quâ tng hp ỵc trỡnh by hỡnh v bõng phân ứng RT-PCR ELISA 523 Nghiên cứu lưu hành Avian Metapneumovirus (aMPV) gà nuôi số tỉnh miền Bắc Việt Nam Ghi chú: (A) sân phẩm RT- PCR với mẫu bệnh phẩm, đối chứng (+) đối chứng âm (-), M: Marker (100bp); (B) giân đồ kết quâ giâi trình tự sân phẩm PCR Hình Kết quâ RT- PCR với mẫu thực địa Ghi chú: Trình tự nucleotide phân tích phần mềm BLAST, truy cập täi địa https://blast.ncbi nlm.nih.gov/Blast.cgi Hình Kết q phân tích tương đồng trình tự nucleotide sân phẩm PCR Bâng Kết quâ tổng hợp phát aMPV phân ứng RT-PCR Địa phương Tổng số mẫu Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) Số trại Số trại dương tính Tỷ lệ (%) Đơng Triều 36 5,56 66,67 Gia Bình 19 0,00 0,00 Lạc Thủy 30 3,33 50,00 Tổng 85 3,53 42,86 Bâng Kết quâ tổng hợp phân ứng RT-PCR ELISA Số mẫu PCR dương tính Tỷ lệ (%) ELISA dương tính Tỷ lệ (%) Gà có triệu chứng 42 2,38 17 40,48 Khơng có triệu chứng 43 4,65 11,63 Tổng 85 3,53 22 25,88 Tình trạng bệnh 524 Cao Thị Bích Phượng, Lê Bá Hiệp, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Nguyễn Văn Giáp Hình Tỷ lệ phát mẫu dương tính với aMPV phân ứng ELISA v RT-PCR Nghiờn cu ny khõo sỏt 85 g nhỵng khơng cị gà đồng thąi vÿa có mặt virus va lỵu hnh khỏng th khỏng aMPV c th Trong 42 g cú triu chng ỵng hụ hỗp cỹng chợ phỏt hin mộu dỵng tớnh aMPV (3,53%) v t l lỵu hnh huyt hc nhúm g ny l 40,48% Tuy nhiờn, 2/3 mộu dỵng tớnh vi virus aMPV ỵc phỏt hin nhúm g khụng cú triu chng lõm sng Kt quõ ny tỵng t vi số báo cáo giĆi Hutton & cs (2017) cỹng bỏo cỏo s lỵu hnh huyt hc aMPV l 21,9% nhỵng tỗt cõ cỏc mộu swab õm tớnh kim tra bỡng RT-PCR Tỵng t Atterby (2012) cüng chỵ phát 1/66 méu có mặt virus t l lỵu hnh khỏng th khỏng aMPV trờn 85% Nghiên cĀu cûa Jones & cs (1988) khỵng đðnh kháng thể đáp Āng sau nhiễm virus kéo dài hĄn nhĂng gà míc bệnh cho kết quâ dỵng tớnh vi ELISA nhỵng ồm tớnh vi RT-PCR Hn nĂa, bệnh tiến triển nặng, bệnh phèm cha mt lỵng ln vi khuốn k phỏt, virus ó thâi, khơng cịn tồn täi nĂa Do vêy, việc phỏt hin aMPV bỡng phõn ng RT-PCR phý thuc rỗt nhiu vo thi im lỗy mộu, c bit g cú triu chng sỵng phự ổu giai oọn hỡnh thành bã đêu khò khën (Catelli & cs., 1998) 3.4 Triệu chứng, bệnh tích gà mắc aMPV Khi quan sỏt cỏc nhng g dỵng tớnh RTPCR hoc cũ lỵu hnh khỏng th khỏng aMPV v õm tớnh vi cỏc mổm bnh khỏc (kt quõ khụng ỵc trỡnh by) cú th thỗy g thỵng cú triu chng hụ hỗp, hớt hi, hỏ mm th (Hỡnh 4.A.1), hin tỵng sỵng ổu, sỵng mớt, chõy nỵc mớt, dớnh mớ mớt (Hỡnh 4.A.2-A.6) Chính vêy, làm gà hän chế să lọi, giõm ởn, g khụng quỏ gổy, chung thỵng đĀng im góc, û rü, mệt mói Theo nghiên cĀu gây bệnh thăc nghiệm aMPV ć gà cûa Majo & cs (1995), nhng biu hin hụ hỗp ỵc quan sỏt t 3-6 ngy sau gõy nhim, xuỗt hin dch nhæy ć müi, gà thć hổn hển, há miệng để th Aung (2007) cỹng quan sỏt thỗy triu chng hụ hỗp t ngy th sau gõy nhim, g bớt ổu ỷ rỹ, ho, chõy nỵc mỹi Ngy th 6, đa số gà gây nhiễm có biểu sỵng xoang hc mớt v ngy 8-9 l sỵng cc ọi Ngoi khụng cú biu hin nỵc mỹi ýc Một số nghiên cĀu khác cüng ghi nhên triệu chĀng ổu tiờn cỷa hi chng sỵng phự ổu g l hít hĄi, sung huyết kết mäc mít, tuyến lệ, sau ũ l phự dỵi da quanh mớt (Morley & Thomson, 1984; Kuhne, 2009; Homayounfar & cs., 2015; Abdelmoez & cs., 2019) Tiến hành mổ khám ca bệnh míc aMPV cú th nhờn thỗy vựng ổu thỵng cú hin tỵng phù, viêm tổ chĀc xung quanh vùng mít, có dch rợ viờm, bó ờu xoang dỵi mớt (Hỡnh 5.B.2), mt s trỵng hp tớch dch phự cõ vựng dỵi hm (Hỡnh 5.B.3) Khớ quõn cú dch nhổy, bó ờu lỗp kớn ỵng hụ hỗp trờn hay phi viờm, tớch nỵc cỹng quan sỏt ỵc mt s ca bệnh (Hình 5.B.4- 5.B.5) Sung huyết mí mít 525 Nghiên cứu lưu hành Avian Metapneumovirus (aMPV) gà nuụi ti mt s tnh Bc Vit Nam dỵi (Hỡnh 5.B.1) thỵng thỗy cỏc ca bnh g chỵa cũ hin tỵng sỵng phự mt cú th suy đåy giai độn bít đỉu cûa q trình viờm, nờn khú cú th nhờn bit ỵc g bnh quan sỏt, n g cú hin tỵng sỵng phù mặt bệnh trć nên nặng Ghi chú: A.1 Gà có triệu chứng hơ hấp, há mồm thở; A.2 Sưng đầu, dính mí mắt gà con; A.3 Dính mí mắt gà trưởng thành; A.4-A.6 Mắt sưng, hóa mủ Hình Triệu chứng gà nhiễm aMPV Ghi chú: B.1 Mí mắt sung huyết; B.2 Gà bị phù vùng mí mắt, bã đậu xoang mắt; B.3 Tích dịch phù vùng hàm; B.4 Khí quân chứa bã đậu; B.5 Phổi viêm, tích dịch; B.6 Nội täng phủ fibrin Hình Bệnh tích gà mắc aMPV 526 Cao Thị Bích Phượng, Lê Bá Hiệp, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Nguyễn Văn Giáp Abdelmoez & cs (2019) quan sỏt bnh tớch g bnh thỗy thỵng cú dch vng hoc mỷ dỵi da ổu, xoang ổu mt v viờm khớ quõn Mt s ca bnh thỗy viờm mng ngồi tim, viêm phổi, túi khí Đåy cüng kết luên cûa số nghiên cĀu đặc điểm bệnh aMPV gây (Nunoya & cs., 1991; Jirjis & cs., 2002) Mặc dù nhĂng đặc điểm khơng hồn ton c trỵng cho aMPV nhỵng hi chng sỵng phự đæu kết quâ cûa việc nhiễm aMPV Báo cáo cỷa Jones & Rautenschlein (2013) cỹng nhờn thỗy bnh thc tế phý thuộc phæn lĆn vào să nhiễm trùng thĀ phát Nhiều tác giâ báo cáo tình träng nhiễm vi khuèn phĀc hợp làm biến chĀng nhiễm aMPV ć g tht Mcdougall & Cook (1986) ó phồn lờp ỵc E coli, Pseudomonas spp., Moraxella spp t cỏc trỵng hp g sỵng phự ổu Ngoi ra, Goodwin & Waltman (1994) ó phồn lờp ỵc P aeruginosa, E coli, P mirabilis Staphylococcus spp ć nhĂng gà bð SHS nëm 1992 Hn na, Tanaka & cs., (1995) phõn lờp ỵc aMPV vĆi E coli P mirabilis tÿ đàn g tht vi khp thổn kinh b sỵng Nhờt Bõn Cú th thỗy cỏc ca b nhim vi khuốn k phỏt, E coli rỗt ph bin vi c trỵng fibrin phû lên nội täng (Pattison & cs., 2007; Jones & Rautenschlein, 2013) KẾT LUẬN Nghiên cĀu l nghiờn cu ổu tiờn khợng nh cú s lỵu hành cûa aMPV ć đàn gà nuôi täi số tỵnh miền Bíc Việt Nam Vì thąi gian thâi virus nhanh (không ngày) nên gà cị biểu điển hình khâ nëng phát virus mộu bnh phốm l rỗt thỗp, ny nu kim tra mỏu s thỗy cú mt khỏng th kháng aMPV Các kết quâ tìm hiểu triệu chĀng v bnh tớch cho thỗy g nhim aMPV cú biu hin tờp trung ỵng hụ hỗp trờn Trong ũ, biu hin sỵng phự xung quanh mớt (mt bờn/ hai bờn) l thỵng gp nhỗt Bnh tớch phi thỵng khụng in hỡnh Tuy nhiờn, bnh thỵng d nhổm lộn vi mt s bnh trờn ỵng hụ hỗp khỏc nhỵ ND, IB, ORT, CRD, IC… Việc chèn đoán låm sàng khơng xác dén đến điều trð khơng kðp thąi làm cho bệnh trć nên trỉm trọng hĄn Do đị, nên kết hợp kï thuêt sinh học phân tā phân Āng huyết học để chèn đốn xác kðp thąi TÀI LIỆU THAM KHẢO Abdelmoez N.S., Shawky M., Abdelhady H.A., Lebdah M & Salama S.S (2019) Isolation and identification of some possible causative agents of Swollen Head Syndrome (SHS) in broiler chickens in Egypt Ali M.Z., Park J.E & Shin H.J (2019) Serological survey of avian Metapneumovirus infection in chickens in Bangladesh The Journal of Applied Poultry Research 28(4): 1330-1334 Atterby C (2012) A minor study on avian metapneumovirus Swedish University of Agricultural Sciences Aung Y.H (2007) Comparison of the pathogenesis and immune responses following avian Metapneumovirus subtype A and B infection in broiler-type chickens Bayon-Auboyer M., Arnauld C., Toquin D & Eterradossi N (2000) Nucleotide sequences of the F, L and G protein genes of two non-A/non-B avian pneumoviruses (APV) reveal a novel APV subgroup Journal of General Virology 81(11): 2723-2733 Buys S., Preez J H d & H.J.Els (1980) A preliminary report on the isolation of a virus causing sinusitis in turkeys in South Africa and attempts to attenuate the virus Turkeys 28: 36 Catelli E., Cook J., Chesher J., Orbell S., Woods M., Baxendale W & Huggins M (1998) The use of virus isolation, histopathology and immunoperoxidase techniques to study the dissemination of a chicken isolate of avian pneumovirus in chickens Avian pathology 27(6): 632-640 Cook J., Kinloch S & Ellis M (1993) In vitro and in vivo studies in chickens and turkeys on strains of turkey rhinotracheitis virus isolated from the two species Avian pathology 22(1): 157-170 Cook J.K & Cavanagh D (2002) Detection and differentiation of avian pneumoviruses (metapneumoviruses) Avian pathology 31(2): 117-132 Đào Thị Hảo (2008) Phân lập, xác định số đặc tính sinh học Mycoplasma gallisepticum chế kháng nguyên, huyết chẩn đoán Luận án Tiến sĩ Nông nghiệp (Viện Thú y) Furian T.Q., Borges K.A., de Moraes H.L.S & Salle C.T.P (2018) Respiratory Diseases in Poultry: A Constant Challenge Gharaibeh S & Algharaibeh G (2007) Serological and molecular detection of avian pneumovirus in 527 Nghiên cứu lưu hành Avian Metapneumovirus (aMPV) gà nuôi số tỉnh miền Bắc Việt Nam chickens with respiratory disease in Jordan Poultry science 86(8): 1677-1681 Gharaibeh S & Shamoun M (2012) Avian metapneumovirus subtype B experimental infection and tissue distribution in chickens, sparrows, and pigeons Veterinary Pathology 49(4): 704-709 Goodwin M.A & Waltman W.D (1994) Clinical and pathological findings in young Georgia broiler chickens with oculofacial respiratory disease (“socalled swollen heads”) Avian diseases pp 376-378 Hall T.A (1999) BioEdit: A user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT Nucleic acids symposium series [London]: Information Retrieval Ltd., c1979-c2000 pp 95-98 Homayounfar N., Shoushtari H., Charkhkar S & Bozorgmehrifard M (2015) Detection by reverse transcriptase-polymerase chain reaction and molecular characterization of avian metapneumovirus in chicken flocks in Iran WALIA Journal 31(S3): 170-174 Htut Aung Y., Liman M., Neumann U & Rautenschlein S (2008) Reproducibility of swollen sinuses in broilers by experimental infection with avian metapneumovirus subtypes A and B of turkey origin and their comparative pathogenesis Avian pathology 37(1): 65-74 Hutton S., Bettridge J., Christley R., Habte T & Ganapathy K (2017) Detection of infectious bronchitis virus 793B, avian metapneumovirus, Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae in poultry in Ethiopia Tropical animal health and production 49(2): 317-322 Jirjis F.F., Noll S., Halvorson D.A., Nagaraja K.V & Shaw D (2002) Pathogenesis of avian pneumovirus infection in turkeys Veterinary Pathology 39(3): 300-310 Jones R & Rautenschlein S (2013) Avian metapneumovirus Diseases of poultry pp.112-138 Jones R., Williams R., Baxter‐Jones C., Savage C & Wilding G (1988) Experimental infection of laying turkeys with rhinotracheitis virus: distribution of virus in the tissues and serological response Avian pathology 17(4): 841-850 Kuhne P (2009) Ways to control avian meta pneumovirus Challenge 80(60): 40 Majo N., Allan G., O'loan C., Pages A & Ramis A (1995) A sequential histopathologic and immunocytochemical study of chickens, turkey poults, and broiler breeders experimentally infected with turkey rhinotracheitis virus Avian diseases pp 887-896 Mayahi M., Momtaz H., Jafari R.A & Zamani P (2017) Detection and subtyping avian 528 metapneumovirus from turkeys in Iran Veterinary Research Forum Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran p 105 McDougall J & Cook J (1986) Turkey rhinotracheitis: preliminary investigations Veterinary record 118(8): 206-207 Morley A & Thomson D (1984) Swollen-head syndrome in broiler chickens Avian diseases pp 238-243 Nagy A., Abdallah F., Sweed K., Salama A & Omar M (2018) Seroprevelance of avian Metapneumovirus in Egyptian chicken and duck flocks with a reference on economic impact J Virol Sci 4(4): 8-14 Naylor C., Shaw K., Britton P & Cavanagh D (1997) Appearance of type B avian pneumovirus in Great Britain Avian pathology 26(2): 327-338 Nguyễn Thị Lan, Chu Đức Thắng, Nguyễn Bá Hiên, Phạm Hồng Ngân, Lê Văn Hùng & Nguyễn Thị Yến (2016) Đặc điểm vi khuẩn Ornithobacterium Rhinotracheale (ORT) phân lập từ đàn gà nuôi số tỉnh phía Bắc Việt Nam Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 11: 1734 Nguyễn Thị Loan, Lê Đình Quyền, Dương Hồng Quân, Lê Huỳnh Thanh Phương, Nguyễn Bá Hiên & Lê Văn Phan (2016) Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để chẩn đoán bệnh viêm phế quản truyền nhiễm (Infectious Bronchitis) gà đẻ trứng số tỉnh phía Bắc Việt Nam Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 9: 1387 Nunoya T., Tajima M., Izuchi T., Takahashi K., Otaki Y., Nagasawa Y & Hakogi E (1991) Pathology of a broiler disease characterized by the swollen head Journal of Veterinary Medical Science 53(2): 347-349 Pattison M., McMullin P., Bradbury J.M & Alexander D (2007) Poultry diseases Elsevier Health Sciences Sid H., Benachour K & Rautenschlein S (2015) Coinfection with multiple respiratory pathogens contributes to increased mortality rates in Algerian poultry flocks Avian diseases 59(3): 440-446 Tanaka M., Takuma H., Kokumai N., Oishi E., Obi T., Hiramatsu K & Shimizu Y (1995) Turkey rhinotracheitis virus isolated from broiler chicken with swollen head syndrome in Japan Journal of Veterinary Medical Science 57(5): 939-941 Tucciarone C M., Andreopoulou M., Franzo G., Prentza Z., Chaligiannis I & Cecchinato M (2017) First identification and molecular characterization of Avian metapneumovirus subtype B from chickens in Greece Avian diseases 61(3): 409-413  ... Conjugate 1X; Kit ELISA ID Screen avian metapneumovirus Indirect 5P (IDVET_MPVS5P, IDvet) 521 Nghiên cứu lưu hành Avian Metapneumovirus (aMPV) gà nuôi số tỉnh miền Bắc Việt Nam Bâng Mồi đặc hiệu để phát... (2007) Serological and molecular detection of avian pneumovirus in 527 Nghiên cứu lưu hành Avian Metapneumovirus (aMPV) gà nuôi số tỉnh miền Bắc Việt Nam chickens with respiratory disease in Jordan... viờm, tớch nỵc cỹng quan sỏt ỵc số ca bệnh (Hình 5.B.4- 5.B.5) Sung huyết mí mít 525 Nghiên cứu lưu hành Avian Metapneumovirus (aMPV) gà nuôi số tỉnh miền Bắc Vit Nam dỵi (Hỡnh 5.B.1) thỵng thỗy