Nghiên cứu bào chế vi nhũ tương chứa đông trùng hạ thảo và vitamin e

TRẦN THỊ KIM CÚC BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRẦN THỊ KIM CÚC KHĨA 2020 - 2022 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VI NHŨ TƯƠNG CHỨA ĐÔNG TRÙNG HẠ THẢO VÀ VITAMIN E - NGÀNH:.CN DP& BC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRẦN THỊ KIM CÚC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VI NHŨ TƯƠNG CHỨA ĐÔNG TRÙNG HẠ THẢO VÀ VITAMIN E NGÀNH: CN DƯỢC PHẨM & BÀO CHẾ THUỐC MÃ SỐ: 8720202 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TIẾN SĨ TRẦN VĂN THÀNH THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu tơi thực hướng dẫn PGS TS Trần văn Thành Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố từ cá nhân hay tổ chức cơng trình nghiên cứu khác TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2022 Tác giả luận văn Trần Thị Kim Cúc ii Luận văn Thạc sĩ dược học – Năm học 2020 – 2022 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VI NHŨ TƯƠNG CHỨA ĐÔNG TRÙNG HẠ THẢO VÀ VITAMIN E Trần Thị Kim Cúc Người hướng dẫn: PGS TS Trần Văn Thành TÓM TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ Trong nghiên cứu này, vi nhũ tương hệ thống phân phối nano mét tiềm năng, thiết kế để tải cao đông trùng hạ thảo vitamin E sản phẩm dùng da, ngăn ngừa q trình lão hố da Với mục tiêu sau: Xây dựng công thức bào chế vi nhũ tương D/N chứa đông trùng hạ thảo vitamine E phuong pháp chuẩn độ pha nước Thẩm định ứng dụng quy trình định lượng adenosin vi nhũ tương Đánh giá tính chất lý hoá tác động in vitro vi nhũ tương chứa đơng trùng hạ thảo vitamin E hoạt tính chống oxy hố, ngăn ngừa q trình lão hố da qua khả thu dọn gốc tự PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Kiểm nghiệm cao tồn phần đơng trùng hạ thảo theo tiêu chuẩn sở, khảo sát tính tương kỵ với thành phần tá dược điều chế Xây dựng công thức bào chế vi nhũ tương qua phương pháp chuẩn độ nước dựa vào giãn đồ pha Kỹ thuật điều chế vi nhũ tương qua cách phối hợp tỷ lệ phù hợp thành phần: dầu , nước, hỗn hợp chất diện hoạt - đồng diện hoạt Đánh giá vi nhũ tương qua: độ ổn định vật lý với thử nghiệm stress test chu kỳ nóng - lạnh OC, 45 O C, 48 (6 lần), 25OC (6 lần); Xác định zeta tiềm Kích thước hạt, hệ số đa phân tán PDI Xây dựng ứng dụng quy trình định lượng adenosin vi nhũ tương HPLC: thẩm định tính tương thích hệ thống, độ đặc hiệu, khoảng tuyến tính, độ lặp lại , độ iii Đánh giá độ ổn định adenosin sản phẩm sau pha chế, 15 ngày, 30 ngày 90 ngày Đánh giá hiệu suất tải adenosin sản phẩm Thử nghiệm DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) đánh giá hoạt tính thu dọn gốc tự đông trùng hạ thảo sản phẩm KẾT QUẢ Kiểm nghiệm cao toàn phần đạt tiêu chuẩn sở Xây dựng thiết kế công thức vi nhũ tương D/N chứa đông trùng hạ thảo vitamin E phương pháp chuẩn độ pha nước Kích thước hạt 19,89 nm Vi nhũ tương đạt ổn định vật lý qua thử nghiệm: suốt, khơng có tượng tách pha, đục, kết bơng Đã xây dựng quy trình định lượng adenosin vi nhũ tương, phương pháp thẩm định đạt theo tiêu chí quy định Hiệu suất tải adenosin vi nhũ tương đạt 96,46 % Thử nghiệm DPPH đánh giá hoạt tính chống oxy hố qua thu dọn gốc tự với giá trị phần trăm ức chế gôc tự giá trị IC50 43,03 g (±0,1) (hay EC 50) KẾT LUẬN Xây dựng công thức bào chế vi nhũ tương D/N chứa cao đông trùng hạ thảo vitamin E, với hiệu suất tải adenosin vi nhũ tương 96,46 % iv RESEARCH ON ESTABLISHMENT OF MICROEMULSION CONTAINING CORDICEPS AND VITAMIN E Final thesis for the Master degree of Pharmacy – Academic year 2020-2022 Tran Thi Kim Cuc Supervisor: Associate Professor PhD Tran van Thanh ABSTRACT Introduction In this study, a potential nanometer delivery system microemulsion to highload cordyceps and vitamin E products applied to the skin, prevents the skin aging process According to the following objects: Formulation of O/W microemulsion containing cordyceps and vitamin E by water- phase titration method was developed Validation and application of the procedure for quantification of adenosine in microemulsion Evaluation of physicochemical properties in vitro of microemulsion containing cordyceps and vitamin E on antioxidant activity, preventing skin aging through the ability to scavenge free radicals Method Analysis of all complete cordyceps extract according to basic standards, investigation of incompatibility with excipient in the preparation Formulation of microemulsion by water titration method based on Pseudoternary phase diagrams Microemulsion preparation technique by combining appropriate proportions of ingredients: oil, water, co-surfactan /surfactant mixture Evaluation of microemulsion: physical stability with stress test hot-cold cycles 4OC, 45OC, for 48 hours (6 times), 25 OC (times) Determine the zeta potential, particle size, and PDI The Development and application of a procedure quantification of adenosine in microemulsion by HPLC about system compatibility, specificity, linearity, repeatability, and accuracy Evaluation of adenosine stability in the product after preparation, 15 days, 30 days and 90 days v Assessment of adenosine loading performance in the product The assay DPPH evaluates the free radical scavenging activity of cordyceps in microemulsion Results and discussions The Developed process and designed an O/W microemulsion formula containing cordyceps and vitamin E by water-phase titration The particle size is 19,89 nm The microemulsion achieved physical stability tests: transparency, phase unseparated, turbidity, and flocculation A procedure for the quantification of adenosine in microemulsion has been developed, the method has been validated and attained the specified criteria The adenosine loading efficiency reached 96,46% The DPPH assay assessed antioxidant activity free radical scavenging with a percentage of free radical inhibition and an IC50 (or EC 50) value of 43,03g (±0,10) Conclusion A formula for preparing an O/W microemulsion containing cordyceps and vitamin E was developed, with an adenosine loading efficiency in the microemulsion of 96,46% vi MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG .viii DANH MỤC CÁC HÌNH x DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ, HÌNH xi MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan vi nhũ tương 1.2 Tổng quan Đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris 1.3 Vitamin E (all- rac alpha tocopheryl acetat) 16 1.4 Cấu trúc da đường thẩm thấu thuốc 17 1.5 Cơ chế thẩm thấu thuốc chất tăng cường thẩm thấu 19 1.6 Chăm sóc da 21 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined 2.1 Đối tượng nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.2 Phương pháp nghiên cứu Error! Bookmark not defined Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 34 3.1 Kiểm nghiệm cao toàn phần đông trùng hạ thảo 34 3.2 Khảo sát tính tương kỵ cao ĐTHT với tá dược điều chế vi nhũ tương 35 3.3 Sàng lọc pha dầu, pha nước, chất diện hoạt/ đồng diện hoạt chuẩn bị cho điều chế vi nhũ tương 35 3.4 Kỹ thuật điều chế vi nhũ tương D/N 40 3.5 Phương pháp đánh giá vi nhũ tương chứa cao đông trùng hạ thảo vitamnin E 44 Chương BÀN LUẬN 57 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 vii PHỤ LỤC 69 viii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ĐTHT: Đông trùng hạ thảo FDA : Food and Drug Administration – Cơ quan quản lý thực phẩm dược phẩm HLB : Hydrophilic Lipophilic Balance – Cân dầu – nước HPLC : High – Perfomance Liquid Chromatography – Sắc ký lỏng hiệu cao KTTP : Kích thước tiểu phân MAPK : Mitogen – Activated Protein Kinase ME : Microemulsion – Vi nhũ tương MCT: Multi medium – chain triglyceride – Chất béo trung tính chuỗi vừa N/D : Nước / Dầu PLC / PKC : Phospho Lipase C / Protein Kinase C PDI : Polydipersity Index – Hệ số đa phân tán SEM : Scanning Electron Microscope – Kính hiển vi điện tử quét 99m Tc-DOX : Technetium – 99m Doxycyclin – Doxycyclin đồng phân hạt nhân TCCS: Tiêu chuẩn sở UV : Ultraviolet – Tia cực tím WHO : World Health Organization – Tổ chức Y tế Thế giới