Chọn lọc nâng cao năng suất sinh trưởng của gà mía bằng chỉ thị phân tử

HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM HỒNG ANH TUẤN CHỌN LỌC NÂNG CAO NĂNG SUẤT SINH TRƯỞNG CỦA GÀ MÍA BẰNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ Ngành: Chăn nuôi Mã số: 62 01 05 Người hướng dẫn: PGS.TS Bùi Hữu Đoàn PGS.TS Nguyễn Hoàng Thịnh NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP - 2023 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận án cảm ơn, thông tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Tác giả luận án Hoàng Anh Tuấn i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận án, nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận án, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Bùi Hữu Đoàn PGS.TS Nguyễn Hồng Thịnh, thầy tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Chăn nuôi chuyên khoa, Khoa Chăn nuôi - Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, thực đề tài hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lời cảm ơn đến PGS.TS Phạm Kim Đăng Ban Chủ nhiệm Đề tài “Chọn lọc nâng cao suất sinh trưởng gà Mía thị phân tử”, Mã số 01C06/62-2016-4 hỗ trợ kinh phí cho phép sử dụng số liệu đề tài Xin chân thành cảm ơn cán công nhân viên Cơng ty Hadico, Hội Chăn ni gà Mía, Phịng thí nghiệm Bộ môn Di truyền - Giống gia súc - Khoa Chăn nuôi, Học viện Nông nghiệp Việt Nam, nhiều sinh viên, học viên cao học tận tình giúp đỡ thực đề tài Xin chân thành cảm ơn người thân, gia đình, bạn bè đồng nghiệp ln bên cạnh, động viên khuyến khích giúp đỡ tơi tinh thần, vật chất để hồn thành luận án Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Tác giả luận án Hoàng Anh Tuấn ii MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng ix Danh mục hình xi Danh mục sơ đồ xiii Trích yếu luận án xiv Thesis abstract xvi Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu đề tài 1.3.1 Đối tượng nghiên cứu 1.3.2 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp đề tài 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.5.1 Ý nghĩa khoa học 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Sự di truyền tính trạng số lượng 2.1.1 Bản chất di truyền tính trạng số lượng 2.1.2 Ước tính giá trị giống 2.1.3 Tính trạng số lượng 2.1.4 Hệ số di truyền 2.1.5 Một số thành phần phương sai 2.2 Cơ sở khoa học việc đánh giá suất gà iii 2.2.1 Một số tính trạng sinh trưởng 2.2.2 Một số tính trạng sinh sản 11 2.3 Gà địa 13 2.3.1 Cải tiến gà địa 14 2.3.2 Gà địa Việt Nam 15 2.4 Chọn lọc nhân giống gà 19 2.4.1 Lịch sử phát triển công tác chọn lọc gia cầm 19 2.4.2 Nhân dòng 20 2.4.3 Hệ thống công tác giống gà 22 2.4.4 Nội dung công tác nhân giống gà 23 2.5 Ứng dụng công nghệ sinh học phân tử chọn lọc giống gà 24 2.5.1 Công nghệ gen 24 2.5.2 Một số thành tựu nghiên cứu SNPs công tác giống gà 25 2.5.3 Phương pháp tiếp cận gen ứng viên (Candidate Gene) 28 2.5.4 Kiểu gen GH INS liên quan đến tính trạng sản xuất gà 29 2.6 Tình hình nghiên cứu đa hình gen nước 33 2.6.1 Tình hình nghiên cứu đa hình gen gà giới 33 2.6.2 Tình hình nghiên cứu đa hình gen giống gà địa Việt Nam 36 2.6.3 Một số thông tin gà Mía - đối tượng nghiên cứu 37 2.7 Ứng dụng số hàm số tốn học chăn ni gà thịt 38 Phần Nội dung phương pháp nghiên cứu 41 3.1 Nội dung nghiên cứu 41 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 41 3.1.2 Nội dung nghiên cứu 41 3.2 Phương pháp nghiên cứu 41 3.2.1 Nội dung 1: Đặc điểm hóa chi tiết ngoại hình giống gà Mía 41 3.2.2 Nội dung 2: Xác định tần số kiểu gen đa hình gen INS, GH; ảnh hưởng kiểu gen đến khả tăng khối lượng gà Mía 42 3.2.3 Nội dung 3: Chọn tạo dịng gà Mía sinh trưởng nhanh 45 iv 3.2.4 Nội dung 4: Đánh giá khả sản xuất thịt xác định tuổi giết thịt thích hợp gà Mía thương phẩm (được sinh từ hệ 2) 54 Phần Kết thảo luận 58 4.1 Đặc điểm ngoại hình gà Mía 58 4.1.1 Tiêu chuẩn hóa đặc điểm ngoại hình gà Mía 58 4.2 Đa hình gen insulin (INS), Growth hormone (GH) ảnh hưởng chúng đến khả sinh trưởng gà Mía 70 4.2.1 Xác định đa hình gen, kiểu gen, tần số kiểu gen, alen gen INS GH đàn gà Mía 70 4.2.2 Ảnh hưởng kiểu gen gen INS GH đến khối lượng gà Mía 75 4.3 Chọn tạo dịng gà Mía mang kiểu gen GG gen GH có khả sinh trưởng nhanh 83 4.3.1 Khả sinh sản gà Mía dịng trống có gen sinh trưởng nhanh, hệ xuất phát hệ 84 4.3.2 Tần số xuất kiểu gen GG đàn gà Mía hệ 91 4.3.3 Tỷ lệ nuôi sống, khối lượng thể hiệu sử dụng thức ăn gà Mía mang kiểu gen GG hệ hệ 91 4.3.4 Kết phân tích số tham số di truyền q trình chọn lọc gà Mía qua hệ 99 4.4 Khả sản xuất gà Mía thương phẩm thịt mang kiểu gen GG 102 4.4.1 Khối lượng thể 102 4.4.2 Chất lượng thân thịt tỷ lệ số nội quan gà Mía mang kiểu gen GG 105 4.4.3 Xác định hàm sinh trưởng phù hợp thời điểm giết thịt thích hợp cho gà Mía thương phẩm sinh trưởng nhanh 108 Phần Kết luận đề nghị 117 5.1 Kết luận 117 5.2 Đề nghị 118 Danh mục cơng trình cơng bố có liên quan đến luận án 119 Tài liệu tham khảo 120 Phụ lục 135 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt ADN Deoxyribonucleic acid - Best Linear Unbiased Prediction Mơ hình tuyến tính tốt khơng thiên vị Bp Base pair Cặp bazơ BW Body Weight Khối lượng thể BW36 Body Weight at 36 days Khối lượng thể 36 ngày tuổi BW39 Body Weight at 39 days Khối lượng thể 39 ngày tuổi BW46 Body Weight at 46 days Khối lượng thể 46 ngày tuổi cGH Chicken growth hormone BLUP cGHR cGHSR Gen mã hóa hormone sinh trưởng gà Gen mã hóa thụ thể hormone sinh Chicken growth hormone receptor trưởng gà Chicken growth hormone secretagogue Thụ thể tiết hormone tăng trưởng receptor gà cs and others Cộng Cv % Coefficient of variation Hệ số biến thiên D-loop Displacement loop Vùng điều khiển ADN ty thể dNTP Deoxynucleotide Deoxynucleotide Đvt - Đơn vị tính ĐC - Đối chứng EAAP The European Association of Animal Hiệp hội chăn nuôi Châu Âu Production EDTA Ethylene Diamine Tetraacetic Acid - F Forward Mồi xuôi FAO Food and Agriculture Organization of Tổ chức lương thực nông the United Nations nghiệp Liên hiệp quốc FCR Feed conversion ratio Hệ số chuyển hóa thức ăn GLM General Linear Models Mơ hình tuyến tính tổng quát GTG Breeding value Giá trị giống GWAS Genome wide association study Nghiên cứu liên kết toàn hệ gen INFPD International Network for vi Family Mạng lưới quốc tế phát triển chăn Chữ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt Poultry Development nuôi gia cầm nông hộ INS Insuline gene Gen Insulin Kb Kilo base pair 1.000 cặp bazơ kDa Kilodalton - LHQ The United Nations Liên hiệp quốc LSM Least Square Mean Trung bình bình phương nhỏ mARN Messenger RNA ARN thông tin ME Metabolizable Energy Năng lượng trao đổi MHC Major Histocompatibility Complex Phức hợp tương thích mơ MLM Mixed linear model Mơ hình tuyến tính hỗn hợp mtDNA Mitochondrial DNA ADN ty thể Mx Myxovirus resistant gene Gen kháng myxovirus NADH Nicotinamide adenine dinucleotide - NST - Năng suất trứng OD Optical density Mật độ quang OECD The Organisation for Cooperation Development PCR Polymerase Chain Reaction PCR-RFLP Polymerase chain reaction - Restriction Đa hình chiều dài đoạn cắt giới fragment length polymorphism hạn PCR PN Production Number Chỉ số sản xuất p-value Probability value Giá trị xác suất QTL Quantitative Trait Loci Locus tính trạng số lượng R Reverse Mồi ngược RBI Rare Breeding International Tổ chức quốc tế giống RE Restriction Enzyme Enzyme cắt giới hạn RFI Residual feed intake Lượng thức ăn dư thừa SCN AD Sau Công nguyên SD Standard deviation Độ lệch chuẩn SE Standard error Sai số chuẩn SLT - Sản lượng trứng SNPs Single-nucleotide polymorphism Đa hình nucleotide đơn Economic Tổ chức Hợp tác Phát triển Kinh tế Phản ứng chuỗi polymerase vii Chữ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt TĂ - Thức ăn TCN BC Trước công nguyên TCVN - Tiêu chuẩn Việt Nam THXP - Thế hệ xuất phát TLNS - Tỷ lệ nuôi sống TN - Thí nghiệm TT - Tuần tuổi TTTĂ - Tiêu tốn thức ăn VN - Vòng ngực DT - Dài thân VN/DT - Vòng ngực/Dài thân UNEP WCU The United Nations Environment Programme United Nations Educational Scientific and Cultural Organization World Conservation Union Cơ quan bảo vệ môi trường Liên hợp quốc Tổ chức giáo dục, khoa học văn hóa Liên Hợp Quốc Hiệp hội Bảo tồn thiên nhiên giới WWF World Wide Fund for Nature Quỹ Quốc tế thiên nhiên - Trung bình mẫu UNESCO viii Least Squares Means for effect A3971G Pr > |t| for H0: LSMean(i)=LSMean(j) Dependent Variable: TT4 i/j 1 0.9025 0.1966 0.9025 0.1966 0.2818 0.2818 A3971G TT5 LSMEAN Standard Error Pr > |t| LSMEAN Number AA 318.353529 3.990392 |t| a 5.70185196 9.0986719 0.63 0.5310 d 0.49950626 12.2959641 0.04 0.9676 Parameter Dependent Variable: TT16 Estimate Standard Error t Value Pr > |t| a 8.41680440 9.5292221 0.88 0.3773 d -0.57544349 12.8778106 -0.04 0.9644 Parameter Dependent Variable: TT17 Estimate Standard Error t Value Pr > |t| a 9.99540215 9.8269895 1.02 0.3094 d -3.15863540 13.2802141 -0.24 0.8121 172 Parameter Dependent Variable: TT18 Estimate Standard Error t Value Pr > |t| a 10.2894447 10.1707903 1.01 0.3120 d -2.7621453 13.7448273 -0.20 0.8408 Parameter Dependent Variable: TT19 Estimate Standard Error t Value Pr > |t| a 10.6810510 10.5620834 1.01 0.3122 d 0.6664854 14.2736215 0.05 0.9628 Parameter Dependent Variable: TT20 Estimate Standard Error t Value Pr > |t| a 13.5964363 10.8560560 1.25 0.2107 d -2.2449838 14.6708967 -0.15 0.8784 173 PHỤ LỤC XÁC ĐỊNH CÁC THAM SỐ DI TRUYỀN BẰNG PHẦN MỀM MTDFREML Started 10:01:27.60 on 06/30/2022 ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ PROGRAM "MTDFRUN" - Estimate Covariance Components for MT-IAM Last revised 8/ 31/ ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ Estimates: GENETIC VARIANCES AND COVARIANCES : a1 a2 a1 : 1621.746 2285.445 a2 : 2285.445 8438.570 ENVIRONMENTAL VARIANCES AND COVARIANCES : e1 e2 e1 : 2239.554 3156.091 e2 : 3156.091 12657.86 PHENOTYPIC VARIANCES AND COVARIANCES : p1 p2 p1 : 3861.300 5441.536 p2 : 5441.536 21096.43 HERITABILITIES AND GENETIC CORRELATIONS a1 a2 42 ( 038) a2 : 62 40 ( 047) ( 036) a1 : ENVIRONMENTAL PROPORTION OF TOTAL VARIANCE AND CORRELATIONS e1 e2 58 ( 038) e2 : 59 60 ( 015) ( 036) e1 : The current time is: 10:52:59.31 Total time of analysis The elapsed time was: 00:50:21.86 174 Started 15:03:39.95 on 07/01/2022 ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ PROGRAM "MTDFRUN" - Estimate Covariance Components for MT-IAM Last revised 8/ 31/ ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ Estimates: GENETIC VARIANCES AND COVARIANCES : a1 a2 a1 : 1119.58 1263.057 a2 : 1263.057 4268.138 ENVIRONMENTAL VARIANCES AND COVARIANCES : e1 e2 e1 : 1826.683 2105.214 e2 : 2105.214 8285.209 PHENOTYPIC VARIANCES AND COVARIANCES : p1 p2 p1 : 2946.263 3368.271 p2 : 3368.271 12553.35 HERITABILITIES AND GENETIC CORRELATIONS a1 a2 38 ( 027) a2 : 58 34 ( 016) ( 014) a1 : ENVIRONMENTAL PROPORTION OF TOTAL VARIANCE AND CORRELATIONS e1 e2 62 ( 027) e2 : 54 66 ( 013) ( 014) e1 : The current time is: 15:05:12.02 Total time of analysis The elapsed time was: 00:00:13.52 175 PHỤ LỤC MỘT SỐ KẾT QUẢ UỚC TÍNH GIÁ TRỊ GIỐNG CỦA GÀ If genetic groups are used in the model the SEP are okay but the rTI are incorrect unless group effects are estimated perfectly!!! Genetic variances used in order 3655.670355653816000 10675.454002667860000 animal 10110001 10120020 10120021 10120022 10120023 10120024 10120025 10210002 10220026 10220027 10220028 10220029 10220030 10220031 10310003 10320032 10320033 10320034 10320035 10320036 10320037 10410004 10420038 10420039 10420040 10420041 10420042 10420043 10510005 10520044 10520045 10520046 10520047 10520048 10520049 10610006 10620050 10620051 10620052 10620053 10620054 10620055 10710007 10720056 10720057 10720058 10720059 10720060 F PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti PBV SEP Rti 00 18.104 31.65 85 30.937 54.08 85 00 17.991 39.40 76 30.745 67.33 76 00 15.031 37.75 78 25.685 64.51 78 00 14.083 35.99 80 24.066 61.51 80 00 -18.725 41.67 72 -31.998 71.21 72 00 1.797 38.53 77 3.071 65.84 77 00 -12.073 35.95 80 -20.632 61.44 80 00 -4.308 31.69 85 -7.361 54.16 85 00 6.757 39.42 76 11.546 67.37 76 00 -23.213 36.54 80 -39.668 62.44 80 00 -10.671 39.46 76 -18.236 67.43 76 00 27.976 38.54 77 47.807 65.86 77 00 7.322 37.10 79 12.512 63.41 79 00 -12.477 39.43 76 -21.321 67.38 76 00 9.447 31.68 85 16.144 54.14 85 00 10.625 40.48 74 18.157 69.18 74 00 -17.373 37.10 79 -29.688 63.39 79 00 -43.772 39.43 76 -74.800 67.38 76 00 1.124 37.76 78 1.921 64.54 78 00 10.388 35.98 80 17.751 61.48 80 00 48.454 39.50 76 82.802 67.51 76 00 -19.631 31.58 85 -33.547 53.96 85 00 27.389 38.48 77 46.804 65.76 77 00 -13.759 37.05 79 -23.513 63.31 79 00 -45.783 37.03 79 -78.237 63.29 79 00 -26.526 39.37 76 -45.330 67.28 76 00 24.597 39.37 76 42.033 67.28 76 00 14.451 36.46 80 24.695 62.30 80 00 13.584 31.79 85 23.214 54.32 85 00 18.109 38.59 77 30.946 65.94 77 00 31.352 40.52 74 53.577 69.24 74 00 2.734 38.59 77 4.673 65.94 77 00 -48.750 41.72 72 -83.308 71.30 72 00 -10.582 38.61 77 -18.084 65.98 77 00 20.721 34.44 82 35.409 58.85 82 00 -12.016 31.64 85 -20.534 54.06 85 00 -12.787 39.41 76 -21.851 67.35 76 00 -8.174 38.52 77 -13.969 65.83 77 00 2.544 37.81 78 4.348 64.62 78 00 15.538 38.56 77 26.553 65.89 77 00 -14.126 38.56 77 -24.140 65.89 77 00 4.988 36.50 80 8.524 62.38 80 00 -19.759 31.74 85 -33.765 54.24 85 00 7.483 37.17 79 12.787 63.52 79 00 -24.817 36.55 80 -42.409 62.46 80 00 44.493 38.61 77 76.033 65.98 77 00 -31.489 43.19 70 -53.810 73.81 70 00 -50.825 39.45 76 -86.854 67.41 76 176 10720061 10810008 10820062 10820063 10820064 10820065 10820066 10820067 10910009 10920068 10920069 10920070 10920071 10920072 10920073 11010010 11020074 11020075 11020076 11020077 11020078 11020079 20110100 20110101 20110102 20110103 20110104 20110105 20110106 20110107 20110108 20110109 20110110 20110111 20110112 20110113 20110114 20110115 20110116 20110117 20110118 20110119 20110120 20110121 20110122 20110123 20110124 20110125 20110126 20110127 20110128 20110129 20120400 20120401 20120402 20120403 20120405 20120406 20120407 20120408 20120409 20120410 20120411 20120412 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 35.397 36.60 80 1.465 31.70 85 21.644 43.18 70 -3.271 36.53 80 41.614 37.11 79 2.634 36.52 80 -36.998 38.54 77 -24.157 38.60 77 -3.524 31.67 85 -27.706 39.42 76 3.161 35.98 80 65.907 37.77 78 6.882 40.45 74 -56.284 38.53 77 4.516 37.77 78 16.637 31.67 85 6.980 39.42 76 -8.308 38.54 77 -3.529 35.98 80 -12.878 37.77 78 10.396 40.47 74 23.976 37.79 78 -14.051 33.48 83 6.224 33.39 83 14.872 33.39 83 1.571 33.20 84 -45.018 33.20 84 10.836 33.39 83 32.543 33.18 84 -9.290 33.20 84 22.354 33.56 83 37.027 33.56 83 39.627 33.48 83 26.451 33.18 84 23.054 33.48 83 -29.456 33.39 83 53.556 33.20 84 -15.086 33.81 83 4.544 33.20 84 -1.279 33.48 83 -6.186 33.81 83 45.081 33.18 84 -36.154 33.56 83 19.395 33.81 83 44.352 33.56 83 19.847 33.18 84 22.968 33.48 83 41.371 33.39 83 29.360 33.20 84 -38.604 33.39 83 12.623 33.20 84 -5.666 33.48 83 30.656 33.56 83 17.561 33.22 84 17.710 33.45 83 16.359 33.20 84 29.514 33.20 84 -11.742 33.20 84 7.280 33.56 83 17.894 33.20 84 -12.828 33.22 84 -23.984 33.81 83 -10.278 33.22 84 1.660 33.22 84 60.488 62.54 80 2.504 54.16 85 36.986 73.78 70 -5.590 62.43 80 71.113 63.42 79 4.501 62.41 80 -63.226 65.86 77 -41.282 65.96 77 -6.022 54.12 85 -47.347 67.37 76 5.402 61.49 80 112.626 64.54 78 11.761 69.13 74 -96.182 65.84 77 7.717 64.54 78 28.431 54.12 85 11.927 67.37 76 -14.197 65.87 77 -6.031 61.49 80 -22.006 64.54 78 17.765 69.16 74 40.973 64.58 78 -24.011 57.21 83 10.636 57.06 83 25.415 57.06 83 2.685 56.74 84 -76.931 56.74 84 18.517 57.06 83 55.612 56.71 84 -15.875 56.74 84 38.200 57.35 83 63.274 57.35 83 67.718 57.21 83 45.202 56.71 84 39.397 57.21 83 -50.336 57.06 83 91.520 56.74 84 -25.779 57.77 83 7.765 56.74 84 -2.187 57.21 83 -10.571 57.77 83 77.038 56.71 84 -61.783 57.35 83 33.143 57.77 83 75.793 57.35 83 33.916 56.71 84 39.250 57.21 83 70.698 57.06 83 50.173 56.74 84 -65.969 57.06 83 21.570 56.74 84 -9.683 57.21 83 52.387 57.35 83 30.010 56.76 84 30.263 57.17 83 27.955 56.73 84 50.436 56.73 84 -20.066 56.73 84 12.441 57.35 83 30.578 56.73 84 -21.921 56.76 84 -40.986 57.77 83 -17.564 56.76 84 2.837 56.76 84 177 20120413 20120414 20120415 20120416 20120417 20120418 20120419 20120420 20120421 20120422 20120423 20120424 20120425 20120426 20120427 20120428 20120429 20210130 20210131 20210132 20210133 20210134 20210135 20210136 20210137 20210138 20210139 20210140 20210142 20210143 20210145 20210146 20210147 20210148 20210149 20210150 20210151 20210152 20210153 20210154 20210155 20210156 20210157 20210158 20210159 20220430 20220431 20220432 20220433 20220434 20220436 20220437 20220438 20220439 20220440 20220441 20220442 20220443 20220445 20220446 20220447 20220448 20220449 20220450 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 28.049 33.56 83 87.546 33.38 83 12.949 33.22 84 37.338 33.22 84 28.808 33.56 83 -33.239 33.20 84 11.404 33.45 83 15.107 33.22 84 -2.415 33.45 83 15.423 33.38 83 -9.206 33.81 83 4.576 33.22 84 14.480 33.81 83 -39.007 33.20 84 61.477 33.38 83 33.289 33.22 84 11.013 33.38 83 -23.368 33.58 83 26.320 33.46 83 -27.544 33.58 83 2.387 33.58 83 -13.926 33.57 83 -1.787 33.24 84 -97.643 33.58 83 -2.325 33.46 83 -72.692 33.57 83 7.315 33.58 83 -30.806 33.24 84 22.760 33.46 83 21.704 33.56 83 27.062 33.31 83 -43.347 33.24 84 15.677 33.56 83 8.512 33.46 83 32.964 33.31 83 -17.699 33.24 84 27.747 33.31 83 11.950 33.31 83 8.251 33.57 83 34.465 33.56 83 -35.740 33.56 83 -20.781 33.57 83 50.433 33.58 83 -67.121 33.31 83 9.154 33.57 83 -30.512 33.27 84 2.522 33.56 83 -17.643 33.32 83 53.708 33.47 83 -5.248 33.47 83 51.380 33.32 83 -15.436 33.32 83 -3.272 33.47 83 -6.892 33.55 83 25.093 33.55 83 32.944 33.27 84 9.155 33.47 83 6.282 33.32 83 -42.846 33.32 83 -15.483 33.56 83 58.902 33.27 84 34.868 33.54 83 -60.018 33.27 84 -7.821 33.55 83 47.932 57.35 83 149.605 57.04 83 22.128 56.76 84 63.806 56.76 84 49.229 57.35 83 -56.801 56.73 84 19.488 57.17 83 25.815 56.76 84 -4.128 57.17 83 26.356 57.04 83 -15.732 57.77 83 7.820 56.76 84 24.745 57.77 83 -66.658 56.73 84 105.056 57.04 83 56.886 56.76 84 18.820 57.04 83 -39.932 57.38 83 44.977 57.18 83 -47.069 57.38 83 4.078 57.38 83 -23.797 57.36 83 -3.053 56.80 84 -166.859 57.38 83 -3.974 57.18 83 -124.221 57.36 83 12.501 57.38 83 -52.644 56.80 84 38.895 57.18 83 37.089 57.34 83 46.246 56.92 83 -74.075 56.80 84 26.790 57.34 83 14.546 57.18 83 56.331 56.92 83 -30.246 56.80 84 47.416 56.92 83 20.421 56.92 83 14.099 57.36 83 58.897 57.34 83 -61.075 57.34 83 -35.512 57.36 83 86.183 57.38 83 -114.701 56.92 83 15.643 57.36 83 -52.142 56.85 84 4.309 57.35 83 -30.150 56.94 83 91.779 57.19 83 -8.968 57.19 83 87.802 56.94 83 -26.378 56.94 83 -5.591 57.19 83 -11.778 57.33 83 42.880 57.33 83 56.297 56.85 84 15.645 57.19 83 10.736 56.94 83 -73.218 56.94 83 -26.459 57.35 83 100.655 56.85 84 59.584 57.32 83 -102.563 56.85 84 -13.365 57.33 83 178 20220451 20220452 20220453 20220454 20220455 20220456 20220457 20220458 20220459 20310160 20310161 20310162 20310163 20310164 20310166 20310167 20310168 20310169 20310170 20310171 20310173 20310174 20310175 20310176 20310177 20310178 20310179 20310180 20310181 20310182 20310183 20310184 20310185 20310186 20310187 20310188 20310189 20320460 20320461 20320462 20320463 20320464 20320466 20320467 20320468 20320469 20320470 20320471 20320472 20320473 20320474 20320475 20320476 20320477 20320478 20320479 20320480 20320481 20320482 20320483 20320484 20320485 20320486 20320487 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 24.873 33.47 83 -60.240 33.27 84 -36.720 33.27 84 -20.068 33.56 83 -17.036 33.54 83 9.559 33.32 83 13.477 33.56 83 6.778 33.27 84 -5.832 33.27 84 13.968 33.19 84 -23.908 33.68 83 -1.171 33.68 83 -3.768 33.19 84 79.560 33.54 83 59.426 33.19 84 -33.861 33.31 83 -8.564 33.68 83 50.516 33.57 83 -25.447 33.38 83 -99.644 33.57 83 -18.446 33.57 83 26.323 33.38 83 1.322 33.38 83 21.061 33.19 84 6.594 33.38 83 53.108 33.68 83 14.221 33.31 83 34.548 33.19 84 10.460 33.31 83 -6.376 33.31 83 -21.545 33.38 83 14.130 33.68 83 8.146 33.57 83 -11.825 33.31 83 7.660 33.31 83 39.158 33.19 84 38.015 33.57 83 52.223 33.20 84 -26.805 33.20 84 -11.708 33.31 83 53.293 33.59 83 52.543 33.38 83 -3.675 33.20 84 -34.484 33.59 83 8.409 33.20 84 -18.244 33.20 84 -51.835 33.55 83 -25.475 33.31 83 10.864 33.59 83 18.786 33.31 83 21.786 33.59 83 -45.034 33.31 83 -62.433 33.55 83 65.538 33.59 83 55.321 33.66 83 7.461 33.20 84 81.990 33.59 83 -34.612 33.38 83 -8.039 33.66 83 1.511 33.59 83 -45.389 33.55 83 22.186 33.31 83 46.561 33.38 83 -1.574 33.38 83 42.504 57.19 83 -102.942 56.85 84 -62.749 56.85 84 -34.294 57.35 83 -29.112 57.32 83 16.336 56.94 83 23.030 57.35 83 11.582 56.85 84 -9.966 56.85 84 23.870 56.72 84 -40.855 57.56 83 -2.000 57.56 83 -6.439 56.72 84 135.958 57.31 83 101.551 56.72 84 -57.864 56.93 83 -14.634 57.56 83 86.326 57.36 83 -43.485 57.04 83 -170.279 57.36 83 -31.522 57.36 83 44.984 57.04 83 2.260 57.04 83 35.991 56.72 84 11.268 57.04 83 90.756 57.56 83 24.301 56.93 83 59.038 56.72 84 17.875 56.93 83 -10.895 56.93 83 -36.818 57.04 83 24.146 57.56 83 13.920 57.36 83 -20.207 56.93 83 13.091 56.93 83 66.916 56.72 84 64.963 57.36 83 89.243 56.74 84 -45.806 56.74 84 -20.007 56.92 83 91.072 57.41 83 89.789 57.05 83 -6.281 56.74 84 -58.928 57.41 83 14.369 56.74 84 -31.176 56.74 84 -88.579 57.34 83 -43.533 56.92 83 18.566 57.41 83 32.103 56.92 83 37.230 57.41 83 -76.956 56.92 83 -106.690 57.34 83 111.996 57.41 83 94.537 57.52 83 12.751 56.74 84 140.110 57.41 83 -59.147 57.05 83 -13.738 57.52 83 2.582 57.41 83 -77.564 57.34 83 37.913 56.92 83 79.567 57.05 83 -2.690 57.05 83 179