Giao trinh thuc tap sinh ly 1 3957

TRƯỜNG ĐẠI HỌC VÕ TRƯỜNG TOẢN KHOA Y Giáo Trình: THỰC TẬP SINH LÝ I (ĐH Y ĐA KHOA) Đơn vị biên soạn: Khoa Y Thành phần tham gia biên soạn: BS Huỳnh Trung Tín Hậu Giang, 2017 Giáo Trình TT.Sinh lý MỤC LỤC XÁC ĐỊNH ÁP XUẤT THẨM THẤU ĐỊNH CÔNG THỨC BẠCH CẦU THƯỜNG 16 NHÓM MÁU HỆ ABO – CHỈ ĐỊNH VÀ NGUYÊN TẮC TRUYỀN MÁU 20 XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG HỒNG CẦU 23 XÉT NGHIỆM THỬ THAI 28 THĂM DÒ CHỨC NĂNG THẬN BẰNG PHÂN TÍCH NƯỚC TIỂU 32 ĐÁNH GIÁ CHỨC NĂNG THẬN 36 Giáo Trình TT.Sinh lý XÁC ĐỊNH ÁP XUẤT THẨM THẤU ĐỘ BỀN CỦA MÀNG HỒNG CẦU MỤC TIÊU: Trình bày chuẩn bị dụng cụ tiến hành thí nghiệm áp suất thẩm thấu hồng cầu Trình bày cách ứng dụng xác định áp suất thẩm thấu để tìm áp suất thẩm thấu dung dịch độ bền hồng cầu NỘI DUNG: Đại cương: Thí nghiệm Dutrochet: Dùng chng đựng nước đường có đáy màng bán thấm (màng cho dung mơi qua ngăn chất hịa tan), nhúng vào chậu nước Sau thời gian mực nước chuông từ a lên b Như vậy, dung dịch ưu trương (nước đường) có sức hút dung dịch nhược trương (nước) hai dung dịch đẳng trương, lực hút cân áp suất thủy tinh cột nước dâng cao thêm (ab) gọi áp suất thẩm thấu dung dịch Dung dịch chứa nhiều chất hịa tan áp suất thẩm thấu cao Giáo Trình TT.Sinh lý Hamburger lập lại thí nghiệm màng bán thấm sử dụng màng hồng cầu, thực sau Chuẩn bị dụng cụ: -20 ống nghiệm xếp giá gổ -Ống hút 10ml -Ống nhỏ giọt -Dung dịch NaCl 10/1000 -Nước cất -Dung dịch X muốn xác định áp suất thẩm thấu Tiến hành: -Đánh số ống nghiệm từ đến 10 cho vào ống Số ống nghiệm 10 NaCl10/1000 10 Nướ cất Nồng độ dung dịch 10 -Sau cho vào ống giọt máu Dùng ngón tay bịt kín miệng ống, chúc ngược nhẹ nhàng lần để hòa tan máu ( không lắc mạnh) Biết dung dịch muối đẳng trương với tế bào chất hồng cầu ta thấy: +Ống số có NaCl=9/1000 ống đẳng trương so với tế bào chất hồng cầu Số dung môi vào hồng cầu nhau, hồng cầu không thay đổi thể tích +Ống số 10 có NaCl=10/1000 ống ưu trương so với tế bào chất hồng cầu Số dung môi bị hút từ hồng cầu dung dịch ống, hồng cầu teo lại +Ống từ số đến số1, dung dịch ngày nhược trương so với tế bào chất hồng cầu nên dung mơi vào hồng cầu, hồng cầu phình Giáo Trình TT.Sinh lý nồng độ NaCl hồng cầu bắt đầu vỡ Ở nồng độ NaCl mà hồng cầu vỡ với số hồng cầu chưa vỡ ta gọi nồng độ tiêu huyết giới hạn Ta nhận ống nhờ độ suốt giới hạn dãy ống đục Ứng dụng 4.1 Tìm áp suất thẩm thấu dung dịch X Dựa kết luận với loại máu, điều kiện thí nghiệm, tượng tieu huyết xảy ống có áp suất thẩm thấu nhau, ta suy áp suất thẩm thấu dung dịch Pha dung dịch X cách pha với NaCl 10/1000 ta có ống từ số đến số 10 có từ 1*X/10 đến X Giã sử lúc ống tiêu huyết giới hạn xảy ống ta có 2X/10 đẵng trương với 5/1000 NaCl, hay X đẵng trương với 25/1000 NaCl +Chú ý: không kết luận X dung dịch NaCl 25/1000 vìX dung dịch có chất hịa tan khác 4.2 Xác định độ bền vũng màng hồng cầu Giáo Trình TT.Sinh lý Dùng 10 ống nghiệm pha với NaCl 10/1000 đem ly tâm dựa màu sắc, cặn lắng ta suy ống tiêu huyết tối thiểu ống tiêu huyết tối đa Số ống nghiệm 10 NaCl 10/1000 10 Nước cất Nồng độ dung dịch Trị số bình thường máu người, ống tiêu huyết tối thiểu có nồng độ 6,5/1000 ống tiêu huyết tối đa có nồng độ 3,5/1000 Nếu hồng cầu bền vững, trị số xảy nồng độ cao Từ thí nghiệm cho ta thấy dung dịch truyền vào máu phải đẳng trương với tế bào hồng cầu (NaCl 9/1000, Glucose 5/100) Giáo Trình TT.Sinh lý XÁC ĐỊNH NHĨM MÁU HỆ ABO Mục tiêu 1.Trình bày thành phần hệ nhóm máu hệ ABO 2.Trình bày nguyên tắc xét nghiệm xác định nhóm máu hệ ABO 3.Thực kỹ thuật xét nghiệm xác định nhóm máu hệ ABO 4.Nhận định giải thích kết xét nghiệm xác định nhóm máu hệ ABO 5.Trình bày ứng dụng xét nghiệm xác định nhóm máu ABO NỘI DUNG ĐẠI CƯƠNG - Nhóm máu diện kháng nguyên(KN) màng hồng cầu Bản chất KN glycoprotein Trên màng hồng cầu có nhiều loại glycoprotein nên có nhiều loại KN tạo thành hệ nhóm máu khác nhau,trong co hai hệ nhóm máu quan trọng hệ nhóm máu ABO Rheus Trong nhóm máu hệ ABO,màng hồng cầu người có loaij KN A B - Mỗi KN có kháng thể(KT) tương ứng,khi KN kT tương ứng gặp nhausex xảy tượng ngưng kết Ví dụ KN A ngưng kết gặp KT α ( anti A ), KN B ngưng kết gặp KT β (anti B) KT tồn huyết chia thành loại: KT tự nhiên (ví dụ KT hệ nhóm máu ABO) KT miễn dịch (ví dụ KT hệ nhóm máu Rheus) - Căn vào có mặt KN màng hồng cầu KT có huyết thanh,Lansteiner phân loại máu hệ ABO làm nhóm A,B,AB O theo bảng sau: Kháng nguyên Kháng thể Genotype A A Anti B (β) OA,AA B B Anti A (α) OB,BB AB AB (A B) Không AB O Không Anti AB (α β) OO Nhóm máu 2.Ngun tắc Giáo Trình TT.Sinh lý Có hai phương pháp dùng để xác định nhóm máu, phương pháp trực tiếp (xi) dùng huyết mẫu để tìm KN màng hồng cầu phương pháp gián tiếp (ngược) dùng hồng cầu mẫu để tìm KT huyết 2.1.Ngun tắc xác định nhóm máu phương pháp trực tiếp Lấy máu người thử trộn với giọt huyết mẫu khác biết trước KT, dụa vào tượng ngưng kết có xãy hay khơng,từ suy KN màng hồng cầu tương ứng suy nhóm máu người cần thử 2.2.Nguyên tắc xác định nhóm máu phương pháp gián tiếp Lấy máu cảu người thử tách huyết sau trộn với giọt hồng cầu mẫu khác nhau, dựa vào tượng ngưng kết có xảy hay khơng, từ suy KT có huyết suy nhóm máu người cần thử PHƯƠNG TIỆN DỤNG CỤ - Dụng cụ lấy máu: lancet, bông, cồn 70o - Các lọ đựng huyết mẫu ( anti A, anti B, anti AB) hồng cầu mẫu ( hồng cầu A, hồng cầu B, hồng cầu O ) - Lame, đũa thủy tinh, bút chì sáp ( hay bút lơng ) - Khay hạt đậu KỸ THUẬT XÁC ĐỊNH NHÓM MÁU THEO PHƯƠNG PHÁP TRỰC TIẾP 4.1 Chuẩn bị dụng cụ bệnh nhân - Mâm dụng cụ: đầy đủ - Bệnh nhân định, tay sạch, giải thích đầy đủ, an tâm hợp tác 4.2 Nhỏ huyết mẫu máu lên lame - Nhỏ huyết lên lame: nhỏ giọt huyết mẫu ( Anti A, Anti B Anti AB) lên lame - Nhỏ mấu lên lame: lấy máu mao mạch + Sác trùng cồn 70o cạnh bên đầu ngón tay số bàn tay không thuận, trẻ nhỏ lấy máu ngón chân gót chân + Lấy lancet khỏi bao, cầm đuôi kim, tạo vết thương cách đâm nhanh gọn, dứt khốt vào vị trí sát trùng + Nặn giọt máu đường kính khoảng 3mm nhỏ lên bên cạnh giọt anti + Dùng lau phần máu cịn lại ngón tay bệnh nhân Giáo Trình TT.Sinh lý giọt huyết khác Giọt máu Hình Các giọt huyết mẫu máu lame 4.3 Trộn máu với giọt huyết mẫu: dùng đũa thủy tinh để trộn máu với giọt huyết với Tránh không dùng đũa trộn giọt sang giọt khác 4.4 Quan sát - Quan sát để xác định có biểu ngưng kết hay khơng + Nếu có ngưng kết thấy hồng cầu bị ngưng kết thành đám huyết + Nếu khơng có tượng ngưng kết: hồng cầu hòa lẫn với huyết mẫu tượng pha lỗng máu - Xác định xác giọt huyết mẫu có tượng ngưng kết 4.5 Đọc biện luận kết Nhóm máu ABO: có khả xảy - Trường hợp 1: hai giọt anti A anti AB có tượng ngưng kết.Giọt anti B không ngưng kết.Kết luận máu vừa thử thuộc nhóm máu A - Trường hợp 2: hai giọt anti AB anti B có tượng ngưng kết Giọt anti A không ngưng kết Kết luận máu người thử thuộc nhóm máu B - Trường hợp 3: ba giọt anti ngưng kết.Kết luận máu thuộc nhóm AB - Trường hợp 4: ba giọt anti không ngưng kết Kết luận máu thuộc nhóm máu O Giáo Trình TT.Sinh lý Nghiệm pháp hồng cấu ( Dùng Nghiệm pháp huyết ( dùng Nhóm huyết mẫu ) Anti hồng cầu mẫu ) máu Anti B Anti AB HCA HCB HCO ABO - - - + + - O + - + - + - A - + + + - - B + + + - - - AB A Xác định hệ nhóm máu ABO 5.ỨNG DỤNG - xác định nhóm máu trước truyền máu Sơ đồ truyền máu hệ nhóm máu ABO: - Xác định nhóm máu y pháp Giáo Trình TT.Sinh lý Hình Quy tắc đếm hồng cầu c) Cách tính Nếu gọi A tổng sốhồng cầu đếm 80 ô nhỏthì sốhồng cầu buồng đếm máu sẽlà A x 4.000 x 200 SốHC 1mm3= -= A x 10.000 x 16 Trong đó: A: sốhồng cầu đếm 80 ô 4.000 = 400 x 10 ( 1/400 mm2: diện tích nhỏ; 1/10 mm: chiều cao từmặt buồng đếm đến lamelle) 200: độpha loãng mẫu máu d) Rửa dụng cụ - Sau làm xong phải thổi hết dung dịch máu ống trộn hồng cầu rửa nhiều lần HCl 0,1N, nước cất - Rửa buồng đếm nước cất lau nhẹbằng bơng gịn - Sấy lau khô buồng đếm, ống trộn 27 Giáo Trình TT.Sinh lý XÉT NGHIỆM THỬ THAI (pregnancy test ) MỤC TIÊU:  Trình bày nguồn gốc, chất, tác dung thay đổi nồng độ hCG thai kỳ  Trình nguyên lý làm xét nghiệm thử thai  Phân tích kết xét nghiệm thai  Trình bày ứng dụng xét nghiệm thử thai NỘI DUNG: ĐẠI CƯƠNG: -Đây xét nghiệm đánh giá tồn hCG mẩu thử , từ gián tiếp chẩn đốn có thai -hCG hợp bào ni tiết ran gay trứng làm tổ, xuất huyết nước tiểu -Bản chất glucoprotein -Chức ngăn ngừa thối triển hoàng thể -Bắt đầu xuất máu khoãng 8-9 ngày, nước tiểu khoãng 14 ngày sau thụ tinh -Nồng độ tăng nhanh chóng, đạt mức tối đa khỗng 10-12 tuần sau thụ thai, sau giảm dần xuống từ tuần thứ 16-20 trì mức đến lúc sanh -Có nhiều phương pháp NX thử thai, trình bày phương pháp: +Xét nghiệm thử thai thỏ +Phương pháp miễm dịch que thử thai NGUYÊN LÝ XÉT NGHIỆM: tìm hCG mẩu thử -HCG Có tính kháng nguyên -Tạo anti – hCG cách tiêm hCG nhiều lần cho thỏ tạo anti-hCG có huyết thỏ => điều chế que thử thai - Lấy huyết nước tiểu phụ nữ có thai trộn với kháng thể huyết thỏ (anti-hCG) gây phản ứng ngưng kết, từ kết luận có hay khơng có hCG mẫu thử => có hay khơng có thai 28 Giáo Trình TT.Sinh lý PHƯƠNG TIỆN DỤNG CỤ: -Cốc đựng nước tiểu -Que thử nhanh (trên que có sẵn anti-hCG chất thị màu KỶ THUẬT XÉT NGHIỆM THỬ THAI: Lấy mẫu thử: -Lấy huyết nước tiểu người cần thử -Lấy nước tiểu nên lấy vào buổi sang, lấy dòng -Mẩu thử chưa làm cần bảo quản lạnh, làm phải để trở nhiệt độ thường lắc Phương pháp tiến hành: -Rót nước tiểu vào cốc nhựa (< 1cm) -Xé bao đựng que vị trí có đánh dấu -Nhúng que vào cốc đựng nước tiếu sau cho mực nước tiểu không vượt vạch qui định -Chờ phút, quan sát xuất vạch màu que: +Kết âm tính: xuất vạch màu +Kết dương tính: xuất hai vạch màu +Kết sai: khơng xuất vạch màu 29 Giáo Trình TT.Sinh lý Đọc biện luận kết quả: -Kết (-): có nghĩa mẫu thử khơng có hCG => người phụ nữ khơng có thai -Kết (+): có nghĩa mẫu thử có hCG => người phụ nữ có thai -Kết sai que thử bị lỗi, thao tác thử sai -Dương tính giả: xuất số chất giống hCG nước tiểu (khối u đường tiêu hóa, ăn dùng số thuốc có chất có hCG ỨNG DỤNG -Chẩn đốn có thai sớm, nhanh, dễ lamf, tiện lợi, người phụ nữ tự làm nhà 30 Giáo Trình TT.Sinh lý -Chẩn đốn, theo dõi, tiên lượng điều trị thai trứng -Dự đoán tuổi thai (ít làm) -Chẩn đốn phân biệt thai ngồi tử cung 31 Giáo Trình TT.Sinh lý THĂM DỊ CHỨC NĂNG THẬN BẰNG PHÂN TÍCH NƯỚC TIỂU MỤC TIÊU: Trình bày sơ lược hình thành nước tiểu Trình bày đặc điểm, tính chất nước tiểu thành phần có nước tiểu Trình bày ý nghĩa lâm sang giá trị phân tích nước tiểu I.TỔNG QUAN VỀ XÉT NGHIỆM NƯỚC TIỂU: Sự hình thành nước tiểu: -Nước tiểu hình thành liên tục từ thận, sản phẩm dịch lọc huyết tương -Đơn vị chức thận nephron (1-1,5 tr) -Thận quan tiết thể (cùng với da, hơ hấp ), tiết hấp thu chọn lọc chất theo nhu cầu thể, từ có vai trị: +Thải chất không cần thiết (từ sản phẩm chuyển hóa thể, thuốc …) +Cân nội mơi +Điều hịa huyết áp Thành phần nước tiểu -Thường gồm: ure, chất vơ cơ, hữu hịa tan nước -Chủ yếu sản phẩm từ thối hóa protein như: ure, creatinin, a uric -Các chất khác có thể thấy nước tiểu như:hormone , vitamin, thuốc… -Các phần tử hữu hình như: tế bào, trụ tế bào, tinh thể, dịch nhầy, vi khuẩn mặt dù khơng có nguồn gốc từ dịch lọc huyết tương, tìm thấy nước tiểu coi bệnh lý Cách lấy mẫu nước tiểu: 3.1 Lấy nước tiểu dòng +Nam: Kéo da qui đầu, để lộ lổ tiểu, rửa lổ tiểu nước, xà phòng, sát trùng povidine, bỏ nước tiểu đầu tiên, đưa lọ vơ trùng hứng dịng nước tiểu chảy 32 Giáo Trình TT.Sinh lý +Nữ: ngồi bồn vệ sinh, dùng tay tách môi lớn ra, rửa sach, sát trùng lổ tiểu, lau theo hướng từ trước sau, lấy nước tiểu dòng +Trẻ em: sát trùng lổ tiểu, mang túi nhựa vô trùng 3.2 Lấy nước tiểu qua sonde tiểu: -Được thực nhân viên y tế điều kiện vô trùng -Chỉ dùng không lấy phương pháp lấy dịng (tiểu khơng tự chủ, bí tiểu…) 3.3 Lấy nước tiểu qua chọc dò xương mu: -Do BS thực -Phải có cầu bang quang -Dùng kim chọc dò, chọc xương mu 2cm, đường trắng II PHÂN TÍCH CÁC ĐẶC ĐIỂM CỦA NƯỚC TIỂU Các đặc điểm vật lý: 1.1 Màu sắc; -Bình thường: màu vàng (màu sắc tố urochrome, urobilin ), nước tiểu cô đặc màu vàng thẩm, nước tiểu pha loãng màu vàng nhạc -Bất thường: Màu đỏ: tiểu máu, thuốc (rifamycin, riboflavin) Màu xá xị:tiểu hemoglobin, tiểu myoglobin Màu vàng đậm: bilirubin bệnh lý vàng da, thuốc (tetracycline) Màu trắng đục: nhiều đạm, tiểu mủ, tinh thể, tiểu dưỡng trấp Màu xanh: biliverdin, xanh methylene 1.2 Tỉ trọng: dùng khảo sát chức cô đặc pha lỗng nước tiểu thận -Bình thường: +Pha lỗng tối đa: 1,005 +Cơ đặc tối đa: 1,030 +Giới hạn thường gặp: 1,018 – 1,027 -Bất thường : +Sinh lý: 33 Giáo Trình TT.Sinh lý Tăng: trẻ em, uống nước, vận động nhiều Giảm: uống nhiều nước +Bệnh lý: Tăng: tiểu đạm, đái tháo đường Giảm: dùng thuốc lợi tiểu, đái tháo nhạc, suy thận mạn 1.3 pH nước tiểu: - Bình thường nước tiểu acid với pH=6 -Sinh lý: người bình thường, pH dao động từ 4,5 đến Kiềm: (>6,5) sau bữa ăn Toan: (