Đánh giá tác động kháng viêm và làm giảm nồng độ acid uric máu của cao cúc chân vịt (sphaeranthus africanus l )

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH TRẦN VĂN TUYÊN ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM VÀ LÀM GIẢM NỒNG ĐỘ ACID URIC MÁU CỦA CAO CÚC CHÂN VỊT (SPHAERANTHUS AFRICANUS L.) NGÀNH: DƯỢC LÝ – DƯỢC LÂM SÀNG MÃ SỐ: 8720205 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS NGÔ KIẾN ĐỨC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu nêu luận văn khách quan, trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Trần Văn Tuyên i TÓM TẮT ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM VÀ LÀM GIẢM NỒNG ĐỘ ACID URIC MÁU CỦA CAO CÚC CHÂN VỊT (SPHAERANTHUS AFRICANUS L.) Đặt vấn đề: Cúc chân vịt (Sphaeranthus africanus L.) sử dụng y học dân gian chữa số bệnh viêm họng, sưng, đau có số nghiên cứu khoa học tác dụng dược lý, có tiềm điều trị gout thơng qua ức chế hoạt tính enzym xanthin oxidase kháng viêm Mục tiêu: đánh giá tác động ức chế hoat tính enzym xanthin oxidase kháng viêm in vitro cao Cúc chân vịt; đồng thời, đánh giá động kháng viêm làm giảm nồng độ acid uric máu in vivo cao toàn Cúc chân vịt (Sphaeranthus africanus L.) Đối tượng - Phương pháp nghiên cứu: toàn mặt đất Cúc chân vịt điều chế phương pháp ngấm kiệt với ethanol 80% sau lắc phân bố để điều chế cao phân đoạn n-hexan, cloroform, ethyl acetat, n-butanol phân đoạn nước Trong thử nghiệm in vitro, cao Cúc chân vịt đánh giá tác động ức chế hoạt tính enzym XO theo phương pháp Noro cộng (1983) hoạt tính kháng viêm phương pháp ức chế biến tính protein Trong thử nghiệm in vivo, cao toàn phần Cúc chân vịt đánh giá tác động làm giảm nồng độ acid uric máu mô hình gây tăng acid uric máu kali oxonat tác động kháng viêm mơ hình gây phù bàn chân chuột carrageenan Kết quả: cao toàn phần cao phân đoạn Cúc chân vịt thể tác động ức chế hoạt tính enzym XO hoạt tính kháng viêm in vitro Trong cao, cao ethyl acetat với giá trị IC50 = 651,38 ± 14,59 µg/ml có hoạt tính cao thử nghiệm ức chế hoạt tính enzym XO, cao n-butanol với giá trị IC50 = 5,04 ± 0,05 mg/ml có hoạt tính kháng viêm cao Trong thử nghiệm in vivo, cao tồn phần Cúc chân vịt có tác động làm giảm nồng độ acid uric máu có khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng bệnh (p < 0,05) hai liều 1,25 g 2,5 g cao /kg chuột, giảm tương đương với allopurinol (liều 10 mg/kg) Cao toàn phần Cúc chân vịt hai liều 1,25 g 2,5 g/kg chuột làm giảm độ phù bàn chân chuột chưa có khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bệnh giảm lơ đối chiếu (diclofenac 10 mg/kg) Kết luận: cao toàn phần cao phân đoạn thể tác động ức chế hoạt tính xanthin oxidase kháng viêm in vitro Cao toàn phần Cúc chân vịt liều hai liều 1,25 g 2,5 g cao/kg chuột có tác động làm giảm nồng độ acid uric máu mơ hình gây tăng acid uric máu kali oxonat, đồng thời chưa thể tác động kháng viêm mô hình gây phù bàn chân chuột carrageenan Từ khóa: xanthin oxidase, kháng viêm, Sphaeranthus africanus, gout i ABSTRACT THE ANTI-INFLAMMATORY AND URIC ACID LOWERING EFFECTS OF EXTRACTION OF SPHAERANTHUS AFRICANUS L Background: Sphaeranthus africanus L is being used in Viet nam as a traditional medicine for sore throat, swelling and pain relief treatment This plant has some scientific studies on pharmacological effects, which may have potential in treatment of gout with xanthine oxidase inhibitory activity or anti-inflammatory effect Objectives: Extracts of Sphaeranthus africanus L are evaluated in vitro for xanthin oxidase inhibitory and anti-inflammatory activity and in vivo for anti-inflammatory and uric acid lowering effects Method: Sphaeranthus africanus L., whole plant on the ground, was extracted with alcohol 80% by percolation and then prepared for total and fractions extract (n-hexane fractions, chloroform, ethyl acetate, n-butanol and water fractions) The extracts were evaluated in vitro for XO enzyme inhibitory activity based on the method of Noro et al (1983) and anti-inflammatory activity by inhibiting protein denaturation The total extract was evaluated in vivo for blood uric acid levels lowering effect using potassium oxonateinduced hyperuricemia model and anti-inflammatory effect using carrageenan-induced mouse paw edema model Results: The total extract and the fractions of Sphaeranthus africanus L showed both inhibitory effects on XO enzyme and anti-inflammatory activity in vitro Ethyl acetate extract had the highest activity with IC50 651.38 ± 14.59 µg/ml in the XO enzyme activity inhibition test and n-butanol extract, with IC50 5.04 ± 0.05 mg/ml, had the highest antiinflammatory activity In the in vivo test, the effect of total extract in reducing blood uric acid levels had a significant difference compared with the control group (p < 0.05) at both doses of 1.25 g and 2.5 g/kg in mice, and is equal to that of allopurinol (10 mg/kg dose) Total extract of Sphaeranthus africanus L., at both doses of 1.25 g and 2.5 g/kg in mice, reduced the edema of mice feet, there was no significant difference compared to the control group and the reduction was less than the control group (diclofenac with dose of 10 mg/kg in mice) Conclusions: Total extract and fractions both showed effects on xanthine oxidase inhibitory and anti-inflammatory activity in vitro Total extract of Sphaeranthus africanus L., at two doses of 1.25 g and 2.5 g/kg in mice, reduced blood uric acid levels and demonstrated the trend of reducing the edema of mice foot on the carrageenan-induced mouse paw edema model Keywords: xanthin oxidase, anti-inflammatory, Sphaeranthus africanus, gout LỜI CẢM ƠN Đầu tiên em xin gửi lời chân thành cảm ơn đến tồn thể q thầy khoa Dược – Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh, người thầy, tận tình dạy bảo truyền đạt kiến thức cho em suốt hai năm em học trường Cũng xin gửi lời cảm ơn đến hai bạn Trương Thị Vân Nguyễn Hồng Ngọc lớp D15, người đồng hành từ bắt đầu đề tài Hai bạn cố gắng làm tốt khơng kết mà ln tận tình giúp đỡ, chia sẻ Thật cảm ơn bạn Em xin chân thành cảm ơn anh Đạt, chị Thảo thầy mơn Sinh Hóa ln giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian làm đề tài môn Em xin cảm ơn chị Nghĩa thầy cô môn Dược lý, ln hỗ trợ q trình em làm thử nghiệm Xin chân thành cảm ơn cô Tuyền, bạn Thảo người bạn không giúp đỡ mà cịn góp ý, động viên nhiều từ lúc làm đề tài lúc viết bài, sửa bài, báo cáo Em xin chân thành cảm ơn biết ơn thầy TS Ngô Kiến Đức, người trực tiếp hướng dẫn luận văn cho em Thầy không người hướng dẫn trực tiếp mà cịn ln hỗ trợ cho em tất thứ em cần thiết để thực đề tài Thầy thông cảm, động viên cho em tới kết cuối Có giai đoạn khơng có thầy có lẽ em bỏ cuộc, kiên nhẫn thầy em lại tiếp tục Em ghi nhớ giúp đỡ thầy Cuối cùng, với tất lịng kính u chân thành nhất, xin cảm ơn ba mẹ gia đình ln chỗ dựa vật chất tinh thần để n tâm học tập hồn thiện để có ngày hơm Một lần xin chân thành cảm ơn tất cả! MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC HÌNH .xi ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 Cúc chân vịt (Sphaeranthus africanus L.) 1.2 Tăng acid uric máu – Mơ hình gây tăng acid uric máu 1.3 Độc tính cấp 16 1.4 Viêm – Mơ hình gây viêm 17 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Đối tượng, nguyên vật liệu 20 2.2 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật 22 2.3 Điều chế cao Cúc chân vịt 23 2.4 Đánh giá tác động ức chế enzym xanthin oxidase in vitro 24 2.5 Khảo sát hoạt tính kháng viêm in vitro phương pháp ức chế biến tính albumin lịng trắng trứng 25 2.6 Khảo sát độc tính cấp cao toàn phần Cúc chân vịt 26 2.7 Khảo sát tác động làm hạ acid uric mơ hình gây tăng acid uric máu chuột nhắt trắng 26 i 2.8 Khảo sát tác động kháng viêm mơ hình gây phù bàn chân chuột carrageenan 30 2.9 Phương pháp xử lý liệu, thống kê 31 Chương KẾT QUẢ 33 3.1 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật 33 3.2 Điều chế cao Cúc chân vịt 33 3.3 Tác động ức chế enzym xanthin oxidase in vitro cao Cúc chân vịt 34 3.4 Khảo sát hoạt tính kháng viêm in vitro phương pháp ức chế biến tính protein lòng trắng trứng cao Cúc chân vịt 43 3.5 Độc tính cấp cao toàn phần Cúc chân vịt 51 3.6 Tác động làm hạ acid uric máu cao toàn phần Cúc chân vịt chuột gây tăng acid uric máu kali oxonat 52 3.7 Tác động kháng viêm mơ hình gây phù bàn chân chuột carrageenan chuột nhắt cao toàn phần Cúc chân vịt 55 Chương BÀN LUẬN 58 4.1 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật kết điều chế cao Cúc chân vịt 58 4.2 Tác động ức chế hoạt tính enzym XO 59 4.3 Tác động kháng viêm in vitro phương pháp ức chế biến tính albumin lịng trắng trứng 60 4.4 Tác động hạ acid uric máu mơ hình gây tăng acid uric máu chuột nhắt trắng 61 4.5 Tác động kháng viêm in vivo 63 4.6 Tiềm điều trị gout Cúc chân vịt (Sphaeranthus africanus L.) 64 i Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 66 5.1 Kết luận 66 5.2 Kiến nghị 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt DMSO ĐVTN EDTA GLUT1 GLUT9 HPLC HTCOX IC50 LD50 M NSAID RT-PCR SD SEM TT XDH XO XOR Từ gốc Dimethyl sulfoxide Nghĩa tiếng Việt Động vật thử nghiệm Ethylene diamine tetraacetic acid Glucose transporter Glucose transporter High performance liquid chromatography Half-maximal inhibitory concentration Lethal Dose 50 Chất vận chuyển glucose Chất vận chuyển glucose Sắc ký lỏng hiệu cao Hoạt tính chống oxy hóa Nồng độ ức chế 50% Liều gây chết 50% đông vật thử nghiệm Mean Giá trị trung bình Non-steroidal anti-inflamatory drug Thuốc kháng viêm không steroid Real-time polymerase chain Phản ứng trùng hợp chuỗi reaction Standard deviation Độ lệch chuẩn Standard error of the mean Sai số chuẩn trung bình Thuốc thử Xanthine dehydrogenase Xanthine oxidase Xanthine oxidoreductase DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số nghiên cứu liên quan đến Cúc chân vịt Bảng 2.2 Danh mục hóa chất dung mơi 21 Bảng 2.3 Danh mục thiết bị, dụng cụ 22 Bảng 2.4 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật Cúc chân vịt 23 Bảng 2.5 Quy trình định lượng acid uric 29 Bảng 3.6 Kết phân tích sơ thành phần hóa thực vật 33 Bảng 3.7 Kết điều chế cao toàn phần cao phân đoạn Cúc chân vịt 34 Bảng 3.8 Kết khảo sát tác động ức chế hoạt tính enzym XO in vitro cao toàn phần 34 Bảng 3.9 Kết khảo sát tác động ức chế hoạt tính enzym XO in vitro cao n-hexan 35 Bảng 3.10 Kết khảo sát tác động ức chế hoạt tính enzym XO in vitro cao cloroform 36 Bảng 3.11 Kết khảo sát tác động ức chế hoạt tính enzym XO in vitro cao ethyl acetat 37 Bảng 3.12 Kết khảo sát tác động ức chế hoạt tính enzym XO in vitro cao n-butanol 38 Bảng 3.13 Kết khảo sát tác động ức chế hoạt tính enzym XO in vitro cao nước 39 Bảng 3.14 Kết khảo sát tác động ức chế hoạt tính enzym XO in vitro allopurinol 40 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Bovine Serum Albumin Protein Denaturation Assay”, International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research, 27, pp.145-153 39 Rahman H., Eswaraiah M C , Dutta A (2015), “In-vitro anti-inflammatory and anti-arthritic activity of Oryza Sativa Var joha rice (an aromatic indigenous rice of Assam)”, Am Eurasian J Agric Environ Sci, 15, pp.115-121 40 Winter C.A, Risley E.A, Nuss G.W (1962), “Carrageenan-induced edema in the hind paw of rat as an assay for anti-inflammatory activity”, Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, 111(3), pp.544-547 41 Patel M.D, Gowda S (2012), “In Vivo Animal Models in Preclinical Evaluation of Anti-Inflammatory Activity-A Review”, International Journal of Pharmaceutical Reasearch & Allied Sciences, 1(2), pp.1-5 42 Vogel H.G (2008), Drug Discovery and Evaluation: Pharmacological Assays, Springer, New York 43 Badariath A et al (2010), “A Review on in vitro antioxidant methods : comparisions, correlations and considerations”, International Journal of PharmTech Research, 2(2), pp.1276-1285 44 Muthuswamy Umamaheswari et al (2007),“Xanthine oxidase inhibitory activity of some Indian medicinal plants”, Journal of Ethnopharmacology, 109, pp.547- 551 45 Alamgeer, Uttra A M, Hasan U.H (2017), “Anti-arthritic activity of aqueousmethanolic extract and various fractions of Berberis orthobotrys Bien ex Aitch’, BMC complementary and alternative medicine, 17(1), p.371 46 Galani V.J, Patel B.G, Rana D.G (2010), “Sphaeranthus indicus Linn.: A phytopharmacological review”, International journal of Ayurveda research, 1(4), pp.247–253 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 47 Ramachandran S (2013), “Review on Sphaeranthus indicus Linn (Koṭṭaikkarantai) ”, Pharmacognosy reviews, 7(14), pp.157-169 48 Ling X., Bochu W (2014), “A review of phytotherapy of gout: perspective of new pharmacological treatments”, Die Pharmazie, 69(4), pp.243-256 49 Shin S.A, Joo B.J, Lee J.Set al (2020), “Phytochemicals as Anti-Inflammatory Agents in Animal Models of Prevalent Inflammatory Diseases”, Molecules (Basel, Switzerland), 25(24) 50 Namrata G.M, Manojkumar Z.C, Chopda T.M (2015), “A Review on Sphaeranthus Indicus Linn: Multipotential Medicinal Plant”, International Journal ofPharmaceutical Research & Allied Sciences, 4(3), pp.48-74 51 Shi Y-W, Wang C-P, Wang X et al (2012), ‘Uricosuric and nephroprotective properties of Ramulus mori ethanol extract in hyperuricemic mice”, Journal of ethnopharmacology, 143(3), pp.896-904 52 Yu Z, Fong WP, Cheng CH (2006), “The dual actions of morin (3, 5,7,2r,4rpentahydroxyflavone) as a hypouricemic agent: uricosuric effect and xanthine oxidase inhibitory activity”, The Journal of pharmacology and experimental therapeutics, 316(1), pp.169-175 53 Hou C-W, Lee Y-C, Hung H-F et al (2012), “Longan seed extract reduces hyperuricemia via modulating urate transporters and suppressing xanthine oxidase activity”, The American journal of Chinese medicine, 40(5), pp.979- 991 54 Nguyen T.D, Thuong P.T, Hwang I.H et al (2017), “Anti-Hyperuricemic, AntiInflammatory and Analgesic Effects of Siegesbeckia orientalis L Resulting from the Fraction with High Phenolic Content”, BMC complementary and alternative medicine, 17(1), p.191 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 55 Huang J et al (2011), “Effects of Genistein, Apigenin, Quercetin, Rutin and Astilbin on serum uric acid levels and xanthine oxidase activities in normal and hyperuricemic mice”, Food and chemical toxicology : an international journal published for the British Industrial Biological Research Association, 49(9), pp.1943–1947 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh MỤC LỤC PHỤ LỤC Phụ Lục Cấu trúc hóa học danh pháp IUPAC dẫn xuất từ Cúc chân vịt (Sphaeranthus africanus L.) PL-1 Phụ Lục Kết khảo sát tác động ức chế enzym xanthin oxidase in vitro cao Cúc chân vịt PL-3 Phụ Lục Kết khảo sát tác động kháng viêm in vitro phương pháp ức chế biến tính albumin lịng trắng trứng PL-6 Phụ Lục Kết khảo sát tác động hạ acid uric máu mơ hình gây tăng acid uric máu chuột nhắt trắng PL-9 Phụ Lục Kết khảo sát tác động kháng viêm mơ hình gây phù bàn chân chuột carrageenan chuột nhắt cao Cúc chân vịt PL-10 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-1 PHỤ LỤC Cấu trúc học danh pháp IUPAC dẫn xuất từ Cúc chân vịt (Sphaeranthus africanus L.) (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12) (13) (14) Cấu trúc dẫn xuất từ Cúc chân vịt Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-2 STT Danh pháp IUPAC thành phần Cúc chân vịt (1S,5R,6R)-3-(hydorxymethyl)-6-isopropyl-5-(((Z)-3-methylpenta-1,3-dien2-yl)oxy)-2-oxocyclohex-3-en-1-yl (R)-2,3,3-trimethyloxirane-2-carboxylate (1S,5R,6R)-3-(hydroxymethyl)-6-isopropyl-5-(((Z)-2-methylbut-2enoyl)oxy-2-oxocyclohex-3-en-1-yl-2-methylene-215-but-2-enoate (1S,5R,6R)-3-(hydroxymethyl)-6-isoprpyl-5-(((Z)-3-methylpenta-1,3-dien-2yl)oxy)-2-oxocyclohex-3-en-1-yl (2R,3R)-2,3-dihydroxy-2-methylbutanoate (1S,5R,6R)-3-(hydroxymethyl)-6-isoprpyl-5-(((Z)-3-methylpenta-1,3-dien-2yl)oxy)-2-oxocyclohex-3-en-1-yl (2S,3R)-2,3-dihydroxy-2-methylbutanoate 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5-hydroxy-3,6,7-trimethoxy-4H-chromen-4-one 5,6-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3,7-dimethoxy-4H-chromen4-one (3S,10S,13R)-17-((2R,E)-5-ethyl-6-methylhept-3-en-2-yl)-3,10,13-trimthyl2,3,4,5,6,9,10,11,12,13,14,15,16,17-tetradecahydro-1Hcyclopenta[a]phenanthrene (3S,10R,13R)-17-((2R,E)-5-ethyl-6-methylhept-3-en-2-yl)-3,10,13-trimthyl2,3,4,5,6,9,10,11,12,13,14,15,16,17-tetradecahydro-1Hcyclopenta[a]phenanthrene (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22hexanene 10 (4R, 4As,6Br, 8Ar, 12Bs, 14As)-4,4a,6b,8a,11,12b,14aoctamethyldocosahydropicen-3-ol 11 5,6-dihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methylphenyl)-3,7-dimethoxy-4H-chromen4-one 12 (3R,4S,5S,6S)-6-(hydroxymethyl)-5-methyl-6-proxytetrahydro-2H-pyran3,4-diol 13 di((Z)-but-2-en-2-yl)-(1R,2S,3R)-5-((((Z)-but-2-en-2yl)oxy)carbonyl)oxy)-2-isopropyl-6-oxocyclohex-4-ene-1,3-dicarboxylate 14 (3R,4S,5S,6S)-6-(hydroxymethyl)-5-methyl-6-propoxytetrahydro-2H-pyran3,4-diol Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-3 PHỤ LỤC Kết khảo sát tác động ức chế enzym xanthin oxidase in vitro cao Cúc chân vịt PL 2.1 Cao toàn phần Nồng độ (μg/ml) 500 1000 1500 2000 2500 0,248 0,198 0,169 0,135 0,085 0,032 Abs 0,239 0,192 0,165 0,137 0,086 0,037 0,242 0,193 0,165 0,134 0,087 0,036 IC50 (μg/ml) Mean ± SD I (%) 20,16 19,67 20,25 31,86 30,96 31,82 45,57 42,68 44,63 65,73 64,02 64,05 87,10 84,52 85,12 1497,47 1550,23 1561,11 1536,27 ± 34,04 μg/ml PL 2.2 Cao n-hexan Nồng độ (μg/ml) 500 1000 1500 2000 2500 0,230 0,209 0,172 0,154 0,094 0,075 Abs 0,247 0,225 0,183 0,168 0,103 0,082 0,238 0,213 0,173 0,160 0,101 0,084 IC50 (μg/ml) Mean ± SD I (%) 9,13 8,91 10,50 25,22 25,91 27,31 33,04 31,98 32,77 59,13 58,30 57,56 67,39 66,80 64,71 1891,70 1872,72 1912,03 1892,26 ± 19,83 μg/ml PL 2.3 Cao cloroform Nồng độ (μg/ml) 500 1000 1500 2000 2500 0,218 0,202 0,167 0,143 0,127 0,105 Abs 0,222 0,207 0,170 0,146 0,128 0,101 0,221 0,204 0,168 0,146 0,125 0,103 IC50 (μg/ml) Mean ± SD Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn I (%) 7,34 6,76 7,69 23,39 23,42 23,98 34,40 34,23 33,94 41,74 42,34 43,44 51,84 54,51 53,39 2350,26 2275,79 2290,03 2350,36 ± 39,53 μg/ml Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-4 PL 2.4 Cao ethyl acetat Nồng độ (μg/ml) 100 300 500 1000 1500 0,263 0,217 0,162 0,145 0,094 0,025 Abs 0,264 0,214 0,164 0,147 0,097 0,027 0,247 0,199 0,154 0,134 0,092 0,020 IC50 (μg/ml) Mean ± SD I (%) 17,49 18,94 19,43 38,40 37,88 37,65 44,87 44,32 45,75 64,26 63,26 62,75 90,49 89,77 91,90 657,17 662,34 629,89 651,38 ± 14,59 μg/ml PL 2.5 Cao n-butanol Nồng độ (μg/ml) 100 300 500 1000 1500 0,189 0,167 0,138 0,127 0,075 0,032 Abs 0,225 0,198 0,163 0,146 0,087 0,040 0,210 0,189 0,154 0,139 0,082 0,039 IC50 (μg/ml) Mean ± SD I (%) 11,64 12,00 10,00 26,98 27,56 26,67 32,80 35,11 33,81 60,32 61,33 60,95 83,07 82,22 81,43 820,49 809,32 828,82 819,54 ± 9,79 μg/ml PL 2.6 Cao nước Nồng độ (μg/ml) 4000 5000 6000 7000 8000 0,222 0,188 0,171 0,130 0,105 0,096 Abs 0,198 0,144 0,127 0,117 0,082 0,077 0,225 0,175 0,160 0,147 0,111 0,098 IC50 (μg/ml) Mean ± SD Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn I (%) 15,32 27,27 22,22 22,97 35,86 28,89 41,44 40,91 34,67 52,70 58,59 50,67 56,75 61,11 56,44 6580,75 7080,82 7126,09 6929,22 ± 302,63 μg/ml Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-5 PL 2.7 Allopurinol Nồng độ (μg/ml) 10 20 0,247 0,141 0,116 0,067 0,037 0,026 Abs 0,239 0,135 0,114 0,059 0,038 0,024 0,243 0,141 0,115 0,063 0,048 0,028 IC50 (μg/ml) Mean ± SD Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 42,92 53,04 72,87 85,02 89,47 1,55 I (%) 41,98 52,67 74,07 80,25 88,48 1,51 1,55 ± 0,06 μg/ml 42,80 52,67 74,07 83,13 89,30 1,62 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-6 PHỤ LỤC Kết khảo sát tác động kháng viêm in vitro phương pháp ức chế biến tính albumin lịng trắng trứng PL 3.1 Cao tồn phần Nồng độ (mg/ml) 1,860 1,243 1,134 1,070 1,036 0,914 Abs 1,858 1,279 1,142 1,087 1,044 0,928 1,859 1,313 1,127 1,078 1,011 0,923 IC50 (mg/ml) Mean ± SD 33,17 39,03 42,47 44,30 50,86 5,98 I (%) 31,16 38,54 41,50 43,81 50,05 6,09 5,95 ± 0.15 mg/ml 29,37 39,38 42,01 45,62 50,35 5,80 PL 3.2 Cao n-hexan Nồng độ (mg/ml) 1,358 0,830 0,693 0,533 0,485 0,414 Abs 1,357 0,795 0,706 0,590 0,497 0,410 1,359 0,811 0,701 0,563 0,494 0,415 IC50 (mg/ml) Mean ± SD 38,89 48,97 60,75 64,29 69,52 4,15 I (%) 41,41 47,97 56,52 63,38 69,79 4,19 4,17 ± 0,02 mg/ml 40,23 48,42 58,57 63,65 69,46 4,17 PL 3.3 Cao cloroform Nồng độ (mg/ml) 1,720 1,184 1,050 0,790 0,592 0,515 Abs 1,719 1,197 1,025 0,794 0,609 0,559 1,721 1,213 0,996 0,797 0,620 0,541 IC50 (mg/ml) Mean ± SD Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 31,16 38,95 54,07 65,58 70,06 2,81 I (%) 30,37 40,37 53,81 64,57 67,48 2,87 2,84 ± 0,03 mg/ml 29,52 42,13 53,69 63,97 68,56 2,84 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-7 PL 3.4 Cao ethyl acetat Nồng độ (mg/ml) 2,5 1,786 1,372 1,243 1,133 1,032 0,765 Abs 1,785 1,385 1,249 1,172 1,026 0,798 1,787 1,381 1,237 1,157 1,027 0,821 IC50 (mg/ml) Mean ± SD 23,18 30,40 36,56 42,22 57,17 3,56 I (%) 22,41 30,03 34,34 42,52 55,29 3,68 3,65 ± 0,08 mg/ml 27,72 30,78 35,25 42,53 54,06 3,72 PL 3.5 Cao n-butanol Nồng độ (mg/ml) 1,257 1,117 0,877 0,724 0,675 0,478 Abs 1,257 1,092 0,916 0,774 0,701 0,463 1,257 1,139 0,091 0,751 0,696 0,471 IC50 (mg/ml) Mean ± SD 11,14 30,23 42,40 46,30 61,97 4,98 I (%) 13,13 27,13 38,42 44,23 63,17 5,09 5,04 ± 0,05 mg/ml 9,39 28,32 40,25 44,63 62,57 5,06 PL 3.6 Cao nước Nồng độ (mg/ml) 1,859 1,142 1,087 1,025 0,978 0,917 Abs 1,860 1,124 1,103 1,092 0,960 0,901 1,858 1,135 1,093 1,060 0,976 0,911 IC50 (mg/ml) Mean ± SD Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 38,57 42,53 44,86 47,39 50,67 6,79 I (%) 39,57 40,70 41,29 48,39 51,56 6,80 6,87 ± 0,12 mg/ml 38,75 41,44 42,79 46,77 50,75 7,01 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-8 PL 3.7 Diclofenac natri Nồng độ (mg/ml) 0,5 1,2 1,5 1,342 0,956 0,653 0,549 0,402 0,214 Abs 1,342 0,942 0,639 0,542 0,404 0,202 1,342 0,958 0,671 0,548 0,395 0,207 IC50 (mg/ml) Mean ± SD Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 28,76 51,34 59,09 70,04 84,05 1,01 I (%) 29,81 52,38 59,61 69,90 84,95 0,98 1,00 ± 0.01 mg/ml 28,61 50,00 59,17 70,57 84,58 1,01 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-9 PHỤ LỤC Kết khảo sát tác động hạ acid uric máu phác đồ điều trị (một liều) PL 4.1 Hàm lượng acid uric máu phác đồ điều trị (một liều) Hàm lượng Acid uric (mg/dl) CB C1 4,8 4,1 STT SL 4,9 CSL 3,9 C2 4,5 DC 3,9 4,2 3,8 4,2 4,9 4,8 3,6 3,2 4,1 3,9 4,1 4,9 4,9 4,2 4,7 4,8 4,7 4,7 6,0 6,7 5,2 5,2 3,8 3,9 3,8 4,2 4,5 4,8 4,8 4,2 4,4 4,2 4,5 4,9 5,1 5,1 3,5 3,9 4,7 4,5 5,1 4,0 4,3 TB 4,20 4,34 5,26 4,24 4,61 4,24 SEM 0,23 0,15 0,26 0,15 0,13 0,18 C2 4,6 DC 3,8 PL 4.2 Hàm lượng acid uric máu phác đồ dự phòng Hàm lượng Acid uric (mg/dl) CB C1 5,3 3,1 STT SL 4,3 CSL 3,3 TB 3,3 3,6 3,2 4,2 4,2 4,7 4,2 3,96 3,4 3,7 3,4 4,5 4,9 4,9 4,5 4,08 5,3 4,6 5,0 4,7 4,6 4,7 5,6 4,98 3,6 3,1 3,7 3,1 4,4 4,4 4,9 3,79 3,6 3,4 3,0 3,1 4,7 4,4 5,2 4,00 4,0 4,0 4,3 4,6 4,6 4,5 5,1 4,36 SEM 0,19 0,25 0,14 0,25 0,29 0,15 SL: lô sinh lý; CSL: lô chứng sinh lý; CB: lô chứng bệnh; C1: lô uống cao Cúc chân vịt liều 1,25 g 2,5 g cao/g chuột; DC: lô đối chiếu uống allopurinol 10 mg/kg Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-10 PHỤ LỤC Kết khảo sát tác dụng điều trị viêm in vivo (đơn vị thể tích: ml x 10-2) Lô Chuột V0 10 10 10 10 Chứng 10 bệnh 10 10 10 10 Mean 10 10 10 10 10 DC 5 10 mg/kg 10 10 10 10 Mean 10 10 10 C1 10 (Cúc 10 1,25 10 g/kg) 10 10 11 Mean 10,2 V3h 16 16,5 15,5 15,5 16 15 16 17 16 15,94 15,5 15,5 16 15,5 17 15 15 16 16 15,72 15 16 15 19 15,5 16 15 17 16,06 V1 16 15 14 15 14,5 14,5 15 15 16 15,00 13 15 14 14,5 15 14 14,5 14 14,5 14,28 15 14 15 14 14 15 15 17 14,88 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn V2 15 15 13,5 14,5 15 14,5 14 14 14 14,39 13,5 13,5 13 14 14 13,5 13 13 14 13,50 14 14,5 13,5 14 13,5 13,5 14 15 14,00 V3 15 14 14 14,5 14 14 15 15 15 14,50 13,5 13 13 14 13,5 14 13,5 12,5 13 13,33 16 14 13 13,5 13 14 14 14 13,94 V4 15 13 15 15,5 14,5 15 14 15 13 14,44 14 14 13,5 14 13,5 13,5 13,5 12,5 13 13,50 14 13,5 13 15 14 14 15 14 14,06 V5 14 16 14 15 15 13 14 14 15 14,44 13 12 12 13 14 13 12 11 12 12,44 13 14 13 14 14 14 14,5 14,5 13,88 V6 14 13 14 14 14 13 15 15 14 14,00 13 12 12 13 13 13 13 11 12 12,44 15 14 13 14 14 14 14 14 14,00 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-11 Kết khảo sát tác dụng điều trị viêm in vivo (đơn vị thể tích: ml x 10-2) Lơ C2 (Cúc 2,5 g/kg) Mean Chuột V0 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 V3h 15 17 15 16 16 17 17 15 15 15,89 V1 14 15 14 14 14 14 14 14 14 14,11 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn V2 14 13 14 13 14 15 14 14 14 13,89 V3 13 13 14 13 14,5 15 14 14 14 13,83 V4 14 14 14 13 14 14.5 14 14 14 13,94 V5 13 14 14 13,5 13,5 14 14 14 14 13,78 V6 13 13 13 13 14 14 14 14 13,5 13,50