Nghiên cứu đánh giá tác dụng chống viêm và phân lập một số thành phần từ alkaloid toàn phần của rễ cây bá bệnh (eurycoma longifolia jack )

B GIÁO D O B IH YT C HÀ N I LÊ THANH LIÊM NGHIÊN C U NG CH NG VIÊM VÀ PHÂN L P M T S THÀNH PH N T ALKALOID TOÀN PH N C A R CÂY BÁ B NH (EURYCOMA LONGIFOLIA JACK.) LU N CH C HÀ N I 2018 B GIÁO D O IH B YT C HÀ N I LÊ THANH LIÊM NGHIÊN C U NG CH NG VIÊM VÀ PHÂN L P M T S THÀNH PH N T ALKALOID TOÀN PH N C A R CÂY BÁ B NH (EURYCOMA LONGIFOLIA JACK.) CH C LU C LI U MÃ S : 8720206 ng d n khoa h c : HÀ N I 2018 C H C C TRUY N - chân thành - - - Lê Thanh Liêm M CL C Trang DANH M C CÁC KÝ HI U, CH VI T T T DANH M C CÁC B NG DANH M C CÁC HÌNH TV NG QUAN Eurycoma Eurycoma 1.2 T ng quan v lồi Eurycoma longifolia 1.2.2 1.2.4 Cơng d ng theo y h c c truy n 14 1.3 T ng quan b 15 1.3.1 Khái ni 15 1.3.2 Vai trò c 16 17 U 20 1.3.3 20 2.2 Hóa ch t thi t b dùng nghiên c u 20 20 20 2.2.3 D ng c thi t b nh c 21 in vitro 21 in vivo 21 22 22 2.3.1 nh tính m t s nhóm ch t h 22 n alkaloid tồn ph n 22 2.3.1.2 Chi t xu t phân l 22 nh c u trúc 23 2.3.1 2.3.2 in vitro in vivo 23 2.3.2 t tính ch ng viêm in vitro 23 2.3.2 t tính ch ng viêm in vivo 26 28 lý s li u 2.3.3 t qu 3: 29 29 29 in vitro, in vivo 3.2.1 nhóm ch n alkaloid tồn ph n r Bá b nh 29 tác d ng ch ng viêm c p in vitro 31 in vivo 32 nh c ch t phân l t tính ch ng viêm in vitro c a c 33 3.3.1 Phân l p ch n ELA 3.3.2 Nh n d ng c u trúc ch t phân l 33 c 36 3.3.2.1 Nh n d ng ch t EL- 36 3.3.2.2 Nh n d ng ch t EL- 41 3.3.2 45 in vitro 48 4: BÀN LU N 51 4.1 V tác d ng sinh h 51 4.2 V thành ph n hóa h 54 56 K T LU XU T TÀI LI U THAM KH O PH L C DANH M C CÁC KÝ HI U, CH VI T T T 13 C-NMR Ph c ng t h t nhân Carbon -13 H-NMR Ph c ng t h t nhân proton A-549 T bào u COX Cyclooxygenase D Diclomethan DD Dung d ch i n Vi t Nam IV DEPT Ph DEPT DM Dung môi DMEM Dulbecco's modified Eagle's medium DMSO Dimethylsulfoxide eNOS Nitric oxide synthase n i bào FBS Fetal bovine serum Gr Gram H2SO4 Acid sulfuric HCl Acid clohydric HepG2 T bào u HL-60 Human leukemia 60 HMBC Ph HO Heme oxygenase HSQC Ph h t nhân qua nhi u liên k t h t nhân tr c ti p IC50 N c ch 50% IL Interleukin iNOS Nitric oxide synthase c m ng Jurkat T bào B ch c u T KHCNVN Khoa h c Công ngh Vi t Nam LPS Lipopolysaccharide M Methanol MCF-7 T bào u MS Ph kh MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide NaCl Natri clorua NaOH Natri hydroxit NF- Y u t nhân kappa B nNOS Nitric oxide synthase th n kinh NO Nitric oxide NOS Nitric oxide synthases PG Prostaglandin TLTK Tài li u tham kh o TT Thu c th THP-1 T bào monocyte YHCT Y h c c truy n ng DANH M C CÁC B NG B ng Tên b ng 3.1 K t qu Trang nhóm ch n ELA b ng ph n ng hóa h 30 3.2 K t qu ho t tính ch ng viêm c a cao n ELA t r Bá b nh 3.3 31 ng c n ELA t r Bá b phù chân chu t 3.4 B ng s li u ph 32 H-NMR 13C-NMR c a h p ch t EL1 có so sánh v i TLTK [24], [27] 40 3.5 B ng s li u ph H-NMR 13C-NMR c a h p ch t EL2 có so sánh v i TLTK [29] 3.6 B ng s li u ph 44 H-NMR 13C-NMR c a h p ch t EL3 có so sánh v i TLTK [27] 3.7 K t qu ho t tính ch ng viêm c a h p ch 48 c phân l p t r Bá b nh 49 DANH M C CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Hình thái th c v t Bá b nh (Eurycoma longifolia 1.2 C u trúc c a m t s quassinoid phân l p t Bá b 1.3 C u trúc c a m t s alkaloid phân l p t Bá b 1.4 C u trúc c a m t s triterpen phân l p t Bá b 1.5 C u trúc c a m t s d n xu t skylene phân l p t Bá b nh 14 2.1 Quy trình thí nghi m th tác d ng ch 27 3.1 chi 3.2 phân l p h p ch t EL-1, EL-2, EL- 3.3 n alkaloid toàn ph ng h p ch t EL-1, EL-2, EL-3 v 11 12 13 30 35 n ELA, h dung môi D:M (20:1) 36 3.4 Ph H-NMR c a h p ch t EL- 36 3.5 Ph giãn 1H-NMR c a h p ch t EL- 37 3.6 Ph 38 3.7 Ph DEPT c a h p ch t EL- 39 3.8 C u trúc c a h p ch t EL- 3.9 Ph kh 13 C-NMR c a h p ch t EL- 39 n t c a h p ch t EL-1 40 H-NMR c a h p ch t EL-2 41 3.10 Ph 3.11 Ph 13 C-NMR c a h p ch t EL-2 42 ...B GIÁO D O IH B YT C HÀ N I LÊ THANH LIÊM NGHIÊN C U NG CH NG VIÊM VÀ PHÂN L P M T S THÀNH PH N T ALKALOID TOÀN PH N C A R CÂY BÁ B NH (EURYCOMA LONGIFOLIA JACK. ) CH C LU C LI U... dung 1: Nghiên c u v tác d ng sinh h c: - ng ch ng viêm in vitro c a ph n c a r Bá b nh m t s ch t phân l - n alkaloid toàn c tác d ng ch ng viêm in vivo c a n alkaloid toàn ph n c a r Bá b nh... ELA (5g) ng D/M (10: 1) ELA-I (0,94g) ELA-III (1,47g) ELA-II (0,3g) ng H/A (20: 1) ELA-I (0,12g) ELA-I.2 (0,19g) ELA-I.3 (0,09g) R ak t tinh b ng CH2Cl2 Silicagel pha ng D/M(30: 1) EL-3 (15mg) ELA-I.2.1