Nghiên cứu ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng thực vật và nguồn mẫu lên sự phát sinh mô sẹo của mẫu cây bá bệnh (eurycoma longifolia jack)

Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ vi DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH vii MỞ ĐẦU Chương 1:TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Bá bệnh .5 1.1.1 Phân loại học 1.1.2 Nguồn gốc phân bố .6 1.1.3 Đặc tính sinh học .6 1.1.3.1 Đặc điểm phân loại Bá bệnh 1.1.3.2 Đặc điểm hình thái Bá bệnh 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Ứng dụng 1.1.6 Các nghiên cứu Bá bệnh .10 1.1.6.1 Tình hình nghiên cứu giới 10 1.1.6.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 12 1.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến phát sinh mô sẹo .12 1.2.1 Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật 12 1.2.2 Vai trò quan, tuổi quan ánh sáng đến hình thành mơ sẹo 15 1.3 Phương pháp lớp mỏng tế bào (Thin cell layers) 18 1.3.1 Khái niệm .18 1.3.2 Những tính chất đặc trưng hệ thống TCL 19 1.3.3 Ưu điểm 19 1.4 Mô sẹo 21 1.4.1 Khái niệm .21 1.4.2 Mục đích ni cấy mơ sẹo 21 i Đồ án tốt nghiệp 1.4.3 Q trình tạo mơ sẹo 21 1.4.4 Những nghiên cứu mô sẹo dược liệu 22 1.4.4.1 Sâm Ngọc Linh (Panax Vietnamensis) 22 1.4.4.2 Cây Trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L.) 23 1.4.4.3 Cây Thông đỏ Hymalaya (Taxus wallichiana Zucc.) .24 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 25 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 25 2.2 Vật liệu 25 2.2.1 Đối tượng thí nghiệm .25 2.2.2 Điều kiện nuôi cấy 25 2.2.3 Trang thiết bị dụng cụ 25 2.2.4 Hóa chất mơi trường thí nghiệm 26 2.2.6 Phương pháp xử lý số liệu .27 2.3 Nội dung nghiên cứu 27 2.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp 27 2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non 28 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống non .29 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp 30 2.3.5 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non 31 2.3.6 Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống non .32 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 ii Đồ án tốt nghiệp 3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp 34 ii Đồ án tốt nghiệp 3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non 40 3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống non 46 3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp 51 3.5 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non 55 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .62 4.1 Kết luận .62 4.2 Đề nghị 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO Error! Bookmark not defined PHỤ LỤC Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT 2,4-D : 2,4-dichlorophenoxyacetic acid BA : – benzyladenine BAP : N – benzyllaminopurine CĐHSTTV : Chất điều hòa sinh trưởng thực vật DKW : Drive- Kuniyuki Wainut IAA : Axit α- indol axetic Ltcl : Long thin cell layer MS : Murashige and Koog (1962) NAA : α – napthalene acetic acid SPSS : Statistical Product and Services Solutions TCL : Thin cell layer TDZ : N-phenyl-N′-1, 2, 3-thiadiazol-5-ylurea tTCL : transverse thin cell layer Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên mẫu cấy tử diệp Bá bệnh 28 Bảng 2.2 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên mẫu cấy non Bá bệnh 29 Bảng 2.3 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên mẫu cấy cuống non Bá bệnh .30 Bảng 2.4 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên mẫu cấy tử diệp Bá bệnh 31 Bảng 2.5 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên mẫu cấy non Bá bệnh 32 Bảng 2.6 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên mẫu cấy cuống non Bá bệnh .33 Bảng 3.1 Ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp sau 45 ngày nuôi cấy 35 Bảng 3.2 Ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non sau 45 ngày nuôi cấy .41 Bảng 3.3 Ảnh hưởng BA NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống non sau 45 ngày nuôi cấy 47 Bảng 3.4 Ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp sau 45 ngày nuôi cấy 52 Bảng 3.5 Ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non sau 45 ngày nuôi cấy .55 Bảng 3.6 Ảnh hưởng BA TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống non sau 45 ngày nuôi cấy 58 Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 So sánh tỷ lệ mơ sẹo hình thành khối lượng tươi trung bình mô sẹo theo nồng độ NAA riêng lẻ lên mẫu cấy lớp mỏng tử diệp (bảng 3.1) 36 Biểu đồ 3.2 So sánh tỷ lệ mơ sẹo hình thành khối lượng tươi trung bình mơ sẹo theo nồng độ NAA riêng lẻ lên mẫu cấy lớp mỏng non (bảng 3.2) 433 Biểu đồ 3.3 So sánh tỷ lệ mơ sẹo hình thành khối lượng tươi trung bình mơ sẹo theo nồng độ NAA riêng lẻ lên mẫu cấy lớp mỏng non (số liệu bảng 3.3) 499 Biểu đồ 3.4 So sánh tỷ lệ mơ sẹo hình thành khối lượng tươi trung bình mơ sẹo theo nồng độ TDZ riêng lẻ lên mẫu cấy lớp mỏng tử diệp (số liệu bảng 3.4) 53 Biểu đồ 3.5 So sánh tỷ lệ mô sẹo hình thành khối lượng tươi trung bình mơ sẹo theo nồng độ TDZ riêng lẻ lên mẫu cấy lớp mỏng non (số liệu bảng 3.5) 56 Biểu đồ 3.6 So sánh tỷ lệ mơ sẹo hình thành khối lượng tươi trung bình mơ sẹo theo nồng độ TDZ riêng lẻ lên mẫu cấy lớp mỏng cuống non (số liệu bảng 3.6) 59 Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Hình Bá bệnh Hình 1.2 Các dược phẩm chiết xuất từ Bá bệnh 10 Hình 3.1.a Ảnh hưởng NAA kết hợp với BA lên mẫu tử diệp với nồng độ – mg/l 37 Hình 3.1.b Ảnh hưởng NAA kết hợp với BA lên mẫu tử diệp với nồng độ – mg/l 38 Hình 3.2 Ảnh hưởng NAA kết hợp với BA lên mẫu cấy với nồng độ từ 0,5 – 4,0 mg/l 44 Hình 3.3 Ảnh hưởng NAA két hợp với BA lên mẫu cấy cuống với nồng độ từ 0,0 – 4,0 mg/l 50 Hình 3.4 Ảnh hưởng TDZ kết hợp với BA lên mẫu tử diệp với nồng độ 0,2 – 1,0 mg/l .54 Hình 3.5 Ảnh hưởng TDZ kết hợp với BA lên mẫu non với nồng độ 0,2 – 1,0 mg/l 57 Hình 3.6 Ảnh hưởng TDZ kết hợp với BA lên mẫu cuống non với nồng độ 0,2 – 1,0 mg/l 61 Hình 3.7 Hình thái giải phẫu nguồn mẫu khác a, b) Mẫu lá; c, d) Mẫu tử diệp 61 vii Đồ án tốt nghiệp MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Đặt vấn đề Từ xa xưa cỏ đóng vai trò quan trọng đời sống người Nó khơng nơi trú ẩn, nguồn thực phẩm phong phú, nguyên liệu sản xuất vật dụng cần thiết cho sống mà nguồn dược liệu quý giá Con người khám phá tìm khả trị bệnh cỏ ghi chép hiểu biết vào sách thành y điển danh tiếng từ lâu đời Ngày nay, khoảng 25% loại dược phẩm có nguồn gốc từ thực vật số tăng tương lai ngày nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học khám phá từ cỏ người dần có xu hướng quay trở lại với dược phẩm có nguồn gốc từ thiên nhiên Tuy nhiên, việc sử dụng dược liệu hạn chế chiết xuất trực tiếp lượng từ thực vật việc tổng hợp nhân tạo gặp nhiều khó khăn đường tổng hợp nhân tạo gặp nhiều khó khăn chưa làm sáng tỏ Thu nhận hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học từ thực vật phương pháp nuôi cấy tế bào đơn xem giải pháp hữu hiệu để sản xuất, làm giàu hàm lượng ổn định nguồn cung cấp nguyên liệu cho sản xuất thuốc chữa bệnh có nguồn gốc từ thực vật Tầm quan trọng Với xu hướng dùng thảo dược thiên nhiên để chữa bệnh, Bá bệnh trở thành đối tượng nghiên cứu nhiều quốc gia khu vực Đơng Nam Á, đặc biệt xem nhân sâm Malaysia, có nhiều tiềm nguồn dược liệu chữa bệnh sốt, đau bụng, chống sốt rét tăng cường sức khỏe sinh lý nam giới, … Lý chọn đề tài Trong năm gần đây, nhu cầu sử dụng sản phẩm chiết xuất từ rễ vỏ Bá bệnh ứng dụng làm dược liệu ngày tăng, điều tạo nên áp lực cho việc trì quần thể Mặt khác, việc thu nhận hợp chất Đồ án tốt nghiệp thứ cấp nuôi cấy nghiên cứu cho kết tốt Ginsenoside từ nhân sâm (P ginseng) (Choi cộng sự, 1994; Franklin Dixon, 1994); Rosmarinic acid từ tía tơ (Coleus bluemei) (Ulbrich cộng sự, 1985); Berberin từ liễu sam (C japonica) (Matsubara cộng sự, 1989)… Chính thế, việc ni cấy tế bào thực vật xem phương pháp ưu để cung cấp ổn định nguồn nguyên liệu mà khơng làm ảnh hưởng đến nguồn ngồi tự nhiên [18], [31], [45] Xuất phát từ vấn đề đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật nguồn mẫu lên phát sinh mô sẹo mẫu cấy Bá bệnh (Eurycoma longifolia Jack)” tiến hành Ý nghĩa đề tài Thí nghiệm đề nhằm khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến khả hình thành mơ sẹo, với mục đích tăng nhanh số lượng mơ sẹo để làm nguồn vật liệu cho thí nghiệm thu nhận sinh khối có hợp chất thứ cấp nhằm ứng dụng rộng rãi y học Tình hình nghiên cứu Năm 2005, Hussein cộng nghiên cứu nhân nhanh chồi qua nuôi cấy đỉnh sinh trưởng Bá bệnh [24] Năm 2006, Hussein cộng thành công việc tạo chồi bất định từ nuôi cấy rễ thân Bá bệnh [23] Năm 2010, Mahmood cộng nghiên cứu cảm ứng mô sẹo từ quan Bá bệnh [30] Năm 2010, Miyake cộng nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào ung thư quassinoids [31] Năm 2014, Trần Trọng Tuấn cộng nghiên cứu q trình phát sinh mơ sẹo từ mẫu bá bệnh (Eurycoma longifolia Jack) [12] [26] Hutchinson M.J., Saxena P.K (1996) Acetylsalicylic acid enchances and synchronizes TDZ-induced somatic embryogenesis in geranium tissue cultures, Plant Cell Rep., 15, 512-515 [27] Huy N.P., Nhut D.T (2012) In vitro morphogenic response of leaf explants of kiwifruit (Actinidia deliciosa), J Biotechnol, 10(4A), 995-1003 [28] Itokawa H., Kishi E., Morita H., Takeya K (1992) Cytotoxic quassinoids and tirucallane-type triterpenes from the woods of Eurycoma longifolia, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 40, 1053-1055 [29] Itokawa H., Qin X.R., Morita H., Takeya K., Iitaka Y (1993) Novel quassinoids from Eurycoma longifolia, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 41, 403-405 [30] Mahmood M., Normi R., Subramaniam S (2010) Optimization of suitable auxin application in arecalcitrant woody forest plant of Eurycoma longifolia (Tongkat Ali) for callus induction, African Journal of Biotechnology, 9, 8417-8428 [31] M i ya k e K ,L i F.,T e z uk a Y.,A wal e S., K adot a S (2010) C ytot o x i c acti v i t y o f q uas s in o id s f r o m Eu r yc o m al ong i fol ia , N atural Product Communications, 5, 1009 -1012 [32] Morita M., Xing X.H., Unno H (1999) Synchronized shoot regenation of rice (Oriza sativa L.) calli on solid medium by adjustment of intracellular 2,4 D concentratio, Plant Cell Rep., 18, 633-639 [33] Murnilawati A.G.H., Masitah H., Rosna M.T (2005) Callus Induction from Tobacco (Nicotiana tabacum) Leaf Explants for the Production of Quinone, Dev Chem Eng Mineral Process, 13(5/6), 563-572 [34] Murashige T., Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures, Physiological Plant Pathology, 15, 473-497 [35] Nancy A.E (2003) A new classic of cytokinin research: cytokinin-deficient arabidopsis plants provide new insights into cytokinin biology, The plant cell, 15, 2489-2492 [36] Pierik R.L.M (1998) In vitro culuture of higher plants, Kluwer Academic Publishers [37] Preece J.E., Sutter E.G (1991) Acclimatization of micropropagated plants to the greenhouse and field, Microppropagation Technology and Application, Kluwer Academic Pulishers, 71-93 [38] Sandra M.K., Allen L.M (1987) Effect of BA, NAA, and 2,4-D on red maple callus growth, Plant Cell, Tissue and Organ Culture 10, 57-63 [39] Shaiful B.I., Wan M.Z W M., Annie G., Nik H N H., Zatul M.M.K., Eckehard L (2012) Randomized Clinical Trial on the Use of PHYSTA Freeze-Dried Water Extract of Eurycoma longifolia for the Improvement of Quality of Life and Sexual Well-Being in Men, Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 1-10 [40] Suong N.N., Bhatnagar S., Polonsky J., Vuilhorgne M., Prange´ T., Pascard C (1982) Structure of laurycolactone A and B, new C18-quassinoids from Eurycoma longifolia and revised structure of eurycomalactone (X-ray analysis), Tetrahedron Letters, 23, 5159-5162 [41] Tada H., Yasuda F., Otani K., Doteuchi M., Ishihara Y., Shiro M (1991) New antiulcer quassinoids from Eurycoma longifolia, European Journal of Medicinal Chemistry, 26, 345-349 [42] Thoi L.V., Suong N.N (1970) Constituents of Eurycoma longifolia Jack, The Journal of Organic Chemistry, 35, 1104-1109 [43] Thoi L.V., Suong, N.N (1963) Chemical constituents from the bark of Eurycoma longifolia, II Isolation of ß-sitosterol, campeserol, and 2,6– dimethoxybenzoquinone, Ann Fac Sci., Univ., 1, 43-51 [44] Vaughan H (1974) Regulators of cell division in plant tissues XX, The cytokinins of coconut milk, Physiology Plant, 32, 66-70 [45] Visser C., Fletcher R.A., Saxena P.K (1995) TDZ stimulates expansion and greening in cucumber cotyledons, Physiol Mol Biol Plants, 1, 21-26 PHỤ LỤC Bảng Bảng ANOVA ảnh hưởng nồng độ BA, NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp ANOVA gram Su m Bet wee Wit hin Tot al DM f ea 44 800 018 1360 004 2404 F 4 S i 00 Bảng Bảng phân hạng ảnh hưởng nồng độ BA, NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp gram ba- S u naa tudi N D un ca n a 9 6 02 03 03 043 04 04 048 04 04 04 058 05 05 05 05 058 05 05 05 05 068 06 06 06 06 068 06 06 06 06 081 08 08 08 08 08 088 08 08 08 08 08 088 08 08 08 08 08 089 08 08 08 08 08 092 09 09 09 09 092 09 092 09 09 09 09 092 09 096 09 09 09 09 096 09 09 101 10 10 10 30 40 14 35 29 41 16 11 43 19 101 10 10 10 11 12 25 15 17 39 20 10 45 44 24 34 23 13 21 42 26 102 10 10 10 27 27 27 103 10 10 10 102 10 10 10 27 27 27 103 10 10 10 106 10 10 106 10 10 10 106 10 10 106 10 10 10 109 10 10 109 10 10 10 110 11 11 110 11 11 11 112 11 11 112 11 11 11 115 11 11 115 11 11 11 117 11 11 117 11 11 11 9 12 12 122 122 12 12 12 12 123 123 12 12 12 12 123 123 12 12 12 12 125 125 12 12 12 13 130 130 13 13 13 136 136 13 13 13 137 137 13 13 13 137 137 13 13 13 38 137 137 13 13 13 78 78 78 139 139 13 13 13 9 144 144 14 14 14 146 146 14 14 14 153 153 15 15 15 166 166 16 16 3 170 17 17 9 171 17 17 171 17 17 175 17 195 8 2 258 05 05 1.00 05 Bảng Bảng ANOVA ảnh hưởng nồng độ BA, NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non ANOVA gram Su m Bet wee 251 With in 202 dM f ea 44 006 225 001 F S i 00 ANOVA gram Su m Bet wee 251 Wit hin 202 Tot al 453 dM f ea 44 006 225 001 269 F S i 00 Bảng Bảng phân hạng ảnh hưởng nồng độ BA, NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non gram S u l a Dun b can a N 6 6 30 36 37 38 40 41 42 43 44 45 18 31 34 16 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 S 42 05 06 06 05 25 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000 Bảng Bảng ANOVA ảnh hưởng nồng độ BA, NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống ANOVA gram Su m Bet wee 028 Wit hin 082 Tot 110 al dM f ea 44 001 180 000 224 F S i 05 Bảng Bảng phân hạng ảnh hưởng nồng độ BA, NAA riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống Gram cuo ngl Dun a can a N 5 5 5 10 17 18 19 20 21 22 25 26 27 28 Subse t for 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 S 05 05 07 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 Bảng Bảng ANOVA ảnh hưởng nồng độ BA, TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp ANOVA gram Su m Bet wee 142 Wit hin 498 Tot al 640 dM f ea 24 006 200 002 224 F S i 00 Bảng Bảng phân hạng ảnh hưởng nồng độ BA, TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy tử diệp gram ba- Subse t for tdzt udi Dun e can a N 9 17 19 25 9 15 10 23 22 20 14 9 9 9 9 9 S 07 05 59 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 9.000 Bảng Bảng ANOVA ảnh hưởng nồng độ BA, TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non ANOVA gram Su m Bet wee 006 Wit hin 015 Tot al 021 dM f ea 24 000 100 000 124 F S i 04 Bảng Bảng phân hạng ảnh hưởng nồng độ BA, TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy non gram lab Dun a11 can a 12 Subset for N 5 13 14 15 5 5 5 5 5 5 5 5 5 S Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 Bảng 11 Bảng ANOVA ảnh hưởng nồng độ BA, TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống non ANOVA gram Su m Bet wee 007 Wit hin 009 Tot al 016 dM f ea 24 000 100 000 124 F S i 00 10 Bảng 12 Bảng phân hạng ảnh hưởng nồng độ BA, TDZ riêng lẻ hay kết hợp lên phát sinh hình thái mẫu cấy cuống non gram cu on gb a Duncan 12 N 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 Subse t for S groups11 14 Means for in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000 11 ... đến nguồn tự nhiên [18], [31], [45] Xuất phát từ vấn đề đề tài Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật nguồn mẫu lên phát sinh mô sẹo mẫu cấy Bá bệnh (Eurycoma longifolia Jack) ... sinh mơ sẹo từ mẫu bá bệnh (Eurycoma longifolia Jack) [12] Đồ án tốt nghiệp Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng thực vật (chất ĐHSTTV) đến phát sinh mô sẹo. .. auxin có ảnh hưởng khác ảnh hưởng lên phát sinh hình thái (sự tạo chồi hay rễ), ảnh hưởng lên phát sinh phôi soma Nồng độ auxin môi trường cao ngăn cản phát sinh hình thái lại cảm ứng phát sinh phơi