Đang tải... (xem toàn văn)
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC NGUYỄN THỊ THANH THÚY BƯỚC ĐẦU XÂY DƯṆG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ DƯƠC̣ LIỆU THỊT QUẢ ĐÀO TIÊN (Crescentia cujete L ) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢ[.]
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC - - NGUYỄN THỊ THANH THÚY BƯ ỚC ĐẦU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ DƯ ƠC ̣ LIỆU THỊT QUẢ ĐÀO TIÊN (Crescentia cujete L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC HÀ NỘI- 2019 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI VN U KHOA Y DƯỢC dP rm ac y, - - an NGUYỄN THỊ THANH THÚY ine BƯ ỚC ĐẦU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ DƯ ƠC ̣ LIỆU ed ic THỊT QUẢ ĐÀO TIÊN of M (Crescentia cujete L.) KHÓA: QH.2014 Sc ho ol KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌCNGÀNH DƯỢC HỌC TS NGUYỄN THỊ HẢI YẾN Co py rig ht @ Người hướng dẫn: PGS.TS NGUYỄN THANH HẢI HÀ NỘI- 2019 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Lời cảm ơn người dạy dỗ, hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian qua VN U Sau thời gian thực đề tài với nhiều nỗ lực cố gắng, thời điểm hồn thành khóa luận lúc tơi xin phép bày tỏ lòng biết ơn chân thành với ac y, Trước hết, xin gửi lời cảm ơn chân thành lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS dP rm Nguyễn Thanh Hải, TS Nguyễn Thị Hải Yến, người tận tình hướng dẫn, hết lịng bảo tạo điều kiện giúp đỡ suốt q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến giảng viên thuộc Bộ môn Bào chế Công nghệ dược phẩm, Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Bộ mơn Hóa an dược Kiểm nghiệm thuốc, Khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội giúp đỡ tơi nhiều q trình làm thực nghiệm trường ine Xin cảm ơn Ban giám hiệu, Phòng đào tạo, phòng ban tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Cảm ơn thầy cô Khoa Y Dược, ĐHQGHN quan tâm dìu dắt truyền kiến thức cho tơi năm học vừa qua ed ic Và cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè ln theo sát động viên, quan tâm giúp tơi hồn thành khóa luận of M Dù cố gắng, lần đầu làm nghiên cứu tơi khó tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận ý kiến đóng góp thầy để khố luận thêm hồn thiện Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Thúy Co py rig ht @ Sc ho ol Một lần xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Viết đầy đủ CD Chuẩn độ CTCT Công thức cấu tạo CTPT Công thức phân tử DPPH 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl EtOH Ethanol MS Phương pháp khối phổ PTN Phịng thí nghiệm ine an dP rm ac y, Kí hiệu STT Số thứ tự Thuốc thử Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic TT PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Bảng 1: Danh sách thực vật chi Crescentia cujete L dP rm Bảng 3: Các hợp chất bật Crescentia cujete L ac y, Bảng 2: Giá trị trung bình nồng độ khống chất có trái Crescentia Bảng 4: Các chất thuộc nhóm p-hydroxybenzoyloxy 11 Bảng 5: Các hợp chất thuộc nhóm n- alkyl glycosid 12 Bảng 6: Độ ẩm bột thịt đào tiên 34 Bảng 7: Độ ẩm thịt đào tiên tươi 34 35 Bảng 9: Tỷ lệ tro không tan acid dược liệu đào tiên 35 Bảng 10: Kết định tính mẫu tươi ed ic Bảng 11: Kết định tính mẫu khơ ine an Bảng 8: Tỷ lệ tro toàn phần dược liệu đào tiên 36 37 39 Bảng 13: Kết xác định độ lặp lại phương pháp đo quang 40 Bảng 14: Kết xác định độ phương pháp đo quang 40 of M Bảng 12: Độ hấp thụ quang dãy dung dịch chuẩn 41 Bảng 16: Thành phần dầu hạt đào tiên 43 Co py rig ht @ Sc ho ol Bảng 15: Một số số dầu hạt đào tiên PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Tên hình, đồ thị ac y, Trang Hình 1: Cây đào tiên Hình 2: Quả hạt đào tiên dP rm Hình 3: Công thức cấu tạo iridoid Crescentia cujete L Hình 4: Hoạt tính chống oxi hóa Cresscentia cujete L dung mơi chiết Hình 5: Bảng xác định đường glucoza an Hình 6: Ruột tươi Đào tiên ine Hình 7: Ruột khơ đào tiên Hình 8: Vi phẫu thịt ed ic Hình 9: Bột thịt đào tiên kính hiển vi Hình 10: Phổ hấp thụ dung dịch khoảng bước sóng 13 27 31 31 32 32 37 M từ 330-800nm of Hình 11: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ chất chuẩn bước sóng 347,5nm 41 Co py rig ht @ Sc ho ol Hình 12: Sắc ký đồ acid béo dầu hạt đào tiên 38 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma MỤC LỤC VN U ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ CRESCENTIA CUJETE L 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI CRESCENTIA ac y, 1.2 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU CRESCENTIA CUJETE L (QUẢ dP rm ĐÀO TIÊN) 1.2.1 Thành phần hóa học 1.2.2 Tác dụng dược lý 15 1.2.3 Công dụng 17 an 1.2.4 Độc tính 17 ine CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 ed ic 2.1 Nguyên liệu, hóa chất máy móc, thiết bị 19 2.2 Phương pháp nghiên cứu 20 M 2.2.1 Mô tả 20 of 2.2.2 Vi phẫu 20 ho ol 2.2.3 Độ ẩm 20 2.2.4 Tro toàn phần 20 Sc 2.2.5 Tro không tan acid 21 2.2.6 Định tính 21 @ 2.2.7 Định lượng 25 ht 2.2.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên 25 rig CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 Co py 3.1 Mô tả 35 3.2 Đặc điểm vi phẫu thịt soi bột 36 3.3 Độ ẩm 37 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 3.4 Tro toàn phần 37 VN U 3.5 Tro không tan acid 38 3.6 Định tính 39 ac y, 3.7 Định lượng 41 3.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên 25 dP rm KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an Tài liệu tham khảo 49 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ĐẶT VẤN ĐỀ VN U Ngày giới, xu hướng tìm kiếm sử dụng sản phẩm chăm sóc sức khỏe có nguồn gốc tự nhiên ngày tăng Con người có khuynh hướng sử dụng nhiều thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên Việt Nam khơng nằm ngồi xu hướng Điều kiện tự nhiên ưu đãi cho đất nước ta dP rm ac y, có hệ sinh thái phong phú đa dạng, có tiềm to lớn tài nguyên thuốc Đất đai khí hậu nhiệt đới gió mùa phù hợp với nhiều loại trồng, có nhiều lồi thuốc quý Đây tiền đề tốt để ngành Dược phát triển thuốc từ Dược liệu [8] an Cây Đào tiên có tên khoa học Crescentia cujete L., loại thân gỗ, sống lâu năm thuộc họ Chùm Ớt (Bignoniaceae) Quả đào tiên có hình cầu trơng giống bưởi vừa phải, màu xanh lục bóng, đường kính 6-12 cm, đến 20cm.Trong dân gian người ta hay sử dụng thịt đào tiên tươi ed ic ine khô ngâm với rượu để uống nhằm đem lại tác dụng chữa bệnh Công dụng đào tiên biết đến bồi bổ sức khỏe, chữa ho, nhuận tràng [9] Theo số nghiên cứu nước ngồi thịt đào tiên cịn có tác dụng dược lý như: hoạt tính kháng khuẩn từ chiết xuất thịt [28], tác dụng chống oxi hóa [26], tác dụng hạ đường huyết thử nghiệm chuột [25].… Đây loại M hữu ích tiềm việc nghiên cứu phát triển thuốc từ dược liệu Tuy nhiên, nay, nước ta nghiên cứu loại of Vì việc xây dựng tiêu chuẩn sở cho dược liệu điều cần thiết Sc ho ol Để góp phần cung cấp sở tiền đề cho nghiên cứu sau này, thực đề tài: "Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên" với mục tiêu sau: @ - Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu với số tiêu chí chung Dược điển Việt Nam IV Co py rig ht - Bước đầu nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ CRESCENTIA CUJETE L VN U 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI CRESCENTIA Chi Crescentia thuộc họ Chùm Ớt (Bignoniaceae) thuộc nhóm thực vật hạt kín (thực vật có hoa) ac y, Crescentia chi sáu loài thực vật có hoa thuộc họ Chùm Ớt, dP rm phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới Châu Mỹ, châu Phi, châu Úc vùng Đông nam Á [5], [7] Lồi có kích thước vừa phải, cao tới 10m tạo hình cầu lớn, vỏ mỏng, cứng cùi mềm, đường kính lên đến 25cm [41] Cây gỗ nhỏ hay lớn, mọc so le, đơn Hoa nách lá, có tràng hoa hình ống lớn, phình bụng, mọng Hạt nhiều, kích thước khoảng 8mm x 9mm, mặt ngồi nhẵn, khơng có cánh, nằm lẫn [43] ine an Theo The Plant List [40] bao gồm 45 tên thực vật khoa học xếp hạng loài cho chi Crescentia Trong số có tên lồi chấp nhận Dưới tên loài đó: ed ic Bảng 1: Danh sách thực vật chi Crescentia Trạng thái M Tên Mức độ tin cậy Nguồn Chấp nhận iPlants Crescentia amazonica Ducke Chấp nhận iPlants Crescentia cujete L Chấp nhận iPlants Crescentia linearifolia Miers Chấp nhận iPlants Crescentia mirabilis Ekmanex Urb Chấp nhận iPlants Crescentia portoricensis Britton Chấp nhận iPlants @ Sc ho ol of Crescentia alata Kunth ht Crescentia cujete L Co py rig Theo tài liệu thực vật nước nước ngoài, vị trí Đào tiên xếp bậc taxon sau [4, 5, 6, 14]: PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Nghành Magnoliophyta (Nghành Ngọc lan) VN U Lớp Magnoliopsida (Lớp Ngọc lan) Phân lớp Lamiadae (Phân lớp Hoa môi) Họ Bignoniaceae (Họ Chùm Ớt) dP rm Chi: Crescentia L ac y, Bộ Scrophulariales (Bộ Hoa mõm chó) Nguồn gốc xuất xứ: Châu Mỹ nhiệt đới Phân bố Việt Nam: trồng gần khắp tỉnh thành, chủ yếu trồng miền Nam ine an Còn gọi Calabacero (Tây Ban Nha), Cujeté (Brazil), Totumo (Panama, Colombia, Venezuela Peru), Tutumo (Bolivia), Taparo (Venezuela), Mate (Ecuador), Huinga (Peru), Pate (Peru), Cuyabra (Colombia), ed ic Morro (Guatemala), Cujete (Tây Ban Nha, Philippines), Trái kỳ diệu (Philippines), Kalbas (Dominica St Lucia), Higuera (Puerto Rico) Rum (Sri Lanka) [42] M * Đặc điểm hình thái [12, 30, 34, 46]: Thân, tán, lá: Cây gỗ nhỏ hay nhỡ, sống lâu năm, cao từ 4-5m Tán hình ho ol of tháp, vỏ thân màu xám Lá mọc so le, thường thu tập mấu, hình trái xoan ngược, thon hẹp dài gốc, dài 10-15cm, rộng 3-4cm, mọc khít thành chùm hay hơn, màu xanh đậm, bóng, cứng, tán dày, rụng vào mùa khơ (Hình 1) @ Sc Hoa, quả, hạt: Hoa to thường mọc đơn độc đầu cành hay kẽ lá, màu trắng đục, mùi hơi, dài hình chng, nhẵn, dễ rụng, chia thùy khơng đều; tràng gần hình chng, ống rộng loe đầu, dài 5cm, cánh không đều, mép uốn lượn; nhị 4, py rig ht nhị dính gốc ống tràng; bầu hình chóp, Quả mọng, hình cầu trông giống bưởi vừa phải, màu xanh lục bóng, đường kính 6-12 cm, đến 20cm, vỏ xanh cứng, thịt màu trắng có vị chua Hạt nhiều, phẳng nhỏ, khơng cánh, nằm lẫn chìm thịt Trái chín phải vào khoảng tháng Mùa hoa gần quanh năm [39] (Hình 2,3) Co *Đặc điểm sinh lý, sinh thái: Tốc độ sinh trưởng: Trung bình PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Phù hợp với: Cây ưa sáng, nhu cầu nước trung bình Nhân giống từ hạt Đào tiên Việt Nam trồng cách cắm cành hay tách nhánh mọc từ chồi rễ Cây hoa trái mùa năm Có khả chịu mặn trồng nơi có nước tốt Cây cần trồng nơi khơng có sương lạnh khơng thích ứng với độ lạnh Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an dP rm ac y, cao [45] Hình 1: Cây đào tiên PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U ac y, dP rm an ine ed ic M of ho ol Sc @ ht rig py Co PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U 1.2 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU CRESCENTIA CUJETE L (QUẢ ĐÀO TIÊN) Mơ tả: Quả hình cầu trông giống bưởi vừa phải, màu xanh lục, đường kính từ 6-12cm, đến 20cm, cuống ngắn, vỏ láng, bì dày, ngoại cứng Thịt có màu trắng, nhớt, có vị chua, có nhiều hạt dẹt nhỏ, rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an dP rm ac y, không cánh màu trắng nằm lẫn thịt Trái chín phải khoảng tháng Thịt nạo để ngồi trời nhanh chóng bị chuyển sang màu đen biến thành màu nâu khô [9, 12] Hình 2: Quả hạt đào tiên Co py Chú thích: 1: Quả đào tiên non 2: Quả trưởng thành 3: Quả già rụng, ruột chuyển sang màu đen 4: Hạt đào tiên PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 1.2.1 Thành phần hóa học VN U Cho đến nay, chưa có nhiều nghiên cứu thành phần hóa học Crescentia cujete L Các nghiên cứu chủ yếu tập trung vào vỏ Trong thịt đào tiên người ta phát có số acid hữu axit xitric, axit tactric, axit clorogenic, axit creosentic [9] Trong trái chứa vitamin B1, ac y, giàu lượng vitamin C [45] dP rm Nghiên cứu hóa chất thực vật trái thu saponin, flavonoid, cardenolides, tannin phenol, diện hydro xyanua Kết cho thấy nồng độ trung bình tương đối thấp kim loại nặng, an nồng độ trung bình cao mangan, sắt, kẽm đồng Giá trị cho chất béo, protein, nitơ, chất xơ thô, độ ẩm, sucrose, fructose, galactose hàm lượng lượng cao tương ứng: 1,13; 8,35; 1,34; 4,28; 84,92; 59,86, 25,09; 18,24 88,69% [23] ed ic Nồng độ 0,04 0,01 0,02 59,77 21,74 7,88 3,97 6,90 53,01 0,17 0,07 0,10 0,03 0,01 0,02 0,00 0,01 0,11 py rig ht @ Sc ho ol of Calcium (%) Magnesium (%) Potassium (%) Sodium (ppm) Manganese (ppm) Iron (ppm) Zinc (ppm) Copper (ppm) Phosphorus (ppm) Lead (ppm) Chromium (ppm) Nickel (ppm) Cobalt (ppm) Cadmium (ppm) Selenium (ppm) Arsenic (ppm) Tin (ppm) HCN (ppm) M Khoáng chất ine Bảng 2: Giá trị trung bình nồng độ khống chất có trái Crescentia cujete L Co Các hợp chất chiết xuất trái Crescentia cujete L phân tích phương pháp GC-MS diện 12 thành phần hóa học [27] Được biểu diễn hình PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Bảng 3: Các hợp chất bật Crescentia cujete L CTHH CTCT I II III IV Furfuran C5H4O2 2,4(1h,3h)-pyrimidinedion C4H4N2O2 1.2.3 Benzenetriol 4H-pyran-4-one 2,5-diflourophenylhydrazine dP rm 1174 6210 C6H6O3 10787 C5H4O2 7968 C6H6F2N2 10920925 C2H4N6 49863143 py rig ht @ Sc ho ol of M V ine C5H8N2 ed ic 3,5-dimethyl-1H-pyrazole CID 7362 an Pyrazole, 1,4-dimethyl, Pubchem VN U Tên hợp chất ac y, STT Co 1,2,4,5-tetrazine-3,6-diamine PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Furancarbonxaldehyde C5H4O2 4-mercaptophenol C6H6OS 10 2-propenoic acid, 3-phenyl C9H8O2 11 1,3,5-Triazine-2,4,6-Triamine 12 Trans-Cinnamic acid V VN U IV 7968 ac y, III 240147 dP rm II 444539 ed ic ine an I 61176 C9H8O2 444539 Sc ho ol of M C2H4N6 @ Một nghiên cứu khác Tetsuo Kaneko cộng [16], phương pháp phân tích liệu quang phổ xác định thành phần đào tiên có đủ ht 16 iridoid iridoid glycosid (hình 5) gồm: rig ➢ Crescentins I, II, III, IV, V py ➢ Crescentins A, B, C Co ➢ Aucubin (5) ➢ 6-O-p-hydroxybenzoyl-6-epiaucubin (6) ➢ Agluside (7) PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ➢ 5,7-bisdeoxy-cynanchoside (8) VN U ➢ Ajugol (9) ➢ 6-O-p-hydroxy-benzoylajugol (10) ➢ Ningpogenin (11) ac y, ➢ Crescentoside C; 6ß, 7ß- epoxide (16) dP rm Trong đó, có loại iridoid đặt tên crescentins I (l), II (2), III (3), IV (4) V (13) loại iridoid glycosid đặt tên crescentosides A (12), B (14) C (15) [11] Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an Các nhà khoa học phân lập chất từ lồi Crescentia cujete L., hợp chất chủ yếu thuộc nhóm iridoid, ngồi cịn có nhóm chất nhóm n-alkyl glycosid, nhóm p-hydroxybenzoyloxy (bảng 3,4) [17] 10 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U ac y, dP rm an ine ed ic M of ho ol Sc @ ht rig py Co Hình 3: Cơng thức cấu tạo iridoid iridoid glycosid Crescentia cujete L 11 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma CTPT 6- O-(p-hydroxybenzoy)- D- Glucose C34H46O18 an Acanthosid D C13H16O8 ed ic ine CTCT ac y, Tên chất dP rm STT VN U Bảng 4: Các chất thuộc nhóm p-hydroxybenzoyloxy C13H16O7 ho ol of benzoat M Beta- D- Glucopyranosyl Beta-D-fructofuranosyl-6-O(p-hydroxybenzoyl)-α-D- C19H26O12 Sc Co py rig ht @ glucopyranosid 12 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ... đề tài: "Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên" với mục tiêu sau: @ - Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu với số tiêu chí chung Dược điển Việt Nam IV Co py rig ht - Bước đầu nghiên... Đây tiền đề tốt để ngành Dược phát triển thuốc từ Dược liệu [8] an Cây Đào tiên có tên khoa học Crescentia cujete L., loại thân gỗ, sống lâu năm thuộc họ Chùm Ớt (Bignoniaceae) Quả đào tiên có hình... khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến giảng viên thuộc Bộ môn Bào chế Công nghệ dược phẩm, Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Bộ mơn Hóa an dược Kiểm nghiệm thuốc, Khoa Y Dược, Đại học