Đang tải... (xem toàn văn)
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC ĐẶNG THỊ THUỲ CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP THÀNH PHẦN SAPONIN TRONG THÂN RỄ CÂY SÂM VŨ DIỆP (PANAX BIPINNATIFIDUS SEEM ) THU HÁI Ở TÂY BẮC KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NG[.]
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC ĐẶNG THỊ THUỲ CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP THÀNH PHẦN SAPONIN TRONG THÂN RỄ CÂY SÂM VŨ DIỆP (PANAX BIPINNATIFIDUS SEEM.) THU HÁI Ở TÂY BẮC KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HÀ NỘI - 2018 VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI r ne an dP ĐẶNG THỊ THUỲ ma c y, KHOA Y DƢỢC CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP THÀNH PHẦN SAPONIN TRONG THÂN RỄ CÂY SÂM VŨ DIỆP (PANAX BIPINNATIFIDUS SEEM.) ed ici THU HÁI Ở TÂY BẮC ho ol of M KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC Khoá: QH.2013.Y TS NGUYỄN HỮU TÙNG ThS NGUYỄN THỊ HOÀNG ANH Co p yri gh t@ Sc Ngƣời hƣớng dẫn: HÀ NỘI - 2018 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực khố luận tơi nhận đƣợc nhiều giúp đỡ từ y, thầy cô, bạn bè gia đình ma c Lời đầu tiên, với tất kính trọng lịng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn đến TS Nguyễn Hữu Tùng, giảng viên mơn Hố dƣợc Kiểm nghiệm r thuốc Khoa Y Dƣợc Đại học Quốc gia Hà Nội, ngƣời thầy hết lòng bảo, hƣớng dẫn động viên suốt trình học tập nghiên cứu khoa học ne an dP Tôi xin bày tỏ biết ơn chân thành đến thầy cô Khoa Y Dƣợc Đại học Quốc gia Hà Nội, Ths Nguyễn Thị Hồng Anh, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập làm khố luận Và xin cảm ơn chị Thuỷ- Khoa Dƣợc trƣờng Đại học y dƣợc Thái Nguyên, chị Huệ bạn Phƣợng, Chuyên, Phƣơng- Khoa Y Dƣợc trƣờng Đại ed ici học Quốc gia Hà Nội đồng hành suốt thời gian qua Lời cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình, bạn bè ln bên giúp đỡ ho ol of M động viên học tập sống Do thời gian thực đề tài có hạn nên khơng thể tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận đƣợc ý kiến đóng góp q thầy bạn Hà Nội, ngày 09 tháng 05 năm 2018 Sinh viên Đặng Thị Thuỳ Co p yri gh t@ Sc Tôi xin chân thành cảm ơn! PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT y, DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC BẢNG ma c ĐẶT VẤN ĐỀ r Chƣơng - Tổng quan 1.1 Tổng quan chung sâm vũ diệp .2 1.1.3 Đặc điểm thực vật, phận dùng Phân bố sinh thái 1.1.5 Tác dụng dƣợc lý 1.1.7 Thành phần hoá học ne an dP 1.1.4 1.2 Tổng quan phƣơng pháp sắc ký 1.2.1 Sắc ký cột 1.2.2 Sắc ký lớp mỏng (TLC) 1.2.3 Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) ed ici 1.3 Tổng quan phƣơng pháp xác định cấu trúc 1.3.1 Phƣơng pháp phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (NMR) 1.3.2 Phƣơng pháp phân tích khối phổ (MS) 10 ho ol of M Chƣơng - Đối tƣợng phƣơng pháp nghiên cứu 11 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 11 2.2 Phƣơng tiện nghiên cứu 11 2.2.1 Dung môi, hoá chất .11 2.2.2 Thiết bị, dụng cụ 12 gh t@ Sc 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 12 2.3.1 Phƣơng pháp xử lý chiết mẫu 12 2.3.2 Phƣơng pháp phân lập tinh chế hợp chất hoá học .12 2.3.3 Phƣơng pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất 12 2.3.4 Phƣơng pháp phân tích định tính hợp chất sắc ký lỏng hiệu cao 13 Co p yri Chƣơng 3- Kết thực nghiệm bàn luận 13 3.1 Chiết xuất tinh chế hợp chất saponin từ thân rễ SVD .13 3.1.1 Chiết xuất phân lập 13 3.1.2 Kiểm tra độ tinh khiết hai chất phân lập đƣợc SKLM 15 3.2 Xác định cấu trúc saponin phân lập đƣợc 16 3.2.1 Hợp chất số 16 3.2.2 Hợp chất số 19 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U 3.3 Phân tích định tính dấu vân tay hố học hợp chất sắc ký lỏng hiệu cao 22 ma c y, Chƣơng - Bàn luận .23 4.1 Về xử lý chiết mẫu phân lập chất tinh khiết 23 4.2 Xác định cấu trúc hợp chất 24 4.3 Xây dựng dấu vân tay sắc ký dƣợc liệu SVD HPLC 24 r Chƣơng - Kết luận kiến nghị 25 5.1 Kết luận 25 5.2 Kiến nghị 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO Co p yri gh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an dP PHỤ LỤC PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 13 C-NMR Carbon 13 nuclear magnetic resonance VN U DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DEPT IR Infrared HPLC High performance liquid chromatography Proton nuclear magnetic resonance ma c r H-NMR y, DEPT Mass spectrum NMR Nuclear magnetic resonance Rf Retardation factor RP18 Reversed Phase 18 SKLM Sắc ký lớp mỏng TLC Thin layer chromatography UV Ultra violet VIS Visible Co p yri gh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an dP MS PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình Cấu trúc hoá học 10 saponin tách đƣợc từ thân rễ ma c SVD y, Tên hình Hình Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) thu hái r Sapa, Lào Cai 15/07/2016 11 14 Hình Sắc ký đồ chất số số phân lập đƣợc sau 15 Hình Sơ đồ chiết phân đoạn lỏng-lỏng ne an dP Hình Sơ đồ phân lập sắc ký hợp chất tinh khiết từ phân đoạn BuOH 15 phun thuốc thử H2SO4 10% /EtOH 19 Hình Cấu trúc hóa học hợp chất số 22 ici Hình Cấu trúc hóa học hợp chất số Hình Sắc ký đồ HPLC hai saponin phân lập đƣợc 23 Co p yri gh t@ Sc ho ol of M ed (A), (B) cao butanol SVD PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Bảng Các hợp chất saponin phân lập từ SVD 16 ma c Bảng Số liệu phổ 1H 13C-NMR, DEPT hợp chất y, số 19 Co p yri gh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an dP r Bảng Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất số PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U ĐẶT VẤN ĐỀ y, Việt Nam vùng đất nhiều loài thảo dƣợc quý đặc biệt loài thuộc chi sâm Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) thuốc quý thuộc chi Sâm (Panax) đƣợc sử dụng thuốc truyền thống có ma c tiềm để phát triển thành sản phẩm chăm sóc sức khỏe nhƣ loài khác chi Gần sâm vũ diệp đƣợc hoá bƣớc đầu đƣợc trồng thử nghiệm r số địa phƣơng nhƣ Hà Giang Lào Cai [1; 13] Về mặt y học, thân rễ sâm vũ diệp đƣợc sử dụng làm thuốc bổ có mặt số thuốc truyền thống dân tộc vùng núi Tây Bắc ne an dP Ở Việt Nam giới, tổng quan tài liệu thấy khơng có nhiều nghiên cứu thành phần hoá học tác dụng sinh học dƣợc liệu sâm vũ diệp ici Vì vậy, việc nghiên cứu cách có hệ thống thành phần hoá học tác dụng sinh học để thu thập thêm chứng khoa học nâng cao hiệu sử dụng loại dƣợc liệu quý hứa hẹn nhiều kết có giá trị khoa học thực tiễn Năm 2017 vừa qua, nhóm nghiên cứu Khoa Y Dƣợc Đại học Quốc Gia Hà Nội thực nghiên cứu bƣớc đầu thành phần hoá học thân rễ sâm vũ diệp thu ho ol of M ed hái Sapa, Lào Cai với hợp chất phân lập đƣợc từ phân đoạn phân cực ethyl acetat [7; 8] Tiếp nối nghiên cứu thực đề tài “Nghiên cứu thành phần saponin thân rễ sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) trồng Tây Bắc” Kết đề tài góp phần xây dựng sở liệu thành phần hố gh t@ Sc học, từ làm tiền đề cho nghiên cứu sâu nhƣ định tính định lƣợng nhƣ nghiên cứu tác dụng sinh học loài sâm Mục tiêu đề tài bao gồm: Chiết xuất phân lập hợp chất saponin phân đoạn n-butanol thân rễ sâm vũ diệp Xác định cấu trúc hoá học saponin phân lập đƣợc Xây dựng dấu vân tay sắc ký sâm vũ diệp sắc ký lỏng hiệu cao Đề tài phần đề tài cấp Nhà nƣớc thuộc Chƣơng trình Tây Bắc “Ứng dụng giải pháp khoa học công nghệ để phát triển nguồn nguyên liệu tạo sản phẩm từ hai loài Sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) Tam Co p yri thất hoang (Panax stipuleanatus H Tsai et K.M.)”, mã số: KHCN-TB.07C/13-18 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma VN U Chƣơng - Tổng quan y, 1.1 Tổng quan chung sâm vũ diệp 1.1.1 Tên khoa học, tên đồng danh Sâm vũ diệp cịn có tên khác vũ diệp tam thất, hoa diệp tam thất, trúc tiết ma c nhân sâm, tam thất xẻ, sâm hai lần xẻ, phan xiết (Dao), hoàng liên thất, nữu tử thất, tam thất lông chim, hƣơng sơn tam thất (Trung Quốc) có tên khoa khoa học Panax bipinnatifidus Seem [1; 12] r Một số tên đồng danh SVD: Aralia bipinnatifida (Seem.) C B Clarke; Aralia quinquefolia (L.) Dec et Plan.var.major Burk; Aralia quinquefolia (L.) Dec.et Plan.var.elegantior Burk; ne an dP Panax pseudoginseng Wall.var.bipinnatifidus (Seem.) Li; Panax pseudoginseng Wall var major (Burk.) Li; Panax major Ting ex Pei; Panax pseudoginseng Wall spp Himalaicus Hara; Panax pseudoginseng Wall.var.elegantior (Burk) Hoo et Tseng; Panax Japonicus Mey.var.bipinnatifidus (Seem.) Wu et Feng [12] 1.1.2 Vị trí phân loại [2] ho ol of M ed ici Trong hệ thống phân loại thực vật Takhtajan (1987), SVD thuộc chi Nhân sâm (Panax L.), họ Ngũ gia bì (Araliaceae) Ngành Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc lan (Magnoliopsida) Phân lớp Hoa hồng (Rosidae) Bộ Hoa tán (Apiales) Họ Ngũ gia bì (Araliaceae) Chi Nhân sâm (Panax L.) gh t@ Sc 1.1.3 Đặc điểm thực vật, phận dùng Cây thân thảo sống nhiều năm Thân rễ dài có nhiều đốt vết sẹo thân rụng hàng năm để lại Thân khí sinh mảnh, cao 20-30 cm, thƣờng đơn độc, mọc thẳng, rỗng giữa, có vạch dọc, thƣờng lụi tàn vào mùa đông, mọc chồi thân từ tháng đến đầu tháng dƣơng lịch Lá kép chân vịt, gồm 2-3 mọc vịng Lá chét 5-7 (ít 3) thn, dài 2,5-14 cm, rộng 1,5-4 cm, gốc trịn, đầu thuôn Co p yri thành mũi nhọn, xẻ thuỳ không đều, mép có cƣa, có lơng Cụm hoa tán đơn, mọc ngọn; cuống cụm hoa 5-10 cm; cụm hoa có từ 2090 hoa; cuống hoa mảnh dài 1-1,5 cm Hoa màu trắng đục, mọc thành tán đơn thân, cánh hoa, bầu 2-3 ô Quả mọng, hình cầu dẹt, đƣờng kính 0,6-1,2 cm, chín màu đỏ, có chấm đen to đầu, chứa 1-2 hạt Hạt hình cầu gần PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ... Tiếp nối nghiên cứu thực đề tài ? ?Nghiên cứu thành phần saponin thân rễ sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem. ) trồng Tây Bắc? ?? Kết đề tài góp phần xây dựng sở liệu thành phần hoá gh t@ Sc học, từ... ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI r ne an dP ĐẶNG THỊ THUỲ ma c y, KHOA Y DƢỢC CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP THÀNH PHẦN SAPONIN TRONG THÂN RỄ CÂY SÂM VŨ DIỆP (PANAX BIPINNATIFIDUS SEEM. ) ed ici THU HÁI Ở TÂY BẮC... núi Tây Bắc ne an dP Ở Việt Nam giới, tổng quan tài liệu thấy khơng có nhiều nghiên cứu thành phần hoá học tác dụng sinh học dƣợc liệu sâm vũ diệp ici Vì vậy, việc nghiên cứu cách có hệ thống thành