ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC TRỊNH THỊ DUYÊN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO BERBERIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội 2019 http //www PDFWatermarkRemover com/buy htm Cop yr igh t @ S[.]
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y-DƯỢC TRỊNH THỊ DUYÊN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO BERBERIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội - 2019 y, VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI nd Ph TRỊNH THỊ DUYÊN arm ac KHOA Y-DƯỢC ea NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ M ed ici n NANO BERBERIN ho ol of KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Sc Khóa: QH.2014 Y ThS NGUYỄN VĂN KHANH Co py rig h t@ Người hướng dẫn: PGS.TS NGUYỄN THANH HẢI Hà Nội - 2019 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark y, VN U LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, xin bày tỏ kính trọng biết ơn tới thầy giáo PGS.TS Nguyễn Thanh Hải (giảng viên môn Bào chế Công nghiệp Dược, Khoa Y - Dược, Đại arm ac học Quốc gia Hà Nội), người thầy tận tình dạy bảo, hướng dẫn khơi gợi niềm đam mê nghiên cứu khoa học Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới ThS Nguyễn Văn Khanh (cán bộ Ph môn Bào chế Công nghiệp Dược, Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội), người thầy nhiệt tình tận tâm, giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận nd Tơi xin chân thành cảm ơn tồn thể thầy giáo, giáo, anh, chị làm việc công tác Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội bảo, giúp đỡ, tạo điều ea kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập rèn luyện khoa Hà Nội, ngày 10 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trịnh Thị Duyên Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed người đồng hành ici n Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè người thân – PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark BBR Berberin Dược điển Việt Nam DSC Phân tích nhiệt vi sai arm ac DĐVN y, VN U DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Hydroxypropyl methylcellulose KTTP Kích thước tiểu phân NaLS Natri lauryl sulfat NSX Nhà sản xuất PVP Polyvinyl pyrrolidon ici n ea nd Ph HPMC Chỉ số phân bố kích thước tiểu phân PDI Tinh khiết hóa học ed TKHH M TT Khối lượng / thể tích Co py rig h t@ Sc ho ol of w/v Thuốc thử PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark Tên y, VN U DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Nội dung Trang Cơng thức hóa học berberin clorid Hình 1.2 Thiết bị nghiền bi Hình 2.1 Điều kiện quy trình bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn độ hấp thụ quang berberin theo nồng độ bước sóng 348 nm Hình 3.2 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo loại polyme Hình 3.3 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo nồng độ polyme 23 Hình 3.4 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo loại chất diện hoạt 24 Hình 3.5 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo nồng độ chất diện hoạt Hình 3.6 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo kích cỡ bi Hình 3.7 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo tốc độ nghiền 28 Hình 3.8 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo thời gian nghiền 30 Sơ đồ bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 31 Ph nd ea ici n ed M of ho ol Sc t@ Hình 3.9 arm ac Hình 1.1 17 20 21 26 27 32 Hình 3.11 KTTP, PDI hỗn dịch nano berberin bột nano berberin 33 rig h Hình 3.10 Berberin nguyên liệu (bên trái) bột nano berberin (bên phải) py Co 10 Hình 3.12 Độ hịa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 34 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark Nội dung Trang Một số chế phẩm chứa berberin thị trường Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất 15 Bảng 3.1 Độ hấp thụ quang theo nồng độ berberin bước sóng 348 nm Bảng 3.2 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo loại polyme 21 Bảng 3.3 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo nồng độ polyme 22 Bảng 3.4 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo loại chất diện hoạt 24 Bảng 3.5 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo nồng độ chất diện hoạt 25 Bảng 3.6 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo kích cỡ bi 27 Bảng 3.7 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin theo tốc độ nghiền 28 Bảng 3.8 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo thời gian nghiền 29 Bảng 3.9 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin bột nano berberin 32 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 33 nd ea ici n ed M of ho ol Sc 20 Co py rig h t@ Bảng 3.10 Ph Bảng 1.1 arm ac Tên y, VN U DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark y, VN U MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ arm ac DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU ĐẶT VẤN ĐỀ Ph CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vài nét berberin nd 1.1.1 Cơng thức hóa học tên gọi ea 1.1.2 Tính chất lý, hóa 1.1.3 Định tính ici n 1.1.4 Định lượng ed 1.1.5 Tác dụng dược lý M 1.1.6 Dược động học 1.1.7 Một số chế phẩm chứa berberin thị trường of 1.2 Tổng quan hạt nano thuốc ho ol 1.2.1 Vài nét công nghệ nano 1.2.2 Ảnh hưởng kích thước nano đến sinh khả dụng thuốc Sc 1.2.3 Các phương pháp bào chế hạt nano thuốc 1.2.4 Kỹ thuật nghiền bi t@ 1.2.5 Đông khô 11 rig h 1.3 Một số nghiên cứu nano berberin 12 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 Co py 2.1 Nguyên liệu, thiết bị đối tượng nghiên cứu 15 2.1.1 Nguyên liệu, hóa chất 15 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 15 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark y, VN U 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 16 2.2 Nội dung nghiên cứu 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Xây dựng đường chuẩn phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS 16 arm ac 2.3.2 Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 16 2.3.3 Phương pháp đánh giá số đặc tính nano berberin 18 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 19 Ph CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 20 nd 3.1 Định lượng berberin phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS 20 3.2 Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 21 ea 3.2.1 Ảnh hưởng loại polyme tới kích thước tiểu phân 21 ici n 3.2.2 Ảnh hưởng nồng độ polyme tới kích thước tiểu phân 22 3.2.3 Ảnh hưởng loại chất diện hoạt tới kích thước tiểu phân 24 ed 3.2.4 Ảnh hưởng nồng độ chất diện hoạt tới kích thước tiểu phân 25 M 3.2.5 Ảnh hưởng kích cỡ bi tới kích thước tiểu phân 26 of 3.2.6 Ảnh hưởng tốc độ nghiền tới kích thước tiểu phân 28 ho ol 3.2.7 Ảnh hưởng thời gian nghiền tới kích thước tiểu phân 29 3.3 Đánh giá số đặc tính bột nano berberin 32 Sc 3.3.1 Hình thức 32 3.3.2 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân, zeta 32 t@ 3.3.3 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 33 rig h 3.3.4 Kết phân tích nhiệt vi sai 34 3.4 Bàn luận 34 Co py 3.4.1 Về phương pháp bào chế nano bererin 34 3.4.2 Về xây dựng quy trình bào chế nano berberin 35 3.4.3 Về đặc tính bột nano berberin thu 35 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark y, VN U CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 37 4.1 Kết luận 37 4.2 Đề xuất 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici n ea nd Ph arm ac PHỤ LỤC PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark y, VN U ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, bên cạnh việc sử dụng dược chất có nguồn gốc hóa tổng hợp việc sử dụng hợp chất có nguồn gốc từ thiên nhiên ngày nhà khoa học quan tâm Berberin alcaloid thuộc nhóm isoquinolin, có rễ, thân rễ, vỏ thuộc chi Berberis, Hydrastis candensis, Coptis [4] Các nghiên cứu arm ac chứng tỏ berberin có nhiều tác dụng dược lý tốt chống viêm [32], chống nhiễm khuẩn [10], chống tiêu chảy có ảnh hưởng đáng kể đến bệnh đái tháo đường [16] Nó cho thấy tác dụng khác hệ thần kinh, tim mạch sử Ph dụng phương pháp điều trị ung thư [12], [26], [28], [31] nd Mặc dù có nhiều ưu điểm, berberin lại bị hạn chế sử dụng lâm sàng Nguyên nhân chủ yếu berberin tan nước, khó hấp thu qua ruột, ea sinh khả dụng thấp khoảng 5% [25], [27] Bào chế berberin kích thước nano ici n cải thiện độ tan tốc độ hịa tan, từ giúp nâng cao sinh khả dụng Có hai phương pháp để tạo hạt nano thuốc là: phương pháp từ lên ed (bottom-up) từ xuống (top-down) Trong đó, phương pháp bottom-up sử dụng thường phải hịa tan dược chất dung mơi hữu độc hại khó có M phân bố kích thước hẹp [23] Với phương pháp top-down sử dụng số of kỹ thuật nghiền bi, đồng hóa, đồng hóa áp suất cao Kỹ thuật nghiền bi ho ol có nhiều ưu điểm nghiền hạt có kích thước tiểu phân bé trì trạng thái vơ khuẩn ngun liệu Sc Chính vậy, chúng tơi tiến hành “Nghiên cứu bào chế nano berberin” với hai mục tiêu sau: t@ Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi Co py rig h Đánh giá số đặc tính bột nano berberin PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark y, VN U CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vài nét berberin Berberin loại isoquinolin alcaloid, màu vàng [28] Berberin dễ dàng chiết xuất từ thực vật tổng hợp hóa học, thường có rễ, thân rễ, vỏ arm ac thuộc chi Berberis, Hydrastis candensis, Coptis với hàm lượng khoảng 1,5 – 3% chiếm 82% so với alcaloid toàn phần [4] Berberin thường sử dụng lâm sàng dạng berberin clorid, berberin sulfat [28] M ed ici n ea nd Ph 1.1.1 Cơng thức hóa học tên gọi Cơng thức hóa học: of Hình 1.1 Cơng thức hóa học berberin clorid Cơng thức phân tử: C20H18NO4Cl.2H2O ho ol Tên khoa học: 5,6-dihydro-8,9-dimethoxy-1,3-dioxa-6a-azoniaindeno(5,6-a)anthracen clorid dihydrat [6] rig h t@ Sc 1.1.2 Tính chất lý, hóa Lý tính: - Cảm quan: tinh thể hay bột kết tinh màu vàng, khơng mùi, có vị đắng - Độ chảy dạng base 1450C (bị phân hủy) [6] - Độ tan: Dạng base tan chậm nước, tan ethanol, khó tan ether Dạng muối clorid tan tỉ lệ 1/400 nước, dễ tan nước sôi, tan Co py ethanol, thực tế không tan chloroform ether Dạng muối sulfat dễ - tan nước tỷ lệ 1/30, tan ethanol [6] Độ tan nước berberin phụ thuộc vào pH, độ tan cao pH xấp xỉ [9] Berberin khơng có C bất đối nên khơng có đồng phân quang học [6] PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark y, VN U Hóa tính: - Hóa tính N: berberin có tính chất base yếu, tạo muối cách thay nhóm OH, việc tạo muối berberin không giống alcaloid khác mà muối tạo thành giống muối hydroxyd kim loại, nghĩa có loại phân tử nước [6] - Hóa tính oxy: berberin ổn định môi trường kiềm mạnh, N không vững bền, môi trường kiềm mạnh dễ hỗ biễn mở vòng, cho chức aldehyd arm ac - gọi berberinal [6] Hóa tính mạch kép: berberin mạch kép nhân Ph hydro alkaloid không màu [6] - ici n ea nd 1.1.3 Định tính Theo Dược điển Việt Nam V, phương pháp định tính berberin clorid [3]: - Phương pháp A: so sánh phổ hấp thụ hồng ngoại chế phẩm với phổ hấp thụ hồng ngoại berberin clorid chuẩn Phương pháp B: hòa tan 0,1 g chế phẩm 20 ml nước cách đun nóng M ed Thêm 0,5 ml acid nitric đậm đặc (TT), làm lạnh, để yên 10 min, lọc Lấy ml dịch lọc thêm ml dung dịch bạc nitrat % (TT), xuất tủa trắng Tủa không tan acid nitric loãng (TT), tan dung dịch amoniac (TT) thừa Phương pháp C: hòa tan mg chế phẩm 10 ml dung dịch acid hydrocloric of - ho ol 10% (TT) Lắc đều, thêm bột cloramin B (TT) có màu đỏ anh đào t@ Phương pháp sắc kí lỏng [3] Phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS [2] Phương pháp cân [1] Phương pháp thể tích [1] rig h - Sc 1.1.4 Định lượng Để định lượng berberin clorid dùng phương pháp sau: py 1.1.5 Tác dụng dược lý Berberin có nhiều tác dụng dược lý kháng khuẩn [10], kháng virut [14], hạ Co sốt, chống tiêu chảy chống viêm [32] Tác dụng chống viêm berberin thông qua ức chế protein hoạt hóa (AP-1), yếu tố phiên mã quan trọng trình PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the watermark ức chế tăng sinh vi khuẩn Helicobacter pylori [18] y, VN U viêm [31] Berberin có tác dụng điều trị bệnh nhiễm trùng đường ruột cách Gần đây, số nghiên cứu berberin có tác dụng điều trị bệnh đái tháo đường type thơng qua kích thích hoạt hóa adenosine monophosphate - activated protein kinase [16] Berberin báo cáo tác nhân giảm cholesterol mới, arm ac chế hoạt động khác biệt so với nhóm statins [15] Ph Berberin chứng minh có tác dụng tốt nhiều bệnh tim mạch huyết áp, chống loạn nhịp, tăng co bóp tim, giảm sức cản ngoại vi huyết áp, phòng ngừa huyết khối tĩnh mạch [12] Ngoài ra, berberin cho thấy tác dụng tốt hệ thần kinh Trong trình nd thiếu máu não, berberin chống apoptosis, bảo vệ chống lại tổn thương tế bào thần kinh, ea cải thiện tuần hoàn máu não [28] Berberin chất ức chế thuận nghịch acetylcholinesterase, giúp cải thiện việc học trí nhớ bệnh Alzheimer [28] ici n Hoạt tính chống trầm cảm berberin thông qua điều khiển amin sinh học não như: norepinephrin, serotonin, dopamin, thụ thể oxyd, và/hoặc thụ thể ed sigma [20] M Berberin cịn sử dụng để điều trị nhiều bệnh ung thư khác ung of thư biểu mô tế bào gan [25], ung thư ruột kết người [31] Sc ho ol 1.1.6 Dược động học Berberin đưa vào thể qua đường uống thích hợp đặc biệt điều trị bệnh mãn tính Sinh khả dụng đường uống thuốc phụ thuộc vào tỷ lệ mức độ hòa tan thuốc dịch tiêu hóa, tính thẩm thấu Quá trình hấp thu t@ thuốc xảy chủ yếu ruột non [9] Một số nghiên cứu cho thấy sinh khả dụng berberin dùng đường uống người tình nguyện khỏe mạnh tương đối thấp (