Khóa luận bước đầu xây dựng tiêu chuẩn cơ sở dược liệu thịt quả đào tiên

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC  - - NGUYỄN THỊ THANH THÚY BƯ ỚC ĐẦU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ DƯ ƠC ̣ LIỆU THỊT QUẢ ĐÀO TIÊN (Crescentia cujete L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC HÀ NỘI- 2019 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI ,V NU KHOA Y DƯỢC an dP rm ac y  - - NGUYỄN THỊ THANH THÚY ed ici ne BƯ ỚC ĐẦU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ DƯ ƠC ̣ LIỆU THỊT QUẢ ĐÀO TIÊN Sc ho ol o fM (Crescentia cujete L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌCNGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA: QH.2014 TS NGUYỄN THỊ HẢI YẾN Co p yri g ht @ Người hướng dẫn: PGS.TS NGUYỄN THANH HẢI HÀ NỘI- 2019 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Lời cảm ơn ,V NU Sau thời gian thực đề tài với nhiều nỗ lực cố gắng, thời điểm hồn thành khóa luận lúc tơi xin phép bày tỏ lịng biết ơn chân thành với người dạy dỗ, hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian qua Trước hết, xin gửi lời cảm ơn chân thành lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS rm ac y Nguyễn Thanh Hải, TS Nguyễn Thị Hải Yến, người tận tình hướng dẫn, hết lịng bảo tạo điều kiện giúp đỡ suốt q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến giảng viên thuộc Bộ môn Bào chế Công nghệ dược phẩm, Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Bộ mơn Hóa an dP dược Kiểm nghiệm thuốc, Khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội giúp đỡ nhiều trình làm thực nghiệm trường ed ici ne Xin cảm ơn Ban giám hiệu, Phòng đào tạo, phòng ban tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Cảm ơn thầy Khoa Y Dược, ĐHQGHN quan tâm dìu dắt truyền kiến thức cho năm học vừa qua Và cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè ln theo sát động viên, quan tâm giúp tơi hồn thành khóa luận Sc ho ol o thêm hoàn thiện fM Dù cố gắng, lần đầu làm nghiên cứu tơi khó tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận ý kiến đóng góp thầy để khố luận Một lần tơi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Sinh viên Co p yri g ht @ Nguyễn Thị Thanh Thúy PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Viết đầy đủ CD Chuẩn độ CTCT Công thức cấu tạo CTPT Công thức phân tử DPPH 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl EtOH Ethanol an dP rm ac y Kí hiệu ,V NU DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Phương pháp khối phổ PTN Phịng thí nghiệm ed ici ne MS STT Số thứ tự Thuốc thử Co p yri g ht @ Sc ho ol o fM TT PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Bảng 1: Danh sách thực vật chi Crescentia cujete L rm ac y Bảng 2: Giá trị trung bình nồng độ khống chất có trái Crescentia Bảng 3: Các hợp chất bật Crescentia cujete L Bảng 4: Các chất thuộc nhóm p-hydroxybenzoyloxy 11 Bảng 6: Độ ẩm bột thịt đào tiên Bảng 7: Độ ẩm thịt đào tiên tươi an dP Bảng 5: Các hợp chất thuộc nhóm n- alkyl glycosid 12 34 34 35 Bảng 9: Tỷ lệ tro không tan acid dược liệu đào tiên 35 ed ici ne Bảng 8: Tỷ lệ tro toàn phần dược liệu đào tiên 36 Bảng 11: Kết định tính mẫu khơ 37 Bảng 12: Độ hấp thụ quang dãy dung dịch chuẩn 39 Bảng 13: Kết xác định độ lặp lại phương pháp đo quang 40 Bảng 14: Kết xác định độ phương pháp đo quang 40 Bảng 15: Một số số dầu hạt đào tiên 41 Bảng 16: Thành phần dầu hạt đào tiên 43 Co p yri g ht @ Sc ho ol o fM Bảng 10: Kết định tính mẫu tươi PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Tên hình, đồ thị Trang rm ac y Hình 1: Cây đào tiên Hình 2: Quả hạt đào tiên Hình 3: Cơng thức cấu tạo iridoid Crescentia cujete L dung mơi chiết Hình 5: Bảng xác định đường glucoza Hình 6: Ruột tươi Đào tiên ed ici ne Hình 7: Ruột khơ đào tiên an dP Hình 4: Hoạt tính chống oxi hóa Cresscentia cujete L Hình 8: Vi phẫu thịt Hình 9: Bột thịt đào tiên kính hiển vi fM Hình 10: Phổ hấp thụ dung dịch khoảng bước sóng từ 330-800nm Hình 11: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ chất chuẩn bước sóng 347,5nm Sc ho ol o ,V NU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ 13 27 31 31 32 32 37 38 41 Co p yri g ht @ Hình 12: Sắc ký đồ acid béo dầu hạt đào tiên PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma MỤC LỤC ,V NU ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ CRESCENTIA CUJETE L 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI CRESCENTIA rm ac y 1.2 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU CRESCENTIA CUJETE L (QUẢ ĐÀO TIÊN) 1.2.1 Thành phần hóa học 1.2.2 Tác dụng dược lý 15 an dP 1.2.3 Công dụng 17 1.2.4 Độc tính 17 ed ici ne CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên liệu, hóa chất máy móc, thiết bị 19 2.2 Phương pháp nghiên cứu 20 fM 2.2.1 Mô tả 20 2.2.2 Vi phẫu 20 Sc ho ol o 2.2.3 Độ ẩm 20 2.2.4 Tro toàn phần 20 2.2.5 Tro không tan acid 21 2.2.6 Định tính 21 @ 2.2.7 Định lượng 25 ht 2.2.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên 25 yri g CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 Co p 3.1 Mô tả 35 3.2 Đặc điểm vi phẫu thịt soi bột 36 3.3 Độ ẩm 37 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 3.4 Tro toàn phần 37 ,V NU 3.5 Tro không tan acid 38 3.6 Định tính 39 rm ac y 3.7 Định lượng 41 3.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên 25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 Co p yri g ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne an dP Tài liệu tham khảo 49 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ĐẶT VẤN ĐỀ ,V NU Ngày giới, xu hướng tìm kiếm sử dụng sản phẩm chăm sóc sức khỏe có nguồn gốc tự nhiên ngày tăng Con người có khuynh hướng sử dụng nhiều thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên Việt Nam rm ac y không nằm ngồi xu hướng Điều kiện tự nhiên ưu đãi cho đất nước ta có hệ sinh thái phong phú đa dạng, có tiềm to lớn tài nguyên thuốc Đất đai khí hậu nhiệt đới gió mùa phù hợp với nhiều loại trồng, có nhiều lồi thuốc q Đây tiền đề tốt để ngành Dược phát triển thuốc từ Dược liệu [8] an dP Cây Đào tiên có tên khoa học Crescentia cujete L., loại thân gỗ, sống lâu năm thuộc họ Chùm Ớt (Bignoniaceae) Quả đào tiên có hình cầu trơng giống bưởi vừa phải, màu xanh lục bóng, đường kính 6-12 cm, đến 20cm.Trong dân gian người ta hay sử dụng thịt đào tiên tươi khô ngâm với rượu để uống nhằm đem lại tác dụng chữa bệnh Công dụng ed ici ne đào tiên biết đến bồi bổ sức khỏe, chữa ho, nhuận tràng [9] Theo số nghiên cứu nước thịt đào tiên cịn có tác dụng dược lý như: hoạt tính kháng khuẩn từ chiết xuất thịt [28], tác dụng chống oxi hóa [26], tác dụng hạ đường huyết thử nghiệm chuột [25].… Đây loại fM hữu ích tiềm việc nghiên cứu phát triển thuốc từ dược liệu Sc ho ol o Tuy nhiên, nay, nước ta nghiên cứu loại Vì việc xây dựng tiêu chuẩn sở cho dược liệu điều cần thiết Để góp phần cung cấp sở tiền đề cho nghiên cứu sau này, thực đề tài: "Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên" với mục tiêu sau: - Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu với số tiêu chí chung Dược điển @ Việt Nam IV Co p yri g ht - Bước đầu nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ CRESCENTIA CUJETE L ,V NU 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI CRESCENTIA Chi Crescentia thuộc họ Chùm Ớt (Bignoniaceae) thuộc nhóm thực vật hạt kín (thực vật có hoa) rm ac y Crescentia chi sáu loài thực vật có hoa thuộc họ Chùm Ớt, phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới Châu Mỹ, châu Phi, châu Úc vùng Đông nam Á [5], [7] Lồi có kích thước vừa phải, cao tới 10m tạo hình cầu lớn, vỏ mỏng, cứng cùi mềm, đường kính lên đến 25cm [41] Cây gỗ nhỏ hay lớn, mọc so le, đơn Hoa nách lá, có tràng hoa an dP hình ống lớn, phình bụng, mọng Hạt nhiều, kích thước khoảng 8mm x 9mm, mặt ngồi nhẵn, khơng có cánh, nằm lẫn [43] Theo The Plant List [40] bao gồm 45 tên thực vật khoa học xếp hạng loài cho chi Crescentia Trong số có tên lồi chấp nhận Dưới ed ici ne tên loài đó: Bảng 1: Danh sách thực vật chi Crescentia Trạng thái fM Tên Mức độ tin cậy Nguồn Chấp nhận iPlants Crescentia amazonica Ducke Chấp nhận iPlants Crescentia cujete L Chấp nhận iPlants Crescentia linearifolia Miers Chấp nhận iPlants Crescentia mirabilis Ekmanex Urb Chấp nhận iPlants Crescentia portoricensis Britton Chấp nhận iPlants @ Sc ho ol o Crescentia alata Kunth ht Crescentia cujete L Co p yri g Theo tài liệu thực vật nước nước ngoài, vị trí Đào tiên xếp bậc taxon sau [4, 5, 6, 14]: PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Bảng 8: Tỷ lệ tro toàn phần dược liệu đào tiên Khối lượng dược liệu(g) Khối lượng tro(g) Tỷ lệ tro toàn phần(%) 1,035 0,068 7,69 1,056 0,070 7,76 1,015 0,061 rm ac y Trung bình ,V NU STT 7,03 7,49 Nhận xét: Từ bảng cho thấy tỷ lệ tro toàn phần dược liệu trung bình 7,49%, mẫu cao 7,76% Do vậy, qui định tỷ lệ tro toàn phần dược liệu an dP không % 3.5 Tro không tan acid Tỷ lệ % tro không tan acid dược liệu tính theo cơng thức: 100 * m 100% M (100 − A) ed ici ne X (%) = Trong đó: m: khối lượng tro (g); fM M: khối lượng mẫu thử (g); A: Độ ẩm mẫu thử (%) Sc ho ol o Với độ ẩm mẫu mang thử 14,63 Tiến hành theo phương pháp (Phụ lục 9.7 DĐVN V), kết thu bảng sau: Bảng 9: Tỷ lệ tro không tan acid dược liệu đào tiên Khối lượng Khối lượng Tỷ lệ tro không tan dược liệu(g) tro(g) acid(%) 1,035 0,012 1,358 1,056 0,016 1,774 1.015 0.009 1,038 Co p yri g ht @ STT Trung bình 1,39 38 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU Từ bảng cho thấy tỷ lệ tro không tan acid dược liệu trung bình 1,39%, mẫu cao 1,774% Do vậy, qui định tỷ lệ tro tồn phần dược liệu khơng q 2% 3.6 Định tính rm ac y * Mẫu tươi Kết sơ cho thấy mẫu tươi thịt có chứa tanin phenol, saponin, flavonoid, glycosid tim, iridoid Bảng 10: Kết định tính mẫu tươi Nhóm chất Thí nghiệm kiểm tra Tanin 10ml mẫu+ nước cất+ nhiệt lọc Quan sát thấy màu Dương phenol + FeCl3 1% xanh đen tính 10ml mẫu +5ml HCl 1% + nhiệt Dung dịch thu Âm +lọc+ acid picric không đục tính 10ml mẫu + 10ml ethyl acetat + Quan sát Dương thấy có màu vàng tính Quan sát thấy có màu nâu Dương tính Quan sát thấy có màu xanh Dương tính Nhiệt + Lọc + 1ml dung dịch NH3 5ml mẫu + acid acetic băng + lọc + Vài giọt FeCl3+ 1ml H2SO4 đậm đặc 10ml mẫu+ nước cất + nhiệt + lọc + TT Trim Hill ht @ Iridoid Lắc mạnh phút Để nguyên sau Dương tính Sc ho ol o Glycosid tim Kết luận 15 phút cột bọt fM Alkaloid Flavonoid an dP ed ici ne 20ml mẫu+ nước cất+ nhiệt + lọc Saponin Quan sát yri g * Mẫu khô Co p Kết định tính mẫu khơ thấy chứa đường khử, polysaccarid, flavonoid, saponin, acid amin, acid hữu cơ, tanin, chất béo Được thể rõ qua bảng 11 39 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Bảng 11: Kết định tính mẫu khơ Phản ứng định tính thuốc Kết sơ ,V NU Nhóm chất thử Kết Kết luận Đường khử Phản ứng Fehling + Có Polysaccarid Rượu 96% + + Phản ứng Cyanidin Flavonoid NaOH 10% acid amin 7.Acid hữu an dP - Phản ứng tạo bọt + Chì acetat - Phảng ứng lafon - Phản ứng Salkowski + TT Ninhydrin + Có Na2CO3 + Có Phản ứng gelatin + Có TT Trim Hill - Khơng có Vi thăng hoa - Phản ứng Borntraeger - Hơ giấy lọc + Có - Khơng có - Khơng có Sc ho ol o Tanin Iridoid 10 Glycosid tim 11.Chất béo @ 12.Sterol ht 13 Caroten + Mở đóng vịng lacton ed ici ne 5.Saponin Có - fM Coumarin + - Rượu AlCl3 Chì Acetat rm ac y FeCl3 5% Có Cơ cách thủy + Anhydryd acetic + H2SO4 đặc Cô cách thủy + H2SO4 đặc Khơng có Có Khơng có yri g Nhận xét: Kết cho thấy thịt tươi có chứa glycosid tim, iridoid cịn thịt khơ phần âm tính Có thể q trình làm khô làm Co p biến đổi chất với chiết xuất ethanol khơng thu nhóm chất so với không sử dụng dung môi chiết 40 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 3.7 Định lượng ,V NU 3.7.1 Định lượng đường thịt đào tiên phương pháp đo quang a, Khảo sát cực đại hấp thụ quang rm ac y Từ kết thấy độ hấp thụ quang dung dịch đạt giá trị cực đại bước sóng 347,5nm Do chọn bước sóng 347,5 bước sóng khảo sát fM ed ici ne an dP b, Tiến hành đo quang tính tốn kết Sc ho ol o Hình 10: Phổ hấp thụ dung dịch khoảng bước sóng từ 330-800nm Chú thích: Phổ hấp thụ dung dịch mẫu trắng @ Phổ hấp thụ dung dịch chiết Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn glucose ht Kết thực nghiệm thu mật độ quang dunng dịch chuẩn dung dịch thử tươi khô 0,990 0,890, 0,771 Áp dụng công thức ta yri g tính hàm lượng đường tính theo glucose ngun liệu khơ hồn tồn là: Co p * Mẫu khô X= 0,771.26,7.10−3.300.10.100 100 = 36,23% 10.10.0,990.1.1.2.(100 − 13,91) 41 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma X = 0.89.26,7.10 −3.1.25.25.10.100 10.10.0,99.100 1,25.1.(100 − 84,12) ,V NU *Mẫu tươi 100 % = 7,55% c, Thẩm định đánh giá phương pháp Xác định khoảng tuyến tính rm ac y ⚫ Tiến hành pha dãy dung dịch chuẩn glucose với nồng độ bảng Hút xác 1ml dung dịch chuẩn, 4ml dung dịch thử 1, 4ml dung dịch thử vào bình định mức 10ml sau cho nước cất đến vạch Khuấy đều, đun cách thủy Làm nguội vòi nước Sau dung dịch nguội tiến an dP hành đo quang bước sóng 347,5nm Mẫu trắng chuẩn bị song song, không chứa dung dịch chiết Dựa phần mềm excel để vẽ đồ thị đường chuẩn Nồng độ (mg/ml) 0,052 0,069 Abs 0,198 0,250 ed ici ne Bảng 12: Độ hấp thụ quang dãy dung dịch chuẩn 0,089 0,135 0,267 0,331 0,310 0,480 0,990 1,188 Phương trình hồi quy tuyến tính: y = 3,6317x - 0,0015 Sc ho ol o fM Hệ số tương quan: R2= 0,9989 1.4 0.8 @ 0.6 y = 3.6317x - 0.0015 R2 = 0.9989 0.4 ht Độ hấp thụ quang (Abs) 1.2 yri g 0.2 Co p 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 Nồng độ glucose(mg/ml) Hình 11 : Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ chất chuẩn bước sóng 347,5nm 42 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU Từ kết bảng hình cho thấy với nồng độ chất chuẩn từ 0,052- 0,54 (mg/ml) có tương quan tuyến tính nồng độ độ hấp thụ quang Ta y = 3,6317x - 0,0015 với hệ số tương quan R2= 0,9989 ⚫ Khảo sát độ lắp lại phương pháp Để xác đinh độ lặp lại phương pháp tiến hành với thí nghiệm riêng rm ac y biệt cho mẫu chiết khô thịt đào tiên điều kiện chiết Tiến hành: Hút xác 1ml dung dịch chiết, 4ml dung dịch thử 1, 4ml dung dịch thử vào bình định mức 10ml sau cho nước cất đến vạch Khuấy đều, đun cách thủy Làm nguội vòi nước Sau dung dịch an dP nguội tiến hành đo quang bước sóng 347,5nm Mẫu trắng chuẩn bị song song, không chứa dung dịch chiết Kết thu sau: Bảng 13: Kết xác định độ lặp lại phương pháp đo quang STT Abs 0,777 0,789 Khối lượng bột khô (g) 2,0016 2,0034 0,792 0,798 0,767 0,798 2,0048 2,0052 2,006 2,0068 ed ici ne SD= 0,0124; RSD= 1,576% fM Số liệu thống kê Kết bảng cho thấy phương pháp có độ lặp chấp nhận ⚫ Sc ho ol o thông qua RSD= 1,576% Độ phương pháp Để xác định độ thực với dung dịch chuẩn glucose có nồng độ xác 0,135 (mg/ml) Các bước tiến hành lặp lại lần Bảng 14: Kết xác định độ phương pháp 0,480 0,482 0,489 0,491 0,0,495 0,489 0,1357 0,1366 0,1372 0,1399 0,1347 0,1355 ht Abs @ STT yri g Nồng độ Co p Glucose (mg/ml) Ctrung bình= 0,1366 ; SD= 0.0018 43 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 0,135 − Ctb SD n = 0,1350 − 0,1366 0,00182 = 2,17 ,V NU ttn = Tra bảng t(0.95;5)=2,57 > ttn=2,17 Như vậy: tc > ttn: khơng có khác kết giá trị trung bình so rm ac y với giá trị tham chiếu mức ý nghĩa 5%, tức phương pháp có độ đạt yêu cầu 3.7.2 Xác định hàm lượng đường tổng phương pháp Bertrand ta tính hàm lượng đường toàn phần là: 87 76,4 100 = 6,72% 1000 10 10 ed ici ne X= an dP * Mẫu tươi: Khối lượng mẫu ban đầu đem định lượng 10g, thể tích KMnO4 đem chuẩn độ 24,7ml (tra bảng xác định đường glucoza tương đương với 87mg đường glucoza) Lượng dung dịch thử đem làm thí nghiệm 10ml Thể tích dung dịch sau định mức 76,4ml Từ áp dụng công thức * Mẫu khô: Khối lượng mẫu ban đầu đem định lượng 2g, thể tích KMnO4 đem chuẩn độ 25,5ml (tra bảng xác định đường glucoza tương fM đương với 90mg đường glucoza) Lượng dung dịch thử đem làm thí nghiệm 10ml Thể tích dung dịch sau định mức 77,5ml Từ áp dụng cơng thức X= Sc ho ol o ta tính hàm lượng đường toàn phần là: 90 77,5 100 = 35,01% 1000 10 Nhận xét: Hàm lượng đường thịt khô cao thịt tươi Định lượng đường phương pháp đo quang (36,23%) cho kết cao với phương pháp Bertrand (đơi với mẫu khơ) định lượng mẫu @ khác dẫn tới kết khác Quá trình định lượng theo phương ht pháp Bertrand thực nhiều bước, kết sai số lớn dẫn tới chênh yri g lệch kết 3.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên Co p 3.8.1 Đánh giá tính chất cảm quan số lý hóa dầu a, Mơ tả Dầu thơ chiết từ hạt đào tiên có màu vàng nâu đậm, suốt, có mùi thơm nhẹ, đặc trưng 44 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Kết thực nghiệm ghi lại bảng Bảng 15: Một số số dầu hạt đào tiên ,V NU b, Chỉ số lý hóa Chỉ số peroxid Chỉ số iod (Wijs) Chỉ số xà phịng KOH/g) (mEq/kg) (gI2/100g) hóa (mg KOH/g) 4,02 9,6 92 rm ac y Chỉ số acid (mg 188,5 Về mặt ý nghĩa số, số acid tương đối cao cho thấy dầu dễ bị phân hủy oxi hóa Cịn số cịn lại bình thường 3.8.2 Định lượng dầu thơ phương pháp cân an dP Sau trích ly dầu từ 39g hạt hệ thống soxlet cô quay chân không để tách hết dung môi thu dầu có màu vàng nâu đậm m1 = 271,74g; m2= 278,16; m = 39,04g; 278,16 − 271,74 100% = 16,44% 39,04 ed ici ne % chất béo = 3.8.3 Định tính thành phần acid béo dầu phương pháp GC/MS Từ lượng dầu trích ly, tiến hành methyl hóa sau sử dụng phương Co p yri g ht @ Sc ho ol o fM pháp sắc ký khí khối phổ để định tính acid béo có dầu Thu kết sau: Hình 12: Sắc ký đồ acid béo dầu hạt đào tiên 45 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU Kết phân tích GC- MS thấy peak có cường độ lớn thời gian lưu 21,949, cho thấy thành phần chiếm nhiều dầu hạt đào tiên Qua nhận dạng cấu trúc hóa học khối phổ xác định hợp chất có thời gian lưu 21,949 14,17- Octadecadienoic acid Dưới kết tóm tắt thành phần hóa học dầu hạt Tỉ lệ (%) Palmitoleic acid C16: C16H30O2 0,31 Palmitic acid C16: C16H32O2 19,56 RT Thành phần acid béo 20,788 20,931 an dP CTPT STT 21,884 rm ac y đào tiên phân tích phương pháp sắc ký khí khối phổ (GC- MS): Bảng 16: Thành phần dầu hạt đào tiên 12,15- Octadecadienoic acid C18: 5,9 C18H32O2 22,044 Stearate acid C18: C18H36O2 3,85 23,129 11-Eicosenoic acid C19: C19H38O2 0,15 25,250 Nonadecanoic acid C19:0 C19H38O2 1,2 23,326 Eicosanoic acid C20:0 C20H40O2 0,54 67,85 Sc ho ol o fM ed ici ne 21,949 14,17- Octadecadienoic acid C18: Qua kết thấy dầu hạt đào tiên chứa thành phần, chủ yếu 14,17- Octadecadienoic acid, Palmitic acid Hàm lượng acid béo không no chiếm nhiều tổng lượng acid có dầu hạt đào tiên, loại Co p yri g ht @ acid có lợi cho sức khỏe người Đây nguồn nguyên liệu tiềm để nghiên cứu phát triển dầu ăn 46 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ,V NU Kết luận Sau thời gian thực đề tài thu kết sau: - Đã mơ tả hình thái thực vật đào tiên đặc điểm vi phẫu thịt rm ac y - Đã định tính xác định số nhóm chất có thịt đào tiên là: tanin phenol, flavonoid, iridoid, glycosid tim mẫu thịt tươi Trong mẫu thịt khơ định tính sơ được: acid hữu cơ, acid amin, saponin, chất béo, polysacarid, tanin, saponin, flavonoid, đường khử an dP - Đây nghiên cứu bước đầu góp phần bước hồn thành chuyên luận tiêu chuẩn sở cho dược liệu thịt đào tiên theo tiêu chuẩn DĐVN V Trong đó, độ ẩm khơng q 15% với thịt khơ 85% với thịt tươi; tro tồn phần khơng 8%; tro không tan acid không 2% Định lượng ed ici ne đường tổng theo phương pháp: phương pháp Bertrand phương pháp đo quang thu kết 6,72%, 7,55% với thịt tươi 35,01%, 36,23% với thịt khô - Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên xác định số acid, peroxid, iod, xà phịng hóa là: 4,02; 9,6; 92; 188,5 Định lượng dầu thơ tính fM dầu chiếm 16,44% Định tính chất có dầu phương pháp GC- MS thu chất là: Palmitoleic acid, Palmitic acid, 12,15- Octadecadienoic Sc ho ol o acid, 14,17- Octadecadienoic acid, Stearate acid, 11- Eicosenoic acid, Eicosanoic acid, Nonadecanoic acid Kiến nghị Do thời gian có hạn, đề tài xây dựng tiêu chuẩn sở với mẫu trồng Lạng Sơn Do đó, cần tiến hành nghiên cứu cỡ mẫu nhiều @ để việc kết luận tiêu mang tính đại diện cho dược liệu thịt đào tiên yri g ht - Đề xuất xây dựng tiêu định lượng thành phần chính, đặc trưng dược liệu thịt đào tiên phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao góp phần đánh giá xác hàm lượng hóa chất thực vật hữu ích có thịt đào tiên Co p - Đề xuất xác định tỉ lệ tạp chất dược liệu, tỉ lệ vụn nát xác định hàm lượng kim loại nặng cho dược liệu thịt đào tiên 47 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU - Đề xuất tiếp tục nghiên cứu hoàn thiện xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên để bổ sung chuyên luận dược liệu Đào tiên Co p yri g ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne an dP rm ac y Dược điển Việt Nam 48 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma Tài liệu tham khảo ,V NU Tiếng việt [1] Bộ môn dược liệu (2010), Thực tập dược liệu, Trường đại học dược Hà Nội rm ac y [2] Bộ Y tế (2007), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr68-79 [3] Bộ Y tế (2007), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr857-862 [4] Bộ môn thực vật, Trường ĐH Dược Hà Nội (2005), Thực vật học, Nhà xuất an dP Y học [5] Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam- tập III, Nhà xuất trẻ, tr83-85 ed ici ne [6] Võ Văn Chi (1997), Cây cỏ thường thấy Việt Nam- tập I, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, tr136 [7] Viện Dược liệu (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam- tập I, Nhà xuất khoa học kĩ thuật, tr209, 305, 747- 748 fM [8] Nguyễn Văn Thành, Nguyễn Hoàng Thanh Đinh Hoa Lĩnh (2004),"Luận văn Nghiên cứu số thuốc, thuốc dân gian cộng đồng dân tộc Sc ho ol o thiểu số buôn Đrăng Phôk –vùng lõi vườn quốc gia Yokđôn –huyện Buôn Đôn –tỉnh Đaklak" [9] Đỗ Tất Lợi (1962), Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr897 [10] Nguyễn Quốc Tuấn (2012), Xây dựng phương pháp định tính, định lượng @ flavonoid nụ vối, Luận văn thạc sĩ- Trường ĐH Khoa học tự nhiên ht [11] Nguyễn Thị Huế (2017), Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu Tam thất hoang (Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M Feng) Trồng Sapa- yri g Lào Cai, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học- Khoa Y Dược, ĐHQGHN Co p [12] Trần Hà Ngân (2010), Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học Đào tiên, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học- Trường ĐH Dược Hà Nội [13] Dược điển Việt Nam (2010), Tập IV 49 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU [14] Nguyễn Thế Cường (2011), Nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học thịt đào tiên (Crescentia cujete Linn.), họ Núc Nác (Bignoniaceae), Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học- Trường ĐH Dược Hà Nội rm ac y [15] Trần Bích Lam, Lê Xuân Hải, Nguyễn Thị Triều My, Lâm Quốc Trình (2011), “Nghiên cứu trình thu nhận dầu thơ phương pháp ép trích ly từ hạt cao su Nam Bộ”, Science and Technology Development, Vol 14, No.K3- 2011 an dP Tiếng anh [16] Tetsuo Kaneko, Kazuhiro Ohtani, Ryoji Kasai, Kazuo Yamasaki and Nguyen Minh Duc (1997), “Iridoid and Iridoid Glucosides from fruits of Crescentia cujete”, Phytochemistry, 46, pp.907-910 ed ici ne [17] Tetsuo Kaneko, Kazuhiro Ohtani, Ryoji Kasai, Kazuo Yamasaki and Nguyen Minh Duc (1998), “n-alkyl glycosides and p-hydoxybenzoyloxy glucose from fruit of Crescentia cujete”, Phytochemistry, 47, pp.259-263 fM [18] Michael, 2004; Burkill, 1985; Plant Database, 2004 Sc ho ol o [19] Khandaker Rayhan Mahbub, Md Mojibul Hoq, Monzur Morshed Ahmed, Animesh Sarker (2011), “In vitro Antibacterial activity of Crescentia cujete and Moringa oleifera” [20] Julia F Morton, “The Calabash (Crescentia cujete) in Folk Medicine” [21] Linda B Nielsen, Riskiono Slamet, Dieter Wege (2009), “The synthesis of 3-hydroxymethylfuro[3,2-b] naphtho [2,3-furan-5,10-dione, a novel metabolite @ isolated from Crescentia cujete” [22] Sinval Garcia Pereira1 & Sandra Alves de Araújo1 & Giselle Maria ht Skelding Pinheiro Guilhon & Lourivaldo Silva Santos &Livio Martins Costa yri g Junior (2016), “In vitro acaricidal activity of Crescentia cujete L fruit pulp against Rhipicephalus microplus” Co p [23] The chemical constituents of calabash (Crescentia cujete) / Ejelonu BC, Lasisi AA,Olaremu AG and Ejelonu OC/ African Journal of Biotechnology Vol 10(84), pp 19631-19636, 26 December, 2011 / DOI: 10.5897/AJB11.1518 50 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU [24] B A Smith, F G Dollear,“Oil from calabash seed, Crescentia cujete L.”, Journal of the American Oil Chemists' Society 24(2):52-54 February 1947 / DOI: 10.1007/BF02642127 [25] C Alay-ay, A Hermoso, R Li, M Quinto, P Santos, I Tan, M Villa, R rm ac y Cadiang, M Corpuz, “Hypoglycemic Effect Of Crescentia Cujete Linn (Bignoniaceae) Fruit Juice In Normal Sprague-Dawley Rats”, Planta Med 2016; 82 - PB2 / DOI: 10.1055/s-0036-1578650 [26] Syaefudin, D Nitami, M D M Utari , M Rafi and U Hasanah, “Antioxidant and Antibacterial Activities of Several Fractions from Crescentia cujete L Stem Bark Extract”, Earth and Environmental Science 197 (2018) an dP [27] Sri Rahmaningsih, Arief Prajitno, Aulanni’am Aulanni’am, “Maftuch, Bioactive Compounds From Majapahit Fruit (Crescentia cujete) As a Potential Natural Antibacterial”, International Journal of ChemTech Research, Vol.10 ed ici ne No.3, pp 90-99 [28] U Hasanah, HT Widhiastuti and Syaefudin, “Potency of Ethanol Extract from Berenuk (Crescentia cujete L.) Fruit Rind and Flesh as Antibacterial Agents”, Earth and Environmental Science 187 (2018) fM [29] Leopold, B (1962), “Spectrophotometric Determination of Sugars Using p-Aminobenzoic Acid”, Analytical Chemistry, 34(1), 170-171 Sc ho ol o [30] Mesoamerica, A.F (2008), The Mysterious Tree, Biologist mirtha cano [31] The stephen H.B., Crescentia alata The Institute of Food and Agricultural Sciences, U.S Department of Agricultural, Cooperative Extension Service, University of Florida, IFAS, Florida A.& M @ [32] G Bertrand, N Gabriel Le dosage des sucres reducteurs Bul Soc Chim Paris, 35: 1285-1299 1906 ht [33] GOST 31665-2012 Animal and vegetable fats and oils- Preparation of yri g methyl esters of fatty acids Euro- Asian council for standardization, metrology and certification 2012 Co p [34] The United Nations Conferencen on trade and Development (2005), Market Brief in the European Union for selected natural ingredients from native species Crescentia cujete, United Nation 51 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ,V NU [35] David W Nellis (1997), “Poisonous plants and animal of Florida and the Caribbean”, Pineapple Press, Inc., pp.156- 157 [36] Ogbuagu, M.N (2008), “The nutritive and Anti-Nutritive Compositions of Calabash (Cresscentia cujete) Fruit pulp”, Journal of Food Technology, 6, pp.267- 270 rm ac y [37] Frantisek S (1998), “The Natural Guide to Medicinal Herb Plants”, Tiger book Intenrational Plc, Twickers 8:20 [38] Finar IL (2000), “Stereochemistry and the Chemistry of Natural Products”, Organic Chemistry vol 5th Edn pp.603, 811 an dP [39] Turner (1965), “A screening Methods in Pharmacology”, Academic Press, New York and London, pp.66-68 Internet ed ici ne [40] The Plant List Crescentia [Accessed: 23/3/2019] fM [41] Wikipedia Crescentia [Accessed: 2/4/2019] Sc ho ol o [42] Plant for a future Crescentia cujete- L [Accessed: 2/4/2019] [43] United States Department of Agriculture Crescentia cujete L [Accessed: 2/4/2019] @ [44] Philippine medicinal plant Cujete ht [Accessed: 2/4/2019] yri g [45] Vĩnh Sinh Ngọc Hà, 2015 Đào Tiên Co p [Ngày truy cập 16/5/2019] 52 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ... đề tài: "Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên" với mục tiêu sau: - Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu với số tiêu chí chung Dược điển @ Việt Nam IV Co p yri g ht - Bước đầu nghiên... cứu phát triển thuốc từ dược liệu Sc ho ol o Tuy nhiên, nay, nước ta nghiên cứu loại Vì việc xây dựng tiêu chuẩn sở cho dược liệu điều cần thiết Để góp phần cung cấp sở tiền đề cho nghiên cứu... Bảng 6: Độ ẩm bột thịt đào tiên Bảng 7: Độ ẩm thịt đào tiên tươi an dP Bảng 5: Các hợp chất thuộc nhóm n- alkyl glycosid 12 34 34 35 Bảng 9: Tỷ lệ tro không tan acid dược liệu đào tiên 35 ed ici