KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược học FULL (KIỂM NGHIỆM và độc CHẤT) bước đầu xây dựng tiêu chuẩn cơ sở dược liệu thịt quả đào tiên (crescentia cujete l )

Lời cảm ơn Sau thời gian thực đề tài với nhiều nỗ lực cố gắng, thời điểm hồn thành khóa luận lúc tơi xin phép bày tỏ lòng biết ơn chân thành với người dạy dỗ, hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian qua Trước hết, xin gửi lời cảm ơn chân thành lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thanh Hải, TS Nguyễn Thị Hải Yến, người tận tình hướng dẫn, hết lịng bảo tạo điều kiện giúp đỡ suốt q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến giảng viên thuộc Bộ môn Bào chế Công nghệ dược phẩm, Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Bộ mơn Hóa dược Kiểm nghiệm thuốc, Khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội giúp đỡ tơi nhiều q trình làm thực nghiệm trường Xin cảm ơn Ban giám hiệu, Phòng đào tạo, phòng ban tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Cảm ơn thầy Khoa Y Dược, ĐHQGHN quan tâm dìu dắt truyền kiến thức cho năm học vừa qua Và cuối cùng, xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè theo sát động viên, quan tâm giúp tơi hồn thành khóa luận Dù cố gắng, lần đầu làm nghiên cứu tơi khó tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận ý kiến đóng góp thầy để khố luận thêm hồn thiện Một lần tơi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu Hà Nội, ngày tháng Sinh viên năm DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Viết đầy đủ CD Chuẩn độ CTCT Công thức cấu tạo CTPT Công thức phân tử DPPH 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl EtOH Ethanol MS Phương pháp khối phổ PTN Phịng thí nghiệm STT Số thứ tự TT Thuốc thử DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Tên hình, đồ thị Trang Bảng 1: Danh sách thực vật chi Crescentia Hình 1: Cây đào tiên Bảng 2: Giá trị trung bình nồng độ khống chất có trái Crescentia Hình cujete2:L.Quả hạt đào tiên Hình thức cấunổi tạobật iridoid Bảng 3: 3: Cơng Các hợp chất trongcủa quảCrescentia Crescentiacujete cujeteL.L Hình Hoạtchất tínhthuộc chốngnhóm oxi hóa Cresscentia cujete L Bảng 4: 4: Các p-hydroxybenzoyloxy dung môi chiết Bảng 5: Các hợp chất thuộc nhóm n- alkyl glycosid Hình 5: Bảng xác định đường glucoza Bảng 6: Độ ẩm bột thịt đào tiên Hình 6: Ruột tươi Đào tiên Bảng 7: Độ ẩm thịt đào tiên tươi Hình 7: Ruột khơ đào tiên Bảng 8: Tỷ lệ tro tồn phần dược liệu đào tiên Hình 8: Vi phẫu thịt Bảng 9: Tỷ lệ tro khơng tan acid dược liệu đào tiên Hình 9: Bột thịt đào tiên kính hiển vi Bảng 10: Kết định tính mẫu tươi Hình 10: Phổ hấp thụ dung dịch khoảng bước sóng Bảng 11: Kết định tính mẫu khơ từ 330-800nm Bảng 12: Độ hấp thụ quang dãy dung dịch chuẩn Hình 11: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ Bảng 13: Kết xác định độ lặp lại phương pháp đo quang chất chuẩn bước sóng 347,5nm Bảng 14: Kết xác định độ phương pháp đo quang Hình 12: Sắc ký đồ acid béo dầu hạt đào tiên Bảng 15: Một số số dầu hạt đào tiên Bảng 16: Thành phần dầu hạt đào tiên 9 13 11 12 27 34 31 34 31 35 32 35 32 36 37 37 39 38 40 41 40 41 43 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ CRESCENTIA CUJETE L 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI CRESCENTIA 1.2 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU CRESCENTIA CUJETE L (QUẢ ĐÀO TIÊN) 1.2.1 Thành phần hóa học 1.2.2 Tác dụng dược lý 15 1.2.3 Cơng dụng 17 1.2.4 Độc tính 17 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên liệu, hóa chất máy móc, thiết bị 19 2.2 Phương pháp nghiên cứu 20 2.2.1 Mô tả 20 2.2.2 Vi phẫu 20 2.2.3 Độ ẩm 20 2.2.4 Tro toàn phần 20 2.2.5 Tro không tan acid 21 2.2.6 Định tính 21 2.2.7 Định lượng 25 2.2.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên 25 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 3.1 Mô tả 35 3.2 Đặc điểm vi phẫu thịt soi bột 36 3.3 Độ ẩm 37 3.4 Tro toàn phần 37 3.5 Tro không tan acid 38 3.6 Định tính 39 3.7 Định lượng 41 3.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên 25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 Tài liệu tham khảo 49 ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày giới, xu hướng tìm kiếm sử dụng sản phẩm chăm sóc sức khỏe có nguồn gốc tự nhiên ngày tăng Con người có khuynh hướng sử dụng nhiều thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên Việt Nam khơng nằm ngồi xu hướng Điều kiện tự nhiên ưu đãi cho đất nước ta có hệ sinh thái phong phú đa dạng, có tiềm to lớn tài nguyên thuốc Đất đai khí hậu nhiệt đới gió mùa phù hợp với nhiều loại trồng, có nhiều lồi thuốc q Đây tiền đề tốt để ngành Dược phát triển thuốc từ Dược liệu [8] Cây Đào tiên có tên khoa học Crescentia cujete L., loại thân gỗ, sống lâu năm thuộc họ Chùm Ớt (Bignoniaceae) Quả đào tiên có hình cầu trơng giống bưởi vừa phải, màu xanh lục bóng, đường kính 6-12 cm, đến 20cm.Trong dân gian người ta hay sử dụng thịt đào tiên tươi khô ngâm với rượu để uống nhằm đem lại tác dụng chữa bệnh Công dụng đào tiên biết đến bồi bổ sức khỏe, chữa ho, nhuận tràng [9] Theo số nghiên cứu nước ngồi thịt đào tiên cịn có tác dụng dược lý như: hoạt tính kháng khuẩn từ chiết xuất thịt [28], tác dụng chống oxi hóa [26], tác dụng hạ đường huyết thử nghiệm chuột [25].… Đây loại hữu ích tiềm việc nghiên cứu phát triển thuốc từ dược liệu Tuy nhiên, nay, nước ta nghiên cứu loại Vì việc xây dựng tiêu chuẩn sở cho dược liệu điều cần thiết Để góp phần cung cấp sở tiền đề cho nghiên cứu sau này, thực đề tài: "Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên" với mục tiêu sau: - Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu với số tiêu chí chung Dược điển Việt Nam IV - Bước đầu nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ CRESCENTIA CUJETE L 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI CRESCENTIA Chi Crescentia thuộc họ Chùm Ớt () thuộc nhóm thực vật hạt kín (thực vật có hoa) Crescentia chi sáu lồi thực vật có hoa thuộc họ Chùm Ớt, phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới Châu Mỹ, châu Phi, châu Úc vùng Đông nam Á [5], [7] Lồi kích thước vừa phải, cao tới 10m tạo hình cầu lớn, vỏ mỏng, cứng cùi mềm, đường kính lên đến 25cm [41] Cây gỗ nhỏ hay lớn, mọc so le, đơn Hoa nách lá, có tràng hoa hình ống lớn, phình bụng, mọng Hạt nhiều, kích thước khoảng 8mm x 9mm, mặt ngồi nhẵn, khơng có cánh, nằm lẫn [43] Theo The Plant List [40] bao gồm 45 tên thực vật khoa học xếp hạng loài cho chi Crescentia Trong số có tên lồi chấp nhận Dưới tên lồi đó: Bảng 1: Danh sách thực vật chi Crescentia Mức độ tin Tên Trạng thái Crescentia alata Kunth Chấp nhận iPlants Crescentia amazonica Ducke Chấp nhận iPlants Crescentia cujete L Chấp nhận iPlants Crescentia linearifolia Miers Chấp nhận iPlants Crescentia mirabilis Ekmanex Urb Chấp nhận iPlants Crescentia portoricensis Britton Chấp nhận iPlants cậy Nguồn Crescentia cujete L Theo tài liệu thực vật nước nước ngồi, vị trí Đào tiên xếp bậc taxon sau [4, 5, 6, 14]: Nghành Magnoliophyta (Nghành Ngọc lan) Lớp Magnoliopsida (Lớp Ngọc lan) Phân lớp Lamiadae (Phân lớp Hoa môi) Bộ Scrophulariales (Bộ Hoa mõm chó) Họ Bignoniaceae (Họ Chùm Ớt) Chi: Crescentia L Nguồn gốc xuất xứ: Châu Mỹ nhiệt đới Phân bố Việt Nam: trồng gần khắp tỉnh thành, chủ yếu trồng miền Nam Còn gọi Calabacero (Tây Ban Nha), Cujeté (Brazil), Totumo (Panama,Colombia,VenezuelavàPeru),Tutumo(Bolivia),Taparo (Venezuela), Mate (Ecuador), Huinga (Peru), Pate (Peru), Cuyabra (Colombia), Morro (Guatemala), Cujete (Tây Ban Nha, Philippines), Trái kỳ diệu (Philippines), Kalbas (Dominica St Lucia), Higuera (Puerto Rico) Rum (Sri Lanka) [42] * Đặc điểm hình thái [12, 30, 34, 46]: Thân, tán, lá: Cây gỗ nhỏ hay nhỡ, sống lâu năm, cao từ 4-5m Tán hình tháp, vỏ thân màu xám Lá mọc so le, thường thu tập mấu, hình trái xoan ngược, thon hẹp dài gốc, dài 10-15cm, rộng 3-4cm, mọc khít thành chùm hay hơn, màu xanh đậm, bóng, cứng, tán dày, rụng vào mùa khơ (Hình 1) Hoa, quả, hạt: Hoa to thường mọc đơn độc đầu cành hay kẽ lá, màu trắng đục, mùi hơi, dài hình chuông, nhẵn, dễ rụng, chia thùy không đều; tràng gần hình chng, ống rộng loe đầu, dài 5cm, cánh không đều, mép uốn lượn; nhị 4, nhị dính gốc ống tràng; bầu hình chóp, ô Quả mọng, hình cầu trông giống bưởi vừa phải, màu xanh lục bóng, đường kính 6-12 cm, đến 20cm, vỏ xanh cứng, thịt màu trắng có vị chua Hạt nhiều, phẳng nhỏ, không cánh, nằm lẫn chìm thịt Trái chín phải vào khoảng tháng Mùa hoa gần quanh năm [39] (Hình 2,3) *Đặc điểm sinh lý, sinh thái: Tốc độ sinh trưởng: Trung bình Phù hợp với: Cây ưa sáng, nhu cầu nước trung bình Nhân giống từ hạt Đào tiên Việt Nam trồng cách cắm cành hay tách nhánh mọc từ chồi rễ Cây hoa trái mùa năm Có khả chịu mặn trồng nơi có nước tốt Cây cần trồng nơi khơng có sương lạnh khơng thích ứng với độ lạnh cao [45] Hình 1: Cây đào tiên Từ bảng cho thấy tỷ lệ tro không tan acid dược liệu trung bình 1,39%, mẫu cao 1,774% Do vậy, qui định tỷ lệ tro tồn phần dược liệu khơng 2% 3.6 Định tính * Mẫu tươi Kết sơ cho thấy mẫu tươi thịt có chứa tanin phenol, saponin, flavonoid, glycosid tim, iridoid Bảng 10: Kết định tính mẫu tươi Nhóm chất Thí nghiệm kiểm tra Quan sát Tanin phenol 10ml mẫu+ nước cất+ nhiệt lọc + FeCl3 1% Quan sát thấy màu xanh đen Kết luận Dương tính Saponin 20ml mẫu+ nước cất+ nhiệt + lọc Lắc mạnh phút Để nguyên sau Dương 15 phút cột tính bọt Alkaloid 10ml mẫu +5ml HCl 1% + nhiệt +lọc+ acid picric Dung dịch thu không đục Âm tính Flavonoid 10ml mẫu + 10ml ethyl acetat + Nhiệt + Lọc + 1ml dung dịch NH3 Quan sát thấy có màu vàng Dương tính Quan sát thấy có màu nâu Dương tính Quan sát thấy có màu xanh Dương tính Glycosid tim Iridoid 5ml mẫu + acid acetic băng + lọc + Vài giọt FeCl3+ 1ml H2SO4 đậm đặc 10ml mẫu+ nước cất + nhiệt + lọc + TT Trim Hill * Mẫu khơ Kết định tính mẫu khô thấy chứa đường khử, polysaccarid, flavonoid, saponin, acid amin, acid hữu cơ, tanin, chất béo Được thể rõ qua bảng 11 Bảng 11: Kết định tính mẫu khơ Nhóm chất Phản ứng định tính thuốc Kết sơ thử Kết Kết luận Đường khử Phản ứng Fehling + Có Polysaccarid Rượu 96% + Có FeCl3 5% + Phản ứng Cyanidin + NaOH 10% - Rượu AlCl3 - Chì Acetat + Mở đóng vịng lacton - Phản ứng tạo bọt + Chì acetat - Phảng ứng lafon - Phản ứng Salkowski + acid amin TT Ninhydrin + Có 7.Acid hữu Na2CO3 + Có Tanin Phản ứng gelatin + Có Iridoid TT Trim Hill - Khơng có Vi thăng hoa - Phản ứng Borntraeger - Hơ giấy lọc + Có - Khơng có - Khơng có Flavonoid Coumarin 5.Saponin 10 Glycosid tim 11.Chất béo 12.Sterol 13 Caroten Cô cách thủy + Anhydryd acetic + H2SO4 đặc Cô cách thủy + H2SO4 đặc Có Khơng có Có Khơng có Nhận xét: Kết cho thấy thịt tươi có chứa glycosid tim, iridoid cịn thịt khơ phần âm tính Có thể q trình làm khơ làm biến đổi chất với chiết xuất ethanol khơng thu nhóm chất so với không sử dụng dung môi chiết 3.7 Định lượng 3.7.1 Định lượng đường thịt đào tiên phương pháp đo quang a, Khảo sát cực đại hấp thụ quang Từ kết thấy độ hấp thụ quang dung dịch đạt giá trị cực đại bước sóng 347,5nm Do chọn bước sóng 347,5 bước sóng khảo sát b, Tiến hành đo quang tính tốn kết Hình 10: Phổ hấp thụ dung dịch khoảng bước sóng từ 330-800nm Chú thích: Phổ hấp thụ dung dịch mẫu trắng Phổ hấp thụ dung dịch chiết Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn glucose Kết thực nghiệm thu mật độ quang dunng dịch chuẩn dung dịch thử tươi khô 0,990 0,890, 0,771 Áp dụng cơng thức ta tính hàm lượng đường tính theo glucose nguyên liệu khơ hồn tồn là: * Mẫu khơ X = 0,771.26,7.10 −3 300.10.100 100 = 36,23% 10.10.0,990.1.1.2.(100 −13,91) *Mẫu tươi X = −3 0.89.26,7.10 1.25.25.10.100 10.10.0,99.100.1,25.1.(100 − 84,12) 100% = 7,55% c, Thẩm định đánh giá phương pháp • Xác định khoảng tuyến tính Tiến hành pha dãy dung dịch chuẩn glucose với nồng độ bảng Hút xác 1ml dung dịch chuẩn, 4ml dung dịch thử 1, 4ml dung dịch thử vào bình định mức 10ml sau cho nước cất đến vạch Khuấy đều, đun cách thủy Làm nguội vòi nước Sau dung dịch nguội tiến hành đo quang bước sóng 347,5nm Mẫu trắng chuẩn bị song song, không chứa dung dịch chiết Dựa phần mềm excel để vẽ đồ thị đường chuẩn Bảng 12: Độ hấp thụ quang dãy dung dịch chuẩn Nồng độ (mg/ml) 0,052 0,069 0,089 0,135 0,267 0,331 Abs 0,198 0,250 0,310 0,480 0,990 1,188 Phương trình hồi quy tuyến tính: y = 3,6317x - 0,0015 Hệ số tương quan: R2= 0,9989 1.4 1.2 y = 3.6317x - 0.0015 R2 = 0.9989 Đ ộ hấ p 0.8 th ụ 0.6 qu an g 0.4 (A 0.2 0 0.05 0.1 0.15 0.2 Nồng độ glucose(mg/ml) 0.25 0.3 0.35 Hình 11 : Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ chất chuẩn bước sóng 347,5nm Từ kết bảng hình cho thấy với nồng độ chất chuẩn từ 0,052- 0,54 (mg/ml) có tương quan tuyến tính nồng độ độ hấp thụ quang Ta y = 3,6317x - 0,0015 với hệ số tương quan R2= 0,9989 • Khảo sát độ lắp lại phương pháp Để xác đinh độ lặp lại phương pháp tiến hành với thí nghiệm riêng biệt cho mẫu chiết khô thịt đào tiên điều kiện chiết Tiến hành: Hút xác 1ml dung dịch chiết, 4ml dung dịch thử 1, 4ml dung dịch thử vào bình định mức 10ml sau cho nước cất đến vạch Khuấy đều, đun cách thủy Làm nguội vòi nước Sau dung dịch nguội tiến hành đo quang bước sóng 347,5nm Mẫu trắng chuẩn bị song song, không chứa dung dịch chiết Kết thu sau: Bảng 13: Kết xác định độ lặp lại phương pháp đo quang STT Abs 0,777 0,789 0,792 0,798 0,767 0,798 Khối lượng bột khô (g) 2,0016 2,0034 2,0048 2,0052 2,006 2,0068 Số liệu thống kê SD= 0,0124; RSD= 1,576% Kết bảng cho thấy phương pháp có độ lặp chấp nhận thơng qua RSD= 1,576% • Độ phương pháp Để xác định độ thực với dung dịch chuẩn glucose có nồng độ xác 0,135 (mg/ml) Các bước tiến hành lặp lại lần Bảng 14: Kết xác định độ phương pháp STT Abs 0,480 0,482 0,489 0,491 0,0,495 0,489 0,1357 0,1366 0,1372 0,1399 0,1347 0,1355 Nồng độ Glucose (mg/ml) Ctrung bình= 0,1366 ; SD= 0.0018 ttn = 0,135 Ctb SD2 n = 0,1350 0,1366 0,00182 = 2,17 Tra bảng t(0.95;5)=2,57 > ttn=2,17 Như vậy: tc > ttn: khơng có khác kết giá trị trung bình so với giá trị tham chiếu mức ý nghĩa 5%, tức phương pháp có độ đạt yêu cầu 3.7.2 Xác định hàm lượng đường tổng phương pháp Bertrand * Mẫu tươi: Khối lượng mẫu ban đầu đem định lượng 10g, thể tích KMnO4 đem chuẩn độ 24,7ml (tra bảng xác định đường glucoza tương đương với 87mg đường glucoza) Lượng dung dịch thử đem làm thí nghiệm 10ml Thể tích dung dịch sau định mức 76,4ml Từ áp dụng cơng thức ta tính hàm lượng đường toàn phần là: 76,4 100 87 = 6,72% X= 1000 10 10 * Mẫu khô: Khối lượng mẫu ban đầu đem định lượng 2g, thể tích KMnO4 đem chuẩn độ 25,5ml (tra bảng xác định đường glucoza tương đương với 90mg đường glucoza) Lượng dung dịch thử đem làm thí nghiệm 10ml Thể tích dung dịch sau định mức 77,5ml Từ áp dụng cơng thức ta tính hàm lượng đường toàn phần là: 77,5 100 90 = 35,01% X= 1000 10 Nhận xét: Hàm lượng đường thịt khô cao thịt tươi Định lượng đường phương pháp đo quang (36,23%) cho kết cao với phương pháp Bertrand (đơi với mẫu khơ) định lượng mẫu khác dẫn tới kết khác Quá trình định lượng theo phương pháp Bertrand thực nhiều bước, kết sai số lớn dẫn tới chênh lệch kết 3.8 Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên 3.8.1 Đánh giá tính chất cảm quan số lý hóa dầu a, Mô tả Dầu thô chiết từ hạt đào tiên có màu vàng nâu đậm, suốt, có mùi thơm nhẹ, đặc trưng b, Chỉ số lý hóa Kết thực nghiệm ghi lại bảng Bảng 15: Một số số dầu hạt đào tiên Chỉ số acid (mg KOH/g) Chỉ số peroxid (mEq/kg) Chỉ số iod (Wijs) (gI2/100g) Chỉ số xà phòng hóa (mg KOH/g) 4,02 9,6 92 188,5 Về mặt ý nghĩa số, số acid tương đối cao cho thấy dầu dễ bị phân hủy oxi hóa Cịn số cịn lại bình thường 3.8.2 Định lượng dầu thô phương pháp cân Sau trích ly dầu từ 39g hạt hệ thống soxlet cô quay chân không để tách hết dung mơi thu dầu có màu vàng nâu đậm m1 = 271,74g; m2= 278,16; m = 39,04g; % chất béo = 278,16 − 271,74 100% = 16,44% 39,04 3.8.3 Định tính thành phần acid béo dầu phương pháp GC/MS Từ lượng dầu trích ly, tiến hành methyl hóa sau sử dụng phương pháp sắc ký khí khối phổ để định tính acid béo có dầu Thu kết sau: Hình 12: Sắc ký đồ acid béo dầu hạt đào tiên Kết phân tích GC- MS thấy peak có cường độ lớn thời gian lưu 21,949, cho thấy thành phần chiếm nhiều dầu hạt đào tiên Qua nhận dạng cấu trúc hóa học khối phổ xác định hợp chất có thời gian lưu 21,949 14,17- Octadecadienoic acid Dưới kết tóm tắt thành phần hóa học dầu hạt đào tiên phân tích phương pháp sắc ký khí khối phổ (GC- MS): Bảng 16: Thành phần dầu hạt đào tiên STT RT Thành phần acid béo CTPT Tỉ lệ (%) 20,788 Palmitoleic acid C16: C16H30O2 0,31 20,931 Palmitic acid C16: C16H32O2 19,56 21,884 12,15- Octadecadienoic acid C18: 21,949 14,17- Octadecadienoic acid C18: 22,044 Stearate acid C18: C18H36O2 3,85 23,129 11-Eicosenoic acid C19: C19H38O2 0,15 25,250 Nonadecanoic acid C19:0 C19H38O2 1,2 23,326 Eicosanoic acid C20:0 C20H40O2 0,54 5,9 C18H32O2 67,85 Qua kết thấy dầu hạt đào tiên chứa thành phần, chủ yếu 14,17- Octadecadienoic acid, Palmitic acid Hàm lượng acid béo không no chiếm nhiều tổng lượng acid có dầu hạt đào tiên, loại acid có lợi cho sức khỏe người Đây nguồn nguyên liệu tiềm để nghiên cứu phát triển dầu ăn Kết luận KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Sau thời gian thực đề tài thu kết sau: - Đã mơ tả hình thái thực vật đào tiên đặc điểm vi phẫu thịt - Đã định tính xác định số nhóm chất có thịt đào tiên là: tanin phenol, flavonoid, iridoid, glycosid tim mẫu thịt tươi Trong mẫu thịt khơ định tính sơ được: acid hữu cơ, acid amin, saponin, chất béo, polysacarid, tanin, saponin, flavonoid, đường khử - Đây nghiên cứu bước đầu góp phần bước hồn thành chun luận tiêu chuẩn sở cho dược liệu thịt đào tiên theo tiêu chuẩn DĐVN V Trong đó, độ ẩm khơng q 15% với thịt khô 85% với thịt tươi; tro tồn phần khơng q 8%; tro khơng tan acid không 2% Định lượng đường tổng theo phương pháp: phương pháp Bertrand phương pháp đo quang thu kết 6,72%, 7,55% với thịt tươi 35,01%, 36,23% với thịt khô - Nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên xác định số acid, peroxid, iod, xà phịng hóa là: 4,02; 9,6; 92; 188,5 Định lượng dầu thơ tính dầu chiếm 16,44% Định tính chất có dầu phương pháp GC- MS thu chất là: Palmitoleic acid, Palmitic acid, 12,15- Octadecadienoic acid, 14,17- Octadecadienoic acid, Stearate acid, 11Eicosenoic acid, Eicosanoic acid, Nonadecanoic acid Kiến nghị Do thời gian có hạn, đề tài xây dựng tiêu chuẩn sở với mẫu trồng Lạng Sơn Do đó, cần tiến hành nghiên cứu cỡ mẫu nhiều để việc kết luận tiêu mang tính đại diện cho dược liệu thịt đào tiên - Đề xuất xây dựng tiêu định lượng thành phần chính, đặc trưng dược liệu thịt đào tiên phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao góp phần đ n h g i c h í n h x c h m l ợ n g h ó a c h ấ t - Đề xuất xác định tỉ lệ tạp chất dược liệu, tỉ lệ vụn nát xác định hàm lượng kim loại nặng cho dược liệu thịt đào tiên - Đề xuất tiếp tục nghiên cứu hoàn thiện xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên để bổ sung chuyên luận dược liệu Đào tiên Dược điển Việt Nam Tài liệu tham khảo Tiếng việt [1] Bộ môn dược liệu (2010), Thực tập dược liệu, Trường đại học dược Hà Nội [2] Bộ Y tế (2007), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr68-79 [3] Bộ Y tế (2007), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr857-862 [4] Bộ môn thực vật, Trường ĐH Dược Hà Nội (2005), Thực vật học, Nhà xuất Y học [5] Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam- tập III, Nhà xuất trẻ, tr83-85 [6] Võ Văn Chi (1997), Cây cỏ thường thấy Việt Nam- tập I, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, tr136 [7] Viện Dược liệu (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam- tập I, Nhà xuất khoa học kĩ thuật, tr209, 305, 747- 748 [8] Nguyễn Văn Thành, Nguyễn Hoàng Thanh Đinh Hoa Lĩnh (2004),"Luận văn Nghiên cứu số thuốc, thuốc dân gian cộng đồng dân tộc thiểu số buôn Đrăng Phôk –vùng lõi vườn quốc gia Yokđôn –huyện Buôn Đôn –tỉnh Đaklak" [9] Đỗ Tất Lợi (1962), Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr897 [10] Nguyễn Quốc Tuấn (2012), Xây dựng phương pháp định tính, định lượng flavonoid nụ vối, Luận văn thạc sĩ- Trường ĐH Khoa học tự nhiên [11] Nguyễn Thị Huế (2017), Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu Tam thất hoang (Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M Feng) Trồng SapaLào Cai, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học- Khoa Y Dược, ĐHQGHN [12] Trần Hà Ngân (2010), Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học Đào tiên, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học- Trường ĐH Dược Hà Nội [13] Dược điển Việt Nam (2010), Tập IV [14] Nguyễn Thế Cường (2011), Nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học thịt đào tiên (Crescentia cujete Linn.), họ Núc Nác (Bignoniaceae), Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học- Trường ĐH Dược Hà Nội [15] Trần Bích Lam, Lê Xuân Hải, Nguyễn Thị Triều My, Lâm Quốc Trình (2011), “Nghiên cứu q trình thu nhận dầu thơ phương pháp ép trích ly từ hạt cao su Nam Bộ”, Science and Technology Development, Vol 14, No.K3- 2011 Tiếng anh [16] Tetsuo Kaneko, Kazuhiro Ohtani, Ryoji Kasai, Kazuo Yamasaki and Nguyen Minh Duc (1997), “Iridoid and Iridoid Glucosides from fruits of Crescentia cujete”, Phytochemistry, 46, pp.907-910 [17] Tetsuo Kaneko, Kazuhiro Ohtani, Ryoji Kasai, Kazuo Yamasaki and Nguyen Minh Duc (1998), “n-alkyl glycosides and p-hydoxybenzoyloxy glucose from fruit of Crescentia cujete”, Phytochemistry, 47, pp.259-263 [18] Michael, 2004; Burkill, 1985; Plant Database, 2004 [19] Khandaker Rayhan Mahbub, Md Mojibul Hoq, Monzur Morshed Ahmed, Animesh Sarker (2011), “In vitro Antibacterial activity of Crescentia cujete and Moringa oleifera” [20] Julia F Morton, “The Calabash (Crescentia cujete) in Folk Medicine” [21] Linda B Nielsen, Riskiono Slamet, Dieter Wege (2009), “The synthesis of 3-hydroxymethylfuro[3,2-b] naphtho [2,3-furan-5,10-dione, a novel metabolite isolated from Crescentia cujete” [22] Sinval Garcia Pereira1 & Sandra Alves de Araújo1 & Giselle Maria Skelding Pinheiro Guilhon & Lourivaldo Silva Santos &Livio Martins Costa Junior (2016), “In vitro acaricidal activity of Crescentia cujete L fruit pulp against Rhipicephalus microplus” [23] / Ejelonu BC, Lasisi AA,Olaremu AG and Ejelonu OC/ African Journal of Biotechnology Vol 10(84), pp 19631-19636, 26 December, 2011 / DOI: 10.5897/AJB11.1518 [24] B A Smith, F G Dollear,“Oil from calabash seed, Crescentia cujete ”, Journal of the American Oil Chemists' Society 24(2):52-54 February 1947 / DOI: 10.1007/BF02642127 [25] C Alay-ay, A Hermoso, R Li, M Quinto, P Santos, I Tan, M Villa, R Cadiang, M Corpuz, “ ”, Planta Med 2016; 82 - PB2 / DOI: 10.1055/s-0036-1578650 [26] Syaefudin, D Nitami, M D M Utari , M Rafi and U Hasanah, “Antioxidant and Antibacterial Activities of Several Fractions from Crescentia cujete L Stem Bark Extract”, Earth and Environmental Science 197 (2018) [27] Sri Rahmaningsih, Arief Prajitno, Aulanni’am Aulanni’am, “Maftuch, Bioactive Compounds From Majapahit Fruit (Crescentia cujete) As a Potential Natural Antibacterial”, International Journal of ChemTech Research, Vol.10 No.3, pp 90-99 [28] U Hasanah, HT Widhiastuti and Syaefudin, “Potency of Ethanol Extract from Berenuk (Cre [29] Leopold, B (1962), “Spectrophotometric Determination of Sugars Using p-Aminobenzoic Acid”, Analytical Chemistry, 34(1), 170-171 [30] Mesoamerica, A.F (2008), The Mysterious Tree, Biologist mirtha cano [31] The stephen H.B of Sciences, U.S Department of Agricultural, Cooperative Extension Service, University of Florida, IFAS, Florida A.& M [32] G Bertrand, N Gabriel Le dosage des sucres reducteurs Bul Soc Chim Paris, 35: 1285-129 [33] GOST 31665-2012 Animal and vegetable fats and oils- Preparation of methyl esters of fa [34] The United Nations Conferencen on trade and Development (2005), @ Market Brief in the European Union for selected natural ingredients from native species Crescentia cujete, United Nation [35] David W Nellis (1997), “Poisonous plants and animal of Florida and the Caribbean”, Pineapple Press, Inc., pp [36] Ogbuagu, M.N (2008), “The nutritive and Anti-Nutritive Compositions of Calabash (Cresscentia cujete) Fruit [37] Frantisek S (1998), “The Natural Guide to Medicinal Herb Plants”, Tiger book Intenrational Plc, Twickers 8:20 [38] Finar IL (2000), “Stereochemistry and the Chemistry of Natural Products”, N V Organic Chemistry vol 5th Edn pp.603, 811 [39] Turner (1965), “A screening Methods in Pharmacology”, Academic Press, New York and Lond Internet [40] The Plant List Crescentia > [Accessed: 23/3/2019] [41] Wikipedia Crescentia >[Accessed: 2/4/2019] [42] Plant for a future Crescentia cujete- L > [Accessed: 2/4/2019] [43] United States Department of Agriculture Crescentia cujete L >[Accessed: 2/4/2019] @ [44] Philippine medicinal plant Cujete [Accessed: 2/4/2019] [45] Vĩnh Sinh Ngọc Hà, 2015 Đào Tiên [Ngày truy cập 16/5/2019] ... đầu xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu thịt đào tiên" với mục tiêu sau: - Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu với số tiêu chí chung Dược điển Việt Nam IV - Bước đầu nghiên cứu dầu từ hạt đào tiên CHƯƠNG... glucoza Bảng 6: Độ ẩm bột thịt đào tiên Hình 6: Ruột tươi Đào tiên Bảng 7: Độ ẩm thịt đào tiên tươi Hình 7: Ruột khơ đào tiên Bảng 8: Tỷ l? ?? tro toàn phần dược liệu đào tiên Hình 8: Vi phẫu thịt. .. gọi Calabacero (Tây Ban Nha), Cujeté (Brazil), Totumo (Panama,Colombia,VenezuelavàPeru),Tutumo(Bolivia),Taparo (Venezuela), Mate (Ecuador), Huinga (Peru), Pate (Peru), Cuyabra (Colombia), Morro