Đang tải... (xem toàn văn)
Danh s¸ch ký nhËn lµm thªm ngoµi giê TẠP CHÍ Y häc viÖt nam tẬP 500 th¸ng 3 sè 2 2021 83 chỉ số GI ở giai đoạn thai 21 23 tuần (3 tháng giữa) tăng 66,3 ± 0,17%, giai đoạn thai 34 36 tuần (3 tháng cuối[.]
TẠP CHÍ Y häc viƯt nam tẬP 500 - th¸ng - sè - 2021 số GI giai đoạn thai 21-23 tuần (3 tháng giữa) tăng 66,3 ± 0,17%, giai đoạn thai 34-36 tuần (3 tháng cuối) tăng 74,5 ± 0,18% so với mốc ban đầu [7] Đối với số mảng bám, nghiên cứu số mảng bám tăng dần theo tuổi thai, khác biệt nhóm có ý nghĩa thống kê p10 MB với việc làm giàu trình tự đích (TSE) để khuếch đại SNP đặc hiệu cho liên kết với gen HBB Phương pháp cho phép giảm thiểu tượng ADO AP bệnh beta-thalassemia, PGT-M PGT-A thực đồng thời lần giải trình tự II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Sinh thiết phôi rửa chứa ống PCR 0,2 ml vô trùng thực phản ứng WGA kit DOPlify (PerkinElmer Inc Waltham, MA), tuân theo quy trình TSE mà hãng khuyến cáo Các SNP đặc hiệu sử dụng SNP nằm phạm vi 300kb nằm đầu gen HBB đáp ứng yêu cầu tần số dị hợp tử > 0,3 Sau trình khuếch đại WGA ban đầu, phản ứng PCR làm giàu thứ cấp thực cách sử dụng sản phẩm WGA làm DNA khuôn mẫu với mồi đặc hiệu khuếch đại vùng HBB SNP quan tâm Sản phẩm PCR bổ sung sản phẩm WGA trước chuẩn bị thư viện kit Nextera XT DNA (Illumina, Inc., San Diego, CA USA) (tỷ lệ sản phẩm WGA: sản phẩm PCR = 10: 1) Giải trình tự thực hệ thống máy Miseq (Illumina)-1 chiều-76 chu kỳ so sánh với hệ gen tham chiếu Hg19, sử dụng phần mềm Miseq Reporter Dữ liệu giải trình tự phân tích phần mềm Nexus Copy Number (BioDiscovery, Los Angeles, CA USA) PGFind cho phát bất thường số lượng bất thường cấu trúc NST Miseq Reporter cho phân tích đột biến phân tích di truyền liên kết sử dụng SNP III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Hai trường hợp sử dụng quy trình thiết kế để sàng lọc trước chuyển phôi phôi sinh thiết thực xét nghiệm cặp vợ chồng thứ phôi thực cặp vợ chồng thứ Sau trình WGA, 1/12 mẫu có sản phẩm WGA khơng đạt tiêu chuẩn khơng tiếp tục thực xét nghiệm (hiệu suất khuếch đại 91,7%) Trong trường hợp, phôi chuyển lựa chọn dựa kết sàng lọc PGT-A kết hợp với PGT-M Thêm vào đó, cặp vợ chồng khác thực IVF sàng lọc phôi theo quy trình nêu Tại thời điểm thực viết này, chờ thông tin phôi chuyển kết lâm sàng q trình chuyển phơi từ trung tâm IVF đối tác 85 vietnam medical journal n02 - MARCH - 2021 Trong trường hợp thứ nhất, phôi sinh thiết giai đoạn phôi nang, phơi WGA thành cơng phân tích đột biến gen HBB Đối với trường hợp này, người bố mang đột biến CD17 dị hợp tử người mẹ mang đột biến -28M dị hợp tử gen HBB Trong tất trường hợp, 12 SNP khác xung quanh gen HBB sử dụng để phân tích di truyền liên kết kiểm soát nhiễm chéo từ nguồn DNA ngoại sinh Kết PGT-M cho thấy phôi mang đột biến dị hợp tử kép (Phôi A B), phôi mang đột biến gen HBB bố (C E), phôi mang đột biến mẹ (F) phôi không mang đột biến phôi thực sàng lọc PGT-A, kết cho thấy phôi lưỡng bội (A, D, F G) phôi lệch bội (B, C E) Phôi F chọn để chuyển ghi nhận kết mang thai đơn Kết chọc ối cho thấy thai phụ mang thai bé gái, có kiểu gen HBB phù hợp với kết PGT-M (trisomy 9) Phôi B lựa chọn cho chuyển phôi, xét nghiệm chọc ối thực bệnh nhân mang thai xác nhận thai giới tính nữ lưỡng bội mang đột biến dạng dị hợp tử gen HBB tương đồng với kết PGT-M IV BÀN LUẬN Trong trường hợp thứ hai, phôi thực sinh thiết phơi có kết WGA đạt tiêu chuẩn để tiếp tục thực xét nghiệm Trong trường hợp này, người bố mang đột biến CD26 dị hợp tử, người mẹ mang đột biến CD17 dạng dị hợp tử 19 SNP nằm hai phía gen HBB sử dụng cho xác nhận kết di truyền liên kết kiếm soát nhiễm chéo Kết xét nghiệm PGT-M phôi mang đột biến dạng dị hợp tử kép (A), phôi mang đột biến CD17 dạng dị hợp tử (C, D) phôi mang đột biến CD26 dạng dị hợp tử (B) Kết PGT-A phôi lưỡng bội (A, B, D) phôi mang bất thường lệch bội 86 Trong nghiên cứu này, chúng tơi báo cáo quy trình kết hợp PGT-M cho bệnh beta thalassemia PGT-A xét nghiệm Hai bệnh nhân IVF thực quy trình có kết trẻ sinh sống có NST lưỡng bội khơng mắc bệnh beta thalassemia Trong báo cáo poster Hội nghị PGD-IS (Bangkok, Thailand), Warren cộng so sánh hiệu quy trình TSE so với quy trình PCR truyền thống kết hợp với bổ sung mồi vào phản ứng WGA Khác với phương pháp PCR truyền thống, quy trình TSE kết hợp với phân tích marker STR sàng lọc đột biến gen BRCA mà không ghi nhận tượng ADO PA Tổng cộng, 11 phơi thực với quy trình xét nghiệm nêu Trong 10/11 phơi (90.9%) sàng lọc đồng thời đột biến gen gây bệnh beta thalassemia bất thường số lượng 24 NST Kết sàng lọc đột biến gen gây bệnh beta thalassemia cho thấy phôi mang đột biến dị hợp tử kép, phôi mang đột biến dị hợp tử phơi khơng mang đột biến Trong đó, kết sàng lọc bất thường số lượng 24 NST báo cáo phôi lưỡng bội phôi lệch bội, có phơi thể khảm (+4p) Beta-thalassemia ảnh hưởng đến lượng lớn bệnh nhân Châu Á, việc có xét nghiệm đáng tin cậy, hiệu chi phí cho TẠP CHÍ Y häc viƯt nam tẬP 500 - th¸ng - sè - 2021 phép kết hợp PGT-M PGT-A xét nghiệm bước tiến thực cho khu vực châu Á Không phụ thuộc vào nguyên nhân làm IVF, ln có tỷ lệ định phôi mang bất thường NST Trong bệnh nhân có nguy mắc bệnh beta thalassemia thường có khả sinh sản bình thường, có tỷ lệ định phôi thất bại làm tổ ngun nhân lệch bội Chính vậy, việc kết hợp hai xét nghiệm PGT-M PGT-A quy trình giúp lựa chọn phơi lưỡng bội khơng mang gen gây bệnh thalassemia, quy trình nên áp dụng với bệnh đơn gen khác V KẾT LUẬN Ở chúng tơi báo cáo q trình phát triển ứng dụng lâm sàng PGT-M cho HBB kết hợp với PGT-A cho tổng thể dị bội nhiễm sắc thể từ 11 bệnh nhân với phát chi tiết phịng thí nghiệm với trường hợp hồn thành chuyển phơi TÀI LIỆU THAM KHẢO Agilent-OnePGT Library Prep for Illumina Sequencers https:// www.agilent.com/ cs/library/ usermanuals/ public/ G9425-90000 pdf Accessed Nov 2020 De Rycke M, Goossens V, Kokkali G, Meijer- Hoogeveen M, Coonen E, Moutou C.: “EHSRE PGD consortium data collection XIV-XV: cycles from January 2011 to December 2012 with pregnancy follow-up to October 2013” Hum Reprod 2017; 32(10):1974–94 Dreesen J, Destouni A, Kourlaba G, Degn B, Mette WC, Carvalho F, et al.: “Evaluation of PCR-based preimplantation genetic diagnosis applied to monogenic diseases: a collaborative ESHRE PGD consortium study” Eur J Hum Genet 2014; 22(8):1012–8 Findlay I, Ray P, Quirke P, Rutherford A, Lilford R.: “Allelic dropout and preferential amplification in single cells and human blastomeres: implications for preimplantation diagnosis of sex and cystic fibrosis” Hum Reprod 1995;10(6):1609–18 Forman EJ, Hong KH, Ferry KM, Tao X, Taylor D, Levy B, Treff NR, Scott Jr RT.: ”In vitro fertilization with single euploid blastocyst transfer: a randomized controlled trial” Fertil Steril 2013; 100(1):100–7 Franasiak JM, Forman EJ, Hong KH, Werner MD, Upham KM, Treff NR, et al.: ”The nature of aneuploidy with increasing age of the female partner: a review of 15,169 consecutive trophectoderm biopsies evaluated with comprehensive chromosomal screening” Fertil Steril 2014;101(3):656–63 Galanello R, Origa R.: “Beta-thalassemia” Orphanet J Rare Dis 2010;5:11 Và nhiều tài liệu tiếng nước khác TÁC DỤNG GIẢM ĐAU VÀ CẢI THIỆN CHỨC NĂNG VẬN ĐỘNG CỘT SỐNG THẮT LƯNG CỦA THỦY CHÂM THUỐC GOLVASKA TRÊN BỆNH ĐAU THẦN KINH HÔNG TO MẠN TÍNH Lê Thị Hòe**, Nguyễn Thanh Thủy*, Đặng Kim Thanh* TÓM TẮT 23 Mục tiêu: Đánh giá tác dụng giảm đau phục hồi chức cột sống thủy châm thuốc Golvaska bệnh nhân đau thần kinh hơng to thối hóa cột sống khảo sát tác dụng không mong muốn phương pháp Đối tượng phương pháp: Nghiên cứu can thiệp, so sánh kết trước sau điều trị, có đối chứng 60 bệnh nhân chẩn đốn đau thần kinh hơng to thối hóa cột sống Kết quả: Nhóm sử dụng Thủy châm Golvaska kết hợp điện châm Độc hoạt tang kí sinh thang có điểm VAS trung bình giảm 3,57 ± 1,54 điểm, nhiều nhóm sử dụng điện châm Độc hoạt tang kí sinh thang sau *Trường Đại học Y Hà Nội **Trung ương Hội đơng y Việt Nam Chịu trách nhiệm chính: Nguyễn Thanh Thủy Email: drthuy.yhct@hmu.edu.vn Ngày nhận bài: 5.01.2021 Ngày phản biện khoa học: 2.3.2021 Ngày duyệt bài: 15.3.2021 15 ngày điều trị (p > 0,05) Nhóm cải thiện tầm vận động cột sống thắt lưng tốt nhóm (p < 0,01) Kết luận: Thủy châm thuốc Golvaska có tác dụng giảm đau cải thiện chức cột sống thắt lưng bệnh nhân đau thần kinh hông to mạn tính chưa thấy tác dụng khơng mong muốn phương pháp Từ khóa: Đau thần kinh hơng to, thủy châm, Golvaska SUMMARY THE EFFECTS OF HYDRO – ACUPUNCTURE GOLVASKA ON RELIEVING PAIN AND IMPROVING LUMBAR SPINE MOVEMENT IN PATIENTS WITH CHRONIC SCIATICA Objective: To evaluate the effects of hydro – acupuncture Golvaska on relieving pain and improving lumber spine movement in patients with chronic sciatica and side effects of the method on clinic and paraclinic Methods: A prospective study, comparing before and after treatment, controlled on 60 patients diagnosed with chronic sciatica, type of degenerative lumbar spine according to traditional medicine 87 ... aneuploidy (PGT- A) Embryo biopsy Aneuploidy Beta thalassemia 84 I GIỚI THIỆU Xét nghiệm di truyền trước chuyển phôi cho bệnh di truyền đơn gen (PGT- M) thực lần vào năm 1990 (Handyside AH, 1990) Xét nghiệm. .. luận: Ở chúng tơi báo cáo ứng dụng quy trình xét nghiệm cho 11 cặp bệnh nhân, đưa kết chi tiết trường hợp thực chuyển phôi thực xét nghiệm chẩn đốn trước sinh Từ khóa: Xét nghiệm di truyền trước chuyển. .. khóa: Xét nghiệm di truyền trước chuyển phôi cho bệnh đơn gen (PGT- M), Xét nghiệm di truyền trước chuyển phôi (PGT- A), Sinh thiết phôi, Thể dị bội, Beta thalassemia SUMMARY DEVELOPMENT AND CLINICAL