Độ ổn định của khả năng chống oxy hóa của sữa mẹ sau khi đông lạnh và thanh trùng

ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA KHẢ NĂNG CHỐNG OXY HÓA CỦA SỮA MẸ SAU KHI ĐÔNG LẠNH VÀ THANH TRÙNG Thanh trùng và đông lạnh là các quy trình được sử dụng trong ngân hàng sữa mẹ có thể ảnh hưởng đến một số đặc tính din.

ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA KHẢ NĂNG CHỐNG OXY HÓA CỦA SỮA MẸ SAU KHI ĐÔNG LẠNH VÀ THANH TRÙNG Thanh trùng đơng lạnh quy trình sử dụng ngân hàng sữa mẹ ảnh hưởng đến số đặc tính dinh dưỡng sinh học sữa mẹ Mục đích nghiên cứu đánh giá tác động bước chế biến ngân hàng sữa mẹ áp dụng hàm lượng hợp chất phenolic tổng số khả chống oxy hóa ống nghiệm Nghiên cứu thực nghiệm thực hiện, 40 mL sữa mẹ thu thập từ bà mẹ đăng ký Ngân hàng Sữa mẹ Ouro Preto, bang Minas Gerais Các mẫu đồng để tạo thành hồ bơi Sữa mẹ chia thành bốn phần đặc trưng cho phương pháp điều trị: 1) sau vắt sữa; 2) trùng sau vắt sữa; 3) ngày sau cấp đông -8,5 (± 2,8°C) trùng; 4) 14 ngày sau cấp đông -8,5 (± 2,8°C) trùng Xác định hàm lượng tổng hợp chất phenolic khả chống oxy hóa đánh giá cách sử dụng 2,2-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6sulfonic acid) 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl nhặt gốc tự Các kết biểu thị giá trị trung bình độ lệch chuẩn sáu lần lặp lại Có mối tương quan tích cực phương pháp đánh giá việc giảm tổng hàm lượng phenolic tổng khả chống oxy hóa với q trình trùng chậm theo thời gian đơng lạnh Có tác động tiêu cực q trình trùng đơng lạnh tổng hàm lượng phenolic tổng khả chống oxy hóa, mức giảm đáng kể quan sát thấy vòng ngày kể từ ngày bảo quản Các kết biểu thị giá trị trung bình độ lệch chuẩn sáu lần lặp lại Giới thiệu Sữa mẹ (HM) bao gồm tất chất dinh dưỡng cần thiết cho tăng trưởng phát triển trẻ sơ sinh, bao gồm carbohydrate, axit béo thiết yếu, protein, vitamin khoáng chất1 cung cấp khả bảo vệ miễn dịch khỏi thành phần hòa tan lysozyme, lactoferrin, IgA tiết globulin miễn dịch khác, thành phần tế bào, bao gồm đại thực bào, bạch cầu trung tính tế bào lympho T B Ngoài ra, HM chứa nhiều hợp chất hoạt tính sinh học có đặc tính chống oxy hóa giúp bảo vệ chống nhiễm trùng giảm mức độ nghiêm trọng chúng Trong số đó, bật enzym catalase, superoxide dismutase glutathione peroxidase, vitamin E C, retinol β-caroten ,3 Các hợp chất có khả chống oxy hóa có HM có liên quan đến trẻ sơ sinh tình trạng căng thẳng oxy hóa cao, ví dụ, thời điểm sinh nở, có chuyển đổi từ mơi trường có nồng độ oxy thấp sang mơi trường có nồng độ coi bình thường4 Những lợi chí cịn quan trọng trẻ sơ sinh non tháng, chúng có hệ thống phịng thủ chống oxy hóa chưa trưởng thành, phát triển q trình mang thai.5 Ngồi ra, họ thường tiếp xúc với stress oxy hóa nhiễm trùng, thở máy, dinh dưỡng qua đường tĩnh mạch truyền máu Một số nghiên cứu khả chống oxy hóa HM vượt trội so với sữa công thức dành cho trẻ sơ sinh sữa bò.2 ,6 ,7 Việc sản xuất gốc tự gây stress oxy hóa dẫn đến bệnh trẻ sơ sinh giai đoạn trưởng thành5 Trong trường hợp bà mẹ cho bú, HM nên thu thập thông qua hiến tặng xử lý ngân hàng sữa mẹ (HMB) Tuy nhiên, để loại sữa sử dụng, phải trải qua số quy trình đảm bảo chất lượng vi sinh dinh dưỡng, để có lợi cho trẻ sơ sinh Các điểm quan trọng để trì khả chống oxy hóa HM bao gồm xử lý nhiệt bảo quản Thanh trùng phương pháp xử lý nhiệt sử dụng HMB để đảm bảo chất lượng vi sinh sữa, nhiên, ảnh hưởng đến số đặc tính dinh dưỡng sinh học HM9 Liên quan đến trùng, Silvestre et al quan sát thấy việc xử lý nhiệt HM ngụ ý làm giảm tổng hoạt tính chống oxy hóa thành phần chống oxy hóa quan trọng nó, chẳng hạn glutathione glutathione peroxidase Họ xác minh tổn thất mức độ thấp lớn hơn, tùy thuộc vào loại quy trình áp dụng Về bảo quản, nghiên cứu chưa có kết luận ,5 ,6 Theo Akdag et al.5 , tổng khả chống oxy hóa HM non tháng bảo quản -80 C tháng Tuy nhiên, theo Sari et al.4 , mẫu đông lạnh sữa non, sữa chuyển tiếp sữa trưởng thành -80°C hai tháng khơng bảo tồn khả chống oxy hóa Theo Hanna et al.6 , khả chống oxy hóa HM giảm theo thời gian bảo quản bảo quản lạnh tốt đơng lạnh, đơng lạnh 48 gây tổn thất lớn so với để lạnh bảy ngày Khơng có nghiên cứu tài liệu cho thấy tác động bước xử lý HMB áp dụng hàm lượng hợp chất có hoạt tính sinh học khả chống oxy hóa HM Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) quy định việc xử lý HM cách cung cấp quy trình tiêu chuẩn hóa để lựa chọn, thu thập, bảo quản nước, vận chuyển, bảo quản, xử lý nhiệt (rã đông, trùng làm mát), kiểm soát chất lượng, phân phối quản lý Và việc trùng phải diễn thời gian tối đa 15 ngày sau lần thu hái đầu tiên10 Với tầm quan trọng biết hợp chất hoạt tính sinh học khả chống oxy hóa phát triển sức khỏe trẻ em ,4 ,5 ,6 tài liệu hạn chế đánh giá điều kiện thực tế giai đoạn chế biến HM Mạng lưới Ngân hàng Sữa mẹ Brazil, điều quan trọng phải tiến hành nghiên cứu để đánh giá tính ổn định khả chống oxy hóa HM sau quy trình thơng qua Vì vậy, nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng thời gian cấp đông trùng HM đến hàm lượng hợp chất phenolic tổng số khả chống oxi hóa in vitro Phương pháp luận Đây nghiên cứu thử nghiệm thực phòng thí nghiệm Trường Dinh dưỡng thuộc Đại học Liên bang Ouro Preto với hỗ trợ HMB Santa Casa da Misericórdia Ouro Preto, bang Minas Gerais Các mẫu lấy từ nhóm HM từ nhà tài trợ tình nguyện đăng ký dịch vụ Là tiêu chí loại trừ, chúng tơi sử dụng độ tuổi 20 Ủy ban Đạo đức Nghiên cứu Đại học Liên bang Ouro Preto phê duyệt nghiên cứu Dữ liệu từ người hiến tặng thu thập thông qua bảng câu hỏi để mô tả đặc điểm bà mẹ tuổi tác, nghề nghiệp, trình độ học vấn, thu nhập gia đình, loại nhà ở, chương trình sức khỏe, số lần sinh, số khối thể trước mang thai (BMI), tăng cân mang thai, giai đoạn cho bú liệu trẻ sơ sinh, chẳng hạn tuổi, giới tính, tuổi thai, cân nặng sinh thực hành nuôi sữa mẹ Liên quan đến mẫu thu thập từ người hiến tặng, 40 mL HM, chiết xuất cách vắt sữa tình nguyện viên thực hiện, tuân theo quy trình HMB khuyến nghị Các mẫu vận chuyển dây chuyền lạnh không sáu Sữa người hiến tặng chia thành bốn phần 10 mL, tiếp nhận theo quy trình khác nhau, đặc trưng cho phương pháp điều trị nghiên cứu, sau: 1) sau vắt sữa; 2) Thanh trùng sau vắt sữa; 3) ngày sau cấp đông -8,5 (± 2,8°C) trùng; 4) 14 ngày sau cấp đông -8,5 (± 2,8°C) trùng Đối với lần điều trị, mẫu từ nhà tài trợ đồng để tạo thành nhóm Việc xử lý nhiệt xác minh tính hiệu tiến hành theo tiêu chuẩn Brasil.8 Các mẫu rã đông bể nước 40°C trùng 62,5°C 30 phút sau thời gian gia nhiệt trước Ngay sau xử lý nhiệt, HM làm lạnh xuống 5°C Để đánh giá hiệu trình xử lý nhiệt mà HM phải chịu, sử dụng phương pháp kiểm sốt chất lượng vi sinh mơ tả Brasil , nhằm mục đích phát tổng số vi sinh vật coliform Do đó, sau trùng, bốn phần dịch chiết mL HM trùng cấy vào 10 mL môi trường mật màu xanh sáng 50 g/L (5% w/v) với ống Durham bên Sau đó, mẫu ủ 36 ± 1°C đánh giá sau 48 độ đục diện khí bên ống Durham, đặc trưng cho kết dương tính đó, việc trùng khơng hiệu quả.10 Hàm lượng phenolic tổng số xác định theo phương pháp Folin-Ciocalteu thích nghi11 HM pha lỗng theo tỷ lệ 3:1 với dung dịch đệm phốt phát pH 7,4 0,5 mL phần dịch chiết thêm vào 2,5 mL thuốc thử Folin-Ciocalteu (10%) mL o dung dịch natri cacbonat (4%) Hỗn hợp xoáy giây giữ nhiệt độ phòng 90 phút bóng tối Sau đó, ly tâm với tốc độ 8000 vòng / phút 10 phút nghỉ ngơi lần 20 phút Việc đọc độ hấp thụ thực máy đo quang phổ bước sóng 750nm Dung dịch axit gallic (10 đến 80 μg/mL) sử dụng để xác định đường chuẩn kết biểu thị đương lượng axit gallic (GAE mg/L) Để đánh giá tổng khả chống oxy hóa, phương pháp loại bỏ gốc tự 2,2azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic) (DPPH) 2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl (ABTS) sử dụng Khả nhặt rác DPPH đo phương pháp Brand-Williams cộng đề xuất 12 với sửa đổi đề xuất Zarban et al.13 , 50 μL mẫu HM thêm mL DPPH dung dịch etanol (0,06 mM) Sau đồng hóa, hỗn hợp để yên 30 phút nồi cách thủy 37°C 0,5 mL chloroform thêm vào ly tâm tốc độ 8000 vòng / phút phút Độ hấp thụ dung dịch xác định máy quang phổ bước sóng 517 nm Dung dịch DPPH etanol (0,06 mM) sử dụng làm chất đối chứng tỷ lệ phần trăm hoạt động nhặt gốc DPPH tính tốn theo phương trình sau: (1) Khả chống oxy hóa tương đương với chất chống oxy hóa tổng hợp Trolox ước tính theo quy trình đề xuất Turoli et al 14, với số sửa đổi Gốc ABTS điều chế từ phản ứng mL dung dịch gốc ABTS (7 mM) với 88μL kali persunfat (40 mM), để hỗn hợp nhiệt độ phịng 16 khơng có ánh sáng Sau đó, dung dịch ABTS pha lỗng với etanol để thu độ hấp thụ 0,70 ± 0,05 734 nm Các mẫu HM pha loãng với dung dịch đệm photphat pH 7,4 nồng độ sau: 1000mL/L, 200mL/L 100mL/L Các phần dịch 20 μL độ pha loãng thêm vào mL dung dịch ABTS sau đồng hóa, để yên 10 phút bóng tối Sau đó, chúng ly tâm với tốc độ 8000 vòng / phút phút Độ hấp thụ đọc máy đo quang phổ bước sóng 734 nm Khả chống oxy hóa tính đường chuẩn Trolox (100, 500, 1000, Các kết biểu thị giá trị trung bình độ lệch chuẩn sáu lần lặp lại Các thử nghiệm Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk áp dụng để kiểm tra tính quy phạm liệu Trong trường hợp phân phối bình thường, kết phân tích phân tích phương sai (ANOVA) Đối với phân tích có ý nghĩa (p≤0,05), thử nghiệm Tukey (p≤0,05) áp dụng để so sánh phương tiện Thử nghiệm tương quan Pearson (p≤0,05) thực để đo lường mối tương quan tổng hàm lượng hợp chất phenolic khả chống oxy hóa phương pháp khác sử dụng Các phân tích thống kê thực phần mềm Gói thống kê cho khoa học xã hội (SPSS - phiên 18.0) Kết Các đặc điểm nhà tài trợ trẻ sơ sinh họ liệt kê Bảng Trong số người tham gia, tất sống đô thị Ouro Preto, bang Minas Gerais, có mối quan hệ việc làm sản xuất sữa trưởng thành Trong số bà mẹ, 62,5% 30 tuổi 37,5% bị thừa cân béo phì trước mang thai Về cân nặng sinh, có 62,5% trẻ sinh đủ cân nặng từ 3.000 - 4.000 g.15 Đối với quy trình trùng HM thực sau thời gian bảo quản khác nhau, 0,7 14 ngày bảo quản đông lạnh -8,5°C (± 2,8), sau quy trình thơng qua, người ta quan sát thấy khơng có tổng số coliforms Điều cho thấy hiệu trình trùng khía cạnh vi sinh HM Đối với tổng hợp chất phenolic ( Hình a), nhóm sữa mẹ thơ thu nồng độ cao hợp chất (574,18 ± 77,95 mg GAE/L) Có giảm đáng kể 30,29% (173,95 mg GAE/L) sau trùng HM vào ngày vắt sữa Về ảnh hưởng cấp đông -8,5°C (± 2,8), khơng có thay đổi đáng kể ngày Tuy nhiên, có giảm đáng kể 33,99% (136,05 mg GAE/L) sau 14 ngày bảo quản Đối với khả chống oxy hóa đánh giá phương pháp nhặt gốc tự DPPH ( Hình b), q trình trùng khơng can thiệp đáng kể Tuy nhiên, có giảm đáng kể 52,73% với thời gian cấp đông -8,5°C (± 2,8), sau 14 ngày bảo quản Cần lưu ý việc đông lạnh ngày làm giảm 45,99% khả chống oxy hóa HM, đánh giá phương pháp Có thể quan sát thấy khả chống oxy hóa giảm đáng kể 30,49% (1,93 mmol TE/L) phương pháp loại bỏ gốc tự ABTS quy trình trùng 41,81% (1,84 mmol TE/L) trình đơng lạnh sau ngày bảo quản ( Hình 1c ) Trong khoảng thời gian từ đến 14 ngày đơng lạnh, khả chống oxy hóa khơng bị ảnh hưởng đáng kể đánh giá phương pháp  Bảng Đặc điểm người hiến sữa mẹ họ, Ouro Preto, bang Minas Gerais, 2016 Mối tương quan phương pháp đánh giá, ABTS, DPPH tổng số hợp chất phenolic, kiểm tra Hệ số Pearson có ý nghĩa (p≤0,01), tất tham số tương quan trực tiếp ( Bảng )  Bảng Mối tương quan Pearson tổng hàm lượng phenolic phương pháp khác đánh giá tổng khả chống oxy hóa sữa mẹ   Hình Hàm lượng tổng hợp chất phenolic (a), khả chống oxy hóa cách loại bỏ gốc tự DPPH (b) loại bỏ gốc tự ABTS (c) giai đoạn khác quy trình chế biến sữa mẹ Thảo luận Các nghiên cứu đánh giá tính ổn định khả chống oxy hóa thiết lập nhiệt độ bảo quản HM -20°C6 ,14 ,16 ,17 , nhiên thực tế Mạng lưới HMB Brazil áp dụng 15 ngày để trùng sữa mẹ sau lần lấy suốt thời gian này, phần lớn thời gian sữa mẹ bảo quản tủ đông nơi người cho Theo Embrapa18 bên tủ lạnh gia dụng, tủ đông đạt nhiệt độ từ -1°C đến -4°C tủ đông gia dụng; nhiệt độ từ -14°C đến -17°C Chúng thay đổi tình trạng bảo tồn thao tác Một nghiên cứu thực Bertino et al 19 , điều kiện phịng thí nghiệm kiểm soát, cho thấy nhiệt độ bảo quản HM đặt °C, dao động có giá trị trung bình 6,88 °C ± 1,1 °C Phát nên xem xét trường hợp bảo quản HM, đặc biệt bảo quản nước, nhiệt độ dao động nhiều khơng khí nóng thường xun vào thao tác Nghiên cứu cho thấy mối tương quan thuận tổng hàm lượng hợp chất phenolic tổng khả chống oxy hóa, đo phương pháp nhặt gốc tự ABTS DPPH Mặc dù phân tích cho thấy diện hợp chất phenolic HM điều bị ảnh hưởng q trình trùng đơng lạnh 14 ngày Lý cộng sự.20 tìm thấy mức độ thấp ba loại axit phenolic, axit ferulic, p-hydroxybenzoic p-coumaric Điều đóng góp axit phenolic vào tổng khả chống oxy hóa bị hạn chế loại thực phẩm này, chủ yếu so sánh với hợp chất hoạt tính sinh học khác có mặt, chẳng hạn caroten Đối với ảnh hưởng trình trùng HM, khả chống oxy hóa giảm đánh giá phương pháp loại bỏ gốc tự ABTS, xác minh Silvestre et al.3 , người giảm 66,67% (0,16 mMeq axit uric) trình trùng chậm (63°C 30 phút) Người ta quan sát thấy giảm enzyme có khả chống oxy hóa cụ thể, chẳng hạn 46,12% glutathione (GSH) 62,71% hoạt tính glutathione peroxidase (GPx), bị biến tính xử lý nhiệt Theo phát này, Braga Palhares 21 quan sát thấy protein IgA giảm 64,7% với quy trình trùng Theo Lawrence Lawrence22 số thành phần có HM giảm bớt trùng Trong đó, nghiên cứu khác có kết khác việc đóng băng khác biệt chưa rõ ràng Điều quan sát thấy nghiên cứu Sari et al , việc đơng lạnh HM -80°C làm giảm 56,25% khả chống oxy hóa HM trưởng thành bảo quản -80°C hai tháng phương pháp nhặt gốc tự ABTS Mặt khác, Akdag et al.5 khơng tìm thấy khác biệt đáng kể tổng khả chống oxy hóa HM từ bà mẹ sinh non bảo quản -80°C tháng, đánh giá phương pháp thu hồi gốc tự ABTS Theo Turoli et al.14 , HM bảo quản -20°C tháng có nồng độ peroxide lipid cao Thực tế giải thích hoạt động lipoprotein lipase trình bảo quản, làm tăng nồng độ axit béo tự đó, peroxide lipid, sản phẩm q trình oxy hóa lipid Tuy nhiên, cần lưu ý hàm lượng hợp chất thối hóa lipid cao khơng tương ứng với việc giảm tổng khả chống oxy hóa HM đo phương pháp nhặt gốc tự ABTS Hơn nữa, Miranda et al.17 đánh giá hoạt động enzyme glutathione peroxidase (GPx) hàm lượng chất đánh dấu peroxid hóa lipid, malondialdehyd (MDA) HM xác minh hoạt động GPx giảm đáng kể sau làm mát 24 4°C đông lạnh 10 ngày nhiệt độ -20°C so với HM tươi Tuy nhiên, hàm lượng MDA tăng đáng kể HM làm lạnh Sự thay đổi kết tìm thấy nghiên cứu đánh giá tác động q trình đóng băng điều kiện nhiệt độ liên quan đến tốc độ đóng băng hình thành tinh thể, theo nghiên cứu sinh 23 , ảnh hưởng đơng lạnh đến chất lượng thực phẩm phát triển tinh thể đá dẫn đến tổn thương tế bào Chúng hình thành tỷ lệ nước trải qua thay đổi trạng thái điều xảy q trình đóng băng nhanh chậm Trong q trình đóng băng chậm, tinh thể băng hình thành lớn phát triển khoảng gian bào, phá vỡ thành tế bào liền kề Ngồi ra, tinh thể nước đá có áp suất nước thấp áp suất tế bào, khiến tế bào nước bị tổn thương vĩnh viễn nồng độ chất hòa tan cao biến dạng sụp đổ cấu trúc tế bào Trong q trình đóng băng nhanh, tinh thể băng nhỏ hình thành khơng gian tế bào nội bào, đồng thời không phát triển chênh lệch áp suất nước, với nước tối thiểu tế bào tổn thương vật lý 23 Khi cấp đông HM tủ đơng nội địa, khơng có cách để kiểm sốt tốc độ Như vậy, thiệt hại gây chưa hiểu rõ23 Sự hình thành tinh thể đá làm cố định lượng nước định thực phẩm ra, nồng độ số chất hịa tan có nước khơng đơng lạnh tăng lên24 Một hậu tức thời tăng tốc phản ứng hóa học, chẳng hạn q trình oxy hóa, thủy phân biến tính protein, phần nước khơng đóng băng này, chủ yếu khoảng từ -5°C đến -15°C 24 Điều xảy vì, phạm vi nhiệt độ này, tốc độ phản ứng không giảm nhiều mong đợi nhiệt độ thấp24 Như vậy, nồng độ chất tan tăng theo tốc độ phản ứng, có phản ứng oxi hóa, phản ứng thủy phân biến tính protein, cách tỷ lệ thuận21 Ngay nhiệt độ -18°C, tất nước bị đóng băng, enzym khơng bị vơ hiệu hóa hồn tồn chất hịa tan có pha nước đặc, điều làm thay đổi đặc tính pH, cường độ ion, oxy hóa khử, v.v Kết là, số phản ứng hóa học enzym tiếp tục diễn chậm q trình đơng lạnh Q trình tự oxy hóa lipid phản ứng hóa học quan trọng sản phẩm đơng lạnh, xảy chậm, -18°C 24 Hoạt động cịn lại enzyme làm vitamin C làm giảm sắc tố24 , nhiệt độ đóng băng thấp, hoạt động enzyme chậm, thời điểm xảy gián đoạn hoàn toàn25 Theo Bertino et al.19 , HM làm lạnh 4°C 96 trì hàm lượng ban đầu cuối sản phẩm peroxy hóa lipid, cho thấy khơng trải qua q trình oxy hóa lipid giai đoạn Nó trì khả chống oxy hóa hàm lượng lipase khơng thay đổi Kết khơng hình thành tinh thể đá đó, hợp chất chống oxy hóa bảo quản tốt Trong đó, chất lượng vi sinh HM không đánh giá thành phần giàu số chất dinh dưỡng nên trở thành môi trường nuôi cấy tuyệt vời cho loại vi sinh vật khác nhau.26 Sự khác biệt tìm thấy phương pháp sử dụng để đánh giá tổng khả chống oxy hóa, khả loại bỏ gốc tự ABTS DPPH giải thích phân hủy số hợp chất trình trùng đơng lạnh, có mức độ lực khác gốc cụ thể Theo thỏa thuận với Rufino et al.27 , người kiểm tra khả chống oxy hóa trái nhiệt đới, xác minh đa dạng chất chống oxy hóa có ma trận thực phẩm phức hợp mang lại phản ứng khác phương pháp xác định khả chống oxy hóa ống nghiệm Mặc dù q trình đơng lạnh trùng thúc đẩy việc giảm tổng hợp chất phenolic khả chống oxy hóa, Tổ chức Y tế Thế giới 15 khuyến nghị HMB lựa chọn tốt cung cấp sữa mẹ, chứa tất chất dinh dưỡng cần thiết cho trẻ sơ sinh 28 Hana et al.6 quan sát thấy khả chống oxy hóa HM cao đáng kể so với khả chống oxy hóa cơng thức khác biệt tồn độc lập với thời gian bảo quản nhiệt độ đánh giá (-20°C 4°C ngày) Một hạn chế nghiên cứu không khả thi tiến hành phân tích vào thời điểm khác lượng HM cần thiết cho liều lượng Kết luận Nghiên cứu chứng minh việc giảm tổng hàm lượng phenolic tổng khả chống oxy hóa với trình trùng chậm liên quan đến sữa mẹ thô Trong mô đông lạnh nước tối đa 14 ngày, có tác động tiêu cực việc đông lạnh -8,5°C (± 2,8) tổng khả chống oxy hóa mức giảm rõ rệt tìm thấy ngày bảo quản Do đó, đề xuất nghiên cứu để đánh giá tác động việc bảo quản đông lạnh sau cấp đông khoảng thời gian 24 để xác định hiệu ảnh hưởng hình thành tinh thể đá đến chất lượng HM  ... , mẫu đông lạnh sữa non, sữa chuyển tiếp sữa trưởng thành -80°C hai tháng khơng bảo tồn khả chống oxy hóa Theo Hanna et al.6 , khả chống oxy hóa HM giảm theo thời gian bảo quản bảo quản lạnh tốt... Bảng Mối tương quan Pearson tổng hàm lượng phenolic phương pháp khác đánh giá tổng khả chống oxy hóa sữa mẹ   Hình Hàm lượng tổng hợp chất phenolic (a), khả chống oxy hóa cách loại bỏ gốc tự DPPH... biến sữa mẹ Thảo luận Các nghiên cứu đánh giá tính ổn định khả chống oxy hóa thiết lập nhiệt độ bảo quản HM -20°C6 ,14 ,16 ,17 , nhiên thực tế Mạng lưới HMB Brazil áp dụng 15 ngày để trùng sữa mẹ