TỔNG QUAN
TỔNG QUAN VỀ CARVEDILOL
Hình 1.1 Công thức cấu tạo Carvedilol [18]
- Tên khoa học: (2RS)-1-(9H-Carbazol-4-yloxy)-3-[[2-(methoxyphenoxy) ethyl]amino] propan-2-ol [18]
Carvedilol có tính chất lý hóa như sau: [20]
Solubility: The substance is not soluble in water but freely dissolves in dimethyl sulfoxide (DMSO), is soluble in methylene chloride and methanol, has limited solubility in ethanol and isopropanol, and shows slight solubility in ethyl ether.
- Nhiệt độ nóng chảy: Điểm bắt đầu chảy là 114,5 ℃ [21]
Hệ thống phân loại sinh dược học (Biopharmaceutical Classification System - BCS) của Cơ quan quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Mỹ (FDA) đã phân loại Carvedilol vào nhóm II, tức là dược chất có độ tan thấp nhưng có tính thấm qua màng sinh học cao.
● Dược lý và cơ chế tác dụng [20]
Carvedilol là một loại thuốc có tác dụng giãn mạch, tồn tại dưới dạng hỗn hợp racemic Nó hoạt động bằng cách chẹn không chọn lọc thụ thể beta-adrenergic và chẹn chọn lọc thụ thể alpha1-adrenergic Ngoài ra, ở liều cao, carvedilol còn có tác dụng chẹn kênh calci.
Carvedilol không có tác dụng giống giao cảm nhưng lại có khả năng ổn định màng tế bào một cách hiệu quả Bên cạnh đó, carvedilol còn đóng vai trò quan trọng trong việc chống oxy hóa, giúp bảo vệ tế bào khỏi tổn thương.
Nghiên cứu lâm sàng cho thấy việc kết hợp thuốc chẹn thụ thể alpha1 và beta giúp giảm nhẹ hoặc giữ nguyên tần số tim khi nghỉ ngơi, đồng thời duy trì phân số tống máu và lưu lượng máu đến thận và các vùng ngoại biên.
Carvedilol có khả năng hấp thu không hoàn toàn qua đường tiêu hóa và trải qua quá trình chuyển hóa mạnh lần đầu tại gan, dẫn đến khả dụng sinh học dao động từ 20 - 25% Nồng độ tối đa trong huyết tương đạt được sau 1 - 2 giờ uống thuốc, và nồng độ này tăng theo liều trong phạm vi khuyến nghị Khoảng 98% carvedilol gắn vào protein trong máu, với thể tích phân bố khoảng 2 lít/kg và độ thanh thải huyết tương khoảng 590 ml/phút Thuốc được chuyển hóa chủ yếu ở gan thông qua các enzym CYP 2D6 và CYP 2C9, mặc dù các chất chuyển hóa có hoạt tính chẹn thụ thể beta nhưng không đóng góp đáng kể vào tác dụng của thuốc do nồng độ thấp và tác dụng giãn mạch yếu Khoảng 15% liều uống được thải trừ qua thận, do đó không cần điều chỉnh liều carvedilol ở bệnh nhân suy thận Thời gian nửa đời thải trừ của carvedilol là 6 - 10 giờ.
Carvedilol có thể được sử dụng độc lập hoặc kết hợp với các loại thuốc khác, đặc biệt là thuốc lợi tiểu thiazid Trong điều trị suy tim, Carvedilol thường được kết hợp với digoxin, thuốc lợi tiểu và thuốc ức chế enzym chuyển angiotensin để điều trị suy tim sung huyết vừa đến nặng do thiếu máu cục bộ hoặc bệnh cơ tim Việc sử dụng Carvedilol đã được chứng minh giúp giảm tiến triển của bệnh, cải thiện tỷ lệ tử vong, thời gian điều trị tim mạch tại bệnh viện và giảm nhu cầu điều chỉnh thuốc điều trị suy tim khác.
Suy tim sung huyết mất bù (NYHA độ III - IV) chưa được điều trị theo phác đồ chuẩn có thể dẫn đến các biến chứng nghiêm trọng Bên cạnh đó, hen phế quản hoặc bệnh co thắt phế quản cũng có thể xảy ra, gây ra các cơn hen khó kiểm soát.
Sốc do tim, nhịp tim chậm nặng hoặc blốc nhĩ - thất độ II hoặc độ III
Suy gan có triệu chứng, suy gan nặng
Mẫn cảm với bất cứ thành phần nào của thuốc [3]
1.1.5 Liều lượng và cách dùng
Để giảm nguy cơ tụt huyết áp thế đứng, carvedilol nên được uống cùng với thức ăn Nhà sản xuất cũng khuyến cáo rằng, để giảm biểu hiện giãn mạch ở bệnh nhân sử dụng đồng thời thuốc ức chế enzym chuyển, nên dùng carvedilol 2 giờ trước khi sử dụng thuốc ức chế men chuyển.
Tăng huyết áp có thể được điều trị bắt đầu với liều 12,5 mg, uống một lần mỗi ngày Sau 2 ngày, liều có thể tăng lên 25 mg, vẫn duy trì một lần uống mỗi ngày Một phương pháp khác là bắt đầu với liều 6,25 mg, uống hai lần mỗi ngày.
Liều khởi đầu cho thuốc là 12,5 mg, uống 2 lần mỗi ngày trong 1 đến 2 tuần, có thể tăng liều sau mỗi 2 tuần cho đến tối đa 50 mg, uống 1 lần hoặc chia thành nhiều liều Đối với người cao tuổi, liều 12,5 mg mỗi ngày có thể mang lại hiệu quả Đối với điều trị đau thắt ngực, bắt đầu với liều 12,5 mg, uống 2 lần mỗi ngày, sau 2 ngày có thể tăng lên 25 mg, vẫn uống 2 lần mỗi ngày.
Trước khi bắt đầu liệu pháp carvedilol cho suy tim sung huyết, người bệnh cần được điều trị theo phác đồ chuẩn với glycosid trợ tim, thuốc lợi tiểu và/hoặc thuốc ức chế enzym chuyển angiotensin, đồng thời phải ổn định với liều lượng các thuốc này Liều khởi đầu là 3,125 mg, uống 2 lần/ngày trong 2 tuần; nếu dung nạp tốt, có thể tăng lên 6,25 mg, tối đa không vượt quá 25 mg/ngày cho bệnh nhân dưới 85 kg hoặc suy tim nặng, và 50 mg/ngày cho bệnh nhân trên 85 kg hoặc suy tim nhẹ và trung bình Đối với trẻ em từ 2 đến 18 tuổi, liều khởi đầu là 50 mg/kg (tối đa 3,125 mg), uống 2 lần/ngày trong 2 tuần, và có thể tăng lên 350 mg/kg (tối đa 25 mg) nếu dung nạp tốt.
Bệnh nhân có rối loạn thất trái sau nhồi máu cơ tim, liều khởi đầu 6,25 mg, ngày uống
2 lần, sau 3 - 10 ngày có thể tăng liều 12,5 mg, ngày uống 2 lần và liều cuối cùng có thể dùng 25 mg, ngày uống 2 lần [3]
Nguy cơ suy tim mất bù và/hoặc giảm huyết áp nặng cao nhất trong 30 ngày đầu điều trị
Bệnh cơ tim vô căn: 6,25 - 25 mg/lần, ngày uống 2 lần [3]
1.1.6 Một số chế phẩm Carvedilol trên thị trường
Bảng 1.1 Một số chế phẩm có chứa Carvedilol trên thị trường
Tên chế phẩm Hàm lượng (mg) Dạng bào chế Hãng sản xuất Dilatrend 6,25, 12,5, 25 mg Viên nén thường Roche
Coreg 6,25, 12,5, 25 mg Viên nén thường GSK
Dimitone 6,25, 12,5, 25 mg Viên nén thường Erco
Eucardic 6,25, 12,5, 25 mg Viên nén thường Roche
Eucardic 6,25, 12,5, 25 mg Viên nén thường Roche
Kredex 6,25, 12,5, 25 mg Viên nén thường GSK
Querto 6,25, 12,5, 25 mg Viên nén thường Byk Gulden
Savi carvedilol 6,25, 15,5 mg Viên nén bao phim Savipharm
Carvestad 6,25, 15,5 mg Viên nén thường Stada
Phần lớn các loại thuốc hiện nay có nguồn gốc từ các nhà sản xuất nước ngoài, dẫn đến giá thành cao và số lượng thuốc phụ thuộc vào cơ chế nhập khẩu Điều này gây khó khăn trong việc chỉ định và sử dụng thuốc cho người bệnh.
MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP CẢI THIỆN ĐỘ TAN – ĐỘ HÒA TAN
Để cải thiện khả năng hòa tan của dược chất kém tan trong nước và tăng cường sinh khả dụng, có thể áp dụng một số phương pháp hiệu quả.
1.2.1 Giảm kích thước tiểu phân
Khả năng hòa tan của thuốc phụ thuộc vào kích thước hạt, và việc giảm kích thước hạt thông qua các phương pháp như máy nghiền phản lực, máy nghiền keo rôto stato và máy nghiền bi có thể tăng diện tích bề mặt và cải thiện khả năng hòa tan Tuy nhiên, quá trình này có thể làm thay đổi tính chất vật lý của hoạt chất do tác động của nhiệt độ cao, dẫn đến sự phân hủy Ngoài ra, việc kiểm soát các đặc tính quan trọng của sản phẩm cuối cùng như hình dạng, kích thước, hình thái, đặc tính bề mặt và điện tích tĩnh điện cũng gặp khó khăn Hơn nữa, vùng vô định hình có thể không ổn định về mặt nhiệt động lực học và dễ bị kết tinh lại trong điều kiện nóng ẩm.
+ Công nghệ tạo kích thước hạt nano
Công nghệ tạo kích thước nano là một giải pháp hứa hẹn cho việc phân bố hiệu quả các loại thuốc kém tan trong nước Các hạt thuốc tinh khiết được phân tán ở kích thước nano, nhỏ hơn một micrômet, thường nằm trong khoảng từ 200 đến 600 nm, và được ổn định bằng các chất hoạt động bề mặt Công nghệ này có thể được áp dụng cho các phương thức sử dụng như tại chỗ, đường uống, đường tiêm hoặc đường hô hấp.
Có nhiều phương pháp chế tạo kích thước hạt nano, bao gồm: nghiền, đồng nhất hóa nguyên liệu với áp suất cao trong nước, đồng nhất hóa nguyên liệu với áp suất cao trong môi trường không chứa nước, và kết hợp giữa kết tủa và đồng nhất hóa áp suất cao.
Phương pháp kích hoạt nano đã được sử dụng cho các loại thuốc khác nhau bao gồm tarazepide, atovaquone, amphotericin B, v.v [17]
Hydrotrophy là hiện tượng hòa tan giúp tăng cường độ hòa tan của các chất có độ hòa tan kém trong nước Phương pháp này sử dụng các chất như natri benzoat, urê, natri xitrat và natri salicylat để nâng cao khả năng hòa tan của thuốc.
Rasool A.A et al enhanced the solubility of various drugs, including diazepam, griseofulvin, testosterone, progesterone, and 17-estradiol, in the presence of nicotinamide and related compounds The solubility improvements exhibited a nonlinear relationship as a function of nicotinamide concentration.
1.2.3 Chất hoạt động bề mặt
Việc sử dụng chất hoạt động bề mặt để nâng cao khả năng hòa tan của thuốc hòa tan kém đã đạt được thành công đáng kể Nghiên cứu của Seedhar N và cộng sự cho thấy khả năng hòa tan của Enfloxacine có thể tăng lên đến 26 lần khi áp dụng một loạt đồng dung môi và chất hoạt động bề mặt Trong số các chất hoạt động bề mặt không ion thường được sử dụng, lauroyl macroglycerid, dầu thầu dầu, và di-fatty acid ester của polyetylen glycol với khối lượng phân tử thấp là những lựa chọn phổ biến.
Tỷ lệ hòa tan của muối thường khác so với hợp chất mẹ, với muối natri và kali của acid có khả năng hòa tan nhanh hơn muối nguyên chất Tuy nhiên, việc hình thành muối có thể bị hạn chế bởi một số yếu tố, bao gồm đau vùng thượng vị do độ kiềm cao, phản ứng với nước trong khí quyển và carbon dioxide dẫn đến kết tủa, cũng như sự tuân thủ dùng thuốc của bệnh nhân.
Thuốc hòa tan trong nước kém có thể cải thiện khả năng hòa tan thông qua việc điều chỉnh độ pH Để đánh giá độ hòa tan, thể tích đệm và khả năng dung nạp của pH cần được xem xét kỹ lưỡng Các tá dược hòa tan có thể làm tăng pH môi trường bào chế lên mức cao hơn pKa của thuốc acid, từ đó nâng cao khả năng hòa tan của thuốc Những tá dược này hoạt động như chất kiềm hóa, giúp tăng cường độ hòa tan của thuốc cơ bản.
Sự phân tán rắn, theo định nghĩa của Chiou và Riegelman (1971), là nhóm các sản phẩm rắn bao gồm ít nhất hai thành phần: một chất nền ưa nước và một chất kỵ nước Chất nền có thể tồn tại dưới dạng tinh thể hoặc vô định hình, trong khi các hoạt chất có thể được phân tán ở dạng phân tử, vô định hình hoặc kết tinh Sự phân tán rắn còn được hiểu là sự phân tán của một hoặc nhiều thành phần hoạt tính trong một chất mang trơ ở trạng thái rắn, được chế biến thông qua các phương pháp như đun chảy, bay hơi dung môi hoặc dung môi nóng chảy.
1.2.6.2 Các loại phân tán rắn
Trên cơ sở sắp xếp phân tử, có thể phân biệt một số dạng phân tán rắn như sau:
Hỗn hợp eutectic đơn giản bao gồm hai thành phần có khả năng trộn lẫn hoàn toàn ở trạng thái lỏng, nhưng có giới hạn mở rộng khi ở trạng thái rắn Chúng được tạo ra bằng cách làm đông đặc nhanh chóng sự nóng chảy của hai thành phần Khi hòa tan hỗn hợp thuốc kém tan trong nước với chất mang hòa tan trong nước, chất mang sẽ nhanh chóng hòa tan, giải phóng tinh thể thuốc rất mịn.
Trong dung dịch rắn, hai thành phần kết tinh trong một hệ thống đồng nhất một pha, với kích thước hạt thuốc được giảm xuống kích thước phân tử, từ đó làm tăng tốc độ hòa tan Dung dịch rắn được phân loại thành hai loại: liên tục và không liên tục Trong dung dịch rắn liên tục, hai thành phần có thể trộn lẫn ở trạng thái rắn theo mọi tỷ lệ, trong khi ở dung dịch rắn không liên tục, khả năng hòa tan của từng thành phần trong thành phần kia bị hạn chế.
Dung dịch thủy tinh và huyền phù
Thủy tinh là một hệ thống đồng nhất, trong đó chất tan được hòa trộn vào Hỗn dịch thủy tinh là sự kết hợp giữa các hạt kết tủa lơ lửng trong dung môi thủy tinh Trạng thái thủy tinh đặc trưng bởi độ trong suốt và tính giòn khi nhiệt độ chuyển đổi xảy ra.
Kết tủa vô định hình trong chất mang tinh thể
Trong nhóm thuốc phân tán, thuốc thường được kết tủa dưới dạng vô định hình, trong khi ở dạng hỗn hợp eutectic đơn giản, thuốc tồn tại dưới dạng tinh thể Chẳng hạn, sulfathiazole có thể được tìm thấy ở dạng tinh thể urê.
Có nhiều phương pháp có thể được điều chỉnh để nâng cao khả năng hòa tan của các loại thuốc kém tan trong nước, từ đó cải thiện sinh khả dụng của chúng.
MỘT SỐ CÔNG TRÌNH CẢI THIỆN ĐỘ HÒA TAN CARVEDILOL
Tính đến thời điểm hiện tại, đề tài chưa tìm thấy công trình trong nước thực hiện cải thiện độ hòa tan hoạt chất carvedilol bằng HPTR
Arun Raj R và Dr Jyoti Harindran (2017) đã nghiên cứu cải thiện khả năng hòa tan của Carvedilol thông qua phương pháp hệ phân tán rắn với sự sử dụng của PEG 6000 và HPMC K100M Việc điều chế hệ phân tán Carvedilol - PEG 6000 và Carvedilol - HPMC K100M được thực hiện bằng cách nhào trộn.
Kết quả cho thấy HPTR PEG 6000 – Carvedilol với tỉ lệ 4:1 cho kết quả tốt hơn HPMC K100M với cùng tỉ lệ
HPTR đã được lựa chọn và chế tạo thành viên nén thông qua phương pháp dập thẳng Kết quả cho thấy rằng viên nén sử dụng hệ phân tán rắn có độ hòa tan cao hơn so với viên mẫu đối chứng.
Năm 2012, Jung Bo Shim và các cộng sự đã tiến hành nghiên cứu nhằm kiểm soát tỷ lệ hòa tan của Carvedilol Họ sử dụng hệ phân tán rắn Carvedilol - HPMC với dung môi Methylene chloride và Carvedilol - Eudragit với dung môi Methanol thông qua phương pháp sấy phun.
Nghiên cứu cho thấy rằng phương pháp sấy phun HPTR đã cải thiện đáng kể tốc độ hòa tan của Carvedilol so với nguyên liệu ban đầu.
Nghiên cứu của Varsha Pokharkar và cộng sự (2009) đã cải thiện đáng kể độ hòa tan và tốc độ hòa tan của Carvedilol thông qua việc tạo phức bậc 3 với B-cyclodextrin và Acid citric theo tỉ lệ 1:2:2 trong dung môi cồn - nước Ba phương pháp tạo phức bậc 3 được so sánh, bao gồm trộn vật lý, trộn ướt và phun sấy Kết quả cho thấy kỹ thuật phun sấy đã làm tăng độ hòa tan của Carvedilol lên đến 110 lần Các viên nén phân tán trong miệng được bào chế bằng kỹ thuật phun sấy với tá dược phù hợp, đạt được độ tan 100% trong vòng 5 phút.
Qua nghiên cứu, chưa có công trình nào trong nước thực hiện cải thiện độ hòa tan của carvedilol bằng phương pháp HPTR, điều này tạo ra tính mới cho đề tài Nhiều nghiên cứu quốc tế đã áp dụng phương pháp HPTR để nâng cao độ hòa tan của carvedilol và đạt được kết quả khả quan, cho thấy hướng đi của đề tài là đúng đắn.
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
Cải thiện độ hòa tan của viên nén bao phim Carvedilol 6.25 mg bằng hệ phân tán rắn 2.1.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU
2.1.1.1 Nguyên liệu sử dụng trong nghiên cứu:
- Nguyên liệu Carvedilol, Nhà sản xuất Lifesciences, ngày sàn xuất: 01/2021, ngày hết hạn: 12/202
Bảng 2.1 Danh mục nguyên liệu, tá dược sử dụng trong quá trình nghiên cứu
2.1.1.2 Thiết bị và dụng cụ sử dụng trong nghiên cứu
Thiết bị được sử dụng trong nghiên cứu và phát triển đến từ Phòng Nghiên cứu và Phát triển của Công ty Cổ phần Dược phẩm Savi, cùng với Bộ môn Bào Chế thuộc Khoa Dược của Đại Học Lạc Hồng.
Tên nguyên liệu Nhà sản xuất Tiêu chuẩn
Lactose monohydrate 200 mesh Meggle EP 9
Lactose monohydrate 100 mesh Meggle EP 9
Sillica, colloidal anhydrous Evonik USP 39
Opadry AMB yellow Colorcon TCCS
Bảng 2.2 Danh mục hóa chất kiểm nghiệm sử dụng trong nghiên cứu
Tên hóa chất Nhà sản xuất Tiêu chuẩn
Chuẩn nhân Carvedilol Savipharm Phân tích
Thuốc đối chiếu Roche Nhà sản xuất
Acid hydroclorid Prolabo Phân tích
Natri hydroxid Fisher Phân tích
Kali dihydrophosphat khan Fisher Phân tích
Acid phosphoric Prolabo Phân tích
Natri dodecyl sulfat Fisher Phân tích
Nước cất Savipharm Phân tích
Bảng 2.3 Danh mục thiết bị và dụng cụ sử dụng trong nghiên cứu
Stt Tên thiết bị Model Xuất xứ
1 Cân kỹ thuật ENTRIS620I-1S Đức
3 Cân phân tích GH-202 Đức
4 Máy khuấy từ gia nhiệt F20520162 Italy
6 Máy siêu âm POWERSONIC 620 Đức
7 Máy thử độ hòa tan Erweka DT1612 Đức
8 Máy quang phổ UV-Vis SHIMADZU UV-1800 Đức
9 Máy HPLC LC-2030C PLUS Đức
10 Máy đo DSC DSC-3 Thụy sĩ- Mỹ
11 Máy đo kích thước hạt MAL1252318 Anh
12 Máy dập viên 4 chày KMPC-8 Ấn Độ
13 Máy thử độ cứng Pharmatest PTB-511E Đức
14 Máy thử độ rã Pharmatest ZT-222 Đức
15 Máy thử độ mài mòn Pharmatest PTF10ER Đức
16 Máy sấy phun và tạo hạt tầng sôi SOLIDLAD Đức
17 Máy bao phim TCS-1/5/10/20 Việt Nam
18 Máy ép vỉ CP-250 Việt Nam
19 Cân sấy ẩm hồng ngoại AND MX-50 Đức
20 Máy đo độ nhớt RVDV-II+P Đức
21 Tủ vi khí hậu HPP260ECO Đức
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.1 Thẩm định quy trình định lượng carvedilol
2.2.1.1 Thẩm định quy trình định lượng carvedilol trong thử nghiệm độ hòa tan bằng phương pháp quang phổ UV-Vis [6] Điều kiện thử:
- Thiết bị: Kiểu cánh khuấy
- Môi trường hòa tan: 900 ml dung dịch đệm pH 1,45 [dung dịch acid hydroclorid 0,7%
(7 ml/l), chỉnh về pH 1,45 ± 0,2 bằng dung dịch sodium hydroxid 50% (kl/kl)]
- Tốc độ quay: 50 vòng/phút
Để chuẩn bị dung dịch chuẩn, cân chính xác khoảng 7 mg carvedilol và cho vào bình định mức 250 ml Thêm 5 ml methanol và siêu âm cho đến khi tan hoàn toàn Sau đó, để nguội đến nhiệt độ phòng, thêm môi trường hòa tan vừa đủ đến vạch và lắc đều Cuối cùng, hút chính xác 5,0 ml dung dịch này cho vào bình định mức 20 ml, thêm môi trường hòa tan vừa đủ đến vạch và lắc đều.
Để tiến hành thử nghiệm độ hòa tan, cho 1 viên hoặc 6.25mg Carvedilol vào mỗi bình thử, sau đó thêm môi trường hòa tan đạt nhiệt độ quy định Vận hành thiết bị trong thời gian quy định rồi tắt thiết bị Cuối cùng, hút một phần dịch hòa tan và lọc qua màng lọc 0,45 μm để thu được mẫu thử.
Tiến hành: Điều kiện đo UV:
- Mẫu trắng: môi trường hòa tan
- Tính độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch chuẩn và dung dịch thử
Acorr : độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch chuẩn hoặc dung dịch thử
A285 : độ hấp thụ của dung dịch chuẩn hoặc dung dịch thử ở bước sóng 285 nm
A380 : độ hấp thụ của dung dịch chuẩn ở bước sóng 380 nm
- Tính phần trăm carvedilol C24H26N2O4 hòa tan theo công thức sau:
A U : độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch thử
A S : độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch chuẩn
C S : nồng độ của dung dịch chuẩn (mg/ml)
V : thể tích môi trường hòa tan, 900 ml
L : Hàm lượng ghi nhãn của carvedilol trong 1 viên (mg)
- Yêu cầu về lượng hoạt chất hòa tan trong mỗi viên được đánh giá theo bảng sau:
Chuẩn bị các dung dịch
Để chuẩn bị dung dịch chuẩn gốc, cân chính xác khoảng 7 mg carvedilol và cho vào bình định mức 250 ml Thêm 5 ml methanol và siêu âm cho đến khi hòa tan hoàn toàn Sau đó, để nguội đến nhiệt độ phòng, thêm môi trường hòa tan cho đến vạch định mức và lắc đều.
Để chuẩn bị dung dịch chuẩn, hãy hút chính xác 5,0 ml dung dịch vào bình định mức 20 ml, sau đó thêm dung môi cho đến khi đạt vạch định mức và lắc đều Cuối cùng, lọc dung dịch qua màng lọc 0,45 µm để loại bỏ tạp chất.
Để tiến hành thử nghiệm độ hòa tan, trước tiên cần cân 20 viên nén bao phim và nghiền thành bột mịn Sau đó, cân lượng bột tương đương với khối lượng của một viên nén bao phim và cho vào cốc thử độ hòa tan chứa môi trường hòa tan đã đạt nhiệt độ yêu cầu Tiếp theo, vận hành thiết bị trong thời gian quy định trước khi tắt thiết bị Cuối cùng, hút 20 ml dịch sau khi khuấy hòa tan, lọc qua màng lọc 0,45 μm và loại bỏ 10 ml dịch lọc đầu.
- Dung dịch placebo: Cân chính xác khoảng một lượng bột placebo tương ứng, xử lý tương tự dung dịch thử
Bước Số viên Giới hạn chấp nhận
B1 6 Mỗi viên không được ít hơn Q + 5 %
Trung bình của 12 viên (B1+B2) phải bằng hoặc lớn hơn Q, và không có viên nào có giá trị thấp hơn Q - 15% Đối với 24 viên (B1+B2+B3), trung bình cũng cần đạt hoặc vượt Q, với không quá 2 viên có giá trị thấp hơn Q - 15%, và không viên nào có giá trị thấp hơn Q - 25%.
- Mẫu trắng: Mụi trường hũa tan Lọc qua màng lọc 0,45 àm
- Tiến hành: Tiến hành đo độ hấp thụ của các dung dịch placebo, dung dịch chuẩn, dung dịch thử theo điều kiện được nêu trong phần Độ hòa tan
- Yêu cầu: Độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch placebo không quá 2,0% so với độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch thử
Tính tương thích hệ thống
- Đo độ hấp thụ mẫu chuẩn trong phần tính đặc hiệu lặp lại 6 lần, từ kết quả thu được tính giá trị độ lệch chuẩn tương đối
Chuẩn bị và phân tích mẫu:
- Dung dịch chuẩn gốc: Dùng dung dịch chuẩn gốc mục Độ hòa tan - tính đặc hiệu
Hút chính xác thể tích dung dịch chuẩn gốc vào các bình định mức đã được đánh số theo bảng đã cung cấp, sau đó thêm nước đến vạch quy định và lắc đều để đảm bảo sự đồng nhất.
Bảng 2.4 Các Khoảng nồng độ dung dịch chuẩn gốc
Thể tích chuẩn gốc (ml)
Nồng độ carvedilol (mg/ ml)
- Tiến hành đo độ hấp thụ các dung dịch trên từ nồng độ thấp đến nồng độ cao
Dựa vào nồng độ và độ hấp thụ thu được, sử dụng Excel để vẽ đồ thị thể hiện mối tương quan giữa nồng độ dung dịch và độ hấp thụ Từ đó, xác định phương trình hồi quy và hệ số tương quan tuyến tính Đồng thời, tính toán Y - intercept (%) bằng cách lấy b (intercept) chia cho đáp ứng ở nồng độ 100% và nhân với 100.
- Yêu cầu: R ≥ 0,995, Y - intercept (%) ≤ 2,0% Độ chính xác
- Dung dịch chuẩn: Dùng dung dịch chuẩn phần tính đặc hiệu
- Dung dịch thử: Chuẩn bị 6 dung dịch thử như trong phần tính đặc hiệu
- Tiến hành đo độ hấp thụ các dung dịch trên
Tính hàm lượng (%) dược chất so với hàm lượng ghi trên nhãn của từng dược chất trong
6 mẫu thử trên Từ các hàm lượng (%) thu được của 6 mẫu, tính độ lệch chuẩn tương đối với độ tin cậy P = 95% theo công thức:
Công thức tính độ lệch chuẩn tương đối
Khoảng tin cậy của trị số trung bình ứng với P =0,95 bậc tự do n-1: n
Xi: Là giá trị đo được thứ i
: Là giá trị trung bình n: Số lần đo t: t (5;5%) = 2,015
+ Độ chính xác trung gian
Độ chính xác trung gian phản ánh mức độ dao động của kết quả thử nghiệm trong cùng một phòng thí nghiệm nhưng thực hiện vào các ngày khác nhau, với các kiểm nghiệm viên và thiết bị khác nhau Trong thực tế, nghiên cứu này áp dụng việc thay đổi kiểm nghiệm viên (KNV) trong cùng một phòng thí nghiệm để đánh giá độ tin cậy của kết quả.
Chuẩn bị mẫu – Phân tích mẫu:
- Chuẩn bị mẫu chuẩn và 6 dung dịch mẫu thử, tiến hành phân tích tương tự phần Độ lặp lại ở mục 2.2.1.1, được thực hiện bởi kiểm nghiệm viên thứ 2
- Yêu cầu: (RSD của 12 số liệu của 2 KNV) ≤ 3,0%, Không có sự khác nhau rõ rệt về giá trị trung bình của 2 lần thử nghiệm Độ đúng
Chuẩn bị mẫu và phân tích mẫu:
- Dung dịch chuẩn: Dùng dung dịch chuẩn trong phần tính đặc hiệu ở mục 2.2.1.1
Để chuẩn bị dung dịch chuẩn gốc, cân chính xác khoảng 50 mg carvedilol và cho vào bình định mức 100 ml Tiếp theo, thêm 70 ml methanol và siêu âm cho đến khi chất tan hoàn toàn Sau đó, để dung dịch nguội đến nhiệt độ phòng, và bổ sung methanol đến vạch định mức, cuối cùng lắc đều để hòa tan.
Bảng 2.5 Các khoảng nồng độ mẫu thử độ đúng
Mẫu thử độ đúng Lượng cân placebo (mg)
Thể tích chuẩn gốc (ml)
Nồng độ carvedilol (mg/ ml)
Cân chính xác lượng placebo và hút thể tích dung dịch chuẩn theo bảng hướng dẫn, sau đó cho vào cốc thử độ hòa tan đã đạt nhiệt độ thử nghiệm Vận hành thiết bị trong thời gian quy định rồi tắt Hút 20 ml dịch sau khi khuấy hũa tan, lọc qua màng lọc 0,45 µm và bỏ 10 ml dịch lọc đầu Tiếp tục lọc qua màng lọc 0,45 µm để đảm bảo độ tinh khiết của mẫu.
- Tiến hành đo độ hấp thụ các dung dịch trên
- Tính kết quả và so sánh với tiêu chuẩn chấp nhận
- Từ kết quả phân tích trên, tính ra lượng dược chất có trong từng mẫu
- Tỷ lệ phục hồi (%) = (Hàm lượng tìm thấy / Hàm lượng cho vào) * 100
- Yêu cầu: Tỉ lệ phục hồi ở mỗi nồng độ: 97,0% - 103,0%, RSD ≤ 2,0%
Kết quả khảo sát tính tuyến tính, độ đúng và độ chính xác được xác định, cho thấy khoảng này nằm trong đường tuyến tính và đáp ứng yêu cầu về tỷ lệ phục hồi cũng như độ chính xác.
2.2.1.2 Thẩm định quy trình định lượng carvedilol trong viên nén nghiên cứu bằng phương pháp đo HPLC [6]
Chuẩn bị các dung dịch:
- Dung dịch đệm: Hòa tan 0,7 g kali dihydrophosphat khan trong 500 ml nước, thêm 10 ml triethylamin Điều chỉnh bằng acid phosphoric tới pH 3,0 ± 0,1
Để thực hiện pha động, hòa tan 1,04 g natri dodecyl sulfat vào 150 ml dung dịch đệm trong bình định mức 2 lít và siêu âm Tiếp theo, thêm 720 ml acetonitril và pha loãng đến vạch bằng nước Cuối cùng, lọc dung dịch qua màng lọc nylon 66 với kích thước lỗ lọc 0,2 µm.
- Dung môi pha loãng: Methanol - dung dịch acid hydroclorid 1M (9:1)
- Dung dịch methanol: Methanol và nước (1:1)
Để chuẩn bị dung dịch chuẩn gốc, cân chính xác khoảng 25 mg carvedilol và cho vào bình định mức 100 ml Tiếp theo, thêm 70 ml hỗn hợp dung môi pha loãng và nước theo tỷ lệ 9:1, sau đó siêu âm cho đến khi dung dịch trở nên trong suốt Cuối cùng, định mức đến vạch với cùng dung môi và lắc đều.
- Dung dịch chuẩn: Hút chính xác 5,0 ml dung dịch chuẩn gốc cho vào bình định mức
Pha 100 ml dung dịch bằng cách thêm methanol đến vạch, lắc đều và lọc qua màng lọc 0,45 µm Để chuẩn bị dung dịch thử, xác định khối lượng trung bình của 20 viên, nghiền thành bột mịn Cân 25 mg carvedilol, cho vào bình định mức 100 ml, thêm 10 ml nước và lắc tay Sau đó, thêm 70 ml dung môi pha loãng, siêu âm trong 30 phút và lắc máy trong 30 phút Cuối cùng, thêm dung môi pha loãng đến vạch và lắc đều, lấy khoảng 50 ml dung dịch này để ly tâm ở tốc độ 2000 v/p trong 10 phút.
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG CARVEDILOL
3.1.1 Thẩm định quy trình định lượng carvedilol trong thử nghiệm độ hòa tan bằng phương pháp UV-Vis
Bảng 3.1 Kết quả đo độ hấp thụ UV
Lượng cân (mg) Độ hấp thụ (phút)
Dung dịch thử Bột viên: 164,60 0,2057 0,0052 0,2005
- Độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch placebo không quá 2,0% so với độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch thử
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về tính đặc hiệu
Tính tương thích hệ thống
- Kết quả: Lượng cân Carvedilol chuẩn: 7,20 mg
Bảng 3.2 Kết quả đo độ hấp thụ UV Độ hấp thụ Đo lần
- Độ lệch chuẩn tương đối: 0,632 % (≤ 1,0%)
- Kế luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ tương thích hệ thống
- Kết quả: Lượng cân chuẩn carvedilol: 7,20 mg
Bảng 3.3 Kết quả đo độ hấp thụ UV
Nồng độ (mg/ml) 0,0029 0,0057 0,0072 0,0086 0,0100 Độ hấp thụ
Hiệu số độ hấp thụ 0.0899 0,0899 0,1791 0,2091 0,2555
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu tính tuyến tính trong khoảng nồng độ 0,0029 - 0,01 mg/ml, với phương trình hồi quy ŷ = 29,654x+0,0038, R 2 =0,999 Độ chính xác
- Mẫu chuẩn: Lượng cân caverdilol chuẩn: 7,20 mg, Hiệu số độ hấp thụ: 0,2080
- Mẫu thử: Khối lượng trung bình của viên: 164,10 mg
Bảng 3.4 Kết quả đo độ hấp thụ UV
STT Lượng cân mẫu thử
Hiệu số độ hấp thụ Hàm lượng (%) RSD
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ lặp lại
+ Độ chính xác trung gian
Bảng 3.5 Đối chiếu kết quả của 2 kiểm nghiệm viên
Lượng cân carvedilol chuẩn: 7,20 mg 7,10 mg
Hiệu số độ hấp thụ 0,2080 0,2084
Mẫu thử: Khối lượng trung bình viên: 164,10 mg 160,42 mg
Bảng 3.6 Đối chiếu kết quả đo độ hấp thụ UV của 2 kiểm nghiệm viên
(mg) Hiệu số độ hấp thụ Hàm lượng (%) RSD
KNV 1 KNV 2 KNV 1 KNV 2 KNV 1 KNV 2
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ chính xác trung gian Độ đúng
- Lượng cân chuẩn carvedilol: 7,20 mg, hiệu số hấp thụ: 0,2080
- Lượng cân chuẩn gốc: 50,20 mg
Bảng 3.7 Kết quả đo độ hấp thụ UV
Lượng cân dược chất (mg)
Hiệu số độ hấp thụ
Nồng độ lý thuyết (mg/ ml)
Nồng độ thực tế (mg/ ml)
Tỉ lệ phục hồi (%) RSD
- Kết luận: Tỉ lệ phục hồi ở mỗi nồng độ đều nằm trong khoảng 98,0% - 102,0% và có RSD ≤ 2,0% nên phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ đúng
Từ các kết quả thu được ở phần độ tuyến tính và độ đúng, phương pháp kiểm nghiệm có khoảng xác định từ 65 – 110%
3.1.2 Thẩm định quy trình định lượng carvedilol trong viên nén nghiên cứu bằng phương pháp đo HPLC
Bảng 3.8 Kết quả đo HPLC
Dung dịch thử Dung dịch chuẩn
Lượng cân (mg) Bột viên: 640,10 25,00 615,20
- Trên sắc ký đồ của dung dịch thử, pic chính có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu của pic dung dịch chuẩn trong sắc ký đồ
Trên sắc ký đồ của dung dịch placebo, không xuất hiện bất kỳ pic nào có thời gian lưu trùng khớp với thời gian lưu của pic dung dịch chuẩn.
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về tính đặc hiệu
Tính tương thích hệ thống
- Kết quả: Lượng cân carvedilol chuẩn: 24,90 mg
Bảng 3.9 Kết quả đo HPLC
Lần tiêm Thời gian lưu (phút) Diện tích pic
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ tương thích hệ thống
- Kết quả: Lượng cân carvedilol chuẩn: 24,90 mg
Bảng 3.10 Kết quả đo HPLC
Thể tích chuẩn gốc (ml)
Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ tuyến tính trong khoảng nồng độ 0,0050 - 0,0174 mg/ml, với phương trình hồi quy ŷ = 9E+08x+5439,6x, R 2 =1
- Mẫu chuẩn: Lượng cân caverdilol chuẩn: 24,9 mg; Diện tích pic chuẩn: 10931756
- Mẫu thử: Khối lượng trung bình của viên: 160,10 mg
Bảng 3.11 Kết quả đo HPLC
STT Lượng cân mẫu thử (mg) Diện tích pic Hàm lượng (%) RSD
Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ lặp lại
● Độ chính xác trung gian
Bảng 3.12 Đối chiếu kết quả của 2 kiểm nghiệm viên
Lượng cân carvedilol chuẩn: 24,90 mg 25,20 mg
Mẫu thử: Khối lượng trung bình viên: 160,10 mg 160,40 mg
Bảng 3.13 Đối chiếu kết quả đo HPLC của 2 kiểm nghiệm viên
(mg) Diện tích pic Hàm lượng (%) RSD
KNV 1 KNV 2 KNV 1 KNV 2 KNV 1 KNV 2
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ chính xác trung gian Độ đúng
Bảng 3.14 Kết quả đo HPLC
Lượng cân dược chất (mg)
Nồng độ lý thuyết (mg/ ml)
Nồng độ thực tế (mg/ ml)
Tỉ lệ phục hồi (%) RSD %
Kết luận cho thấy tỉ lệ hồi phục ở mỗi nồng độ đều có RSD dưới 2,0%, với tỉ lệ hồi phục trung bình ở mỗi mức nồng độ nằm trong khoảng 98,0 – 102,0% Điều này chứng tỏ phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về độ đúng.
Từ các kết quả thu được ở phần độ tuyến tính và độ đúng, phương pháp kiểm nghiệm có khoảng xác định từ 30 – 70%
Nghiên cứu điều chế HPTR carvedilol bằng phương pháp sấy phun
3.2.1 Khảo sát dịch phun chứa polymer và carvedilol
Khảo sát dịch phun chứa polyme
Bảng 3.15 Các công thức dịch phun chứa polyme
- Kết quả đánh giá các chỉ tiêu vật lý các công thức dịch phun chứa polymer được trình bày ở Bảng 3.16
Bảng 3.16 Kết quả đánh giá các chỉ tiêu vật lý các công thức dịch phun chứa polymer
CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8
Cảm quan sau khi hòa tan Dịch trong suốt, màu vàng nhạt Độ nhớt (cp) 8,80 17,60 28,80 59,20 105,60 620,00 16,80 273,60
CT9 CT10 CT11 CT12 CT13 CT14 CT15 - Cảm quan sau khi hòa tan Dịch trong suốt, màu vàng nhạt Độ nhớt (cp) * 9,60 15,50 18,40 8,80 14,4 19,2 -
Ghi chú: *: không đo được
- Độ nhớt: Công thức CT4, CT5, CT6, CT8 và CT9 có độ nhớt cao, không thích hợp làm dịch phun tạo hạt tầng sôi
- Thời gian lắng: Tất cả các công thức đều đạt chỉ tiêu thời gian lắng
Kết luận : Chọn các polymer và tỉ lệ phù hợp để tiếp tục các nghiên cứu tiếp theo là:
Khảo sát điều chế dịch phun chứa carvedilol và polymer đã được chọn
Bảng 3.17 Các công thức dịch phun chứa polymer và Cavedilol
- Kết quả đánh giá các chỉ tiêu vật lý các công thức dịch phun chứa polymer và carvedilol được trình bày ở Bảng 3.18
Bảng 3.18 Kết quả đánh giá các chỉ tiêu vật lý các công thức dịch phun chứa polymer và cavrdilol
CT01 CT02 CT03 CT04 CT05 CT06 CT07 CT08 CT09
Cảm quan sau khi hòa tan Dịch trong suốt, màu vàng nhạt Độ nhớt (cp) 8,90 17,65 29,10 9,70 16,50 19,60 8,90 15,30 19,80
- Độ nhớt: Tất cả các công thức đều đạt chỉ tiêu độ nhớt
- Thời gian lắng: Tất cả các công thức đều đạt chỉ tiêu thời gian lắng
Kết luận : Chọn các công thức dịch phun chứa: PVP K30 – Cavedilol, Copovidon VA64 – Cavedilol, Poloxamer 407 – Cavedilol, với các tỉ lệ polymer – Carvedilol lần lượt là:
1 – 1, 1 – 3, 1 – 5, để tiếp tục các nghiên cứu tiếp theo
3.2.2 Nghiên cứu bào chế cốm chứa HPTR Carvedilol bằng phương pháp sấy phun tạo hạt tầng sôi (cỡ lô 3.000 viên)
Kết quả khảo sát thông số cốm sấy phun chứa HPTR được trình bày ở bảng 3.19
Bảng 3.19 Kết quả khảo sát các thông số của cốm sau sấy phun
CT01 CT02 CT03 CT04 CT05 CT06 CT07 CT08 CT09
Tỷ trọng gõ 0,83 0,89 0,91 0,86 1,32 0,800 0,69 0,57 0,52 Chỉ số nén 25,01 23,73 25,42 18,42 24,14 18,03 18,31 10,26 16,30 Chỉ số Hausner 1,34 1,31 1,34 1,23 1,32 1,22 1,22 1,11 1,20 Góc nghỉ (°) 33,70 34,70 37,60 37,70 36,60 36,60 32,70 32,70 33,70 Độ ẩm (%) 0,98 1,00 0,95 1,40 1,35 1,32 3,20 4,10 4,60 Hiệu suất (%) 97,80 97,90 96,50 90,00 93,20 92,00 95,00 95,10 95,13 Hàm lượng cốm (%) 98,80 99,00 99,20 90,00 92,20 95,60 98,60 98,50 97,60 Độ hòa tan cốm (%) 100,05 99,80 99,70 87,60 89,65 90,00 89,20 92,40 94,50
Tất cả các công thức cốm sấy phun đều đạt chỉ số nén, chỉ số Hausner và góc nghỉ theo tiêu chuẩn đề ra Tuy nhiên, độ ẩm của các công thức CT 07, CT 08 và CT 09 không đạt yêu cầu Trong quá trình sấy, cốm có hiện tượng hút ẩm và dính bết vào buồng sấy.
Hiệu suất của cốm sấy phun theo các công thức CT 04, CT 05 và CT 06 không đạt yêu cầu đề ra do hiện tượng tĩnh điện trong quá trình phun Cốm bám vào thành bồn sấy, không bung đều, dẫn đến việc phải ngừng phun để xử lý nhiều lần, gây hao hụt hiệu suất.
- Hàm lượng cốm sấy phun các công thức CT 01, CT 02, CT 03, CT 07, CT 08, CT
09 công thức đạt tiêu chuẩn, trong khi CT 04, CT 05, và CT 06 không đạt yêu cầu Nguyên nhân có thể do quá trình sấy phun gặp hiện tượng bám dính vào buồng sấy, khiến cho cốm không bung đều Điều này dẫn đến việc dịch phun không phân bố đồng đều lên cốm, gây hao hụt hàm lượng hoạt chất.
Độ hòa tan của cốm sấy phun trong các công thức đều đạt tiêu chuẩn yêu cầu Tuy nhiên, các công thức CT 01, CT 02 và CT 03 thể hiện độ hòa tan cao và ổn định hơn so với các công thức khác.
- Kết quả khảo sát phân bố kích thước hạt của các cốm HPTR được trình bày trong bảng 3.20 và hình 3.1, hình 3.2, hình 3.3
+ Kết quả phân bố kích thước hạt của 3 HPTR ở tất cả các tỉ lệ đều đạt so với tiêu chuẩn đề ra ban đầu
+ Cảm quan cốm đồng nhất, khô tơi Cốm của các công thức CT 07, CT 08, CT 09 dễ bị hút ẩm nên phải bảo quản ở điều kiện T: 18 – 22 o C, RH: 15 – 25%
Bảng 3.20 Kết quả khảo sát phân bố kích thước hạt
Tỉ lệ (%) CT01 CT02 CT03 CT04 CT05 CT06 CT07 CT08 CT09
< 90 àm 59,28 43,56 54,48 59,27 71,16 38,14 48,62 6,29 8,10 + Kết quả khảo sát phân bố kích thước hạt của các cốm sấy phun PVP K30 – Cavedilol được trình bày ở các hình sau:
Hình 3.1 Phân bố kích thước hạt của 3 lô cốm sấy phun PVP K30 – Cavedilol
+ Kết quả khảo sát phân bố kích thước hạt của các cốm sấy phun Copovidon VA64 –
Cavedilol được trình bày ở các hình sau:
Hình 3.2 Phân bố kích thước hạt của cốm sấy phun Copovidon VA64 – Cavedilol
+ Kết quả khảo sát phân bố kích thước hạt của các cốm sấy phun Poloxamer 407 – Cavedilol được trình bày ở các hình sau:
Hình 3.3 Phân bố kích thước hạt của cốm sấy phun Pololxamer 407 – Cavedilol
- Kết quả độ hòa tan của các cốm HPTR được trình bày trong bảng 3.21
Bảng 3.21 Kết quả độ hòa tan của các cốm HPTR
CT01 CT02 CT03 CT04 CT05 CT06 CT07 CT08 CT09 Độ hòa tan
+ Độ hòa tan của tất cả các công thức đều đạt tiêu chuẩn đề ra Tuy nhiên các công thức
CT01, CT02, CT03 có xu hướng tốt hơn, tỉ lệ polymer đã chọn khảo sát không ảnh hưởng nhiều đến độ hòa tan
- Kết quả phân tích nhiệt vi sai (DSC) của nguyên liệu Carvedilol và các cốm HPTR được thể hiện như sau:
Hình 3.4 Kết quả DSC nguyên liệu Carvedilol
Hình 3.5 Kết quả DSC so sánh cốm HPTR và mẫu trộn vật lý PVP K30- Carvedilol
Hình 3.6 Kết quả DSC so sánh cốm HPTR và mẫu trộn vật lý
Hình 3.7 Kết quả DSC so sánh cốm HPTR và mẫu trộn vật lý
+ Phổ nguyên liệu Carvedilol: xuất hiện đỉnh tại 122,15 °C
+ Phổ mẫu trộn vật lý: xuất hiện đỉnh tương ứng với đỉnh tại 121,28 °C
Phổ các mẫu cốm HPTR cho thấy không có các đỉnh tương tự như trên phổ Cavedilol và mẫu trộn vật lý, điều này chứng minh rằng có sự biến đổi trong cấu trúc tinh thể của hoạt chất trong cốm HPTR từ dạng tinh thể sang dạng vô định hình.
Các công thức từ CT01 đến CT09 đều đạt tiêu chuẩn về độ hòa tan và kết quả DSC như mong muốn, với cốm có lưu tính tốt Tuy nhiên, do một số khó khăn trong quá trình sấy phun tạo hạt tầng sôi, đề tài đã quyết định chọn công thức chứa polymer PVP K30 – Carvedilol để tiến hành các bước nghiên cứu tiếp theo.
Mặc dù ba công thức với tỉ lệ 1:1, 3:1 và 5:1 của polymer PVP K30 – Carvedilol đều cho sản phẩm cốm sấy phun đạt yêu cầu, bài viết chỉ tập trung vào tỉ lệ 1:1 để phát triển công thức và quy trình chế tạo viên nén bao phim carvedilol 6.25 mg Tỉ lệ 3:1 và 5:1 có PVP K30 chiếm 11,72% và 19,53% trong viên nhân, vượt quá mức khuyến cáo cho tá dược polymer PVP K30, đồng thời tính chất hút ẩm của PVP K30 có thể gây khó khăn trong bảo quản và đánh giá độ ổn định Ngược lại, tỉ lệ 1:1 với 3,91% trong viên nhân là phù hợp với khuyến cáo sử dụng cho viên nén của tá dược này.
Xây dựng công thức và quy trình điều chế viên nén bao phim carvedilol 6.25
3.3.1 Khảo sát tính chất lý hóa, độ hòa tan của viên đối chiếu và xây dựng đặc điểm chất lượng kỳ vọng (QTTP) cho viên nén nghiên cứu
● Khảo sát tính chất lý hóa, độ hòa tan của viên đối chiếu
- Mẫu đối chiếu viên nén Dilatrend ® , hộp chứa 3 vỉ bấm Al/Al x 10 viên, hàm lượng carvedilol 6.25 mg, nhà sản xuất Roche, số lô: M2315B02, hạn dùng: 24052024
Hình 3.8 Mẫu hộp Dilatrend ® 6.25 mg (Roche)
Hình 3.9 Mẫu viên và vỉ viên Dilatrend ® 6.25 mg
- Kết quả đánh giá viên được trình bày trong Bảng 3.22
Bảng 3.22 Kết quả khảo sát tính chất lý hóa, độ hòa tan của viên đối chiếu
Stt Tính chất Nội dung
1 Cảm quan Viên nén trỏn, hai mặt khum có vạch ngang, một mặt có chữ “F”, số “1”, một mặt có chữ “B”, “M”
3 Thời gian rã trung bình 2,20 phút
7 Độ hòa tan trung bình 98,90 %
3.3.2 Xây dựng thuộc tính chất lượng cho sản phẩm trung gian và thành phẩm (CQAs)
Bảng 3.23 Các thuộc tính chất lượng cho sản phẩm trung gian và thành phẩm
Giai đoạn Tiêu chuẩn Yêu cầu Phương pháp kiểm tra
Cảm quan Cốm màu trắng đến trắng ngà, khô tơi, đồng nhất Quan sát Phân bố kích thước hạt
Tỷ lệ cỡ hạt từ 90 –710 àm (≥ 30%)
Máy đo kích thước hạt
Góc nghỉ α ≤ 40 o Dụng cụ đo góc nghỉ
Carr ≤ 25% Máy đo tỷ trọng cốm Chỉ số
Hausner ≤ 1,34 Máy đo tỷ trọng cốm Độ ẩm ≤ 1.5% Cân sấy ẩm hồng ngoại Độ phân tán hàm lượng hoạt chất
Hàm lượng carvedilol phải nằm trong khoảng 95,0 – 105,0% và RSD < 5%,
Phương pháp HPLC Định lượng Từ 95,0 % - 105,0 % so với hàm lượng ghi trên nhãn Phương pháp HPLC
Viên nén hình tròn, màu trắng đến trắng ngà, hai mặt khum trơn
Quan sát Độ cứng 50 – 100 N Máy đo dộ cứng
Thời gian rã ≤ 15 phút Máy thử độ rã Độ mài mòn ≤ 1,0 % Máy thừ độ mài mòn
KLTB ± 7,5% Cân phân tích ĐĐKL ± 7,5% Cân phân tích
Bề dày viên 3,5 - 4,5 mm Thước kẹp
Giai đoạn Tiêu chuẩn Yêu cầu Phương pháp kiểm tra Định lượng
Từ 90,0 % - 110,0 % so với hàm lượng ghi trên nhãn Tính trên khối lượng trung bình viên nhân
Phương pháp HPLC Độ hòa tan
≥ 80 % (Q) lượng carvedilol so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút
Cảm quan Viên nén hình tròn, màu vàng, hai mặt khum trơn Quan sát
Thời gian rã ≤ 30 phút Máy thử độ rã
KLTB ± 7,5% Cân phân tích Định lượng
Từ 90,0 % - 110,0 % so với hàm lượng ghi trên nhãn Tính trên khối lượng trung bình viên nhân
Phương pháp HPLC Độ hòa tan
≥ 80 % (Q) lượng carvedilol so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút
Cảm quan Viên nén hình tròn, màu vàng, hai mặt khum trơn Quan sát
Thời gian rã ≤ 30 phút Máy thử độ rã
KLTB ± 7,5% Cân phân tích ĐĐKL ± 7,5% Cân phân tích Định lượng
Từ 90,0 % - 110,0 % so với hàm lượng ghi trên nhãn Tính trên khối lượng trung bình viên nhân
Phương pháp HPLC Độ hòa tan
≥ 80 % (Q) lượng carvedilol so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút
3.3.3 Nghiên cứu điều chế viên nén bao phim carvedilol 6,25mg từ cốm chứa HPTR (Cỡ lô 3000 viên)
Công thức viên nén bao phim carvedilol 6.25 mg được xây dựng từ công thức cốm sấy phun chứa HPTR với thành phần PVP K30 và Carvedilol theo tỉ lệ 1:1 Phương pháp dập thẳng được sử dụng, trong đó tá dược độn là lactose monohydrate 100 mesh nhằm điều chỉnh khối lượng viên nhân đạt 160,00 mg Các tá dược rã như Crospovidon CL được khảo sát với các tỉ lệ 1%, 3%, và 5% Ngoài ra, tá dược trơn bóng magnesi stearate được sử dụng với tỉ lệ 1%, cùng với sillica, colloidal anhydrous cố định ở mức 0,5% so với khối lượng viên nhân.
Sau khi kiểm tra các tính chất vật lý và hóa học, tiến hành bao phim viên nén nghiên cứu bằng dịch bao Opadry AMB yellow hòa trong dung môi cồn - nước với tỷ lệ tăng trọng 3% như trình bày trong bảng 3.23.
- Thành phần công thức cho cỡ lô khảo sát các tỉ lệ Crospovidon CL là 500 viên được trình bày như bảng 3.24
Bảng 3.24 Các công thức cốm dập viên chứa HPTR PVP K30 - Carvedilol
Magnesium stearate 1,60 1,00 1,60 1,00 1,60 1,00 Sillica, colloidal anhydrous 0,8 0,50 0,80 0,50 0,80 0,50 Lactose monohydrate
Tổng KL viên nhân/ lô 160,00 100 160,00 100 160,00 100
Nước tinh khiết 23,00 NA 23,00 NA 23,00 NA
Tổng KL viên bao phim/ lô 164,80 NA 164,80 NA 164,80 NA
- Tóm tắt kết quả khảo sát được trình bày ở bảng Bảng 3.25
Bảng 3.25 Tóm tắt kết quả khảo sát viên nhân và viên bao phim từ cốm HPTR
Viên nhân Viên bao phim Viên chứng
CT1A CT1B CT1C CT1A CT1B CT1C Độ cứng (N) 60 - 63 66 -76 63 - 67 75 -78 82 - 84 68 -72 32 - 35 Thời gian rã
0,03 KLTB (mg) 160,20 162,00 162,50 158,20 160,25 163,40 102,60 ĐĐKL (mg) Đạt (158,00 – 162,00) Đạt (157,00 – 161,00 Đạt (158,00 – 160,00 Đạt (165,00 – 166,00 Đạt (163,00 – 165,00 Đạt (164,00 – 165,00 Đạt (104,00 – 102,00
Bề dày (mm) 3,75 3,79 3,80 3,78 3,85 3,95 2,60 Độ ẩm (%) 0,91 0,95 0,94 0,96 0,98 0,97 1,20 Định lượng (%) 99,42 99,32 99,00 99,30 99,50 99,01 99,50 Độ hòa tan (%) 97,20 97,80 101,20 97,10 97,82 101,30 98,92
- Cả 3 công thức đều có đặt tính lý hóa đạt tiêu chuẩn đề ra, Độ hòa tan có xu hướng tăng dần theo tỉ lệ tá dược rã
Mẫu viên công thức CT1C sử dụng tá dược rã với tỉ lệ 5%, giúp viên có độ rã nhanh và độ hòa tan cao tương đương với thuốc đối chứng Tỉ lệ tá dược rã 5% trên mỗi viên cũng phù hợp với khuyến cáo sử dụng tá dược Crospovidon CL trong viên nén.
- Lựa chọn công thức CT1C tương ứng với tỉ lệ tá dược rã Crospovidon CL sử dụng là 5%
- Pha chế lặp lại thêm 3 lần cỡ lô 3000 viên với công thức và tỉ lệ tá dược rã đã chọn
- Công thức lặp lại thêm 3 lần cỡ lô 3000 viên được trình bày trong bảng 3.25
Bảng 3.26 Thành phần công thức lặp lại 3 lần với tỉ lệ tá dược rã đã chọn
Thành phần nguyên liệu KL 1 viên (mg) % KL 3000 viên ( g)
Tổng KL viên nhân/ lô 160,00 100 480,00
Tổng KL viên bao phim/ lô 164,80 NA 494,40
- Tiến hành sấy phun tạo hạt tầng sôi với quy trình sản xuất như mục 2.2.2.2
- Kết quả khảo sát thông số cốm sấy phun chứa hệ phân tán rắn của 2 lô 3000 viên lặp lại được trình bày ở bảng 3.26
Bảng 3.27 Kết quả khảo sát các thông số của cốm sau sấy phun 3 lô 3000 viên
Hàm lượng cốm (%) 98,86 99,10 99,60 Độ hòa tan cốm (%) 100,05 99,98 101,10
- Kết quả khảo sát phân bố kích thước hạt cốm sấy phun của 3 lô 3000 viên được trình bày ở hình sau:
Hình 3.10 Phân bố kích thước hạt cốm sấy phun của 3 lô 3000 viên
- Tóm tắt kết quả khảo sát 3 lô 3000 viên được trình bày ở bảng Bảng 3.27
Bảng 3.28 Tóm tắt kết quả khảo sát viên nhân và viên bao phim của 3 lô 3000 viên
Công thức CT1C Viên nhân Viên bao phim Viên chứng
Lần 1 Lần 2 Lần 3 Lần 1 Lần 2 Lần 3 Độ cứng (N) 63 - 67 62 - 68 60 - 65 68 -72 68-76 68 -72 32 - 35 Thời gian rã (phút) 1’30 1’40 1’20 1’80 1’90 1’80 2’20 Độ mài mòn (%) 0,01 0,01 0,01 NA NA NA 0,03
KLTB (mg) 162,50 161,30 162,80 163,40 164,20 164,40 102,60 ĐĐKL (mg) Đạt (157,00 – 162,00) Đạt (156,00 – 162,00) Đạt (158,00 – 161,00) Đạt (164,00 – 163,00) Đạt (165,00 – 163,00) Đạt (166,00 – 165,00) Đạt (102,00 – 104,00)
Bề dày (mm) 3,80 3,82 3,70 3,95 3,86 3,80 2,60 Độ ẩm (%) 0,94 0,94 0,94 0,97 1,00 0,98 1,20 Định lượng (%) 99,00 99,30 99,50 99,01 99,60 100,20 99,50 Độ hòa tan (%) 101,20 101,80 100,50 101,30 101,20 100,60 98,92
Nhận xét: Các lô pha chế lặp lại 3 lần đều cho kết quả đạt theo yêu cầu đề ra
3.3.4 Sơ bộ đánh giá độ ổn định
Hình 3.11 Mẫu viên nén bao phim carvedilol 6.25 mg công thức CT1C lưu độ ổn định
Kết quả kiểm nghiệm viên nghiên cứu trong đều kiện lão hóa cấp tốc của 3 lô 3000 viên được trình bày trong bảng 3.28
Bảng 3.29 Kết quả độ ổn định trong đều kiện lão hóa cấp tốc
Cảm quan Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Định lượng (%) 99,01 99,01 99,60 99,01 100,20 100,01 Độ hòa tan (%) 101,30 101,20 101,20 101,20 100,60 101,50 KLTB (mg) 163,40 162,50 164,20 163,10 164,40 163,20 ĐĐKL (mg) ĐẠT ĐẠT ĐẠT ĐẠT ĐẠT ĐẠT
Cả 3 lô sản phẩm đều đạt tiêu chuẩn chất lượng đề ra, với kết quả độ hòa tan và định lượng của viên không có sự thay đổi đáng kể sau 1 tháng lưu trữ trong điều kiện cấp tốc.
Xây dựng công thức và quy trình điều chế viên nén bao phim carvedilol 6.25mg
Công thức 3 lô nâng cấp được xây dựng dựa trên công thức CT1C, thành phần cụ thể như Bảng 3.29 với quy trình sản xuất như mô tả trong mục 2.2.4
Bảng 3.30 Thành phần công thức cỡ lô pilot 30.000 viên
Thành phần nguyên liệu KL 1 viên (mg) % KL 30.000 viên (g)
Tổng KL viên nhân/ lô 160,00 100 4800,00
Tổng KL viên bao phim/ lô 164,80 NA 4944,00
- Kết quả các thông số của cốm sau sấy phun lô 1 pilot 30.000 viên được thể hiện trong bảng 3.29
- Phân bố kích thước hạt của lô 1 cỡ lô 30.000 viên được thể hiện trong hình 3.12
Bảng 3.31 Kết quả các thông số của cốm sau sấy phun lô 1 pilot 30.000 viên
Hàm lượng cốm (%) 99,80 Độ hòa tan cốm (%) 100,05
Hình 3.12 Phân bố kích thước hạt cốm sấy phun của lô 1 cỡ lô 30000 viên
- Tóm tắt kết quả lô 1 pilot 30.000 viên được trình bày ở bảng Bảng 3.30
Bảng 3.32 Tóm tắt kết quả viên nhân và viên bao phim của lô 1 pilot 30.000 viên
Viên nhân Viên bao phim Độ cứng (N) 60 - 64 62 - 68
Thời gian rã (phút) 1’20 1’60 Độ mài mòn (%) 0,01 NA
KLTB (mg) 161,50 164,40 ĐĐKL (mg) Đạt (158,00 – 161,00) Đạt (163,00 – 165,00)
Bề dày (mm) 3,84 3,96 Độ ẩm (%) 0,96 0,98 Định lượng (%) 99,98 99,97 Độ hòa tan (%) 101,05 101,20
Sau khi nâng cấp cỡ lô lên 30,000 viên, kết quả cho thấy tất cả các viên nghiên cứu đều đạt tiêu chí đề ra và không có sự khác biệt so với lô 3,000 viên.