BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC & THỰC PHẨM PHẠM NGUYỄN TRƯỜNG THỊNH VŨ THỊ KIỀU OANH TRÍCH LY POLYPHENOL TỪ CÂY NGŨ TRẢO CÓ HỖ TRỢ ENZYME PECTI[.]
BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VIỆN CƠNG NGHỆ SINH HỌC & THỰC PHẨM PHẠM NGUYỄN TRƯỜNG THỊNH VŨ THỊ KIỀU OANH TRÍCH LY POLYPHENOL TỪ CÂY NGŨ TRẢO CÓ HỖ TRỢ ENZYME PECTINASE Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Mã chuyên ngành: 7540101 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP TP.HCM VIỆN CN SINH HỌC & THỰC PHẨM - CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Bộ môn: Công nghệ thực phẩm PHIẾU GIAO ĐỀ TÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên/ nhóm sinh viên giao đề tài (sĩ số nhóm:2) (1) Phạm Nguyễn Trường Thịnh MSSV: 17070271 lớp: DHTP13C (2) Vũ Thị Kiều Oanh MSSV: 17069421 lớp: DHTP13C Ngành: Công nghệ thực phẩm Tên đề tài: - Trích ly polyphenol từ ngũ trảo (Vitex Negundo Linn) có hỗ trợ enzyme pectinase Mục tiêu: - Nghiên cứu điều kiện tối ưu để trích ly polyphenol hoạt tính kháng oxi hóa từ ngũ trảo có hỗ trợ enzyme pectinase Nội dung thực hiện: - Khảo sát xác định yếu tố (tỉ lệ nguyên liệu: dung môi, thời gian, nhiệt độ, pH nồng độ enzyme trích ly) ảnh hưởng đến trích ly polyphenol hoạt tính kháng oxi hóa ngũ trảo Tối ưu hóa q trình trích ly - Phân tích hợp chất sinh học từ dịch chiết ngũ trảo phương pháp LC- MS Kết dự kiến đạt được: - Tìm yếu tố ảnh hưởng đến việc trích ly polyphenol hoạt tính kháng oxi hóa - Xác định điều kiện tối ưu để trích ly polyphenol hoạt tính kháng oxi hóa - Xác định số hợp chất có hoạt tính sinh học từ dịch chiết Ngày giao đề tài: 21/11/2020 Ngày nộp báo cáo: 23/05/2021 Họ tên GV hướng dẫn: Ths Nguyễn Thị Trang Chữ ký: …………………… Ngày 23 tháng 05 năm 2021 Trưởng môn Cán hướng dẫn (ký ghi rõ họ tên) (ký ghi rõ họ tên) THÔNG TIN CHUNG Họ tên sinh viên: Phạm Nguyễn Trường Thịnh MSSV: 17070271 Lớp : DHTP13C Khóa: 13 Chun ngành : Cơng nghệ thực phẩm Mã chuyên ngành: 7540101 SĐT : 0969665764 Email : truongthinhn99@gmail.com Tên đề tài : Trích ly polyphenol từ ngũ trảo có hỗ trợ enzyme pectinase Người hướng dẫn: Th.S Nguyễn Thị Trang SĐT : 0909336967 Email : nguyenthitrang@iuh.edu.vn Cơ quan công tác: Viện Công nghệ Sinh học Thực phẩm, Trường Đại học Cơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh Tp Hồ Chí Minh, ngày 23 tháng năm 2021 Người hướng dẫn Sinh viên (Ký ghi rõ họ tên) (Ký ghi rõ họ tên) THÔNG TIN CHUNG Họ tên sinh viên: Vũ Thị Kiều Oanh MSSV: 17069421 Lớp : DHTP13C Khóa: 13 Chuyên ngành : Công nghệ thực phẩm Mã chuyên ngành: 7540101 SĐT : 0368897861 Email : vuoanh301@gmail.com Tên đề tài : Trích ly polyphenol từ ngũ trảo có hỗ trợ enzyme pectinase Người hướng dẫn: Th.S Nguyễn Thị Trang SĐT : 0909336967 Email : nguyenthitrang@iuh.edu.vn Cơ quan công tác : Viện Công nghệ Sinh học Thực phẩm, Trường Đại học Công nghiệp thành phố Hồ Chí Minh Tp Hồ Chí Minh, ngày 23 tháng năm 2021 Người hướng dẫn Sinh viên (Ký ghi rõ họ tên) (Ký ghi rõ họ tên) LỜI CẢM ƠN Chúng em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy cô trường Đại Học Cơng Nghiệp Thành Phố Hồ Chí Minh nói chung thầy cô Viện Công Nghệ Sinh Học Thực Phẩm nói riêng Nhờ có giúp đỡ bảo tận tình, thầy ln tạo điều kiện tốt cho chúng em để chúng em hồn thành khóa luận tốt nghiệp thời hạn đề Chúng em xin chân thành cảm ơn truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu thầy cô để hỗ trợ chúng em hồn thành khóa luận Đặc biệt, chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cô Thạc sĩ – Nguyễn Thị Trang, người sát cánh chúng em trình chúng em thực nghiên cứu Cô giúp đỡ hỗ trợ chúng em thứ để chúng em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cơ ln truyền đạt cho chúng em kinh nghiệm, kiến thức bổ ích Một lần chúng em xin chân thành gửi lời biết ơn đến cô Và chúng em gửi lời cảm ơn đến thầy cô hỗ trợ chúng em máy móc, thiết bị, dụng cụ để có đủ để hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Sau cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè động viên, đóng góp ý kiến giúp đỡ q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận tốt nghiệp Mặc dù chúng em cố gắng để hoàn thành tốt khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót, mong nhận đóng góp ý kiến thầy cô bạn Chúng em xin chân thành cảm ơn! LỜI CAM ĐOAN “Tôi xin cam đoan luận văn đề tài “Trích ly polyphenol từ ngũ trảo (Vitex Negundo Linn) có hỗ trợ enzyme pectinase.” cơng trình nghiên cứu nhóm tơi thời gian qua Nội dung lý thuyết luận văn có sử dụng số tài liệu tham khảo trình bày phần tài liệu tham khảo Mọi số liệu sử dụng phân tích luận văn kết nghiên cứu chúng tơi tự tìm hiểu, phân tích cách khách quan, trung thực, có nguồn gốc rõ ràng chưa công bố hình thức Tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm có khơng trung thực thơng tin sử dụng cơng trình nghiên cứu này.” TP Hồ Chí Minh, ngày 23 tháng năm 2021 Nhóm khóa luận TĨM TẮT ĐỀ TÀI Ngũ trảo (Vitex Negundo Linn) chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học quan trọng Trong có chứa flavonoid, axit phenolic, tinh dầu, iridoids, triterpenes, lignans có tác dụng giảm đau, chống viêm, chống oxy hóa, đặc tính bảo vệ gan, kháng khuẩn Ngồi ra, ngũ trảo có tác dụng đuổi muỗi, trừ ký sinh trùng, diệt giun, trung hòa nọc rắn, tác dụng ức chế hệ thần kinh trung ương kháng sinh Nghiên cứu tiến hành khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trích ly polyphenol hoạt tính kháng oxi hóa với hỗ trợ enzyme pectinase Hàm lượng polyphenol xác định phương pháp Folin – Ciocalteu, hoạt tính kháng oxy hóa xác định phương pháp DPPH Điều kiện trích ly bao gồm yếu tố khảo sát thực nghiệm tỉ lệ nguyên liệu: dung môi; thời gian; nhiệt độ; pH; nồng độ enzyme trích ly Tối ưu hóa q trình trích ly polyphenol có hỗ trợ enzyme thu thông số tối ưu tỉ lệ nguyên liệu: dung môi 1:16g/ml; thời gian 59 phút; nhiệt độ 500C; pH 4,5; nồng độ enzyme trích ly 1,9% Hàm lượng polyphenol hoạt tính chống oxi hóa thu 12,36 mgGAE/g DW 42,53mol Trolox/g DW Phân tích hợp chất sinh học có dịch chiết từ ngũ trảo phương pháp LC – MS thu 24 hợp chất: 7-(α-D-glucopyranosyloxy)-2,3,4,5,6- pentahydroxyheptanoic acid; 6O-α-D-galactopyranosyl-D-gluconic acid; Dihydroxybenzoic acid; Protocatechuic acid,… có hoạt tính sinh học cao như: kháng nấm, kháng khuẩn, ngăn ngừa xơ vữa động mạch, chống ung thư,… MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH ẢNH i DANH MỤC BẢNG BIỂU ii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Đối tượng phạm vi nghiên cứu 3.1 Đối tượng 3.2 Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa đề tài .3 4.1 Ý nghĩa khoa học 4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan ngũ trảo .4 1.1.1 Định danh 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.3 Nguồn gốc phân bố 1.1.4 Thành phần hợp chất có ngũ trảo 1.1.5 Công dụng ngũ trảo 1.2 Tổng quan polyphenol .7 1.2.1 Định nghĩa polyphenol 1.2.2 Phân loại polyphenol .8 1.2.3 Hoạt tính sinh học tự nhiên Polyphenol 10 1.3 Tổng quan trích ly 13 1.3.1 Nguyên lý trích ly 13 1.3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly 14 1.3.3 Các phương pháp trích ly 14 1.3.4 Trích ly có hỗ trợ enzyme .15 1.4 Tổng quan enzyme pectinase 15 1.4.1 Phân loại enzyme pectinase 16 1.4.2 Cơ chế hoạt động enzyme pectinase .17 1.4.3 Ứng dụng enzyme pectinase 20 1.5 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 21 1.5.1 Trong nước: 21 1.5.2 Ngoài nước 22 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 23 2.2 Nguyên liệu 23 2.2.1 Lá Ngũ trảo 23 2.2.2 Enzyme pectinase 24 2.3 Hóa chất, thiết bị dụng cụ thí nghiệm .24 2.3.1 Hóa chất .25 2.3.2 Thiết bị 25 2.3.3 Dụng cụ 26 2.4 Sơ đồ nghiên cứu 26 2.4.1 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu : dung môi 27 2.4.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian trích ly 28 2.4.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ trích ly 28 2.4.4 Khảo sát ảnh hưởng pH trích ly 28 2.4.5 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ enzyme pectinase trích ly 28 2.4.6 Tối ưu hóa q trình trích ly hàm lượng polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa từ ngũ trảo 28 2.4.7 Phân tích hợp chất sinh học có dịch chiết phương pháp LC- MS 30 2.5 Phương pháp nghiên cứu 30 2.5.1 phương pháp trích ly .30 2.5.2 Xác đinh phenolic tổng theo phương pháp Folin- Ciocalteu 30 2.5.3 Xác định hoạt tính chống oxy hóa theo phương pháp DPPH .32 2.5.4 Phương pháp xử lý số liệu .34 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 35 3.1 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ ngun liệu: dung mơi trích ly 35 3.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian trích ly 37 3.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ trích ly .39 3.4 Khảo sát ảnh hưởng pH trích ly .41 3.5 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ enzyme trích ly .42 3.6 Tối ưu hóa q trình trích ly hàm lượng polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa từ ngũ trảo .44 3.7 Phân tích hợp chất sinh học có dịch chiết phương pháp LC -MS 51 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 56 4.1 Kết luận 56 4.2 Kiến nghị 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ LỤC 75 ... - Trích ly polyphenol từ ngũ trảo (Vitex Negundo Linn) có hỗ trợ enzyme pectinase Mục tiêu: - Nghiên cứu điều kiện tối ưu để trích ly polyphenol hoạt tính kháng oxi hóa từ ngũ trảo có hỗ trợ enzyme. .. ly polyphenol từ ngũ trảo có hỗ trợ enzyme pectinase với hàm mục tiêu hàm lượng polyphenol hoạt tính chống oxi hóa − Tối ưu hóa q trình trích ly polyphenol từ ngũ trảo có hỗ trợ enzyme pectinase. .. từ ngũ trảo (Vitex Negundo Linn) có hỗ trợ enzyme pectinase? ?? Mục tiêu đề tài − Xây dựng quy trình trích ly hợp chất polyphenol từ ngũ trảo − Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất trích ly polyphenol