Trích ly Polyphenol từ lá bàng

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TÁT THÀNH KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC VÀ THỤC PHẤM —caAgo— NGUYEN TAT THANH BÁO CÁO LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐÈ TÀI: TRÍCH LY POLYPHENOL TỪ LÁ BÀNG GVHD: GVC THS BÙI THỊ MINH THỦY THS NGUYỀN QUỐC DUY SVTH: TRẦN THỊ HOÀNG QUYÊN MSSV: 1311518339 TP Hồ Chí Minh, năm 2016 MỤC LỤC NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẦN iii GIÁO VIÊN PHẢN BIỆN iv LỜI CẢM ƠN V LỜI MỞ ĐẦU X CHƯƠNG 1: TỐNG QUAN Giới thiệu bàng 1.1 1.1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.2 Thành phần bàng 1.1.3 Công dụng cùa bàng Khái quát ve Polyphenol 1.2 1.2.1 Tính chất 1.2.2 ứng dụng Quá trình tríchly 1.3 13.1 Biến đổi nguyên liệu 1.3.2 Các yếu tố ảnh huởng .5 1.3.3 Lựa chọn dung mơi trích ly 1.4 Tông quan chất màu thực phẩm 1.4.2 Khái quát chất màu 1.4.3 Nguyên tắc sử dụng chất màu thực phẩm CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 11 2.1 Nguyên liệu 11 2.1.1 Lá bàng 11 2.1.2 Hóa chất 11 2.1.3 Thiết bị 11 2.1.4 Thời gian địa điểm nghiên cứu 12 2.2 Quy trình thu nhận 13 2.2.1 Sơ đồ thu nhận 13 2.2.2 Thuyết minh quy trình 14 2.3 Sơ đồ nghiên cứu 15 2.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát nồng độ dung mơi 16 vi 2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát nhiệt độ trích ly 17 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát thời gian trích ly 17 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát tỷ lệ dung môi 17 2.4 Phương pháp phân tích 17 2.4.1 Phương pháp xác định hàm lượng ẩm 17 2.4.2 Định lượng polyphenol tong bang folin - ciocalteu 18 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 19 3.1 Khảo sát ảnh hưởng nguyên liệu 19 3.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ dung môi 19 3.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ trích ly 20 3.4 Khảo sát ảnh hưởng cùa thời gian trích ly 21 3.5 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ dung môi nguyên liệu 22 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 24 4.1 Kết luận 24 4.2 Khuyến nghị 24 vii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Bảng số chất màu tự nhiên Bảng 1.2 Bảng so chất màu nhân tạo Bảng 1.3 Liều lượng sử dụng số chất màu vô Bảng 3.1 Hàm ẩm bàng 19 viii DANH MỤC HINH Hình 1.1 Cây bàng Hình 2.1 Lá bàng .11 Hình 2.2 Máy đo quang 11 Hình 2.3 Máy xay Khaluck 11 Hình 2.4 Bếp điện 12 Hình 2.5 Cân điện tử 12 Hình 2.6 Máy sấy 12 Hình 2.7 Sơ đồ quy trình thu nhận polyphenol 13 Hình 3.1 Biếu đồ thể ảnh hưởng nồng độ dung môi lên hàm lượng polyphenol 20 Hình 3.2 Biểu đo the ảnh hưởng nhiệt độ lên hàm lượng polyphenol 21 Hình 3.3 Biểu đồ thể ảnh hưởng thời gian lên hàm lượng polyphenol 22 Hình 3.4 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi lên hàm lượng polyphenol 23 ix LỜI MỞ ĐẦU Khí hậu nước ta quanh năm nóng ẩm, nên hệ thực vật vô phong phú đa dạng Cùng với y học cồ truyền phát triển lâu đời, người tìm đến với nhiên thiên lựa chọn loài thiên nhiên để làm thuốc chừa bệnh, bồi bo the Mọi người tin thiên nhiên hiền hịa giúp họ trì sức khoẻ, việc tạo loại thực phẩm chức nhiều dạng khác như: bo sung vào nước giải khát, tạo viên nang “thực phẩm sạch”, “ thực phẩm an tồn” thuật ngữ báo chí nhắc nhiều tờ báo Nhiều người ngày quan tâm đến sức khỏe có hàng loạt tin tức đưa tin vấn đề thực phàm chứa chất gây ung thư, gây hại cho Vì lý đó, mà chúng tơi chọn loại nhiên thiên đe nghiên cứu thành phần chúng mà cụ the chúng tơi muốn nghiên cứu hợp chất kháng oxy hố (polyphenol) bàng ứng dụng chúng vào công nghệ thực phẩm Đe tài nghiên cứu phòng thí nghiệm trường Đại Học Nguyễn Tất Thành vơi hướng dần hồ trợ cô Bùi Thị Minh Thủy thầy Nguyễn Quốc Duy Đe tài có nội dung cần khảo sát sau: Khảo sát nguyên liệu Khảo sát nồng độ dung mơi trích ly Khảo sát nhiệt độ trích ly Khảo sát thời gian trích ly Khảo sát tỷ lệ dung mơi X CHƯƠNG 1: TÔNG QUAN 1.1 Giới thiệu bàng 1.1.1 Đặc điểm thực vật Tên khoa học: Terminalia catappa L Tên khác: Quang Lang Tên nước ngoài: Indian almond - tree, tropical almond (Anh), badamier (Pháp) Họ: Trâm bầu (Combretaceae) Hình 1.1 Cây bàng Cây gồ nhỏ cao 10-15 m mọc đứng, tiết diện tròn, thân già màu nâu đậm xù xì, thân non màu xanh có nốt sần màu nâu xám lông mịn màu nâu đỏ cành Lá: đơn, nguyên, mọc cách tập trung nhiều cành, dài 15-25 cm, rộng 9-13 cm, màu xanh mặt đậm mặt dưới, có nốt sần trịn đáy phiến cạnh hai bên gân Gân hình lơng chim nơi rõ mặt, 9-11 cặp gân phụ kéo dài tận bìa lá; lơng màu nâu đỏ rải rác mặt gân Cuống hình trụ gần trịn dài 1-1,7 cm, có nhiều lơng mịn màu nâu đỏ lông cứng thăng đứng màu đen nơi đính Khơng có kèm Cụm hoa: gié dài thòng nách gần cành hay cành, gié mang hoa lưỡng tính khoảng 1/5 phía gốc hoa đực bầu nỗn bị trụy gié mang toàn hoa đực Hoa: đều, lưỡng tính đơn tính đực Đài hoa: đài đều, màu trắng xanh, dính bên thành ống ngắn bên chia thùy hình tam giác, nhiều lơng mịn màu trắng dài 0,5-1 mm mặt trong, tiền khai van Khơng có cánh hoa Bộ nhị: đều, rời, đính thành vịng họng đài, vịng ngồi xen kè với đài, nhị dạng sợi dài 3-4 mm, màu trắng, bao phấn màu vàng, ơ, hình bầu dục có hai thùy, nứt dọc, hướng trong, hạt phấn màu vàng xanh, hình bầu dục đầu rộng có nhiều rãnh, dài 27,5 |im rộng 10 pm Bộ nhụy: Bầu màu xanh, dài 1,5-2 mm, mặt ngồi có nhiều lơng trắng mịn; nỗn, ơ, nỗn đính nóc; vịi nhụy màu vàng, dạng sợi phình gốc dài khoảng mm; đầu nhụy hình điểm Quả hạch, non hình bầu dục đầu nhọn màu xanh, chín gần trịn màu vàng, vỏ sần sùi, dài 4-6 cm, rộng 3-4 cm Hạt hình bầu dục dài 2-2,5 cm, màu vàng nhạt có lớp áo mỏng dễ bóc Bàng trồng mọc hoang vùng duyên hải khắp nước ta, đồng trồng nhiều tàn cho bóng mát Ra hoa kết trái quanh năm Cây to tán sum suê nên trồng lấy bóng mát trường học, cơng sở Cây Bàng phân bố Việt Nam, Campuchia, Ẩn Độ, Trung Quốc, Malayxia, Nuven Calêdoni, đảo Thái Bình Dương Madagasca nước ta mọc từ Quảng Ninh tới Vũng Tàu-Cơn Đảo đảo ngồi khơi từ bắc nam Cây rụng lá, ưa sáng, mọc tốt đồng đồi núi sỏi cát ven biển, tái sinh mạnh Ra non vào tháng Mùa hoa: Tháng 3-7, mùa quả: tháng 4-9 Bộ phận dùng lá, vỏ cây, nhân hạt {Folium, Cortex et Semen Terminaliae catappae) Các phận có chưa nhiều chất chát (tanin) 1.1.2 Thành phần bàng Vỏ thân bàng chứa 25-35% tanin pyrogalic tanin catechic Lá chứa corigalin, acid galic acid elagic, brevifolin carboxylic acid, flavonoid (chang hạn kamferol hay quercetin) chat tanin (như punicalin, punicalagin, tercatin), chat saponin phytosterol vỏ gồ chứa acid elagic, acid gallic, (+) - catechin, (-) - epicatechin (+) - leucocyanidin, nhân chứa 52,02% chat béo 25,42% protein, 5.98% đường 1.1.3 Công dụng bàng Cao vỏ thân bàng (bỏ lớp vỏ đen bên ngồi) có tác dụng lợi tiểu, cường tim làm săn Cao methanol có tác dụng giảm co thắt ruột thỏ lập Lá dùng làm thuốc chừa cảm sốt, làm mồ hôi, chừa tê thấp lỵ Do chứa nhiều chất nên vỏ thân bàng sử dụng nhiều y học cổ truyền khác vào so mục đích Chăng hạn, Đài Loan người ta dùng rụng làm thuốc chữa số bệnh liên quan tới gan Tại Suriname, chè làm từ bàng dùng để chữa bệnh lỵ tiêu chảy Người ta cho bàng có chứa chất ngăn cản ung thư (mặc dù không thấy chúng thể khả chống ung thư) đặc trưng chống ơxy hóa chống phá hủy nhiễm sắc thể Nhựa non trộn với dầu hạt bơng nấu chín thứ thuốc để chữa hủi Búp non phoi khô tán bột rắc trị ghẻ, trị sâu quảng, sắc đặc ngậm trị sâu Dùng tươi, xào nóng đe đắp chườm nơi đau nhức Vỏ thân sắc uống trị lỵ tiêu chảy, rửa vết loét, vết thương Hạt nấu uống để trị tiêu chảy máu 1.2 Khái quát Polyphenol 1.2.1 Tính chất Polyphenol hợp chất có khả chống oxi hóa vơ hiệu Hợp chất polyphenol tồn tự nhiên nhiều loại trái cây, rau quả, ngũ cốc, rượu vang đỏ, trà, cà phê, sô-cô-la, loại đậu khô Những trái nho, táo, lê, anh đào loại mọng khác chứa đến 200-300 mg polyphenol mồi gram trái tươi Trong ly rượu vang đỏ, tách trà hay cà phê có chứa khoảng 100 mg polyphenol Trong thực phẩm, hợp chat polyphenol chất đóng vai trị tạo nên màu sắc, hương thơm, vị đắng chát thực phàm Các hợp chat polyphenol phân loại thành nhiều nhóm khác theo chức cấu trúc số vịng phenol phân tử xung quanh vịng có hợp chất Thông thường, hợp chat polyphenol chia thành nhóm gồm: • Phenolics axit (có trà, cà phê, nam việt quốc, kiwi, mận đào, táo anh đào) • Flavonoids (có trà xanh, loại trái cây, rau quả, loại đậu, ruợu vang đỏ, trà xanh) • Stilbenes (có rượu vang đỏ, đậu phơng) • Lignans (có loại đậu, ngũ cốc, trái cây, tảo, rong biển) Flavonoid chứa flavanol gồm catechins, gallocatechin trimeric procyanidin thành phần mang lại nhiều tác dụng cho hợp chat polyphenol như: kháng viêm chong oxi hóa, bảo vệ tế bào khỏi phá hoại gốc tự 1.2.2 ủng dụng Từ cuối kỷ 20, nghiên cứu dịch tễ học phân tích cho thấy dùng lâu dài nguồn thực phấm từ thực vật giàu polyphenol bảo vệ thể tránh khỏi trình phát triển nhiều bệnh như: ung thư, tim mạch, tiểu đường, lỗng xương, thối hóa thần kinh Do tác dụng tuyệt vời sức khỏe nên hợp chat polyphenol thực phẩm giàu polyphenol chiết xuất thành nhiều dạng thực phẩm chức dùng đe hỗ trợ sức khỏe cho người 1.3 Q trình trích ly Là q trình hồ tan chọn lọc hay nhiều cấu tử có mầu nguyên liệu cách cho nguyên liệu tiếp xúc với dung mơi Động lực q trình trích ly lệch nong độ cấu tử nguyên liệu dung môi Đây q trình truyền khối Trong q trình trích ly dung mơi thường dạng pha lỏng, cịn mầu ngun liệu có the dạng pha rắn pha lỏng Neu mầu nguyên liệu dạng pha rắn trình gọi trích ly rắn - lỏng Cịn mầu nguyên liệu dạng lỏng trình trích ly lỏng - lỏng Mục đích đe chiết rút cấu tử cần thu nhận có nguyên liệu ban đầu làm tăng nồng độ chúng sản phàm cuối 13.1 Biến đoi nguyên liệu - Hố lý: nhóm biến đổi quan trọng q trình trích ly Đó hồ tan cấu tử từ nguyên liệu vào dung môi Tuỳ theo dung môi mà thành phần hàm lượng cấu tử hoà tan thu dịch trích thay đổi - Vật lý: khếch tán biến đổi vật liệu quan trọng trình trích ly Các phân tử chất tan sè dịch chuyển từ tâm nguyên liệu đến vùng bề mặt dịch chuyển từ vùng bề mặt nguyên liệu vào dung môi Sự khếch tán sè giúp cho 2.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát nồng độ dung mơi -Yếu tố khảo sát: nồng độ ethanol 0%v/v, 20% v/v, 40% v/v, 60% v/v, 80% v/v, 99,5% v/v 16 -Yeu tố cố định: +Tỷ lệ nguyên liệu với dung môi (g/ml); 1:30 +Nhiệt độ (°C): 30°C +Thời gian (phút): 10 phút -Hàm mục tiệu: hàm lượng polyphenol cao 2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát nhiệt độ trích ly - Yếu tố khảo sát: nhiệt độ trích ly 20°C, 40°C, 50°C, 60°C, 70°C - Yeu to co định: +Nồng độ dung mơi (%): lấy giá trị tốt thí nghiệm +Tỷ lệ nguyên liệu với dung môi (g/ml): 1:30 +Thời gian (phút): 10 phút - Hàm mục tiêu: hàm lượng polyphenol cao 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát thời gian trích ly - Yếu tố khảo sát: thời gian 10 phút, 20 phút, 30 phút, 60 phút, 180 phút - Yeu tố cố định: +Nồng độ dung mơi (%): lấy giá trị tốt thí nghiệm +Thời gian (phút): lấy giá trị cao thí nghiệm +Tỷ lệ ngun liệu với dung mơi (g/ml): 1:30 - Hàm mục tiệu: hàm lượng polyphenol cao 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát tỷ lệ dung môi -Yếu tố khảo sát: tỷ lệ nguyên liệu với dung môi 1:20, 1:30, 1:40, 1:50, 1:60, 1:70, -Yeu to co định: +Nồng độ dung môi (%): lấy giá trị tốt thí nghiệm +Nhiệt độ: lấy giá trị cao thí nghiệm +Thời gian (phút): lấy giá trị cao thí nghiệm -Hàm mục tiệu: hàm lượng polyphenol cao 2.4 Phương pháp phân tích 2.4.1 Phương pháp xác định hàm lượng ẩm AO AC 17 2.4.2 Định lượng polyphenol tổng folin - ciocalteu Phương pháp Tillman (TCVN 9745-1:2013 ,(ISO 14502-1:2005)) 2.5 Phưong pháp xử lý số liệu -Xử lý kết phương pháp phân tích phương sai phần mềm SPSS -Xử lý số liệu ve4d9o62 thị bang Microsoft Excel 18 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Khảo sát ảnh hưởng nguyên liệu Chúng khảo sát chủ yếu hàm ấm nguyên liệu, thời gian không đủ đe khảo sát thành phần cua3nguyen6 liệu nên hàm ẩm cần thiết Bang 3.1 Hàm ẩm bàng Nguyên liệu Hàm ẩm (%) Lá bàng bở gân 69.24 ±0.50 Lá bàng 67.35 ±0.54 3.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ dung môi Đối với q trình chiết polyphenol thi dung mơi sè định đáng kể hiệu suất trích ly Vì vậy, việc tìm kiếm lựa chọn dung mơi phù hợp sè nâng cao hiệu trình Tiến hành khảo sát dung mơi trích ly nong độ khác đe chọn dung mơi trích ly tối ưu cho nguyên liệu bàng Nihal Turkmen cộng (2007) tiến hành trích ly polyphenol từ trà đen Các dung môi khảo sát bao gồm acetone, ethanol, dimethylformamide, methanol Ket cho thấy trà đen rat nhạy cảm với chất chiết xuất, trừ dung môi methanol Trần Quang Hiếu (2010) tiến hành nghiên cứu trích ly polyphenol từ mận kết cho thấy nồng độ dung môi ethanol 80% đạt hiệu suất cao Nguyền Xuân Trình (2013) tiến hành nghiên cứu trích ly polyphenol từ sa kê dung môi ethanol, kết cho thấy nong độ dung mơi 70% cho hiệu suất polyphenol tốt Từ nghiên cứu trên, chúng tơi chọn ethanol cho q trình trích ly polyphenol, ethanol dung mơi có khả thấm xun qua mang tế bào thực vật, có the tạo nối hydrogen liên phân tử với nhóm phân cực khác, nên xem dung mơi vạn năng, có the định lượngvà tách chiết chất có độ phân cực mạnh, vừa yếu sắc tố từ tế bào tự dường hiệu so với dung mơi khác Tiến hành thí nghiệm, mồi mầu 5g bàng, với nồng độ dung môi 0%, 20%, 40%, 60%, 80%, 99.5%, với điều kiện nhiệt độ 30°C, thời gian phút, theo tỷ lệ 1:30 Ket khảo sát trình bày hình 3.1 19 Nồng độ ethanol (% v/v) Hình 3.1 Biểu đồ thể ảnh hưởng nồng độ dung môỉ lên hàm lượng polyphenol Theo đo thị cho thấy tăng nồng độ dung mơi ethanol hàm lượng polyphenol tăng, lý biến thiên giá trị hàm lượng polyphenol nồng độ ethanol cao thích hợp làm biến tính phá vờ màng tế bào nguyên liệu dần đến khả trích ly cao, hàm lượng polyphenol tăng cực đại nong độ từ 60% v/v (247,46mg/L), dung mơi ethanol có khả thấm xun qua màng tế bào thực vật dần đến khả trích ly họp chất hữu ke polyphenol tốt Ket sau khảo sát lựa chọn giá trị nồng độ ethanol đe thu nhận polyphenol cao ethanol 60% v/v 80% v/v ANOVA nên chọn giá trị nồng độ ethanol 60% v/v để cố định cho thí nghiệm 3.3 Khảo sát ảnh hưởng ciia nhiệt độ trích ly Từ nghiên cứu trên, tiến hành khảo sát hàm lượng polyphenol thí nghiệm, mồi mẫu 5g bàng, với nong độ dung môi 60% v/v với điều kiện nhiệt độ 20°C, 30°C, 40°C, 50°C, 60°C, 70°C thời gian phút, tỷ lệ 1:30 Kết khảo sát trình bày bảng 3.2 20 300 Hình 3.2 Biểu đồ thể ảnh hưởng nhiệt độ lên hàm lượng polyphenol Qua đồ thị nhận thấy tăng nhiệt độ trích ly hàm lượng polyphenol thu nhận tăng đạt cực đại 40°C (254.43 mg/L) sau giảm Qua đồ thị ta thấy khoảng nhiệt độ từ 30°C lượng polyphenol chiết tách tăng Điều giải thích, nhiệt độ tăng làm giảm độ nhớt dung dịch làm tăng chuyển động phân tử chất tan có nguyên liệu thúc đẩy trình khuếch tán diễn nhanh nâng cao hiệu trích ly tăng nhiệt độ cao dần đến q trình oxi hóa diên nhanh làm hoạt tính dịch trích Ket sau khảo sát nhận thấy hàm lượng polyphenol thu nhận cao nhiệt độ tăng từ 30 - 40°C Do chúng tơi chọn giá trị thời gian trích ly 30°C đe giảm tiêu tốn lượng cố định cho thí nghiệm sau 3.4 Khảo sát thời gian trích ly Sau chọn giá trị dung mơi, nhiệt độ trích ly, chúng tơi tiến hành khảo sát thời gian trích ly polyphenol Trần Quang Hiếu (2010) tiến hành nghiên cứu trích ly polyphenol từ mận kết cho thấy hàm lượng polyphenol thời gian trích ly 60 phút cho hiệu suất tối ưu thời gian đủ đe dung mơi có the thấm vào tế bào trích ly hiệu suất 21 polyphenol cao Dựa vào nghiên cứu tiến hành khảo sát khoảng thời gian từ 10 phút, 20 phút, 60 phút, 180 phút, 300 phút kết trình bày Hàm lượng polyphenol (mg/L) bảng 3.3 Hình 3.3 Biểu đồ thể ảnh hưởng thời gian lên hàm lượng polyphenol Qua đo thị chúng tơi nhận thấy thịi gian trích ly lên hàm lượng polyphenol có chiều hướng tăng dần tăng cực đại 60 phút, sau giảm dần Thời gian cần phải đủ đe trích ly polyphenol khỏi nguyên liệu, thời gian vượt khoảng thời gian tối ưu polyphenol có the bị oxi hóa, làm ảnh hưởng đến chất lượng polyphenol đồng thời làm tiêu tốn nhiều thời gian không mang lại hiệu kinh tế Ket sau khảo sát nhận thấy hàm lượng polyphenol thu nhận cao thời gian 60 phút Do chúng tơi chọn giá trị thời gian trích ly 60 phút để cố định cho thí nghiệm sau 3.5 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ dung môi nguyên liệu Tỷ lệ dung mơi với ngun liệu ũng gía trị quan trọng q trình trích ly polyphenol Trần Quang Hiếu (2010) tiến hành nghiên cứu trích ly polyphenol từ mận kết cho thấy tỷ lệ 1:30 có hàm lượng polyphenol cao Dựa vào nghiên cứu chúng tối tiến hành khảo sát thông so 1:20, 1:30, 1:40, 1:50, 1:60, 1:70, 1:80, 1:90 với nồng độ dung môi 60% v/v, thời gian giờ, nhiệt độ 30°C kết quả: 22 Hàm lượng Polyphenol (%) Hình 3.4 Anh hưởng tỷ lệ dung môi lên hàm lượng polyphenol Qua biệu đồ thị nhận thấy tăng tỷ lệ dung mơi hàm lượng polyphenol thu nhận tăng ôn định đạt cực đại tỷ lệ 1:90 (437.34 mg/L) Do vậy, ta phải xét tỷ lệ tối ưu cho hàm lượng polyphenol nhiều vần phù họp tiết kiệm chi phí Ket sau khảo sát chúng tơi nhận thấy hàm lượng polyphenol thu nhận cao tỉ lệ 1:90 Nhưng đế tiết kiệm chi phí chọn giá trị tỉ lệ dung môi 1:60 (kết xử lý ANOVA nhau), kết họp với giá trị khảo sát lựa chọn cho quy trình trích ly polyphenol từ bàng 23 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Chúng chọn bàng nguyên liệu để thu nhận cao polyphenol bàng có hàm lượng polyphenol tong cao loại nguyên liệu đu đủ bình bát, bàng trồng rộng rãi nên nguồn nguyên liệu dễ tìm cho nghiên cứu Qua thời gian khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly polyphenol từ bàng, đưa kết luận sau: Đã sát định hàm ẩm bàng tươi có gân 67.35 ± 0.50 (%), cắt bỏ gân 69.24 ± 0.54 (%) Các giá trị ảnh hưởng đến quy trình trích ly polyphenol điều kiện tốt dung môi cho hàm lượng cao ethanol 60% v/v tăng 60% v/v hàm lượng polyphenol giảm Nhiệt độ 30°C tốt tăng hàm lượng giảm, tăng nhiệt độ cao hàm lượng polyphenol bị oxi hóa Thời gian 60 phút tối ưu tăng ảnh hưởng den chất lượng polyphenol làm tiêu tồn thời gian Tuy tỷ lệ 1:90 cao tỷ lệ 1:60 tối ưu tăng từ tỷ lệ 1:60 hàm lượng tăng không đáng kể lại tốn kinh tế nên chọn tỷ lệ 1:60 4.2 Khuyến nghị Do thời gian tương đoi ngắn điều kiện tiếp cận sử dụng thiết bị kỳ thuật cao cịn nhiều hạn chế nên chúng tơi đề nghị nhà trường khoa có nhiều thời gian thiết bị cho khố học sau có nhiều thời gian thiết bị thực tốt Phát triển nguyên liệu khác có nhiều hàm lượng polyphenol đặc biệt hợp chất kháng oxy hoá nhằm làm phong phú nguồn nguyên liệu Sử dụng phương pháp khác đe chiết ly polyphenol đe tìm hướng dề thực Khảo sát trình tinh polyphenol ứng dụng cùa chúng vào thực phẩm 24 PHỤ LỤC A- Phương pháp phân tích A.l Phương pháp xác định hàm ẩm a Nguyên tắc Dùng sức nóng làm bay hết nước mẫu Cân trọng lượng mầu trước sau sấy khơ, từ tính phần trăm lượng nước có mẫu b Cách tiến hành Mầu đem cân, đánh số thứ tự, cho vào tủ sấy, sấy nhiệt độ 60°C thời gian Sau sấy cân lại mầu ghi lại kết A.2 Phương pháp định lượng polyphenol tổng a Nguyên tắc Phương pháp Folin - Ciocalteu phương pháp phổ biến sử dụng đe phân tích hàm lượng polyphenol tong, polyphenol khử tác nhân Folin (dung dịch màu vàng polyphosphattungstenate molydate) môi trường base nhẹ tạo màu xanh da trời đậm b Tiến hành > Chuẩn bị mẫu 5g mầu chần nhiệt độ 90°C giây sau xay, lọc lấy dịch polyphenol thơ > Phân tích mẫu 0.5 mL dịch polyphenol thô-> 1mL Follin -> 10mL nước cất -> ủ phút nhiệt độ phòng -à 5mL Na2CO3 (20%) -à ủ nhiệt độ phòng -ỳ đo uv bước sóng 740nm > Dựng đường chuẩn polyphenol Cách tiên hành: thay acid gallic dịch polyphenol thô với nồng độ thay đổi làm tuong tự bước c Ket Hàm lượng polyphenol tống tính tốn dựa độ hấp thu đường chuẩn sử dụng acid gallic làm chất chuẩn Kết biểu diễn dạng mg đương lượng acid gallic (GAE - gallic acid equivalent)/!, B- Ket thí nghiệm TN1: Khảo sát nồng độ dung môi Nồng độ (%) Hiệu suất (%) 234.25 ±7.16 20 21.96 ± 3.21 40 240.44 ± 8.5 60 247.46 ±9.61 80 246.83 ± 5.80 99.5 208.87 ±8.53 Subset for alpha = 0.05 Nồng độ N 99.50 0.6903 20.00 00 0.7753 40.00 0.7960 80.00 0.8174 60.00 0.8195 Sig 0.7262 1.000 1.000 0.195 0.7960 0.166 TN2: Khảo sát nhiệt độ trích ly Nhiệt độ (°C) Hiệu suất (%) 20 245.12 ±3.30 30 250.45 ±5.80 40 254.43 ±3.41 50 254.23 ±3.64 60 251.19 ± 6.61 70 241.64 ±5.82 Subset for alpha = 0.05 Nhiệt độ N 70.00 0.8000 20.00 0.8117 30.00 0.8295 0.8295 60.00 0.8320 0.8320 50.00 0.8422 40.00 0.8428 Sig 0.237 0.8117 0.055 0.218 TN3: Khảo sát thởi gian trích ly Thời gian (phút) Hiệu suất (%) 224.75 ±4.17 10 221.12 ±8.93 20 228.41 ± 10.44 60 251.92 ± 5.81 180 242.04 ± 1.067 300 234.30 ±7.43 Subset for alpha = 0.05 Thời gian N 10.00 0.7313 2.00 0.7434 20.00 0.7557 300.00 180.00 60.00 Sig 0.7557 0.7754 0.7754 0.8013 0.8344 0.102 0.162 0.069 1.000 TN4: Khảo sát tỷ lệ dung môi Tỷ lệ nguyên liệu/dung môi Hiệu suất polyphenol (%) 1:20 219.02 ±7.37 1:30 216.95 ± 10.10 1:40 230.44 ±6.10 1:50 249.85 ±6.60 1:60 306.44 ± 134.6 1:70 390.46 ±20.3 1:80 426.79 ± 15.53 1:90 437.34 ± 14.69 Subset for alpha = 0.05 Tỷ lệ N 30.00 0.7173 20.00 0.7242 40.00 50.00 60.00 70.00 1.4200 80.00 1.4200 90.00 1.4553 Sig 0.7242 0.7674 0.8275 1.1865 0.758 0.060 1.000 1.000 0.142 TÀI LIỆU THAM THẢO [1] Turkmen, N., & Velioglu, Y s (2007) Determination of alkaloids and phenolic compounds in black tea processed by two different methods in different plucking seasons Journal of the Science of Food and Agriculture, 87(7), 1408-1416 [2] Thế, T D., Độ, V V., & Sương, N K (2010) Bước đầu trồng thử nghiệm tách chiết hoạt chất miraculin trái thần kỳ (Synsepalum dulcificum daniell) Tạp chi Phát triển Khoa học Công nghệ, 73(1 T), 54-61 [3] Hồ Viết, Ọ (2006) Phân tích lý hóa [4] Quan, p T., Hang, T V., Ha, N H., De, N X., & Tuyen, T N (2006) Microwave-assisted extraction of polyphenols from fresh tea shoot Science and Technology Development, 9(8), 69-74 ... đoạn trích ly tiếp theo, làm tăng khả khuếch tán thẩm thấu chất vào dung môi, làm tăng khả trích ly d Trích ly Trích ly trình tách một so chất tan dung môi chất lỏng Dung môi đe trích ly polyphenol. .. lựa chọn cho quy trình trích ly polyphenol từ bàng 23 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Chúng chọn bàng nguyên liệu để thu nhận cao polyphenol bàng có hàm lượng polyphenol tong cao loại... tiến hành nghiên cứu trích ly polyphenol từ mận kết cho thấy nồng độ dung mơi ethanol 80% đạt hiệu suất cao Nguyền Xn Trình (2013) tiến hành nghiên cứu trích ly polyphenol từ sa kê dung môi ethanol,