Nhân giống in vitro cây keo lai (Acacia hybrid).pdf

ĐẠI HOC NGUYỄN TẤT THÀNH NGUYEN TAT THANH THỤC HỌC - THỤC HÀNH - THỤC DANH - THỤC NGHIỆP KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TĨT NGHIỆP NHÂN GIỐNG IN VITRO CNN KEO LAI (Acacia hybrid) Sinh viên thực : Lê Văn Bảo MSSV : 1411531964 GVHD : ThS Đồ Tiến Vinh ThS Mai Thị Phương Hoa TP HCM, tháng năm2019 ĐẠI HOC NGUYỄN TẤT THÀNH NGUYEN TAT THANH THỤC HỌC - THỤC HÀNH - THỤC DANH - THỤC NGHIỆP KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TÓT NGHIỆP NHÂN GIỐNG IN VITRO CNN KEO LAI (Acacia hybrid) Sinh viên thực : Lê Văn Bảo MSSV : 1411531964 GVHD : ThS Đồ Tiến Vinh ThS Mai Thị Phương Hoa TP HCM, tháng năm2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYÊN TÁT THÀNH KHOA CÒNG NGHỆ SINH HỌC CỘNG HỊA XÀ HƠI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc - -oOo - NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP Họ tên: Lê Văn Bảo MSSV: 1411531964 Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Lớp: 14DSH02 Đầu đề luận văn: Nhân giống ìn vitro Keo lai (Acacia hybrid) Mục tiêu Xác định yeu tố mơi truờng thích họp để nhân giống invitro Keo lai Nội dung: - Vô trùng mẫu Keo lai - Khảo sát thành phần khoáng nuôi cấy Keo lai Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng đen khả tạo chồi Keo lai - Khảo sát ảnh hưởng Auxin đến trình tạo rễ Keo lai Thời gian thực hiện: tháng 02/2019 đến tháng 8/2019 Người hướng dẫn chính: ThS Đồ Tiến Vinh Người hướng dần phụ: ThS Mai Thị Phương Hoa Nội dung yêu cầu KLTN thông qua Bộ môn TP HCM, ngày thảng năm20 Bộ MÔN (Ký ghi rõ họ tên) CÁN Bộ HƯỚNG DẲN (Ký ghi rõ họ tên) ThS Đồ Tiến Vinh LỜI CẢM ƠN Trên thực tế khơng có thành cơng mà không gắn liền với hồ trợ, giúp đỡ dù hay nhiều, dù trực tiếp hay gián tiếp người khác Trong suốt thời gian từ bắt đầu học tập trường đến nay, em nhận nhiều quan tâm giúp đờ q Thầy Cơ, gia đình bạn bè Trước hết, em xin gửi lời cảm on đến đến thầy cô khoa Công nghệ sinh học trường Đại học Nguyễn Tất Thành Nhờ quan tâm, dạy dồ bảo nhiệt tình chu đáo thầy cơ, em hồn thành luận án tơt nghiệp Đăt biệt, cho em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Ths Đồ Tiến Vinh cô Ths Mai Thị Phương Hoa đà quan tâm giúp đờ bảo, hướng dẫn em trình làm luận án tốt nghiệp Và cuối cùng, em xin bày tỏ lòng biết ơn đến ban lãnh đạo Trường Đại học Nguyễn Tất Thành, phòng ban chức tạo điều kiện giúp đỡ tơi st q trình học tập làm luận án tốt nghiệp Với điều kiện vốn kiên thức hạn chế cùa em nên luận án tốt nghiệp em nhiều thiếu sót Vì vậy, em mong nhân bảo cùa thầy cô đe em nâng cao kiến thức thân phục vụ tốt q trình cơng tác sau Em xin chân thành cảm ơn! (Sinh viên ký tên) Lê Văn Bảo Khoa Công nghệ Sinh học Trường Đại Học Nguyễn Tất Thành MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii TÓM TẮT V SUMMARY vi DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH vii DANH MỤC BẢNG BIẾU viii DANH MỤC CHŨ VIẾT TẮT ix ĐẶT VẤN ĐỀ X CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Keo lai 1.1.1 Phân loại khoa học 1.1.2 Phân loại hình thái 1.1.3 Đăc điêm thực vật 1.1.4 Tình trạng đặc điểm phân bố 1.1.5 Giá trị Keo lai 1.2 Khái niệm nuôi cấy mô thực vật 1.3 Cơ sở khoa học 1.3.1 Tính tồn tế bào thực vật 1.3.2 Sự phân hóa phản phân hóa tế bào thực vật 1.4 ứng dụng phương pháp nuôi cấy mô thực vật 1.5 Các giai đoạn nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.5.1 Giai đoạn chuân bị 1.5.2 Giai đoạn vô trùng mầu cấy khởi động ii 1.5.3 Giai đoạn tạo chồi nhân chồi nhanh 1.5.4 Giai đoạn tạo mô hoàn chỉnh 1.5.5 Giai đoạn chuyển in vitro vườn ươm 1.6 Tình hình nghiên cứu nước giới 1.6.1 Tình hình nghiên cứu giới 1.6.2 Tình hình nghiên cứu nước CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN củu 2.1 Nơi thực 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Thí nghiệm 1: Vơ trùng mẫu 2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát thành phần khống nuôi cấy Keo lai 10 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng đến khả tạo chồi Keo lai 10 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng Auxin đến trình tạo rề Keo lai 10 2.4 Phương pháp thu thập xử lý số liệu 11 2.4.1 Phương pháp thu thập số liệu 11 2.4.2 Xử lý số liệu 11 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 12 3.1 Ket vô trùng mầu 12 3.2 Ket khảo sát thành phần khoáng nuôi cấy Keo lai 14 3.3 Ket khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng đến khả tạo chồi Keo lai 17 3.4 Khảo sát ảnh hưởng cùa Auxin đen trình tạo rề Keo lai 19 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 24 TÀI LIỆU THAM KHẢO 25 iii PHỤ LỤC 27 IV TÓM TẤT Keo lai loại suất cao có giá trị kinh tế cao Đe tài: “Nhân giống in vitro Keo lai (Acacia hybrid),n thực từ tháng 2/2009 đến 8/2009 Phịng thí nghiệm Ni cấy mơ, Khoa Cơng Nghệ Sinh Học, trường Đại học Nguyền Tất Thành với mục tiêu xác định yếu tố mơi trường thích hợp để nhân giống in vitro Keo lai Đe tài có bon nội dung: Vơ trùng mẫu; Khảo sát thành phần khống ni cấy Keo lai; Ảnh hưởng cùa chất điều hòa sinh trưởng đen khả tạo chồi Keo lai Ảnh hưởng Auxin đến khả tạo rễ Keo lai Các thí nghiệm bố trí theo kiêu hồn tồn ngẫu nhiên Những kết đạt sau tháng nghiên cứu: Thời gian vô trùng mầu Keo lai in vitro tốt 10 phút javel 100% Mơi trường thích họp để ni cấy Keo lai in vitro môi trường WPM Môi trường nhân chồi Keo lai in vitro WPM có bố sung BA (1 mg/1), đường 30 g/1, agar 8,0 g/1 Môi trường nuôi cấy tạo rề Keo lai in vitro WPM có bo sung NAA (0,5 mg/1), đường 30 g/1, agar 8,0 g/1 V SUMMARY Acacia hybrid is one of the high yielding and high economic value trees Topic: “In vitro propagation of Acacia hybrid plants.” Carried out from February 2009 to June 2009 at Tissue Culture Laboratory, Department of Biotechnology, Nguyen University Tat Thanh aims to identify suitable environmental factors for in vitro propagation of Acacia hybrid plants The topic has four content: Aseptic samples; Investigate the basic contracting component of hybrid Acacia plantations; Effect of growth regulators on the ability to produce buds of Acacia hybrid and Auxin's influence on the rooting ability of Acacia hybrid The experiments were arranged in a completely random fashion Results achieved after months of research: The best time for sterility of in vitro Acacia hybrid specimens is 10 minutes in 100 % javel The suitable medium for in vitro Acacia hybrid cultivation is the WPM medium In vitro multiplication medium of Acacia hybrid shoots were WPM supplemented with BA (1 mg/1), sugar 30 g/1, agar 8,0 g/1 In vitro rooting medium of Acacia hybrid culture is WPM supplemented with NAA (0,5 mg/1), sugar 30 g/1, agar 8,0 g/1 vi DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH • Hình 1.1 Cây Keo lai dịng AH7 Hình 3.1 Vơ trùng mẫu Keo lai: 13 Hình 3.2 Cây Keo lai sau 30 ngày khảo sát mơi truờng WPM 16 Hình 3.3 Cây Keo lai sau 30 ngày môi trường WPM bồ sung BA 18 Hình 3.4 Cây Keo lai môi trường WPM bo sung NAA 21 vii ... văn: Nhân giống ìn vitro Keo lai (Acacia hybrid) Mục tiêu Xác định yeu tố môi truờng thích họp để nhân giống invitro Keo lai Nội dung: - Vô trùng mẫu Keo lai - Khảo sát thành phần khống ni cấy Keo. .. để nhân giống in vitro Keo lai Đe tài có bon nội dung: Vơ trùng mẫu; Khảo sát thành phần khống nuôi cấy Keo lai; Ảnh hưởng cùa chất điều hòa sinh trưởng đen khả tạo chồi Keo lai Ảnh hưởng Auxin... họp để ni cấy Keo lai in vitro môi trường WPM Môi trường nhân chồi Keo lai in vitro WPM có bố sung BA (1 mg/1), đường 30 g/1, agar 8,0 g/1 Môi trường nuôi cấy tạo rề Keo lai in vitro WPM có bo