Nhân giống in vitro cây hoa hồng cổ Sapa từ đốt thân

Bên cạnh đó, vi nhân giống một loại cây thân bán gỗ và có tinh dầu như cây hoa hồng thường xuyên gặp phải sự tích lũy hợp chất phenol trong cây gây ra hiện tượng ức chế sinh trưởng, khó

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2

KHOA SINH - KTNN

======

HỒ THỊ HÀ

NHÂN NHANH IN VITRO

CÂY HỒNG CỔ SAPA TỪ ĐỐT THÂN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật

HÀ NỘI - 2019

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2

KHOA SINH - KTNN

======

HỒ THỊ HÀ

NHÂN NHANH IN VITRO

CÂY HỒNG CỔ SAPA TỪ ĐỐT THÂN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật

Người hướng dẫn khoa học

TS LA VIỆT HỒNG

HÀ NỘI - 2019

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS La Việt Hồng - Khoa

Sinh KTNN Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 đã luôn định hướng, quan tâm và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài

Tôi xin cảm ơn tới Ban Giám hiệu trường ĐHSP Hà Nội 2, Ban Chủ nhiệm bộ môn Thực vật khoa Sinh - KTNN trường ĐHSP Hà Nội 2 luôn tạo điều kiện thuận lợi nhất giúp tôi hoàn thành khóa luận này

Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán bộ Phòng thí nghiệm Sinh

lý thực vật, Phòng thí nghiệm Thực vật - trường ĐHSP Hà Nội 2 đã tạo điều kiện thuận lợi về thiết bị, phương tiện để tôi có thể hoàn thành khóa luận này

Tôi cũng xin chân thành cảm ơn cô Mai Thị Hồng – Phòng thí nghiệm Sinh lý học thực vật đã luôn giúp đỡ, quan tâm và đóng góp ý kiến để tôi có hoàn thành khóa luận tốt nhất

Cảm ơn gia đình, bạn bè và các em khóa 42, khóa 43 đã luôn giúp

đỡ động viên, góp ý cho tôi trong quá trình học tập và hoàn thành đề tài

Hà Nội, ngày 14 tháng 05 năm 2019

Sinh viên

Hồ Thị Hà

LỜI CAM ĐOAN

Kính gửi: - Phòng Đào tạo trường Đại học Sư Phạm Hà Nội 2

- Khoa Sinh - KTNN trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi được thực hiện dưới sự hướng dẫn của TS La Việt Hồng Các số liệu, kết quả nghiên cứu trong khóa luận là trung thực và chưa được ai công bố

Hà Nội, ngày 14 tháng 05 năm 2019

Sinh viên

Hồ Thị Hà

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT

BAP: 6-Benzylaminopurine

CT: Công thức

Mg/l: miligam/ lit

MS: Murashige & Skoog

NAA: 1-naphthaleneacetic acid

NXB: Nhà xuất bản

LSD0,05: Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 5%

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1

1 Lí do chọn đề tài 1

2 Mục đích và nhiệm vụ nghiên cứu 2

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn 3

NỘI DUNG 4

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

1.1 Giới thiệu về chung về cây hoa hồng 4

1.2 Đặc điểm sinh học của cây hoa hồng 6

1.2.1 Đặc điểm hình thái của cây hoa hồng 6

1.2.2 Điều kiện sinh thái 7

1.3 Giá trị sử dụng 9

1.4 Tình hình nghiên cứu hoa hồng cổ Sapa trên thế giới và ở Việt Nam 10

1.4.1 Tình hình nghiên cứu hoa hồng cổ Sapa trên thế giới 10

1.4.2 Tình hình nghiên cứu hoa hồng cổ Sapa ở Việt Nam 11

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14

2.1 Đối tượng nghiên cứu 14

2.2 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 14

2.3 Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm 14

2.3.1 Thiết bị 14

2.3.2 Dụng cụ 14

2.4 Môi trường nuôi cấy 14

2.5 Điều kiện nuôi cấy 15

2.6 Phương pháp nghiên cứu 15

2.6.1 Tạo vật liệu khởi đầu 16

2.6.2 Tái sinh và nhân nhanh chồi in vitrocây hoa hồng cổ Sapa 16

2.6.3 Ra rễ - tạo cây in vitro hoàn chỉnh 17

2.7 Phân tích thống kê số liệu thực nghiệm 18

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 19

3.1 Tạo vật liệu khởi đầu 19

3.2 Tái sinh và nhân nhanh chồi in vitro cây hoa hồng cổ Sapa 22

3.3 Ra rễ - tạo cây in vitro hoàn chỉnh 26

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 29

1 KẾT LUẬN 29

2 KIẾN NGHỊ 29

TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 PHỤ LỤC

DANH MỤC BẢNG

Bảng 3.1 Kết quả tạo vật liệu khởi đầu từ đốt thân cây hoa hồng cổ Sapa 19Bảng 3.2 Ảnh hưởng của BAP đến quá trình tái sinh và nhân nhanh chồi

cây hoa hồng cổ Sapa sau 8 tuần nuôi cấy 23

Bảng 3.3 Ảnh hưởng của nồng độ NAA đến khả năng hình thành rễ -

tạo cây in vitro hoàn chỉnh (sau 2 tuần nuôi cấy) 27

DANH MỤC HÌNH

Hình 1.1 Cây hoa hồng cổ Sapa 6Hình 3.1 Kết quả tạo vật liệu khởi đầu từ đốt thân cây hoa hồng cổ Sapa 21Hình 3.2 Chồi hoa hồng cổ Sapa sau 5 tuần nuôi cấy 25Hình 3.3 Rễ cây hoa hồng cổ Sapa trên môi trường MS + NAA

0,25mg/l sau 2 tuần nuôi cấy 28

MỞ ĐẦU

1 Lí do chọn đề tài

Cây hồng cổ Sapa là một trong những cây hoa đẹp nhất thế giới Hồng

cổ Sapa thuộc họ Rosaceae là một trong mười họ lớn Cây hoa hồng cổ Sapa

thuộc cây bụi có gai, sinh trưởng và phát triển tốt, lá màu xanh tươi, hoa có màu hồng sen và nở quanh năm, hoa có hương thơm cổ điển quyến rũ Không chỉ vậy, cây hoa hồng cổ Sapa còn là biểu tượng cho tình yêu, ngọt ngào và

sự lãng mạn [13] Hoa hồng cổ Sapa mang lại giá trị tinh thần, đồng thời có lợi nhuận kinh tế cao.Vì vậy, cây hoa hồng thường được nhân giống vô tính bằng các phương pháp như giâm, chiết và ghép Các phương pháp này khá tốn công sức, thời gian và hiệu quả thành công không cao, đặc biệt là đối với các giống hồng ngoại Các phương pháp truyền thống có ưu điểm đơn giản,

dễ thực hiện, không yêu cầu kĩ thuật hay chuyên môn cao, đồng thời không cần có các thiết bị hiện đại [15] Song, vẫn có hạn chế lớn đó là chất lượng cây con tạo ra không cao, số lượng con ít Hiện tại, đã có phương pháp giải quyết được những hạn chế đó là phương pháp nhân giống mới bằng nuôi cấy

mô Ưu điểm vượt trội của phương pháp nhân giống mới này là làm tăng chất lượng và số lượng hoa trong thời gian ngắn và có thể tạo cây con quanh năm Tuy nhiên, khi áp dụng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật lên hoa hồng thường gặp nhiều khó khăn Vấn đề chính là các đoạn thân chuyển từ môi trường bên ngoài vào môi trường MS vô trùng để nuôi cấy dễ mang theo những vi sinh vật bám ở bề mặt thân cây cũng như bị nhiễm nội sinh Ngoài

ra, sự chuyển đổi môi trường ảnh hưởng nhất định đến khả năng sống sót và điều tiết sinh trưởng của chồi bật từ đoạn thân còn mang theo các tính chất của cây Bên cạnh đó, vi nhân giống một loại cây thân bán gỗ và có tinh dầu như cây hoa hồng thường xuyên gặp phải sự tích lũy hợp chất phenol trong cây gây ra hiện tượng ức chế sinh trưởng, khó nuôi cấy, chậm phát triển, vàng

lá và cây dễ bị chết trong môi trường in vitro [7] Năm 1945, Nobecourt và

Kofler đã nuôi cấy mô tạo ra mô sẹo và rễ từ chồi Năm 2009, Kantamaht và cộng sự đã nghiên cứu cây hồng thành công về nhân nhanh và điều khiển ra

hoa in vitro Ở nước ta, đã có một số nghiên cứu với nhiều loại hoa hồng khác

nhau trong đó đối tượng hoa hồng cơm được Nguyễn Thị Phương Thảo và

cộng sự đã nghiên cứu [1] Hoa hồng cổ Sapa được Bùi Thị Thu Hương và cộng sự nghiên cứu vào năm 2017 và thông báo môi trường phù hợp để bật chồi và nhân nhanh chồi là MS có bổ sung BAP và kinetin, cho số chồi/mẫu mới chỉ đạt 2,48 [6]

Hoa hồng cổ Sapa là một trong các loài hoa hồng được ưa chuộng nhất với đặc điểm nổi bật hoa to và có nhiều lớp cánh xoáy tạo nên vẻ đẹp kiêu sa của mình Tuy nhiên, hoa hồng cổ Sapa vẫn có nhược điểm đó là số lượng cá thể chưa nhiều và giá thành tương đối cao

Từ thực tế nêu trên, chúng tôi muốn góp phần làm tăng số lượng, phát triển quy mô hoa hồng cổ Sapa với chất lượng tốt hơn, sạch bệnh hơn, đồng

thời có thể làm giảm giá tiền nên chúng tôi đã chọn đề tài: “NHÂN NHANH

IN VITRO CÂY HỒNG CỔ SAPA TỪ ĐỐT THÂN”

2 Mục đích và nhiệm vụ nghiên cứu

2.1 Mục đích nghiên cứu

Nhân giống in vitro cây hoa hồng cổ Sapa bằng phương pháp nuôi cấy từ

đốt thân giúp tăng số lượng và chất lượng trong thời gian ngắn nhằm phục vụ

sản xuất, đáp ứng nhu cầu của người tiêu dùng trong thời gian tới

2.2 Nhiệm vụ nghiên cứu

- Tạo vật liệu khởi đầu từ đốt thân của cây hoa hồng cổ Sapa: Nghiên cứu và tìm ra nồng độ thích hợp của javen đến hiệu quả khử trùng mẫu cây

hoa hồng cổ Sapa

- Tái sinh và nhân nhanh chồi in vitro: Nghiên cứu và tìm ra nồng độ

thích hợp của BAP và NAA đến hiệu quả của tái sinh chồi và khả năng nhân

nhanh in vitro ở cây hoa hồng cổ Sapa

- Ra rễ - tạo cây in vitro hoàn chỉnh: Nghiên cứu và tìm ra môi trường

thích hợp có sự ảnh hưởng của NAA đến khả năng tạo rễ trong điều kiện nuôi

cây in vitro của cây hoa hồng cổ Sapa

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

3.1 Ý nghĩa khoa học

- Kết quả đề tài góp phần hoàn chỉnh quy trình nhân giống cây hoa

hồng cổ Sapa bằng phương pháp nuôi cấy in vitro

- Là tài liệu tham khảo cho học sinh, sinh viên

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

- Kết quả của đề tài có thể áp dụng trong cơ sở sản xuất nuôi cấy in

vitro cây hoa hồng cổ Sapa từ đó tăng hiệu quả về cả chất lượng và số lượng

- Tạo ra các cây con với số lượng lớn đồng đều nhau về số tuổi đồng thời chất lượng tốt, giảm thiểu tối đa mầm mống sâu bệnh hại và giá thành hợp lí hơn cho người tiêu dùng

NỘI DUNG CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 Giới thiệu chung về cây hoa hồng

Hoa hồng cổ đại có nguồn gốc từ cây Tầm xuân có từ kỷ Đệ Tam cách đây 3,5-7 triệu năm, chủ yếu phân bố ở các vùng đại lục ôn đới Bắc bán cầu, riêng loại hoa 4 mùa có khởi nguyên ở các vùng á nhiệt đới Nguồn gốc của hoa hồng trồng ngày nay rất phức tạp nó là kết quả tạp giao giữa loài Tầm

xuân (Rosa multiflora) với loài Mai khôi (Rosa rugose) và Hoa hồng (Rosa

indica) [3]

Loài Mai khôi (Rosa rugose):có nguồn gốc ở Trung Quốc, hiện còn rất

nhiều cây hoang dại Mai khôi là cây thân gỗ rụng lá, cao tới 2m, thân dạng bò, màu nâu tro, trên thân có một lớp lông nhung và có gai Lá kép lông chim, có 4-9 lá nhỏ, hình thuôn hoặc hình trứng dài 2-5 cm, mép lá có răng cưa, mặt trên không có gai, mặt dưới có lông gai Hoa mọc thành chùm màu trắng hoặc đỏ tím, chứa tinh dầu, có mùi thơm, thông thường ra hoa một lần trong năm [3]

Loài Tầm xuân (Rosa multiflora): có nguồn gốc ở Trung Quốc, Tây

Âu, Bắc Mỹ Tầm Xuân là loại cây bụi rụng lá, cành nhỏ, hoa nhỏ màu trắng đến đỏ Ra hoa vào tháng 5, tháng 6, hoa mọc dày sít nhau như hình cái ô [3]

Loài Hoa hồng (Rosa indica): là loại cây lùm bụi, rụng lá hoặc nửa

rụng lá, cây mọc đứng thẳng hoặc nửa mở Hoa mọc rời hoặc thành chùm trên cành Cây ra hoa nhiều lần trong năm từ cuối tháng 4 đến tháng 10, hoa màu trắng đến đỏ thẫm, thơm nhẹ [3]

Ở Trung Quốc thời Hán Vũ Đế trong cung vua đã có hoa hồng Đến đời Bắc Tống đã có người trồng và đã biết tạo ra giống hồng ra hoa quanh năm,

có mùi thơm do lai giữa Tầm xuân và hoa hồng Ở Châu Âu, trước thế kỷ 17 hoa hồng chủ yếu được nhập từ cao nguyên Tiểu Á những giống ra hoa một lần, không chịu rét, không thơm, mùa sắc đơn điệu Cuối thế kỷ 15, các giống hoa hồng và tầm xuân Trung Quốc được nhập vào Pháp, qua nhiều lần lai tạo

với các loại giống bản địa (R Gigautua và R.gallica) Đến năm 1837, đã tạo

ra giống hoa hồng thơm và đến nay có trên 2 vạn giống, chủ yếu là: giống

hồng lai Hương Trà (Hybrid tea roses), hoa hồng nhiều hoa (Floribumda

roses), hoa hồng to (Grandflora roses), hoa hồng nhỏ (Miniaturo rose), hoa

hồng bụi (Shurubs, Shrub roses), hoa hồng dây (Ramblers, Grand Cover

Roses, R), hoa hồng tiểu thủ (Polyanthas, Pol) [3]

Hoa hồng thuộc họ Rosaceae có đặc điểm dạng cây leo hoặc cây bụi

Họ Rosaceae chiếm số lượng loài lớn (khoảng 3000 loài) phân bố khắp nơi

trên thế giới Hoa hồng được coi là “Hoàng hậu của các loài hoa” vì có kích thước vừa phải, màu sắc đa dạng đẹp mắt, hương thơm dịu dàng nên rất được

ưa chuộng ở nhiều khu vực

Các nước sản xuất hoa hồng chính: Hà Lan, Mỹ, Nhật trong đó Hà Lan là nước trồng và sản xuất hoa hồng lớn nhất thế giới Mỹ cũng là nước trồng nhiều đồng thời cũng là nước nhập khẩu số lượng lớn Ở Trung Quốc có diện tích trồng hoa tương đối lớn và hoa có chất lượng cao nhất ở Trung Quốc

là tỉnh Vân Nam, đây là vùng thích hợp để trồng hoa hồng vì vùng này có vĩ

độ thấp, độ lớn cao, bốn mùa mát mẻ, ánh sáng đầy đủ tương tự Đà Lạt của Việt Nam [3]

Đà Lạt ở Việt Nam với lợi thế có điều kiện khí hậu rất phù hợp để trồng các loại hoa vì vậy vùng trồng hoa công nghệ cao Đà Lạt được mệnh danh là thiên đường hoa với rất nhiều loài hoa khác nhau, trong đó hoa hồng và hoa cúc là hai loại hoa chủ đạo Hoa hồng Đà Lạt không chỉ được đánh giá cao bởi người tiêu dùng trong nước mà còn bởi cả các bạn hàng quốc tế với ưu điểm bông to, cành thẳng, bền, thơm, sinh trưởng và phát triển tốt, khả năng kháng bệnh cao Hiện nay, hoa hồng đã có tới trên 15 loại với chất lượng trôi nổi

Hoa hồng là hoa lưỡng tính có nhị và nhụy cùng nằm trên một hoa Nhị dính vào nhau và dính trên vòi nhụy gọi là bao phấn Khi gặp điều kiện thuận lợi thì hạt phấn rơi trên đầu nhụy có thể thụ phấn, sau đó thụ tinh

Hoa hồng cổ Sapa có nguồn gốc ôn đới và nhiệt đới vùng Bắc bán cầu,

có giá trị kinh tế cũng như tinh thần rất cao Chúng là loại cây bụi có gai, lá

người Pháp mang tới và trồng tại Sapa

1.2 Đặc điểm sinh học của cây hoa hồng

1.2.1 Đặc điểm hình thái của cây hoa hồng

Hình 1.1 Cây hoa hồng cổ Sapa (Nguồn: http://www.vuonvayhoabinh.vn)

Rễ: Rễ cây hoa hồng thuộc loại rễ chùm, có khả năng phân nhánh

mạnh, lan rộng trong đất, khi bộ rễ lớn phát sinh nhiều rễ phụ, ở lớp đất mặt

có khả năng lan rộng tù 5 - 30 cm Rễ hoa hồng có thể ăn sâu tới 1 m, thích hợp phát triển trong các loại đất thoáng khí (20-30%) [3]

Thân: Thân cây gỗ hoặc bụi phân nhiều cành có thể có chiều cao

khoảng 50 - 200 cm Cây hoa hồng cổ Sapa có thân nhỏ và có gai

Lá: Lá hoa hồng có dạng kép lông chim mọc cách, với 3, 5, 7, 9, 11, 13

lá chét, xung quanh lá chét có nhiều răng cƣa nhỏ, xung quanh lá chét có nhiều răng cƣa nhỏ Tùy từng giống mà lá có màu xanh đậm hay nhạt, răng cƣa nông hay sâu hoặc có hình dạng lá khác

Hoa: Hoa có mùi thơm nhẹ, cánh hoa mềm, có nhiều màu sắc và kích

thước khác nhau Hoa hồng mọc đơn độc hay thành cụm Hoa lớn đặc trưng bởi

có đế hoa hình chén, xếp thành một hay nhiều vòng Thuộc loài hoa lưỡng tính, nhị đực và nhụy cái trên cùng một hoa, phân hóa đài hoa rõ rệt, các nhị đực dính vào nhau bao xung quanh vòi nhụy

Quả: Quả có hình trái xoan, có kích thước khác nhau tùy từng giống Khi

chín quả có màu nâu vàng hoặc màu đỏ đun tùy theo màu sắc hoa Quả thuộc loại quả nang, có chứa nhiều hạt nhỏ

Hạt: Hạt nhỏ, có lớp lông trắng bao phủ Hạt nảy mầm rất kém do có lớp

vỏ dày, phôi và nội nhũ có chứa AAB kìm hãm quá trình nảy mầm

1.2.2 Điều kiện sinh thái

Ánh sáng: là nhân tố quan trọng với sự sinh trưởng và ra hoa của hoa

hồng Do thời tiết thay đổi hoặc do sự che bớt ánh sáng dẫn đến giảm cường

độ và thời gian chiếu sáng đều làm giảm lượng khô tích lũy và khả năng sinh trưởng Sự phân hóa hoa, sự phát dục của hoa, thời gian giãn cách giữa hai lần cắt hoa, độ lớn của cành hoa, trọng lượng và chiều dài cành, diện tích lá, màu sắc của cành hoa đều chịu ảnh hưởng của ánh sáng [3]

Chu kì chiếu sáng và độ dài bước sóng có liên qua tới sự phát dục của hoa và vị trí mầm hoa Trong điều kiên mùa hè, phản ứng quang hợp của hoa hồng khá mạnh, 90% chất khô trong cây là do quang hợp, tuy nhiên quang hợp chịu ảnh hưởng của giống, cường độ ánh sáng, nhiệt độ, trạng thái nước và nồng độ CO2 Trong điều kiện bão hòa CO2 nhiệt độ thích hợp cho quang hợp, khi nhiệt độ tăng qua 25o

C thì cường độ quang hợp giảm Trong trường hợp chiếu sáng bổ sung đã làm tăng chỉ số chất lượng hoa, độ dài cành tăng [3]

Nhiệt độ: ảnh hưởng đến quang hợp, hô hấp, sự tạo thành các sản

phẩm trao đổi chất, đặc biệt là sắc tố và cuối cùng là ảnh hưởng đến hiệu quả sản xuất, bao gồm các yếu tố: Nhiệt độ ngày (tối thích cho sự sinh trưởng là 21–23oC), nhiệt độ đêm (16oC), nhiệt độ đất (21–26o

C) Trong giới hạn nhiệt

độ, nhiệt độ ban ngày thấp, ban đêm ức chế sự kéo dài cành Nhiệt độ ổn định 18–20oC là thích hợp nhất cho cả sinh trưởng và phát dục [9]

CO 2 :Nồng độ CO2 cao thích hợp cho sự sinh trưởng và phát dục của

hoa hơn là nồng độ thấp hoặc không ổn định

Độ ẩm: đất thích hợp cho sự sinh trưởng và phát triển của cây hoa

hồng là từ 60–70o

C, đối với độ ẩm không khí là từ 80–85oC Đặc biệt, nếu độ

ẩm trong đất cũng như trong không khí quá cao vào mùa mưa to, kéo dài liên tục năm sáu tháng, đa số hoa hồng bị các loại nấm và sâu bệnh tấn công, khiến cây bị đốm lá, vàng lá, rụng lá, suy kiệt và chết [1]

Tính chất đất đai: Đất trồng cây hồng tốt nhất là đất Macgarit (đất đen

đá vôi) hoặc đất đồi giàu mùn, loại đất này kết cấu viên tốt, mật độ tương đối nhỏ, khả năng giữ mùn tốt, thoáng khí, có lợi cho sự phát triển của rễ Độ sâu của đất và độ dày của tầng canh tác cũng rất quan trọng Đất phải có nhiều lỗ hổng, đặc biệt là sự thông khí của tầng dưới ảnh hưởng rất lớn đối với sự phát triển của rễ Hoa hồng ưa đất hơi chua, có độ pH 5,5-6,5 [3]

Dinh dưỡng: Khả năng hấp thụ dinh dưỡng khoáng phụ thuốc vào

nguồn gốc cây trồng và ảnh hưởng đến năng suất và chất lượng hoa Vì vậy việc cung cấp dinh dưỡng cho cây phù hợp là cần thiết để đạt sản lượng tốt nhất Thiếu Nito cây châm sinh trưởng, phân cành yếu, lá vàng, rễ bị rụng, nhỏ, dài và ít, khả năng quang hợp giảm Thiếu Phospho gây trở ngại cho việc tổng hợp protein, khả năng hình thành tinh bột kém, hoa khó nở Nhiều Phospho ức chế sự hấp thụ sắt Thiếu Canxi, nụ không phát triển thành hoa Thiếu Lưu huỳnh làm cây sinh trưởng chậm nhưng thừa lại gây độc cho cây

Cây hoa hồng cổ Sapa dễ chăm sóc Cây thích nghi được khí hậu ở Việt Nam (nóng vào mùa hè và rất lạnh ở mùa đông) Ngoài ra sức chống chịu của cây tốt có thể trồng trong chậu hoặc đất cây cũng phát triển bình thường Cây

ưa sáng và gió, cây cho hoa quanh năm và hoa có mùi thơm dịu dàng

1.3 Giá trị sử dụng

Cây hoa hồng nổi bật với vẻ đẹp mà mùi thơm dịu dàng nên được người sử dụng rất ưa chuộng, đặc biệt trong những ngày tết Cây sống lâu năm nên cho giá trị cao về thẩm mỹ Cây cho hoa liên tục, với số lượng hoa lớn, nhiều hoa, và kích thước bông to nổi bật Cây hoa hồng có thể trang trí nội thất tại gia đình, văn phòng, công viên

Hoa hồng đa dạng về hình thức, kích cỡ, màu sắc và đặc biệt có một mùi thơm dịu dàng làm say đắm lòng người Chính vì thế thế trên thế giới cũng ở Việt Nam đã phát triển ngành sản xuất hoa hồng, mang lại những lợi ích cho nền kinh tế Tổng giá trị hoa tiêu thụ trên thị trường thế giới là 42 tỷ USD, trong đó hoa hồng chiếm 15 tỷ USD, còn lại là Cúc, Cẩm Chướng thơm, Lay Ơn và các loài hoa khác dự kiến sẽ tăng lên rất nhanh trong các năm tới Diện tích hoa trên thế giới ngày càng mở rộng trong đó diện tích trồng hoa của châu Á khoảng 134 nghìn hecta, chiếm 60% tổng diện tích hoa của thế giới Các nước sản xuất hoa hồng trên thế giới là Hà Lan,

Mỹ, Colombia, Nhật, Iran, trong đó đó Hà Lan là nước chủ nhà xuất khẩu hoa lớn nhất thế giới khoảng 4 tỷ USD tương đương 21 tỷ cành trên một năm Năm 1996, Mỹ sản xuất 3,5 tỷ cành và nhập khẩu 8,3 tỷ cành Ở Châu Á, Trung Quốc là nước bắt đầu sản xuất hoa hồng từ những năm 50 của thế kỷ

XX, hiện nay Quảng Đông là tỉnh trồng hoa hồng nhiều nhất Trung Quốc có diện tích 4320 hecta, sản xuất 2,96 tỷ bông Ở một số nước châu Âu và Trung Quốc mặc dù có sức tiêu thụ rất lớn nhưng chỉ sản xuất được vào mùa hè, chè kho nhiệt độ các mùa còn lại xuống quá thấp, đây chính là cơ hội cho nước có điều kiện thuận lợi như Việt Nam phát triển ngành sản xuất hoa hồng xuất khẩu [3]

Ở Việt Nam, đến năm 2014, hoa hồng đã được trồng phổ biến tại Mê linh, Văn Khê, Đại Thịnh, với diện tích lớn (khoảng 1.152 ha) Trước đây các giống hoa hồng trồng được nhập chủ yếu từ Đà Lạt, nhưng gần đây, chúng bị thoái hóa, hoa nhỏ, chóng tàn và màu sắc không đẹp, chính vì vậy, gần đây người dân đã lựa chọn trồng những giống hoa hồng nhập ngoại như hồng cổ Sapa và hồng Italia, cho bông to, và đẹp hơn hồng Đà Lạt do chúng thích nghi với điều kiện nơi đây [3]

Tại vùng trồng hoa Tây Tựu–Từ Liêm–Hà Nội, khu vực Mê Linh–Hà Nội thì hoa hồng và hoa cúc là hay loài hoa cho thu nhập cao và thường xuyên [11]

Ở khu vực trung du và miền núi phía Bắc với khoảng 55,26%, sản lượng 26,53 triệu bông/năm Hiện nay, các giống hồng trồng ở Việt Nam hầu hết là các giống nhập từ Hà Lan, Mỹ, Pháp, Trung Quốc, với nhiều giống quý

và lạ

Đến năm 2014, hoa hồng đã được trồng phổ biến tại Mê linh, Văn Khê, Đại Thịnh, với diện tích khoảng 1.152 ha Trước đây các giống hoa hồng trồng được nhập chủ yếu từ Đà Lạt, nhưng gần đây, chúng bị thoái hóa, hoa nhỏ, chóng tàn và màu sắc không đẹp, chính vì vậy, gần đây người dân đã mạnh dạn trồng những giống hoa hồng nhập ngoại như hồng Pháp và hồng Italia, cho bông to, và đẹp hơn Hồng Đà Lạt do chúng thích nghi với điều kiện nơi đây

Ngoài ra cây hoa hồng cổ Sapa được phụ nữ ưa chuộng là nguyên liệu

để sản xuất những loại mỹ phẩm chăm sóc sắc đẹp ví dụ như nước hoa hồng

có tác dụng dưỡng da, cung cấp độ ẩm cần thiết cho da mang lại sự trẻ trung

và làn da căng bóng, mịn màng, trắng hồng hay nước hoa vì có mùi thơm dịu dàng, nhẹ nhàng và quyến rũ Ngoài ra, cánh hoa hồng chứa nhiều vitamin như vitamin C, các vitamin nhóm B nên chúng ta có thế sử dụng làm trà chữa được cảm lạnh, điều kinh…

1.4 Tình hình nghiên cứu hoa hồng cổ Sapa trên thế giới và ở Việt Nam

1.4.1 Tình hình nghiên cứu hoa hồng cổ Sapa trên thế giới

Phân tích và tổng hợp các công trình nghiên cứu về nhân nhanh in vitro

hoa hồng trên thế giới

Năm 1946, Lamments đã nghiên cứu dùng nuôi cấy phôi để nhân giống hoa hồng

Năm 1962, Weinstein và cộng sự đã nghiên cứu về nuôi cấy huyền phù

và mô sẹo để tìm hiểu thêm về sự biệt hóa và tái sinh

Năm 1991, Arif và cộng tác đã nghiên cứu nhân chồi ở cây hoa hồng

mini Kết quả nghiên cứu là khi bổ sung 3 mg/l NAA có tác dụng làm chồi cây tăng cao nhất Năm 2005, Al-Khalifah và cộng tác có kết quả nghiên cứu tăng tỉ lê chồi tới 71,1 % khi kết hợp 3,0 mg/l BA và 2,0 mg/l kinetin

Năm 2003, Soomro và cộng sự làm thí nghiệm với mục đích tăng rễ đã

sử dụng 0,6 mg/l IBA và 0,1 mg/l NAA Kết quả đạt được tỉ lệ phần trăm rễ tăng là 50% trong khoảng thời gian 12 tuần

Al-Khalifah và cộng tác viên (2005) sử dụng BA 3,0 mg/l kết hợp

Kinetin 0,2 mg/l thì cây Rosa Hybrid L có tỉ lệ chồi tăng 71,1 %

Hamed và cộng tác viên (2006) trên cây Rosa indica L trên môi trường

có bổ sung BAP 1,5 mg/l sau 7 ngày cho kết quả cao (100% chồi hình thành) còn khi sử dụng Kinetin 0,5 mg/l kết hợp với BAP 0,5 mg/l sau 10 ngày có 98% chồi hình thành

Khosravi và cộng sự (2007) trên cây Rosa Hybrid có bổ sung 0,004

mg/l MAP kết hợp với 0,005 mg/l NAA cho hệ số nhân chồi cao nhất

Năm 2009, Kantamaht và cộng sự đã nghiên cứu nhân nhanh in vitro cây hoa hồng, chủ yếu tìm hiểu sự ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh

trưởng (PGRs), nồng độ đường, các chất khoáng, chiều cao chồi,…[14]

1.4.2 Tình hình nghiên cứu hoa hồng cổ Sapa ở Việt Nam

Các phương pháp nhân nhanh truyền thống (giâm, chiết, ghép) với kĩ thuật đơn giản, dễ thực hiện nên vẫn được sử dụng rộng rãi ở nước ta Song,

chúng có những nhược điểm nhất định và phương pháp nuôi cấy in vitro đã

khắc phục được những hạn chế đó nên đang được phát triển mạnh nhằm đạt được mục đích tăng khả năng sinh trưởng phát triển, tạo ra số lượng lớn các cây con đồng đều về số tuổi, giảm thiểu tối đa mầm mống sâu bệnh hại từ đó tăng chất lượng cây trồng Ngoài ưu điểm nội trội có hệ số nhân nhanh cao thì phương pháp này tạo cây con đồng loạt về độ tuổi và kích thước cây con nhỏ

dễ dàng vận chuyển

Năm 2005, Nguyễn Thị Phương Thảo và cộng sự khi tiến hành nhân

nhanh in vitro trên giống hoa hồng trắng (là giống hồng lai giữa Rosa Gallica

L và Rosa Corimbifera) và hoa hồng đỏ (là giống lai giữa hồng cổ Sapa và

hồng Ấn Độ) cây hoa hồng cơm (Rosa sericea Lindl) Tuy nhiên, chưa có

công bố hoàn chỉnh nào về nhân giống cây hồng cổ Sapa [11]

Theo Nguyễn Thị Kim Hằng (2005) trên giống hồng Rosa Chinensis,

trong giai đoạn nhân nhanh sử dụng BAP 1,5 mg/l cho hệ số nhân cao nhất,

sử dụng NAA 1mg/l hoặc NAA kết hợp với Than hoạt tính 2 mg/l để tạo ra cây hoàn chỉnh là tốt nhất

Theo Hồ Tân (2006) trên cây hoa Hồng Rosa Chinensis, tỷ lệ chồi tăng

cao nhất khi bổ sung BAP 1mg/l và tỷ lệ rễ cao nhất khi bổ sung thêm 2 mg/l NAA

Năm 2008, Nguyễn Hữu Tính đã dùng 0,5 mg/l NAA và 2 mg/l than hoạt tính tạo cây hoa hồng nhung hoàn chỉnh tốt nhất

Trong nghiên cứu gần đây của Nguyễn Phương Thảo và cộng sự (2015) cây Hoa Hồng cơm trong nuôi cấy mô, đoạn cành bánh tẻ mang mắt ngủ, không sâu bệnh, sinh trưởng tốt được rửa sạch dưới vòi nước, ngâm trong xà phòng loãng 15 phút rồi rửa sạch xà phòng dưới vòi nước chảy Sau

đó, mẫu được ngâm trong cồn 70o

trong 1 phút, rửa lại bằng nước cất vô trùng trước khi được khử trùng bằng dung dịch HgCl2 0,1% trong 15 phút và cuối cùng được rửa bằng nước cất vô trùng từ 3 - 5 lần [11]

Năm 2017, Bùi Thị Thu Hương và cộng sự đã nghiên cứu nhân nhanh

in vitro cây hoa hồng cổ Sapa cho kết quả: khi thay đổi nồng độ BAP không

ảnh hưởng đến số lá trung bình của chồi nhưng đã gây ra những ảnh hưởng

lớn và khác nhau đến hệ số nhân, sinh trưởng và phát triển của chồi in

vitro.Hệ số nhân chồi và chiều cao chồi tăng tỉ lệ thuận khi tăng nồng độ BAP

từ 0,5–1,5 mg/l [6]

Năm 2018, Nguyễn Ngọc Quỳnh Thơ và cộng sự khi nghiên cứu trên

cây hoa hồng tỷ muội (Rosa chinensis Jacq Var minima Redh.) đã xác định

được chất khử trùng thích hợp là sử dụng dung dịch HgCl2 0,2% trong 10 phút, môi trường nuôi cấy tạo chồi thích hợp là môi trường MS có bổ sung 2,0 mg/l BA, 0,5 mg/l Kinetin, 0,5 g/l than hoạt tính, 30 g/l sucrose

Năm 2019, La Việt Hồng và cộng sự nghiên cứu hoa hồng Mê Linh

(Hà Nội), đã sử dụng hoa hồng Mê Linh làm vật liệu cho nhân giống in