Khảo sát sơ bộ thành phần hóa học cây An Điền Lưỡng Phân Hedyotis Dichotomakoen.Ex Roth, họ Cà Phê

NTTU-NCKH-04 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phc Đon vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TƠNG KÉT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN BỘ-GIẢNG VIÊN 2020 Tên đề tài: Khảo sát sơ thành phần hóa học An Điền Lường Phân Hedyotis Dichotomakoen.Ex Roth, họ Cà Phê Số hợp đồng: 2020.01,088/HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: Ngô Thị Châu Đơn vị công tác: khoa Dược -trường Đại Học Nguyễn Tất Thành Thời gian thực hiện: 03/2020- 11/2020 MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẤT DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, DANH MỤC sơ ĐÒ MỞĐẢU 1 PHÀN TÔNG QUAN 1.1 ĐẶC TÍNH THỰC VẬT 1.1.1 Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth 1.1.2 Một số chi Hedyotis 1.2 NGHIÊN CỨU VÈ Dược TÍNH 1.2.1 Hedyotis dỉchotoma Koen.ex Roth 1.2.2 Một số chi Hedyotis 1.3 NGHIÊN cửư VÈ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC 1.3.1 Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth 1.3.2 Một số chi Hedyotis NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 2.1 CÁC PHƯƠNG PHÁP VÀ THIẾT BỊ KÌ THUẬT sử DỤNG TRONG Q TRÌNH CỊ LẬP MỘT số HỢP CHÁT HỮU 11 2.1.1 Phương pháp tách chiết 11 2.1.2 Thiết bị sử dụng 11 2.1.3 Hóa chất sử dụng 11 2.2 CÒ LẬP MỘT SỐ HỢP CHÁT HỮƯ 12 2.2.1 Điều chế loại cao 12 2.2.2 Cô lập số họp chất hữu 12 2.3 NGHIÊN cửư 13 2.3.1 Thu hái xử lí mẫu 13 2.3.2 Khảo sát cao diclorometan 13 KỂT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 17 3.1 KHẢO SÁT CÁu'trúc hóa học hợp chẩt phân Lập 17 3.1.1 Khảo sát cấu trúc họp chất Dichoto.Diclo .17 3.1.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất Dichoto.Diclo2 20 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 24 TÀI LIỆU THAM KHẢO 25 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẤT H-NMR : proton nuclear magnetic resonance ,3C-NMR : carbon nuclear magnetic resonance HSQC : heteronuclear single quantum coherence HMBC : heteronuclear multiple bond coherence DEPT : distortionless enhancement by polarization transfer DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1: Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Hình 2: Cây H acutangula Hình 3: Cây H herbacea Hình 4: Cây H diffusa Hình 5: Cây H corymbosa Hình 6: sắc kí lớp mỏng tủa ban đầu Dichoto.Diclol Hình 7: sắc kí lớp mỏng phân đoạn D2 hợp chất Dichoto.Diclo2 Hình Sự tưong quan HMBC giừa H-2 với carbon Hình Sự tương quan HMBC H-5 với carbon Hình 10 Sự tương quan HMBC H-6 với carbon DANH MỤC CÁC BẢNG BIẾU Báng 1: Kết sắc kí nhanh cột khô cao Diclorometan Báng 2: Độ dịch chuyển hóa học proton, carbon tương quan hóa học H c phổ HSỌC, HMBC hợp chất Dichoto.Diclol Báng 3: So sánh phổ 'H-NMR 13C-NMR Dichoto.Diclo2 với (22EỴ5aStigmasta-7,22-dien-3/?-ol (Spinasterol) DANH MỤC Sơ ĐỊ Sơ dồ 1: Quy trình điều chế loại cao An điền lưỡng phân phương pháp trích pha rắn TĨM TẤT KẾT QUẢ NGHIÊN STT cứu Kết đạt Cong việc thực Thu mẫu: Bột khô: l ,64 kg Cây an điền lưỡng phân thu hi tỉnh Bình Phước Sau sấy 70 độ đến khối lượng khơng đoi, đem nghiền nhở, thu bột cy khơ Thu cao etanol, cao ether dâu Xử lý mẫu: Bột khơ trích hỏa, cao dicloromethan etanol, lọc, quay, thu hoi dung môi, thu cao etanol Cao etanol tiếp tục xử lý qua cc dung mơi ete dầu hỏa, diclorometan, etyl acetat , metanol ,thu cao ete dầu hỏa, diclorometan, etyl acetat , metanol Xử lý cao: 4,12 g cao dicloromethan Cao diclorometan chọn đê chạy cột sắc ký silicagel với hệ dung môi từ không phân cực đến phân cực (hệ eter dầu hỏa- cloroform) Thu phân đoạn khác Xử lý tủa cao Thu Dichoto.Diclol dicloromethan Sắc ký cao diclorometan Viết báo cáo Thu Dichoto.Diclo2 Sản phẩm đãng ký STT Sản phẩm đạt Quy trình khảo sát sơ thành Quy trình khảo sát sơ thành phân phần hóa học An Điền Lưỡng hóa học An Điền Lưỡng Phân Phân Cấu trúc hợp chất Dichoto.Diclol Dichoto.Diclo2 Thời gian thực hiện: tháng Thời gian nộp báo cáo : 11/2020 MỞĐẢƯ Việt Nam nước có khí hậu nhiệt đới, thuận lợi cho việc phát triển lồi thực vật Trong đó, nhiều thuốc q ơng bà sử dụng thường xuyên đế chừa bệnh, chưa biết thành phần hóa học chúng Vì vậy, việc nghiên cứu thành phần hóa học dược tính cần thiết Chi Hedyotis, thuộc họ Cà phê, có mặt hầu hết nơi nước ta, ông bà xưa dùng đế trị bệnh viêm nhiễm, kháng u bứu, kháng tế bào ung thư Trong đe tài này, thành phần hóa học cùa Hedyotis dichotoma ( An điền lưỡng phân) tiến hành khảo Hy vọng kết thu góp phần giúp biết rõ thành phần hóa học làm tăng ứng dụng cùa vào sống CHƯƠNG TỒNG QUAN 1.1 ĐẶC TÍNH THỰC VẬT 1.1.1 Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Hình 1: Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Cây An điền lưỡng phân có tên khoa học Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth, thuộc họ Cà phê (Rubiaceae) • Mơ tả: (hình 1)[l] Cỏ niên, cao đến 30 cm, có nhánh dài Lá khơng lơng, có phiến hẹp, dài - cm, rộng 3-5 mm Gân phụ không rõ, bẹ nhỏ, có hai Tụ tán lưỡng phân đều, thưa nhánh Hoa nhỏ, màu lam hay tím tím, tứ phân Nang trịn trịn, to mm, hột nhiều nhỏ • Phân bố: Cây mọc nơi đất cát, vườn, dựa biển [1] 1.1.2 Một sơ chi Hedyotis Hình 4: Cây H diffusa Hình 5: Cây H corymbosa 1.1.2.1 Hedyotis acutangula Champ (bói ngịi cạnh nhọn) • Mơ tả (hình 2)[2] Cây: thảo mọc đứng hay bụi cao khoảng 60cm; lóng dài: 10-20cm, khơng lơng, có rảnh, cạnh nhọn cao Lá: có phiến xoăn, thon, dai 13-14cm, không lông, gân phụ 4-6 cặp, xiên, kèm kim cao l,5cm Chùy hoa: khoảng 3cm, hoa không lông, dài Imm, có thuỳ cao 2,5mm, tràng có ống cao 3,5mm Cây hoa vào mùa hè mùa thu • Phân bố: Cây mọc đất dốc lùm bụi từ Nam Hà, Ninh Bình, đến Gia Lai đèo An Khê [2] 1.1.2.2 Hedyotis herbacea (bòi ngịi có) • Mơ tả (hình 3)[2] Cây: cở mảnh, cao 50cm, thân khơng lơng, có cạnh Lá: có phiến hẹp dài, mỏng, không lông, dài 4-6cm, rộng 4-5mm, gân phụ không rõ, kèm chẻ đôi, cao 2-3 mm Hoa: đơn độc nách lá, cuống dài Quả nang tròn, cao 3-4mm, nở làm mảnh, hạt nhỏ, nhiều Ra hoa quanh năm • Phân bố: Mọc nhiều An Độ, Pakistan, Lào, Campuchia,Việt Nam, Philipin nuớc ta, sống nhiều nơi có cát, vùng biển.[2] 1.1.2.3 Hedyotis diffusa (cơ luỡi rắn trắng) • Mơ tả: (hình 4)[2] Cây: loại cỏ, mọc bị, cao 30-40cm, hình cạnh Lá: mọc đối, thn dài, khơng có lá, có khía đỉnh Hoa: mọc đơn độc thành đôi kẽ lá, có màu trắng Quả: nang, khơ dẹt đầu, có nhiều hạt màu nâu nhạt • Phân bố: Cây thường mọc hoang nơi đất ẩm ướt, bờ ruộng.[2] 1.1.2.4 Hedyotis corymbosa (bời ngịi ngù, vỏ chu) • Mơ tả: (hình 5)[2] Cây: cỏ sà, dài 40cm, mảnh, khơng lơng, thân trịn đáy Lá: có phiến hẹp, dài 5cm, gân phụ khơng rõ, bẹ có rìa cao l,5mm Tụ tán 2-4 hoa trắng hay tím, ống vành có lông miệng Nang lõm đầu, hột nhỏ, nhiều, nâu • Phân bố: có khắp nơi, sân vườn, đất nghèo, bình nguyên den 300m [2] 1.2 NGHIÊN CÚƯ VỀ DƯỢC TÍNH 1.2.1 Hedyotìs dichotoma Koen.ex Roth Cho đến nghiên cứu dược tính An điền lưỡng phân (Hedyotỉs dichotoma Koen.ex.Roth) cịn quan tâm Chưa thấy tài liệu nói dược 49 0‘71 — It 21 > • c —— — DICHOTO.DICLO2-CDC13-C13CPD 410*61 tÚD 14 ART ‘IE 64S "IE 6£0 •£E £ OS • 8Z -149*67 SIS*1C - ssr -!•£ S8Ĩ’4C -t£O '8£ -£0 OlC’Of o:a or* ——— LIT •£!■ tos ’6t Phu luc 7b: Phổ 13C NMR cùa hợp chất Dichoto.Diclo2 DICHOTO.DICLO2-CDC13-C13CPD&DEPT DEPT90 Phu luc 8a: Phố DEPT cùa hơp chất Dichoto.Diclo2 DEPT135 CH£—. -1 - I - > - I—. - - -. - >—> -Ị— 55 50 45 40 35 -|—'—'—'—'—I—'—'—'—'—I—'—'—'—'—I—'—'—'—'—I 30 25 20 15 ppn DEPT135 -J—.—.—.—,—ị—.—.—.—.—J— “1—'—’—’—'—I—'—'—'—•—I—•—•—•—’—I—•—’—•—•—I—'—’—'—’—I 55 50 45 40 35 30 55 50 45 40 35 30 C13CPD 25 20 15 ppm Khảo sát sơ thành phần hóa học An Điền Lưỡng Phân Hedyotìs Dìchotomakoen.ỉLx Roth, họ Cà Phê Ngô Thị Châu1 'Đại Học Nguyên Tảt Thành (ntchau(cp,ntt.edu vn) Tóm tắt: báo trình bày qui trình khảo sát sơ thành phần hóa học An Điền Lưỡng Phân hái tỉnh Bình Phước Qui trình the rõ giai đoạn q trình nghiên cứu từ xử lí thân tươi thành cao Cây An điền lưỡng phân sau thu hái sấy khô, cắt nhuyễn ngâm dầm etanol để điều chế cao etanol Cao trích pha rắn silica gel đế thu loại cao khác nhau: cao eter dầu hỏa, cao diclorometan, cao etyl acetat, cao metanol Từ cao diclorometan, sắc kí cột sắc kí điều che nhiều lần lập hợp chất, đặt tên Dichoto.Diclol Dichoto.Diclo2 Bằng phương pháp hóa lí đại NMR (một chiều hai chiều), MS kết hợp với tài liệu tham khảo xác định cấu trúc hợp chất cô lập Acid 4-hydroxy-3-metoxybenzoic (22£)-5 cr-Stigmasta7,22-dien-3/?-ol Từ khóa: An Điền Lường Phân , cao từ thân An Điền Lưỡng Phân, thành phần hóa học An Điền Lường Phân, cao diclotometan An Điền Lưỡng Phân Giới thiệu Cây An điền lường phân có tên khoa học Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth, thuộc họ Cà phê (Rubiaceae) • Mơ tả: Cỏ niên, cao đến 30cm, có nhánh dài Lá khơng lơng, có phiến hẹp, dài - 5cm, rộng - 5mm Gân phụ khơng rõ, bẹ nhỏ, có hai Tụ tán lưỡng phân đều, thưa nhánh Hoa nhỏ, màu lam hay tím tím, tứ phân Nang trịn trịn, to 3mm, hột nhiều nhỏ • Phân bố: Cây mọc nơi đất cát, vườn, dựa biển [1] Một số chi Hedyotis 1.1 Hedyotis acutangula Champ (bịi ngịi cạnh nhọn)121 Tính mát, có tác dụng tiêu viêm, giải độc, lợi tiếu Trị viêm gan, bệnh đường tiết niệu, viêm màng tiếp hợp cấp, viêm họng 1.2 Hedyotis herbacea (bời ngòi cò)[3] Có vị đắng, bo hạ nhiệt, có tác dụng làm long đờm, trị hen suyễn lao phoi Toàn sắc uống trị sốt rét dùng tắm cho người bị bệnh tê thấp Bột nghiền mật ong cho người bị sốt sưng đau thấp khớp 1.3 Hedyotis diffusa (cỏ lưỡi rắn trắng)[3] Trong y học cổ truyền, dùng đe chữa bệnh viêm họng, viêm đường tiết niệu, viêm gan, sỏi mật Theo y học đại, phát có tác dụng ức chế tế bào ung thư lymphô bạch cầu hạt bạch cầu đơn nhân, tế bào carcinom; ức chế tượng gây đột biến aflatoxin gây Nó hồ trợ điều trị bệnh ung thư nhờ tác dụng ức chế miền dịch 1.4 Hedyotis corymbosa (bịi ngịi ngù, vỏ chu) f3] Có tác dụng hạ nhiệt, bổ thần kinh, trị nhức xương, trị sót bao tử, trị đau lách, sưng gan Án Độ, dùng để trị sốt rét, sốt cách nhật, ăn uống không tiêu, thần kinh suy nhược, vàng da, bệnh gan, trị giun 1.5 Hedyotis auricularia (An điền tai)[3] Có tác dụng nhiệt, giải độc, làm dịu đau, chữa cảm mạo, phát sốt, đau họng, viêm ruột, viêm mũ da, mụn nhọt Người dân thường dùng tươi giã nát để đắp nấu nước chữa vet ran can, ret cắn Nghiên cứu thành phần hoá học 2.1 Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth A.s Hamzah cộng cô lập từ rễ Hedyotis dichotoma hai anthraquinon là: l,4-dihydroxy-2,3-dimethoxyantraquinon 2,3-dimetoxy-9- hydroxy-1,4-antraquinon.[4] l,4-Dihyroxy-2,3-dimetoxyantraquinon 2,3-Dimetoxy-9-hydroxyantraquinon 2.2 Một số chi Hedyotis 2.2.1 Hedyotis acutangula Champ Nghiên cứu thành phần hóa học Hedyotis acutangula tìm thấy họp chất: Arborinone; isoarborinol; taraxerol; germanicol; erythoroldiol; olean-12-ene3 cr,28,29-triol; acid oleanolic; acid ursolic stigmasterol.I?l 2.2.2 Hedyotis herbacea Cây Hedyotis herbacea hydroxymetylantraquinone; có chứa họp chất: l,4-Dihydroxy-2- 1,4-dihydroxy-2,3-dimetoxyantraquinone; acid ursolic; kaempferol-3-O-arabinopyranoside kaempferol-3-O-rutinoside.I6] 2.2.3 Hedyotis diffusa Cây Hedyotis diffusa cỏ chứa Rhamnose; arabinose; mannose; 2,3-dimetoxy-6metylantraquinone; 2-metyl-3-hydroxy-4-metoxyantraquinone; asperuloside; ester metyl scandosid; acid asperulosidic; acid geniposidic; acid deacetylasperulosidic; scandoside; 6-O-p-coumaroil; 6-O-p-metoxy cinnamoil scandosid metyl ester; 6O-p-feruloil scandosid metyl ester.[7] [8] 2.2.4 Hedyotispinifolia Nghiên cứu thành phần hóa học Hedyotis pinifolia tìm thấy hợp chất: Stigmasterol; yổ-sitosterol; acid ursolic; trihydroxyolean-12-en; acid oleanolic; Cố,3/2,23- 1,6-dihyroxy-7-metoxy-2-metylantraquinon; dihydroxy-2-metylantraquinon; 3,6-dihydroxy-2-metylantraquinon; trihydroxy-2-metylantraquinon; 1,6- 1,3,6- 4-ơ-[3-hydroxy 2(dihydroxymetylmetyloxy)]propyl-cr-L- rhamnopyranose; /2-sitosterol-3-ơ-/2-D- glucopyranosid.tl0] [11] Nội dung phương pháp nghiên cứu Bột khơ ngâm trích với cao etanol, cao etanol trích pha rắn silica gel, giải li đơn dung môi từ không phân cực đến phân cực: eter dầu hoả, diclorometan, etyl acetat, metanol Dung dịch hứng, mồi lần 300ml, đem cô quay, thu hồi dung mơi, chấm sắc kí lóp mỏng, đến thấy lượng chất có the đổi sang dung môi phân cực Bột khô (l,64kg) So' đồ 1: Qui trình điều chế loại cao An điền lưỡng phân phương pháp trích pha rắn 3.1 Khảo sát cao diclorometan 3.1.1 Xử lí kết tùa cao diclorometan Trích pha ran silica gel áp dụng cao etanol từ dung môi không phân cực đến dung môi phân cực: eter dầu hoả, diclorometan, etyl acetat, metanol Cô quay thu hồi dung môi Cao diclorometan có tủa xuất Tủa dạng rắn, lần cao màu xanh khối lượng 200,3mg Rửa tủa nhiều lần bang cloroform, màu xanh tan theo dung môi, tách rời khỏi tủa Hòa tan tủa hệ dung môi cloroform : metanol (1:1), giải li etyl acetat Chấm sắc kí bảng mỏng, hình FeC13 tiếp tục sắc kí cột sắc kí điều chế, thu chất rắn màu trắng, kết tinh dạng hình kim Cho vết bảng mỏng màu xanh đậm hình FeC13 Chất đặt tên Dichoto.Diclol 3.1.2 Sắc kí nhanh cột khơ cao diclorometan Tiến hành sắc kí nhanh cột khơ cao diclorometan (sau loại tủa, m=3,92g), giải ly hệ dung môi có độ phân cực tăng dần từ eter dầu hoả đến metanol Dung dịch hứng vào lọ (200ml), đem quay để loại dung mơi Chấm sắc kí lơp mỏng, cho hình H2SO4 50%, lọ cho vết giống gom thành phân đoạn 3.1.3 Hợp chất Dichoto.Diclol Chiết pha rắn cao Diclorometan, cô quay thu hồi dung môi, thấy xuất tủa Rửa, lọc tủa nhiều lần eter dầu diclorometan thu dạng rắn màu trắng vần lẫn màu xanh Tiến hành sắc kí điều chế, giải li etyl acetat thu chất rắn màu trắng hồn tồn, vết bảng mỏng hình FeCl3 cho vết tròn, màu xanh đậm Chất đặt tên Dichoto.Diclol 3.1.4 Hợp chất Dichoto.Diclo2 Từ phân đoạn D2 cao diclorometan, tiến hành sắc kí cột nhiều lần sắc kí điều chế, giải li hệ dung môi eter dầu : aceton (8:2), thu chất rắn màu trắng, cho vết tròn, màu đen bảng mỏng, hình H2SO4 50% Chất đặt tên Dichoto.Diclo2 Ket biện luận 4.1 Khảo sát cấu trúc họp chất Dichoto.Dicloỉ Họp chất Dichoto.Diclol thu từ kết tủa cao diclorometan chiết pha rắn cao etanol • Phổ 'H-NMR (CDCI3 : CD3OD) (ỗppm): 7,60 (1H, dd, J=2 8,5 Hz, H-6); 7,57 (1H, d, J=2 Hz, H-2); 6,87 (1H, d, J=8,5 Hz, H-5); 3,92 (3H, s, -OCH3) • Phổ ,3C-NMR (CDCI3 : CD3OD) kết họp với phổ DEPT 90 135 cho thấy hợp chất có carbon • Phổ HSQC HMBC cho thấy tương quan H c 4.2 Biện luận cấu trúc họp chất Dichoto.Diclol • Phố 'H-NMR có tín hiệu proton cùa vòng thơm (vùng từ trường -8ppm): 7,60 (1H, dd, J=1 8,5Hz); 7,57 (1H, d, J=2Hz); 6,87 (1H, d, J=8,5 Hz) kết họp phổ DEPT cho tín hiệu CH, tín hiệu Carbon tứ cấp, họp chất bước đầu đề nghị dẫn xuất benzen có nhóm the A, B, D sau: A D Hình 1: cấu trúc hóa hoc đề nghị họp chất Dichoto.Diclol • Phổ l3C-NMR cho thấy tín hiệu 169,7ppm Carbon nhóm carbonyl cùa acid ester, 151,5ppm 147,7ppm Carbon sp2 kề nguyên tử 0, 56,lppm Carbon nhóm metoxy Ket hợp HMBC cho tương quan proton cùa nhóm metoxy với mũi 147,7ppm nên mũi 169,7ppm COOH COOCH3) Vậy nhóm vịng sè COOH, -OCH3 OH (khơng phải • Phố HSQC cho thấy: s = 7,60ppm (1H, dd, J=2Hz 8,5Hz) có tương quan với mũi 124,7ppm nên mũi đơi đơi (H-6) gắn với c có ỗ = 124,7ppm = 7,57ppm (1H, d, J=2Hz) có tương quan với mũi 113,21ppm nên mũi đôi (H-2) gắn với c có ỗ = 113,21ppm ghép meta với H-6 = 6,87ppm (1H, d, J=8,5Hz) có tương quan với mũi 115,2pp nên mũi đôi (H-5) gắn với c có = 115,2ppm ghép orto với H-6 ô = 3,92ppm (OCH3) có tương quan với mũi 56,lppm • Phổ HMBC cho thấy: ỗ =3,93 (3H, s, 0CH3) có tương quan với mũi 147,7ppm Vậy Carbon có ô =147,7ppm sè gắn nhóm 0CH3, Carbon có ô = 151,5ppm gắn nhóm OH Carbon có ỗ = 122,6ppm sè gắn COOH ô =7,60ppm (H-6) ô =7,57ppm (H-2) có tương quan với mũi 169,71ppm (COOH) nên nhóm COOH A ô =7,60ppm (H-6) ô = 6,87ppm (H-5) có tương quan với mũi 151,5ppm (C gắn OH) nên D OH Vậy B OCH3 • Sự tương quan HMBC H-2, H-5 H-6 với carbon trình bày hình 2, hình hình Hình Hình Hình Bảng 1: Độ dịch chuyển hóa học proton, carbon tương quan hóa học H c phổ HSQC, HMBC hợp chất Dichoto.Diclol Loại c STT *H- 13C-NMR NMR(Ơppm) (ơppm) HSQC HMBC C-2 COOH, C-l,C-3, C-4, (J-Hz) =C-COOH =C-H 122,6 7,57; J=2 113,2 C-6 =C-OCH3 147,7 =C-OH 151,5 =C-H 6,87; J=8,5 115,5 C-5 C-l,C-3, C-4 =C-H 7,60; J =2, J 124,7 C-6 COOH, C-2, C-4 =8,5 Vậy hợp chất Dichoto.Diclol đề nghị acid 4-hydroxy-3-metoxybenzoic 4.3 Khảo sát cấu trúc hợp chất Dichoto.Diclo2 Biện luận cấu trúc: • Phổ l3C-NMR có bốn mũi đặc trưng với độ dịch chuyển hóa học ppm: 139,58 (>c=); 138,17 (=CH-); 129,49 (=CH-); 117,48 (=CH-) • Phổ 'H-NMR có mũi ô = 5,16ppm (2H); ỗ = 5,03ppm (1H, dd, J = 8,5 15 Hz) thể hợp chất có proton vinyl (C=CH) H-7, H-22, H-23; ỗ = l,023ppm (3H, d, J= 6,5Hz, H-21); ô = 0,852ppm (3H, d, J= 6,0Hz, H-27); ô = 0,546ppm (3H, s, H18); ô = 0,8ppm (9H, H-19, H-26, H-29) • So sánh số liệu phổ l3C-NMR hợp chất Dichoto.Diclo2 với (22E)-5«- Stigmasta-7,22-dien-3/7-ol (Spinasterol)[l2] thấy có trùng khớp Bang 2; So sánh phổ ’H-NMR 13C-NMR Dichoto.Diclo2 với (22E)-5a- Stigmasta-7,22-dien-3/?-ol (Spinasterol) Dichoto.DicIo2 Dichoto.Diclo2 Spinasterol Spinasterol 13c (Sppm) 'H (Sppm) H (Sppm) ,3C (Sppm) STT Loại c 37,2 37,2 -ch2-ch2- 31,5 31,6 O-CH< -ch2- 71,1 38,0 >CH- 40,3 40,4 -ch2- 29,6 29,7 =CH- 117,5 >c= 139,6 139,6 >CH- 49,5 49,6 10 >c< 21,6 21,6 11 34,3 34,3 12 -ch2-ch2- 39,5 39,6 13 >c< 43,3 43,3 14 >CH- 55,2 55,2 15 23,0 23,1 16 -ch2-ch2- 28,5 28,5 17 >CH- 56,0 56,0 18 12,0 19 -ch3 -ch3 13,0 13,1 20 >CH- 40,8 40,8 21 -ch3 21,1 1,023 1,025 21,3 22 =CH- 138,2 5,162 5,163 138,2 23 =CH- 129,5 5,03 5,027 129,5 3,594 3,599 71,1 38,1 5,162 0,546 5,159 0,551 117,5 12,1 24 >CH- 51,3 51,3 25 >CH- 31,9 32,0 26 -CH3 19,0 19,0 27 -ch3 -ch2-ch3 21,4 28 29 0,852 0,849 21,4 25,4 25,5 12,2 12,3 • Hợp chất Dichoto.Diclo2 đề nghị (22E)-5«-Stigmasta-7,22-dien-3/i-ol với cấu trúc hóa học sau: Hình 5: cấu trúc hóa hoc đề nghị hợp chất Dichoto.Diclo2 Ket luận kiến nghị 5.1 Kết luận • Điều chế loại cao: Cây An điền lưỡng phân sau thu hái sấy khô, cắt nhuyễn, ngâm dầm etanol để điều chế cao etanol Cao trích pha rắn silica gel đề thu loại cao khác như: cao eter dầu hỏa, cao diclorometan, cao etyl acetat, cao metanol Cao diclorometan chọn đê khỏa sát • Phân lập họp chất: Từ cao diclorometan, sắc ký cột sắc ký điều chế nhiều lần phân lập hợp chất, đặt tên Dichoto.Diclol Dichoto.Diclo2 Bằng phưong pháp hóa lý đại NMR (một chiều hai chiều), MS kết hợp với tài liệu tham khảo xác định cấu trúc hợp chất cô lập Acid 4-hydroxy-3-metoxybenzoic (22E)-5 iz-Stigmasta-7,22-dien-3 /3-01 5.2 Kiến nghị Đe tài tiếp tục tiến hành phân lập họp chất tinh khiết từ phân đoạn khác thử hoạt tính sinh học họp chất phân lập Lời cám ơn Nghiên cứu tài trợ quỳ NTTU, theo họp đồng số 2020.01.088 Tài liệu tham khảo [1] NGUYỀN KIM PHI PHỤNG, Hoạt tính sinh học nhùng họp chất hữu tự nhiên, Học phần cao học chuyên ngành Hóa hừu cơ, Đại học Khoa học Tự nhiên, 2000-2001 [2] ĐÒ TÁT LỢI, Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà Xuất Bản Y học, 1999 [3] VỒ VĂN CHI, Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà Xuất Bản Y học, 1997 [4], AHMAD s HAMZAH, NORDIN H J LAJIS, M V SARGENT, Planta Medica, 60 (4), 388-389, 1994 [5], HOƯMING wư, SHENGYƯ HUANG, XIAFEI LAO, KAN MA, HUIỌIANG ZHOU, YoujiHuaxue, 12(4), 428-31, 1992, CA 117:230117 [6], SHUZO TAKAGI, MASAE YAKAMI, YUKIE NISHIHAMA, KYOKO ISHIGURO, Shoyakugaku Zasshi, 36(4), 366-9, 1982, CA 98 : 204264 [7], K.C.WONG, G.L.TAN, Journal of Essential Oil Research, 7(5), 537-9, 1995, CA 123:28092 [8], PHAN ĐỨC BÌNH, Tạp chí thuốc sức khoẻ, số 125, 131, 1998 [9], PHẠM HOÀNG HỘ, Cây cở miền nam Việt Nam, tập 2,415-429, 1970 [10] AHMAD s HAMZAH, NORIO AIMI, NORDIN H J LAJIS, Biochemical Systematics and Ecology, 24 (3), 273, 1996, CA 126: 155076 ... diclorometan Viết báo cáo Thu Dichoto.Diclo2 Sản phẩm đãng ký STT Sản phẩm đạt Quy trình khảo sát sơ thành Quy trình khảo sát sơ thành phân phần hóa học An Điền Lưỡng hóa học An Điền Lưỡng Phân Phân... An Điền Lường Phân , cao từ thân An Điền Lưỡng Phân, thành phần hóa học An Điền Lường Phân, cao diclotometan An Điền Lưỡng Phân Giới thiệu Cây An điền lường phân có tên khoa học Hedyotis dichotoma... ppm Khảo sát sơ thành phần hóa học An Điền Lưỡng Phân Hedyotìs Dìchotomakoen.ỉLx Roth, họ Cà Phê Ngơ Thị Châu1 'Đại Học Nguyên Tảt Thành (ntchau(cp,ntt.edu vn) Tóm tắt: báo trình bày qui trình khảo