Đề cương ôn tập môn miễn dịch học thú y

Thạch Văn Mạnh TYD-K55 ĐỀ CƢƠNG ÔN THI HẾT HỌC PHẦN MÔN: Miễn Dịch Học Thú Y Học kỳ I năm học 2013-2014 Câu 1,2: Miễn dịch gì? Trình bày hiểu biết miễn dịch tiếp thu chủ động ? Trình bày hiểu biết MD tiếp thu bị động ? a Miễn dịch trạng thái đặc biệt thể sống khơng mắc phải tác động có hại yếu tố vsv, chất độc, chất lạ # mà thể lồi khác loài bị tác động điều kiện sống lây bệnh tương tự  Miễn dịch khả tự vệ thể, khả nhận loại trừ vật lạ khỏi thể  Miễn dịch bao gồm miễn dịch tự nhiên ( MD ko đặc hiệu) miễn dịch thu ( MD đặc hiệu)  Khả MD thể liên quan tới : Cơ hoạt động thể, đặc tình mầm bệnh, điều kiện ngoại cảnh Ví tình MD thể mức độ khác nhau:  Cơ thể có mức độ MD cao : mầm bệnh xâm nhập không gây bệnh, mầm bệnh bị loại trừ  Cơ thể có mức độ MD thấp : Mầm bệnh gây bệnh biểu bệnh lý mức định  Cơ thể khơng có MD :mầm bệnh gây đc bệnh với triệu chứng, bệnh tìch điển hính, thể bị đầu độc, phá hủy dẫn đến tử vong b MD tiếp thu chủ động - Là loại MD hệ thống MD thể sinh sau tiếp xúc với VSV gây bệnh sau tiêm vacxin - Gồm loại :  MD tiếp thu chủ động tự nhiên : Là loại MD thể có sau tính cờ tiếp xúc với mầm bệnh, bị bệnh qua khỏi  VD : Gà bị mắc Newcastle qua khỏi có MD  Ngồi q trính sống thể nhiều lần bị nhiễm lượng nhỏ tác nhân gây bệnh ( bạch cầu, ho gà ) nên tạo MD với bệnh dù khơng có triệu trứng mắc bệnh  MD tiếp thu chủ động nhân tạo :Là loại MD thể có đc người chủ động đưa vacxin vào thể để thể chủ động tạo MD  Đây hính thức tập dượt cho thể để thể có sức chống đỡ lại yếu tố gây bệnh chúng xâm nhập Ứng dụng : dùng vacxin phòng bệnh cho người, gia súc Đây biện pháp nhất, chủ động để khống chế, toán bệnh truyền nhiễm c MD tiếp thu bị động -Trạng thái MD mà thể có đc khơng phải thể tạo mà đc cung cấp từ bên vào - Gồm loại : Thạch Văn Mạnh TYD-K55  MD tiếp thu bị động tự nhiên : loại MD thể có đc kháng thể đặc hiệu từ mẹ truyền sang cho cách tự nhiên  VD : Gia súc non trẻ sơ sinh nhận đc kháng thể đặc hiệu từ mẹ qua thai bú sữa đầu.Gia cầm non nhận đc kháng thể đặc hiệu từ mẹ qua lòng đỏ trứng + MD giúp cho thể non đề kháng đc với tác nhân gây bệnh có thời gian tồn ngắn + Lớp kháng thể đặc hiệu từ mẹ truyền cho thuộc lớp IgG + Ứng dụng : Cho gia súc non hay trẻ sơ sinh bú sữa đầu ( trẻ < tháng ìt bị sởi).Gia cầm MD kéo dài đến 21 ngày tuổi, lợn khoảng 60 ngày  MD tiếp thu bị động nhân tạo : Là loại MD thể có đc sau người chủ động đưa vào thể lượng kháng thể đặc hiệu.Kháng thể đặc hiệu có sẵn máu đv mắc bệnh qua khỏi vật đc tiêm vacxin.Người ta lấy máu thể đv chắt lấy huyết thanh.Trong huyết có kháng thể nên gọi kháng huyết +Dùng kháng huyết để tạo MD phịng bệnh chữa bệnh +MD xuất sau tiêm kháng huyết vào thể +Thời gian MD tồn ngắn 3-4 ngày ko tuần + Đây hính thức chi viện tạm thời giúp thể chống lại xâm nhập ạt mầm bệnh Câu 3: Thế MD tiếp thu ? So sánh MD tiếp thu chủ động nhân tạo MD tiếp thu bị động nhân tạo ? a MD tiếp thu :  Là MD thu đc trính sống sau khi:tiếp xúc với vsv gây bệnh qua khỏi, sau tiêm vacxin, sau tiêm huyết MD b So sánh : MD tiếp thu chủ động nhân tạo MD tiếp thu bị động nhân tạo Cơ thể huy động quan MD sx kháng Cơ thể ko sx kháng thể đặc hiệu MD có đc thể đặc hiệu tạo MD đưa kháng thể đặc hiệu từ vào Trạng thái MD xuất muộn sau MD xuất sau tiêm kháng huyết tiêm vacxin 5-14 ngày MD trí vài tháng, vài năm MD ngắn ko tuần Liều lượng vacxin ìt 1-5ml Liều lượng huyết nhiều từ 25-250ml Chủ yếu để phòng bệnh Chủ yếu để chữa bệnh Sau tiêm vacxin có phản ứng Sau tiêm huyết có tượng chống, q mẫn Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Câu 4: Thế MD ko đặc hiệu, MD đặc hiệu,MD dịch thể MD qua trung gian tế bào ? MD ko đặc hiệu -Là khả bảo vệ tự nhiên thể chống lại tác động có hại tác nhân gây hại -VD: vai trò bảo vệ thể da, niêm mạc, dịch tiết tuyến, tế bào thực bào MD đặc hiệu -Là khả MD thể chống lại loại mầm bệnh định -Khả MD kháng thể đặc hiệu định MD dịch thể -Trong MD vai trò chủ yếu tế bào LymphoB bị kìch thìch (kháng nguyên, IL 2,3,4,5,6) -Lympho B biệt hóa > thành tương bào (plasma) sản xuất kháng thể dịch thể đặc hiệu (γglobulin MD IgG) -Chình γGlobulin MD đảm nhận chức MD -Các kháng thể tồn máu, dịch tiết MD qua trung gian tế bào -Vai trò chủ yếu Lympho T đảm nhiệm -Gọi trung gian ví thơng tin kháng nguyên muốn tiếp xúc với tế bào Lympho T phải có truyền tải gián tiếp qua nhiều tế bào hoạt chất hóa học trung gian đến tế bào nhận cuối tế bào Lympho T để trở thành kháng thể tế bào Câu 5,6: MD ko đặc hiệu thể gồm yếu tố bảo vệ nào? Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào vật lý a MD ko đặc hiệu gồm:  Hàng rào vật lý: da, niêm mạc  Hàng rào hoá học: bổ thể, interferon, protein liên kết, properdin, opsonin, betalyzin  Hàng rào tế bào: tiểu thực bào, đại thực bào  Hàng rào thể chất  Phản ứng viêm ko đặc hiệu b Hàng rào vật lý:  Da niêm mạc ngăn cản thể với môi trường xung quanh, yếu tố gây bệnh muốn vào thể phải qua  Vai trò da: -Da lành ngăn cản hầu hết VSV gây bệnh xâm nhập thể -Da gồm nhiều lớp tế bào, lớp ngồi sừng hóa tường ngăn cản mặt học vững Lớp tế bào thượng bí ln đổi mới, lớp tế bào chết bong thường xuyên, kéo theo VSV khu trú, giảm bớt số lượng VSV da -Dưới lớp thượng bí hệ thống mơ liên kết với phân bố dày đặc mạch máu thần kinh, VSV xuyên qua lớp thượng bí bị tế bào thực bào tiêu diệt -Da lành lặn, gương phản ánh sức khỏe thể, có khả bảo vệ cao  Niêm mạc: Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -Có diện tìch gấp 200 lần diện tìch da, nơi thường xuyên tiếp xúc với nhiều vật lạ có điều kiện thuận lợi để VSV khu trú ví: có độ ẩm cao, ko có ánh sáng, nhiều nếp gấp, nhiệt độ thìch hợp -Niêm mạc có lớp tế bào có tác dụng ngăn cản VK xâm nhập ví: +Tình đàn hồi cao da +Được bao phủ lớp chất nhầy tuyến niêm mạc tiết tạo màng bảo vệ làm cho vsv chất lạ ko trực tiếp bám vào đc TB ko xâm nhập vào đc bên -Niêm mạc miệng mắt, đường tiết niệu ln đc rửa dịch lỗng: nước bọt, nc mắt, nước tiểu -Niêm mạc đường hơ hấp: có vi rung mao ln chuyển động hướng ngồi cản vsv chất lạ ko cho chúng xâm nhập vào sâu phế nang Niêm mạc đường hô hấp nhạy cảm, phản xạ ho, hắt đẩy vsv khỏi thể Câu 7: Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào hóa học? 1.Bổ thể: -Bổ thể yếu tố chình hệ thống miễn dịch dịch thể tự nhiên ko đặc hiệu, chất protein -Bổ thể hệ thống gồm nhiều thành phần từ C1 – C9, riêng C1 gồm : bán đvi: C1q, C1r, C1s -Bổ thể đc hoạt hóa theo đường khác nhau, đường cổ điển phát sớm nhất, đến 1953 Pillemer tím đường cạnh đường lectin gắn manoxe đc phát gần b.Ký hiệu quy ước quốc tế: -Bổ thể ký hiệu chung C’, chất “đường cổ điển đc gọi thành phần ký hiệu là: C1, C2 C9 -Các chất “con đường thứ hai” (con đường cạnh) gọi yếu tố gồm B,D ,P,lectin MASP -Các chất điều hồ hoạt hố bổ thể cách kím hãm phản ứng có kì hiệu là: INH, INA -Nhiều thành phần bổ thể tiền enzim,khi bị phân cắt thành mảnh thí mảnh nhỏ hồ vào dịch thể kì hiệu a, cịn mảnh lớn có hoạt tình enzim bám vào bề mặt kháng nguyên kì hiệu b (vd: C3a, C3b, C5a,C5b) c.Nơi sx thành phần bổ thể: -khi ni cấy invitro, đại thực bào có k/năg sx hầu hết thành phần bổ thể -Gan quan sx hầu hết thành phần bổ thể trừ C1 biểu mơ đường tiêu hóa tiết niệu sx -Đến tất thành phần yếu tố bổ thể đc tím hiểu đầy đủ cấu trúc,nồng độ bính thường máu d.Bổ thể hoạt hóa theo hai đường: -con đg cổ điển : -Ngoài virut, vk gram (-), protein C polisacarit kìch thìch hoạt hoá bổ thể Lúc thành phần C3 bị tách thành C3a, C3b - Con đường cạnh: e.Vai trò sinh học bổ thể: -Gây phản ứng viêm: - Tham gia dung giải vsv, gây độc TB vsv: phức hợp KN + KT + bổ thể Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -Tham gia trính chống nhiễm khuẩn nhờ trính bám dình miễn dịch -Bổ thể đc hoạt hóa, yếu tố gây nhiễm (vsv) đc bao phủ C3b qua receptor bề mặt đại thực bào nhận biết, tăng khả năg thực bào với vsv Đây q trính opsonin hóa -Xử lý phức hợp miễn dịch: -Bổ thể gắn lên TB limpho B (thành phần C3d) TB limpho T (thành phần C3dh) t/d điều hòa miễn dịch 2.Interferon (IFN) -Là loại protein yếu tố miễn dịch tự nhiên ko đặc hiệu -Do nhiều loại TB tiết bị kìch thìch nguồn thơng tin ngoại lai (virut, vk, độc tố ) -Tác dụng: +Chống virut bên trog TB +Interferon sau sinh ngấm vào TB xung quanh, TB virut xâm nhập đc vào ko nhân lên IFN hoạt hóa đoạn gen TB để tổng hợp lên loại protein chống virut (AVP), AVP có t/d phong bế q trính chép mARN virut nên virut ko nhân lên đc 3.Protein liên kết: - bề mặt TB, huyết bính thường có phân tử protein có khả năg liên kết tự nhiên với chất bề mặt yếu tố gây bệnh: LPS, Lectin, lipit - liên kết với yếu tố gêy bệnh, kím hãm, ngăn chặn tác động gây hại VD: protein phản ứng C có t/d hạn chế phát triển phế cầu khuẩn 4.Properdin -Là loại protein hoà tan huyết tương hầu hết loài động vật -Có phân tử lượng lớn, bị bất hoạt 5600C/30’ -Tác dụng diệt khuẩn ko đặc hiệu Khả diệt khuẩn properdin có đc liên kết với bổ thể ion Mg2+ tạo thành hệ thống kháng khuẩn ko đặc hiệu gọi hệ properdin Nếu tồn mính properdin ko có k/năg kháng khuẩn 5.Opsonin: - Là yếu tố miễn dịch dịch thể ko đặc hiệu, vai trị lớn hoạt động thực bào, có huyết tương lồi đv, đb hàm lượng tăng cao huyết tương thể có miễn dịch - Có t/d hỗ trợ TB thực bào cách vơ hiệu hố k/năg chống lại thực bào số vk có giáp mơ -Hoạt động Opsonin tăng cường kết hợp với bổ thể hệ thống properdin 6.Betalyzin: - protein có huyết tương lồi đv chịu nhiệt, có k/năg ức chế số loài vk gram (+) Câu 8: Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào TB? Hàng rào tế bào gồm loại tiểu thực bào đại thực bào a.Tiểu thực bào: -Là bạch cầu đa nhân trung tình -Thực bào phân tử nhỏ, vk TB -Chiếm 60 – 70% tổng số bạch cầu máu ngoại vi -Kìch thước 12 – 14 μm, bào tương chứa nhiều enzim để tiêu chất -Có đời sống ngắn 4-5 ngày, dễ lách qua thành mạch đến ổ viêm Thạch Văn Mạnh TYD-K55 - Sau thực bào, bạch cầu trung tình chết trở thành đối tượng đại thực bào b.Đại thực bào: -Có nguồn gốc từ nguyên đại thực bào tủy xương Hệ thống TB đơn nhân làm nvu thực bào gồm : monocyte lưu hành máu đại thực bào nằm trog mô -Tùy theo quan trú ngụ mà có tên gọi khác nhau: +Bạch cầu đơn nhân lớn máu +Kuffer gan +Langerhans da +Đại thực bào phế nang phổi +Microglia não +Đại thực bào phúc mạc bụng -Các đại thực bào lưu động TB bạch cầu đơn nhân lớn máu, chúng di chuyển khắp nơi thể lùng bắt vsv ăn TB thể bị thối hóa chất lạ -Đại thực bào chiếm – 8% tổng số bạch cầu máu ngoại vi -Kìch thước TB lớn 15 – 20 μm Bào tương chứa nhiều bọc Lysosom bên chứa nhiều enzim thủy phân -Đại thực bào mạnh vsv nội bào c.Quá trình thực bào: giai đoạn -Giai đoạn gắn: +Trong trính di chuyển yếu tố lạ, chúng gặp va chạm với TB thực bào, dình vào màng TB nhờ : protein liên kết, receptor như:  Receptor TB thực bào với phân tử đường có mặt vsv như: mannose, fructose, axit sialic  Receptor với thành phần Fc IgG  Receptor với bổ thể ( C3b, C4b ) +Sự gắn kết vsv với receptor TB thực bào khơi dậy loạt phản ứng hóa học chuyển thơng tin vào bên TB, làm TB đc hoạt hóa: thị chân giả, hính thành phagosome, tăng cường hoạt động enzim - giai đoạn nuốt : +Nơi tiếp xúc với vsv màng TB lõm xuống +Nguyên sinh chất tạo chân giả bao vây vsv tạo hốc thực bào phagosome - Giai đoạn tiêu: +Các hạt lysosome tiến đến sát phagosome xảy tượng hòa màng hai tiểu thể: màng lysosome nhập vào màng phagosome tạo thể phagolysosome +Trong phagolysosome vsv bị tiêu diệt hai chế:  Cơ chế nhờ enzim: vsv bị tiêu diệt nhờ enzim tiêu hóa protein, lysosome, lactoferin, cuối enzim thủy phân tiêu hủy hoàn toàn VSV  Cơ chế cần oxi: chế oxi đc sd mạnh tạo anion superoxyt (O1/2) NO, NO2, NO- tạo hệ thống sinh halogen hính thành cloramin tiêu diệt VSV -Đặc điểm, hoạt động thực bào: +Thực bào tượng đề kháng tự nhiên chống nhiễm trùng thể Khi vsv xâm nhập vào tổ chức, nơi tiếp xúc có tượng viêm tác động chất hóa học trung gian ổ viêm, tế bào đa nhân trung tình tăng sinh, kéo đến nơi vsv thâm nhập, xuyên mạch vào ổ viêm, len lỏi vào tổ chức bắt, nuốt tiêu hủy VSV Thạch Văn Mạnh TYD-K55 +tùy theo chất vật lạ: tùy mức độ hoạt động TB thực bào dẫn tới ba tính sau:  Tiêu tan vsv thực bào hồn chỉnh  Chất lạ tồn ko bị tiêu tan TB thực bào  Nhân lên: số vk độc lực cao (vk lao, virut) nhân lên TB thực bào TB thực bào chết Đây thực bào ko hoàn chỉnh +hoạt động thực bào đại thực bào thường chậm chạp triệt để so với tiểu thực bào ví đại thực bào cịn thực bào đc mảnh TB, TB thối hóa, xác tiểu cầu, bụi chất lạ khác Câu 9: Miễn dịch đặc hiệu khác so với Miễn dịch ko đặc hiệu? MD ko đặc hiệu MD đặc hiệu -Là khả bảo vệ tự nhiên thể chống -Là khả MD thể chống lại lại tác động có hại tác nhân gây hại loại mầm bệnh định -Khả MD kháng thể đặc hiệu -VD: vai trò bảo vệ thể da, niêm mạc, định dịch tiết tuyến, tế bào thực bào  MD đặc hiệu khác MD ko đặc hiệu điểm sau: Tính đặc hiệu: kháng thể, dù dịch thể hay TB đặc hiệu với epitop KN định, tình chất cấu trúc ko gian chiều bổ thể cứu cho KN kháng thể tương ứng Tính đa dạng: số lượng epitop KN có tự nhiên vơ lớn, có khoảng 109 epitop KN khác mà thể đủ kháng thể đặc hiệu cho epitop→tình đa dạng mặt cấu trúc phần cảm thụ KN Ký ức MD: KN vào lần đc trính diện cho TB MD→dịng TB tương ứng phân triển, số TB giữ lại hính ảnh số cấu trúc KN để dùng cho lần đáp ứng sau gặp lại KN Sự điều hoà: hệ thống MD tự điều hoà thơng qua thơng tin yếu tố hố học hoà tan(cytokin) TB tiết ra, tạo nên mạng lưới cực kí phức tạp mà rối loạn sinh tính trạng bệnh lý Khả phân biệt “cái lạ” “cái mình”: hệ thống MD có khả nhận thành phần KN cấu trúc thân để dung thứ, cịn bất kí “cái lạ” hồn tồn bị loại bỏ Câu 10,11: Kháng nguyên gì, Trình bày hai đặc tính kháng nguyên? Các đặc tính phụ kháng nguyên? a Kháng nguyên  KN chất lạ Khi KN có mặt thể động vật có khả gây đáp ứng MD sau chúng kết hợp đặc hiệu với sản phẩm đáp ứng này(kháng thể dịch thể đặc hiệu kháng thể dịch thể TB)  Khái quát: KN chất đc hệ thống MD thể nhận biết cách đặc hiệu b Trình bày đặc tính kháng nguyên Thạch Văn Mạnh TYD-K55  Gồm đặc tình Tính sinh MD tính đặc hiệu - Tính sinh MD : khả kháng nguyên tạo đáp ứng miễn dịch , đáp ứng dịch thể bào, dương tình âm tình - Tính sinh MD mạnh hay yếu phụ thuộc vào :  Tính kháng nguyên lại phụ thuộc vào Tính lạ kháng nguyên Cấu trúc kháng nguyên Tính lạ kháng nguyên : chất lạ với thể tình kháng nguyên mạnh sinh nhiều kháng thể Những chất xa nguồn gốc tổ tiên có tình kháng ngun mạnh  VD : Dùng albumin thỏ tiêm cho gà  Những chất chình ko phải KN thể ví ko phải chất lạ Cấu trúc kháng nguyên : Những KN có phân tử lượng lớn, cấu trúc phức tạp, tình KN cao Đặc biệt KN chất protein có chứa axit amin mạch vịng: tyroxin, triptophan có tình KN cao  Ngoại lệ: dextran (phừn tử lượng 80000 dalton) ko có tình KN ngược lại insulin (phân tử  lượng 6000),glucagon (phân tử lượng 3800) có tình KN mạnh  Những chất chất lipit axit nucleic thí tình sinh miễn dịch yếu ko có đc gắn với phân tử protein mang thí trở thành KN  Khả đáp ứng miễn dịch thể : loại KN đưa vào thể khác thí khả đáp ứng miễn dịch khác nhau, điều phụ thuộc vào tình di truyền hay địa ca thể  Tính đặc hiệu  đặc tình mà KN đc nhận biết đáp ứng miễn dịch gây Tình đặc hiệu KN chặt chẽ + Nếu thay đổi nhỏ cấu trúc hóa học KN mất tình đặc hiệu + KN thay đổi ko thể kết hợp với KT kìch thìch sinh trc + Đối với KN poliosid cần thay đổi chức đường liên kết hai chức đường (1 – hay – 6) thay α hay βthay đổi tình đặc hiệu + Với KN protein cần thay đổi a.a dạng D thay dạng L thay đổi tình đặc hiệu -Phản ứng chéo: xảy KN có nguồn gốc khác có phản ứng với KT Nguyên nhân: + Có cấu trúc giống + Có cấu trúc tương tự: KN loài vk khác or serotyp lồi có cấu trúc KN có phản ứng với KT có huyết Hoặc chì cấu trúc KN loài vk tương tự cấu trúc thể đv -Nhóm định KN (epitop): +Phần cấu trúc KN nhận biết hệ thống miễn dịch gọi nhóm định KN +Là vị trì để KN kết hợp với KT +Trên KN cụ thể có nhiều epitop ví cấu trúc đc nhắc nhắc lại nhiều lần Thạch Văn Mạnh TYD-K55  Như tình đặc hiệu KN ko phải toàn cấu trúc phân tử KN mà nhóm định KN -Tổng số epitop phân tử KN hóa trị KN Biểu thị khả KN kết hợp với nhiều phân tử KT VD: phân tử albumin huyết gắn đc phân tử KT c Các đặc tính phụ kháng nguyên Tính gây dị ứng: - Một số kháng nguyên dễ gây sản xuất lớp kháng thể:IgE, đáp ứng miễn dịch chuyển thẳng từ sản xuất lớp IgM sang IgE, gây dị ứng tức khắc (IgE lớp kháng thể tế bào, bám tế bào bạch cầu kiềm, tế bào Mast Sự kết hợp KN - KT ◊ giải phóng amin hoạt mạch: Histamin, Serotonin gây dị ứng) -Kháng nguyên dễ gây dị ứng: Phấn hoa, nọc độc số sâu bọ có cánh, số chất súc vật -Tình gây dị ứng phụ thuộc vào địa thể 2.Tính gây dung nạp: -Một số kháng nguyên dễ tạo tình trạng dung nạp miễn dịch kháng nguyên khác -Tình gây dung nạp phụ thuộc vào địa 3.Tính tá chất: -Một tá chất kết hợp với kháng nguyên làm tăng cường độ đáp ứng miễn dịch thể với kháng nguyên -Một số kháng nguyên thân có tình kìch thìch 4.Tính gây phân bào: -Một số kháng nguyên gây đáp ứng miễn dịch đặc hiệu làm tăng γglobulin huyết cách kìch thìch phân bào tế bào lympho B -VD: LPS: Lipopolysaccarid vi khuẩn gram (-) LPS hay đc dùng thực nghiệm với mục đìch phân bào Câu 12: Các loại kháng nguyên vi khuẩn ? Gồm loại 1.Kháng nguyên thân (Kháng nguyên: O) 2.Kháng nguyên lông (KN: H - Hauch) 3.Kháng nguyên giáp mô (KN K hay Kháng nguyên Vi ) 4.Kháng nguyên pili (Fimbriae) (kháng nguyên bám dính) 5.Kháng nguyên độc tố vi khuẩn (kháng nguyên ngoại bào) 6.Kháng nguyên Forman Kháng nguyên thân (Kháng nguyên: O) -Là kháng nguyên nằm lớp màng tế bào, thành phần chủ yếu polysacarit -chịu đc nhiệt độ, 100 độ sau bị phá huỷ -bền với cồn etylic, tiếp xúc với cồn 50 độ không bị phá huỷ -dễ bị phá huỷ formol: Formol 5phần nghín dễ dàng phá huỷ kháng nguyên -Kháng nguyên O khu trú bề mặt vi khuẩn ví liên hệ trực tiếp với hệ thống miễn dịch thể vi khuẩn có giáp mơ, giáp mơ che lấp kháng ngun O -Khi vào thể kháng nguyên O kìch thìch thể sinh kháng thể O, kết hợp kháng nguyên kháng thể đặc hiệu tạo phức hợp hạt mịn lắng xuống, tượng Thạch Văn Mạnh ngưng kết, thân vi khuẩn ngưng kết với -Kháng nguyên O có tình độc, yếu tố gây bệnh VK TYD-K55 Kháng nguyên lông (KN: H - Hauch) -Kháng nguyên H có lơng vi khuẩn, vi khuẩn có lơng có kháng ngun H -Kháng ngun H có chất protein -KN có đặc tình: +Kém chịu nhiệt, nhiệt độ 70 độC/1 kháng nguyên bị phá huỷ +Ko bền với cồn, bị cồn etylic 50 độ phá huỷ +Kháng formol phần nghín -Khi vào thể, kháng nguyên H kìch thìch sinh kháng thể H Sự kết hợp kháng nguyên với kháng thể xảy tượng ngưng kết: Các vi khuẩn ngưng kết lại với lơng dình lơng qua cầu nối kháng thể H, cụm Sự ngưng kết không bền, dễ tan lắc -Người ta chế riêng kháng nguyên O, kháng nguyên H cách: Muốn có kháng nguyên O cho vi khuẩn tiếp xúc với cồn 50 độ Muốn có kháng nguyên H cho vi khuẩn tiếp xúc với formol 5phần nghín Kháng ngun giáp mơ (KN K hay Kháng ngun Vi ) -Kháng ngun có giáp mơ vi khuẩn, vi khuẩn có giáp mơ có kháng ngun K Kháng ngun bên ngồi kháng nguyên O -Bản chất kháng nguyên thường polysacarit -Không chịu nhiệt, vừa yếu tố gây MD vừa yếu tố gây bệnh Kháng nguyên pili (Fimbriae) (kháng nguyên bám dính) -là kháng nguyên có pili vi khuẩn, vi khuẩn có pili có kháng nguyên -VD: Vi khuẩn đường ruột: E.coli, Salmonella -Kháng nguyên có chất protein (Kháng nguyên yếu tố gây bệnh quan trọng vi khuẩn đường ruột) -ở vi khuẩn đường ruột phát đc 30 loại kháng nguyên pili, có loại kháng nguyên quan trọng: K88 hay F4; K99 hay F5; 986P hay F6 F41 -Các kháng nguyên giúp cho vi khuẩn bám dình vào tế bào niêm mạc ruột từ có hội xâm nhập vào bên để gây bệnh -Theo Carter (1995), kháng nguyên bám dình vi khuẩn E.coli loài g/s sau: +Vi khuẩn E.coli lợn có: F4, F5, F6, F41 +Vi khuẩn E.coli trâu, bò: F5, F41 +Vi khuẩn E.coli câu: F5, F41 Kháng nguyên độc tố vi khuẩn (kháng nguyên ngoại bào) -Kháng nguyên ngoại độc tố vi khuẩn, độc tố độc có tình kháng ngun mạnh -Dưới tác động số yếu tố: formol, nhiệt độ độc tố tình độc, khơng cịn khả gây bệnh giữ đc tình kháng nguyên, đc dùng để chế vacxin gọi giải độc tố VD: giải độc tố uốn ván 10 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -IgE lớp kháng thể tế bào, bề mặt tế bào bạch cầu kiềm, Mast có thụ thể giành cho phần Fc lớp kháng thể Đây lớp kháng thể dễ gây dị ứng e Lớp IgD -Lớp IgD chiếm tỷ lệ thấp: 0,1 - 0,2% tổng số Ig huyết -Trọng lượng phân tử: 170.000 - 200.000 dalton, số lắng - 8S -Về cấu trúc +Phân tử IgD cho chuỗi nặng delta chuỗi nhẹ Lamda kappa tạo thành +IgD có chất glucoprotein, lớp kháng thể dễ bị tác động enzym tiêu protein -Cho đến chức sinh học lớp IgD chưa xác định rõ Người ta thường thấy tăng bệnh nhiễm khuẩn mạn tình khơng đặc hiệu cho loại -Đối với bào thai: +Bào thai có khả tổng hợp kháng thể sớm, vào khoảng tuần thứ 10 tổng hợp IgM, tuần thứ 12 tổng hợp IgG ìt +Bào thai khơng có khả tổng hợp IgA, IgE, IgD +IgG kháng thể qua đợc thai, ví thai nhi đc hưởng IgG mẹ Trong - tháng đầu thời kỳ thai, IgG qua thai ìt sau tuần 20 trở IgG qua nhiều Câu 25: Quy luật hình thành kháng thể dịch thể đặc hiệu? -Khi kháng nguyên xâm nhập vào thể, kháng thể chưa sinh mà phải sau thời gian tiềm tàng (thời gian dài hay ngắn phụ thuộc nhiều vào kháng nguyên, vào lần kháng nguyên xâm nhập lần đầu hay lần2, lần 3, ) Sau kháng thể đc sinh ra, lượng kháng thể tăng dần đạt mức cao sau - tuần, lượng kháng thể giảm dần biến sau vài tháng vài năm -Kháng nguyên vào thể lần đầu, đáp ứng miễn dịch gọi đáp ứng miễn dịch sơ cấp hay miễn dịch tiên phát -Kháng nguyên vào thể lần hai, đáp ứng miễn dịch gọi đáp ứng miễn dịch thứ cấp hay miễn dịch thứ phát -Khi kháng nguyên vào lần thời gian tiềm tàng ngắn hơn, lượng kháng thể sản xuất nhiều hơn, thời gian xuất kháng thể sớm -Sự khác biệt đáp ứng miễn dịch sơ cấp thứ cấp vai trò tế bào nhớ miễn dịch lympho T "nhớ", lympho B "nhớ" -Ở miễn dịch thứ phát tế bào "nhớ" miễn dịch phát triển nhanh mạnh tạo lớp tế bào sản xuất kháng thể đặc hiệu ví kháng thể xuất sớm hơn, cường độ đáp ứng miễn dịch dài hơn, mạnh -Đây sở khoa học cho việc tiêm phòng vacxin nhắc lại, tạo miễn dịch cao cho thể -Kháng thể dịch thể đặc hiệu thường tồn thể thời gian bị đào thải, ví phịng bệnh cho người gia súc, gia cầm sử dụng vacxin cần tiêm nhắc lại để tạo miễn dịch cao cho thể -So sánh miễn dịch sơ cấp thứ cấp: Miễn dịch sơ cấp Miễn dịch thứ cấp 25 Thạch Văn Mạnh -Thời gian tiềm tàng: - 14 ngày -Kháng thể ban đầu chủ yếu: IgM, sản xuất IgG ìt -Lượng kháng thể thấp -Ái tình kháng thể trung bính TYD-K55 -Thời gian tiềm tàng: 24 -Chủ yếu IgG, IgM không sản xuất -Lượng kháng thể cao -Ái tình kháng thể cao Câu 26: Các yếu tố ảnh hƣởng đến hình thành kháng thể đặc hiệu? Sự hính thành kháng thể đặc hiệu thể bị ảnh hưởng nhiều yếu tố đặc biệt như: Kháng nguyên, thể trạng thể, điều kiện ngoại cảnh,  Ảnh hƣởng kháng nguyên: -ảnh hưởng chất kháng nguyên: +Kháng nguyên có chất protein, có tình kháng ngun cao, kìch thìch thể sản sinh nhiều kháng thể so với kháng nguyên khác: Gluxit, lipit +ảnh hưởng đường xâm nhập kháng nguyên vào thể +Kháng nguyên vào thể nhiều đường, đưa kháng nguyên vào thể đường đưa thìch hợp nhất, lượng kháng thể sinh nhiều VD: - Virus thìch ứng tế bào thượng bí  đưa vacxin cách chủng da -Virus newcasthe thuộc nhóm Lentogen: Lasota, F, B1, V4 nhân lên tốt tế bào niêm mạc đường hơ hấp, tiêu hố  Nên đưa vacxin loại qua niêm mạc đường hô hấp, tiêu hoá, -Trong sử dụng vacxin, thường hay đưa vacxin vào thể cách tiêm da ví: kháng nguyên qua da  vào mạch bạch huyết  tổ chức hạch lympho (nơi tiếp nhận kháng nguyên sản xuất kháng thể) -Đưa kháng nguyên vào thể qua đường tiêu hố ìt sử dụng ví: Độ PH dày thấp, enzym đường tiêu hoá tác động  Kháng nguyên bị phân giải hay thay đổi đơn vị cấu trúc kháng nguyên  lượng kháng thể sinh ìt -Theo số tác giả đưa kháng ngun vào thể đường tiêu hố, hơ hấp liều lượng kháng nguyên gấp 10 - 100 lần liều kháng nguyên đưa vào dới da -Liều lượng kháng nguyên +Liều lượng kháng nguyên đưa vào thể nhiều, lượng kháng thể sinh nhiều Nhưng lượng kháng nguyên có giới hạn định ví: Nếu lượng kháng nguyên nhiều gây độc cho thể, gây tê liệt miễn dịch, dung nạp miễn dịch, kháng thể không đc sản xuất  Ảnh hƣởng lần đƣa kháng nguyên: -Đưa kháng nguyên vào thể, sau thời gian đưa kháng nguyên nhắc lại vài lần -kháng thể lần sau xuất sớm hơn, lượng kháng thể nhiều so với lần trước Có tượng vài trò tế bào nhớ miễn dịch -Hiện tợng đc ứng dụng việc tiêm nhắc lại vacxin, tạo miễn dịch cao cho thể  Ảnh hƣởng việc dùng nhiều loại kháng nguyên: -Cùng lúc đưa nhiều loại kháng nguyên vào thể với liều thìch hợp, loại kháng thể đc tạo ngang hay nhiều đa kháng nguyên vào riêng loại Ramon gọi tượng công lực kháng nguyên -Nhưng đưa nhiều loại kháng ngun vào thể với liều khơng thìch hợp  kết ngược lại -Hiện tượng công lực kháng nguyên đc ứng dụng vào việc chế tạo vacxin đa giá phòng bệnh cho người gia súc 26 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -VD: +ở người vacxin: PTD phòng bệnh (Ho gà, uốn ván, bạch hầu tiêm bắp hầu) (Ho gà: vi khuẩn Bordetella pertussis Uốn ván: vi khuẩn Clostridium tetani Bạch hầu: vi khuẩn Corynebacterium diphtheriae) +Gia súc: vacxin tụ dấu +Gia cầm: Vacxin Newcasthe + Gumboro + Bronchitis Infectious + Reovirus -Newcasthe + đậu gà  Ảnh hƣởng chất bổ trợ: -Chất bổ trợ chất cho thêm vào vacxin, làm hiệu lực vacxin cao -Chất bổ trợ đc chia làm loại chình: +Bổ trợ chất vơ cơ: Alumin hydroxid, Alumin photphat, Canxiphotphat, than hoạt tình +Bổ trợ chất hữu cơ: dầu động vật, dầu thực vật, dầu khoáng (dầu khoáng parafin) +Bổ trợ sinh vật +Xác vi khuẩn lao +Xác vi khuẩn Salmonella typhimurium -VD: Vacxin viêm gan vịt vơ hoạt có bổ trợ -Tác dụng bổ trợ: +Chất bổ trợ gây phản ứng viêm nhẹ  có tác dụng kìch thìch miễn dịch +Bổ trợ vơ cơ, bổ trợ dầu có tác dụng hấp phụ kháng ngun, làm kháng ngun khó đồng hố thể kháng nguyên tồn lâu, kìch thìch thể lâu  lượng kháng thể sinh nhiều +Bổ trợ sinh vật có tác dụng kìch thìch tế bào miễn dịch +Xác vi khuẩn lao làm tăng tương tác tế bào lympho T đại thực bào, tăng đáp ứng miễn dịch tế bào +LPS tác động mạnh lên tế bào đại thực bào lympho B Tác dụng LPS làm hoạt hoá đại thực bào thực bào thực bào hồn chỉnh +Với lympho B, LPS làm tăng biệt hoá phần bào lympho B  tăng tương bào, tăng tiết kháng thể dịch thể  Ảnh hƣởng thể điều kiện ngoại cảnh: -Cơ thể trưởng thành hệ thống quan, tế bào miễn dịch hoàn thiện  cho đáp ứng miễn dịch mạnh  lượng kháng thể sinh nhiều -Khi già quan miễn dịch suy giảm  đáp ứng miễn dịch giảm, đặc biệt giảm miễn dịch tế bào  lượng kháng thể giảm -Cơ thể khoẻ mạnh sản sinh kháng thể nhiều thể ốm, bệnh tật -Chế độ dinh dưỡng tốt cho lượng kháng thể nhiều so với thể suy dinh dưỡng -ở thể suy dinh dưỡng, hoạt động quan lympho giảm, rối loạn đáp ứng miễn dịch: Miễn dịch tế bào giảm, thực bào giảm, miễn dịch dịch thể giảm, -VD: +Thiếu protein  lượng kháng thể giảm +Nhiều kẽm (Zn)  giảm yếu tố dịch thể tuyến ức  giảm miễn dịch tế bào, Câu 27: Phản ứng ngƣng kết? -Là phản ứng liên kết tiểu thể có kìch thước nhỏ tình Micromet thành cấu trúc lớn quan sát đc mắt thường -Ở kháng nguyên cấu phần nằm bề mặt tiểu thể  Các loại phản ứng ngƣng kết: 1.Phản ứng ngưng kết nhanh phiến kính: 27 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -Đây phản ứng có tình chất định tình Thường sử dụng kháng ngun biết đc nhuộm màu để phát kháng thể tương ứng huyết Thường dùng để chẩn đốn bệnh truyền nhiễm -Vì dụ: +Bệnh thương hàn gà Typhus avium +CRD (Chromic Respiratory Disease) -Cách làm: +Dùng phiến kình, bên nghiệm, bên đối chứng +Bên nghiệm nhỏ giọt huyết cần chẩn đốn, sau nhỏ giọt kháng nguyên biết  trộn đều, sau - phút đọc kết +Nếu huyết có kháng thể tương ứng  kháng nguyên + kháng thể tạo thành đám ngưng kết 2.Phản ứng ngưng kết chậm ống nghiệm: -Phản ứng vừa có tình chất định tình, vừa định lượng kháng thể -Cách làm: +Dùng loạt ống nghiệm, cho vào ống thứ lượng huyết thanh, pha loãng huyết theo số (1/2; 1/4; 1/8 ) theo số 10 Sau cho vào ống nghiệm lượng kháng nguyên (lượng kháng nguyên tương đơng với lượng kháng thể) Trộn để nhiệt độ thìch hợp (tủ ấm 370C) sau 30 phút vài giờ, đọc kết tình đc hiệu giá ngưng kết +Hiệu giá ngưng kết: Là độ pha loãng cao huyết mà cịn khả gây tợng ngưng kết -Phản ứng thường đc sử dụng để chẩn đoán bệnh sảy thai truyền nhiễm 3.Phản ứng ngưng kết hồng cầu thụ động: -Trong phản ứng ngưng kết dùng kháng nguyên hoà tan để phát kháng thể tương ứng Phải cần đến tế bào màng làm giá đỡ mang phân tử kháng nguyên hoà tan -Thường dùng hồng cầu làm tế bào mang -Nguyên lý: +Kháng nguyên hoà tan trở thành kháng ngun hữu hính cách gắn kháng ngun hồ tan vào hồng cầu, hồng cầu làm giá đỡ cho kháng nguyên Phản ứng ngưng kết dễ dàng xảy +Có nhiều phương pháp gắn kháng ngun hồ tan lên bề mặt hồng cầu: Dùng số hoá chất axit tanic, benzidin, muối crôm, glutaldehyt để xử lý hồng cầu Các chất có nhóm chức gắn với hồng cầu, nhóm gắn với kháng nguyên +Khi kháng nguyên gặp kháng thể tương ứng, phản ứng ngưng kết xảy ra, ta quan sát rõ -Ngoài sử dụng hồng cầu làm giá đỡ, sử dụng hạt chất dẻo như: hạt latex, bentonìt Các hạt có tác dụng hấp phụ kháng ngun hồ tan vào  Ƣu nhƣợc điểm phản ứng ngƣng kết +Ưu điểm: Phản ứng đơn giản, dễ làm, độ nhạy cao, ìt tốn kém, đc sử dụng rộng rãi +Nhược điểm: Hay cho phản ứng dương tình giả, khó đạt trính độ chình xác cao Câu 28: Phản ứng kết tủa (Precipitation test) *)Nguyên lý: -Kháng nguyên hoà tan gặp kháng thể tương ứng tương quan thoả đáng (lượng kháng nguyên kháng thể thìch hợp) tượng kết tủa xảy -Sự kết hợp kháng nguyên với kháng thể tạo thành tập hợp: kháng nguyên- kháng thể- kháng nguyên- kháng thể-… 28 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -Hính thành cấu trúc mạng lưới chiều không gian, quan sát đc mắt thường biểu chất tủa màu đục -Trong phản ứng kết tủa thừa kháng thể thừa kháng nguyên thí kết hợp kháng nguyên - kháng thể xảy tượng tủa không xuất *)Phản ứng kết tủa môi trƣờng lỏng: -Phản ứng kết tủa tạo vịng: +Là phản ứng có tình chất định tình Dùng ống nghiệm nhỏ, cho vào lượng kháng ngun hồ tan Dùng pipet hút kháng huyết tương ứng, cho đầu pipet sát đáy ống nghiệm thả từ từ kháng huyết với lượng tương đơng với kháng nguyên Kháng huyết đội kháng nguyên lên Sau thời gian 15 - 20 phút vùng tiếp xúc xuất đĩa tủa mỏng +Phản ứng đc ứng dụng chẩn đoán bệnh nhiệt thán Phản ứng kết tủa Ascoli -Phương pháp Heidelberger Kendall: +Phương pháp vừa có tình chất định tình, vừa có tình chất định lượng +Phương pháp cịn đc dùng để tím tỷ lệ thìch hợp kháng nguyên, kháng thể cho phản ứng +Dùng loạt ống nghiệm, cho vào ống lượng kháng huyết Sau cho kháng nguyên vào với lượng từ ìt đến nhiều +Kết ống đầu ống cuối khơng có tủa ví thừa kháng thể thừa kháng nguyên Những ống thí tủa xuất hiện, tăng dần đến cực đại, giảm dần +Lập bảng biểu diễn thấy vùng: vùng thừa kháng thể, vùng cân kháng nguyên, kháng thể vùng thừa kháng nguyên *)Phản ứng kết tủa môi trƣờng đặc (gel): -Dùng thạch Agar để tạo môi trường đặc: phần đặc chiếm 1- 2% khối lượng, 98- 99% chất láng Thạch có cấu trúc dạng sợi nên tạo đc cấu trúc lưới không gian chứa đc nhiều chất láng -Nguyên tắc: Trong môi trường gel, kháng nguyên kháng thể cách khoảng, chúng khuếch tán phìa nhau, gặp Nếu kháng nguyên, kháng thể tương ứng kết hợp tạo phức hợp kháng nguyên - kháng thể Tại vùng có lượng kháng nguyên, kháng thể thìch hợp đường tủa xuất Có thể quan sát đc muốn rõ thí nhuộm -Phản ứng kết tủa thạch ống nghiệm (kỹ thuật Oudin) +Phản ứng kết tủa khuếch tán thạch đơn: •Dùng ống nghiệm có đường kình nhỏ, cho vào lượng kháng thể trộn lẫn với thạch Trên mặt thạch cho lượng dung dịch kháng nguyên Kháng nguyên từ môi trường lỏng khuếch tán vào thạch, xuống sâu lượng kháng nguyên loãng nơi tỷ lệ kháng nguyên kháng thể tương ứng xuất đường tủa dễ quan sát không bị tan lắc, thuận lợi di chuyển chụp ảnh •Độ nhạy phản ứng tăng gấp - lần so với thực phản ứng môi trường lỏng +Phản ứng kết tủa khuếch tán thạch kép: •Dùng ống nghiệm có đường kình nhỏ, cho kháng thể vào trước, cho vào bên kháng thể lượng thạch Sau cho lên mặt thạch lượng dung dịch kháng nguyên •Kháng nguyên bên từ môi trường lỏng khuếch tán vào thạch, kháng thể bên khuếch tán lên vào thạch nơi tỷ lệ kháng nguyên, kháng thể tương ứng xuất đường kết tủa •Trong ống nghiệm dùng nhiều cặp kháng nguyên, kháng thể khác để chẩn đoán xuất nhiều đường kết tủa riêng rẽ độ nông sâu khác + Phản ứng kết tủa thạch phiến kình đĩa petri (kỹ thuật Ouchterlony) 29 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 •Thực chất phản ứng kết tủa khuếch tán thạch kép, dễ làm, hay sử dụng (Phản ứng AGP: Agar gel precipitation) •Trên phiến kình hộp petri, đổ lớp thạch mỏng - 2mm Khi thạch đông lại, đục lỗ trịn: đường kình lỗ - 5mm, khoảng cách từ lỗ trung tâm với lỗ xung quanh; - 6mm: Lỗ 1: Kháng nguyên biết, Lỗ 2: Kháng thể tương ứng, Lỗ 3, 4, 5, 6: Kháng thể chưa biết •Kháng nguyên kháng thể cách khoảng thạch, chúng khuếch tán phìa, xa lỗ, nồng độ lỗng nơi kháng nguyên, kháng thể tương ứng xuất đường tủa •Có thể dùng hỗn hợp kháng thể để phát nhiều kháng nguyên dung dịch Lúc xuất nhiều đường tủa, đường tủa cặp đặc hiệu kháng nguyên - kháng thể -Có thể thấy nhiều loại kết quả: +Phản ứng giống hệt nhau: Khi kháng nguyên y hệt nhau, thí đường kết tủa nối liền +Phản ứng không giống hệt: Khi kháng nguyên khác nhau, kết hợp riêng rẽ với kháng thể, hai đường tủa cắt chéo +Phản ứng giống phần: Khi kháng nguyên có chung Epitop Epitop riêng khác cho đường kết tủa chung liền với đường tủa phụ xuất gắn với đường tủa trước kháng nguyên thứ hai *)Phản ứng kết tủa khuếch tán điện -Là kết hợp phản ứng kết tủa với di chuyển điện trường -Đây cải tiến có ý nghĩa: Dùng điện trường để đẩy nhanh tốc độ phản ứng kháng nguyên kháng thể Kháng thể γ globulin điện trường di chuyển cực âm Nếu kháng nguyên chất bị hút cực dương, chúng di chuyển gặp nhanh (1 - thay ví 24 - 48 giờ) -Phản ứng xảy nhạy (nhờ điện trường 90% kháng nguyên, kháng thể ngược chiều để gặp nhau, thay ví khuếch tán tứ phìa có 25% gặp -Miễn dịch điện di: +Dùng điện trường để di chuyển hỗn hợp kháng nguyên thành dải kháng nguyên Sau cho kháng thể vào rãnh song song với hàng kháng nguyên Chúng khuếch tán, gặp nhau, đường tủa nằm cách xa nhau, thay ví nằm tập trung vào vùng chật hẹp phản ứng khuếch tán kép (Ouchterlony) Ví dễ quan sát nhận định +Miễn dịch điện di cho phép phát kháng nguyên có 30 loại protein thay ví - điện di thường, - 10 kỹ thuật Ouchterlony Câu 29: Phản ứng kết hợp bổ thể (Phản ứng cố định bổ thể, phản ứng tiêu thụ bổ thể) -Là phản ứng huyết học, có thành phần tham gia: kháng nguyên, kháng thể bổ thể -Kháng thể phản ứng thuộc lớp IgM, IgG có khả hoạt hố bổ thể Khi kháng nguyên kết hợp với kháng thể tạo thành phức hợp kháng nguyên - kháng thể, có mặt bổ thể  bổ thể đc hoạt hố gắn vào tạo thành: kháng nguyên - kháng thể - bổ thể -Phản ứng đc dùng để phát kháng thể có khả hoạt hố bổ thể định lượng bổ thể có huyết -Phản ứng đc thực nhờ hai hệ thống: dung khuẩn, dung huyết tham gia bổ thể  Cách tiến hành phản ứng kết hợp bổ thể 30 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -Phản ứng kết hợp bổ thể phải dùng hai hệ thống: Hệ thống dung khuẩn hệ thống dung huyết Bởi ví dung khuẩn mắt thường khơng quan sát đc phải dùng hệ thống dung huyết để đánh giá kết qua quan sát mắt thường -Chuẩn bị: +Kháng nguyên: Là kháng nguyên biết VD: Vi khuẩn Brucella +Kháng thể: Là kháng thể nghi Lấy máu vật nghi mắc bệnh chắt huyết thanh, đun 560C/30'  diệt bổ thể +Hồng cầu Cừu +Huyết kháng hồng cầu Cừu đun 560C/30' +Bổ thể: Huyết chuột lang đc chuẩn độ theo hệ thống dung huyết -Cách làm: +Cho vào ống nghiệm hệ thống dung khuẩn gồm có: kháng nguyên, kháng thể nghi cho tiếp vào lượng bổ thể đc chuẩn độ Để 370C 20 - 30 phút +Cho tiếp vào ống nghiệm hệ thống dung huyết gồm có hồng cầu Cừu huyết kháng hồng cầu Cừu Để 370C 20 - 30', đọc kết -Phản ứng dƣơng tính: +Hồng cầu khơng tan lắng xuống đáy thành cục tròn đỏ, nước bên Đó do: kháng nguyên + kháng thể tương ứng + bổ thể +Bổ thể đc sử dụng khơng cịn cho hệ thống dung huyết Phản ứng dương tình chứng tỏ huyết vật nghi có kháng thể tương ứng với kháng nguyên Con vật mắc bệnh -Phản ứng âm tính: +Hồng cầu bị tan, huyễn dịch có màu đỏ +Đó khơng có kháng thể tương ứng với kháng nguyên, bổ thể không dùng cho hệ thống dung khuẩn mà tham gia vào hệ thống dung huyết  hồng cầu tan +Phản ứng âm tình, vật khơng mắc bệnh Câu 30: Phản ứng trung hoà (Neutralization test)? -Một số kháng thể gặp kháng ngun kìch thìch sinh chúng như: virus, độc tố vi khuẩn làm cho chúng khơng cịn khả gây bệnh -Phản ứng kết hợp kháng nguyên với kháng thể gọi phản ứng trung hoà -Phản ứng trung hoà hay sử dụng phản ứng trung hoà độc tố phản ứng trung hoà virus  Để làm phản ứng trung hồ có phƣơng pháp +Phương pháp thứ nhất: •Huyết khơng pha lỗng (cố định), virus pha lỗng •Theo phương pháp virus đc pha loãng theo số 10: 10-1 10-7 , hỗn hợp với lượng tương đương huyết miễn dịch nồng độ Để nhiệt độ phòng 30' đến giờ, đem gây nhiễm cho đối tượng nuôi cấy virus (phơi gà động vật nghiệm mơi trường tế bào) •Mỗi nồng độ gây nhiễm cho - đối tượng ni cấy •Bằng phương pháp người ta chuẩn độ đc hiệu giá virus hỗn hợp huyết + Phương pháp thứ hai •Virus cố định, huyết pha lỗng •Theo phương pháp này, huyết đc pha loãng theo số (1/2; 1/4; 1/18 ), hỗn hợp với lượng virus định (thường dùng lượng virus tương đơng với liều 100 đến 1000 liều EID50, LD50) 31 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 •Theo phương pháp trước làm phản ứng phải xác định đc liều gây nhiễm liều gây chết 50% đối tượng nuôi cấy virus (EID50 LD50) •Phương pháp ta xác định đc hiệu giá huyết trung hồ -Phản ứng trung hồ phải có phản ứng đối chiếu kèm theo huyết miễn dịch đc thay huyết bính thường -Kết phản ứng trung hoà biểu diễn số trung hoà +Chỉ số trung hoà: Chỉ số trung hoà biểu diễn liều tối đa virus bị trung hồ huyết so với đối chiếu •IN = colog(SN/SS) •IN: Index Neutralization (chỉ số trung hồ) •SS: Serum special (huyết chuẩn) •SN: Seum normal (huyết bính thường) •IN từ 11 - 50: phản ứng nghi ngờ •IN> 50: phản ứng dương tình Câu 31+32: Phản ứng miễn dịch huỳnh quang (Immuno - fluorescent - test) IF: -Dùng chất đánh dấu chất phát huỳnh quang (khi hấp thụ ánh sáng có bước sóng định phát ánh sáng có bước sóng dài hơn) -Nguyên lý: +Khi dùng kháng thể kháng kháng thể đc nhuộm chất phát huỳnh quang, cho kết hợp với kháng nguyên cần chẩn đoán Nếu có phức hợp kháng nguyên - kháng thể soi kình hiển vi huỳnh quang phát sáng +Dùng chất phát huỳnh quang: •Fluorescent Isothiocyanat: cho màu xanh lục •Rodamin: màu đỏ gạch •Lixamin - Rodamin B (RB200): đỏ vàng da cam -Có phƣơng pháp: trực tiếp gián tiếp  Phản ứng miễn dịch huỳnh quang trực tiếp: -Trong phản ứng thường dùng kháng thể đặc hiệu nhuộm chất phát huỳnh quang để phát kháng nguyên chưa biết -Cách làm: +Lấy bệnh phẩm cần chẩn đoán, làm thành tiêu (phiết bệnh phẩm lên phiến kình, cố định) để kháng nguyên gắn chặt lên phiến kình +Nhỏ giọt kháng nguyên đặc hiệu gắn chất phát huỳnh quang lên tiêu +Để thời gian 30 phút, rửa nước, để khô, quan sát kình hiển vi huỳnh quang (ánh sáng tia tử ngoại) Đọc kết •Phản ứng dương tình: Có tượng phát sáng có kết hợp kháng nguyên - kháng thể gắn chất phát huỳnh quang •Phản ứng âm tình: Khơng có phát sáng, khơng có kết hợp kháng nguyên - kháng thể  Phản ứng miễn dịch huỳnh quang gián tiếp: -Dùng kháng kháng thể đc nhuộm chất phát huỳnh quang để phát kháng ngun cần chẩn đốn -Phương pháp cịn gọi kỹ thuật lớp với thành phần tham gia +Kháng nguyên cần chẩn đoán (kháng nguyên ?) 32 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 +Kháng thể đặc hiệu +Kháng kháng thể gắn chất phát huỳnh quang Trong kháng thể đặc hiệu có chức năng: •Là kháng thể đặc hiệu với kháng ngun cần chẩn đốn •Là kháng nguyên kháng kháng thể đánh dấu (kháng kháng thể kháng thể kháng globulin loài) -Cách làm: +Lấy bệnh phẩm cần chuẩn đoán làm tiêu để kháng nguyên gắn chặt lên phiến kình +Nhỏ giọt kháng thể đặc hiệu lên phiến kình Để tác động 15', rửa nước +Nhỏ tiếp - giọt kháng kháng thể gắn chất phát huỳnh quang +Để tác động thời gian, rửa nước, để khô, quan sát kình hiển vi huỳnh quang Đọc kết -Phản ứng dương tình: Có tượng phát sáng, tức có tượng kết hợp kháng nguyên + kháng thể + kháng kháng thể  gia súc mắc bệnh -Phản ứng âm tình: Khơng có tượng phát sáng, tức khơng có tượng kết hợp kháng ngun + kháng thể + kháng kháng thể Bởi ví kháng ngun kháng thể khơng tương ứng, khơng có kết hợp kháng nguyên - kháng thể, kháng thể bị rửa trôi -Phương pháp gián tiếp hay đc sử dụng ví: +Chỉ cần lần gắn kháng kháng thể với chất huỳnh quang ta sử dụng để chẩn đoán nhiều kháng nguyên khác nhau, với điều kiện kháng thể đặc hiệu chúng phải đc chế loài vật +Độ nhạy phản ứng cao hơn, ví phân tử kháng ngun bị nhiều kháng kháng thể bám vào  độ phát quang tăng lên, dễ phát Câu 33: Phản ứng miễn dịch gắn enzim (Enzim linked Immuno Sorbent Assay): -Dùng chất đánh dấu enzim có hoạt tình cao, phát chất đặc hiệu với enzim, thường cho màu -Nguyên lý: Dùng kháng thể kháng kháng thể gắn enzim, cho kết hợp trực tiếp gián tiếp với kháng nguyên, sau cho chất đặc hiệu với enzim vào, chất kết hợp với enzim gắn tạo nên màu Khi so màu quang phổ ký định lượng đc mức độ phản ứng  Phản ứng ELISA trực tiếp: Dùng để phát kháng nguyên -Cho kháng thể đặc hiệu hấp phụ lên lỗ nhựa, để thời gian, rửa nước loại bỏ kháng thể không gắn -Cho kháng nguyên cần chẩn đoán vào (kháng nguyên đc chiết xuất dạng hoà tan) để độ giờ, rửa nước (loại bỏ thành phần thừa) -Cho kháng thể đặc hiệu gắn enzim vào Để thời gian, rửa nước -Cho chất đặc hiệu với enzim vào, để thời gian (20 - 30') Đọc kết +Nếu có màu tức có kháng nguyên tương ứng với kháng thể đặc hiêu, phản ứng dương tình So màu quang phổ kế để định lượng mức độ phản ứng +Nếu khơng có màu: Phản ứng âm tình  Phản ứng ELISA gián tiếp: Dùng để phát kháng thể -Cho kháng nguyên biết hấp phụ lên nhựa, để thời gian (qua đêm), rửa nước để loại kháng nguyên thừa -Cho huyết cần chẩn đoán vào, để độ Rửa nước loại bỏ thành phần thừa 33 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -Cho kháng kháng thể tương ứng gắn enzim vào, để thời gian (30'), rửa nước -Cho chất đặc hiệu với enzim vào, để thời gian độ 20', đọc kết +Phản ứng dương tình: Có màu xuất So màu quang phổ kế để định lượng mức độ phản ứng +Phản ứng âm tình: Khơng có màu xuất -Trong phản ứng ELISA enzim có hoạt tình cao hay sử dụng peroxydase, chất với enzim 3,3' diaminobenzidin, dới tác dụng enzim tạo màu nâu -Phản ứng ELISA có độ nhậy cao Câu 34: Dung nạp miễn dịch? a Khái niệm: -Dung nạp miễn dịch tượng thể khơng có đáp ứng miễn dịch với loại kháng nguyên lạ cá thể khác lồi có đáp ứng miễn dịch b Phân loại: Dung nạp miễn dịch có: +Đặc hiệu: Là tính trạng thể khơng đáp ứng miễn dịch với loại kháng nguyên bính thường có đáp ứng +Khơng đặc hiệu: Cơ thể đáp ứng miễn dịch với loại kháng nguyên +Tuyệt đối: Là trạng thái dung nạp bền vững, lâu dài có suốt đời +Tương đối: Là trạng thái dung nạp miễn dịch tồn thời gian ngắn c Cơ chế: Dưới ánh sáng thuyết chọn lọc, người ta giải thìch tượng dung nạp miễn dịch sau: +Trong thời kỳ bào thai, máy miễn dịch thể có khả nhận biết thành phần mính (tất gí có bào thai phần mính, ví nên kháng nguyên lạ xâm nhập thời kỳ thể chấp nhận thành phần mính Hết thời kỳ bào thai, khả khơng cịn +Cụ thể nữa, theo quy luật sinh học: thể sinh vật có nhiều Clon tế bào, dòng tế bào giữ mật mã di truyền tổng hợp nên loại kháng thể đặc hiệu tương ứng với loại kháng nguyên có tự nhiên (ước lượng thể có 1012 tế bào lymphoit, 106 tế bào có tế bào đột biến tạo dịng Clon thí có 106 dịng Clon khác tổng hợp 106 loại kháng thể khác Con số đáp ứng đc số lượng kháng nguyên tự nhiên) +Trong thời kỳ bào thai, dịng tế bào có thẩm quyền miễn dịch sinh kháng thể chống lại thành phần thể bị tiêu diệt ức chế Cũng vậy, dịng tế bào có thẩm quyền miễn dịch sinh kháng thể chống lại kháng nguyên lạ rơi vào thời kỳ bào thai bị ức chế tiêu diệt Khi vật trưởng thành không sinh kháng thể chống lại kháng nguyên lạ Thực chất dung nạp miễn dịch huỷ hoại ức chế tế bào có thẩm quyền miễn dịch chuyên biệt phá huỷ mảnh ghép hay chung tế bào có thẩm quyền miễn dịch gây đáp ứng miễn dịch với kháng nguyên Dung nạp miễn dịch làm cho thể hoàn toàn khả chống lại kháng nguyên Đối với vi sinh vật, lúc thể trở thành mảnh đất màu mỡ bỏ ngỏ khơng phịng thủ Câu 35: Tự miễn dịch (autoimmunity)? 34 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 -Bệnh tự miễn dịch bệnh lý cấu trúc chức phận miễn dịch, thể không nhận thành phần thân mính, ảnh hưởng tế bào có thẩm quyền miễn dịch tự kháng thể, thể chống lại thành phần bính thường mính gây nên tổn thương thực thể rối loạn thức ăn -Thực chất vấn đề chỗ: tế bào tổ chức thể, số hoàn cảnh điều kiện cụ thể lại trở thành kháng nguyên Kháng nguyên hính thành thể nên có tên tự kháng nguyên hay kháng nguyên nội sinh, tạo nên tự kháng nguyên lympho bào mẫn cảm chống lại tổ chức chình thân mính gây nên tổn thương cho tổ chức Nếu tổn thương lớn, phản ứng tự miễn dịch chuyển thành bệnh tự miễn dịch Bệnh tự miễn dịch xảy nguyên nhân sau: +Do cấu tạo thể có tổ chức vị trì biệt lập, không tiếp xúc với hệ thống miễn dịch Nếu vi nguyên nhân dẫn đến tiếp xúc chúng đc coi kháng nguyên lạ thể có đáp ứng miễn dịch chống lại; trường hợp hay xảy với tổ chức tuyến giáp, tinh trùng, viêm mắt giao cảm VD: Bệnh viêm mắt giao cảm, bị chấn thương mảnh thuỷ tinh thể rơi vào máu kìch thìch hính thành kháng thể kháng thể chống lại thuỷ tinh thể, mống mắt lại gây mù Bệnh vô sinh xuất kháng thể kháng tinh trùng +Cơ thể có khả chống lại tổ chức chình mính tổ chức bệnh lý Do tác động trính nhiễm trùng, nhiễm độc, chấn thương số tế bào tổ chức bị tổn thương thay đổi cấu trúc, trở thành lạ với thể VD: Bệnh viêm gan virus: virus biến đổi cấu trúc tế bào gan thể chống lại viêm gan mãn tình +Cơ thể có khả chống lại tổ chức mính vi khuẩn, virus lọt vào có kháng nguyên chung với kháng nguyên thành phần quen thuộc thể VD: Trong bệnh thấp tim: chất hexozamin có polyoxit liên cầu khuẩn β có thành phần gluco protein van tim, nên kháng thể kháng liên cầu khuẩn kháng van tim gây tổn thương van tim Trường hợp viêm cầu thận, khớp xảy tương tự +Do có thiếu sót bổ máy kiểm sốt miễn dịch: Khi cịn giai đoạn bào thai, dòng tế bào chống lại kháng nguyên thân bị thủ tiêu ức chế chọn lọc, tạo thành dòng bị cấm Do ngun nhân đó, hệ thống kím hãm dịng bị cấm suy yếu Các dòng tế bào bị cấm đc giải toả, hoạt động mạnh mẽ sinh kháng thể chống lại tổ chức chình mính VD: VK DDL có cấu trúc kháng nguyên giống tế bào van tim nên gây tính trạng bệnh lý van tim làm van tim bị sùi, loét Câu 36: Suy giảm miễn dịch (immuno deficisucy)? a Khái niệm: Suy giảm miễn dịch tính trạng thể sống hệ thống miễn dịch hoạt động yếu, không đáp ứng đc với yêu cầu sống bính thường, dẫn đến khơng chống lại đc với vi sinh vật gây bệnh mà hậu thể bị nhiễm trùng nặng đến tử vong b Phân loại: Suy giảm miễn dịch đc chia làm hai loại:  Suy giảm miễn dịch bẩm sinh: +Suy giảm miễn dịch bẩm sinh hay tiên phát bất thường mang tình di truyền, tạo khuyết tật hệ thống miễn dịch, là: +Suy giảm miễn dịch từ tế bào gốc chung cho hai dòng tế bào lympho B T Trường hợp đc gọi suy giảm miễn dịch nặng phối hợp (SCID - Severed Combined Immuno Deficiency) 35 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 +Suy giảm miễn dịch bẩm sinh dịng T Có trường hợp: Suy giảm nặng dịng T suy giảm tuyến ức làm dòng lympho T khơng trưởng thành biệt hóa đc, kết khơng có miễn dịch qua trung gian tế bào Hiện tượng gọi hội chứng George Trường hợp thứ hai rối loạn hoạt hoá tế bào lympho T trưởng thành +Suy giảm miễn dịch bẩm sinh dịng B: Có thể tổn thương tuỷ xơng, túi Fabricius mà khơng có biệt hố dịng B có sai lạc q trính hoạt hóa lympho B trưởng thành gây rối loạn tổng hợp kháng thể dịch thể +Suy giảm miễn dịch bẩm sinh dòng tế bào thực bào sản xuất bổ thể gây giảm tế bào thực bào thiếu hụt bổ thể  Suy giảm miễn dịch mắc phải +Suy giảm miễn dịch mắc phải trạng thái bệnh lý hay gặp, tượng thứ phát sau nhiều bệnh Nhất bệnh gây suy dinh dưỡng, nhiễm độc, ảnh hưởng số thuốc gây ức chế miễn dịch nhiễm virus +VD: người nhiễm virus HIV - bệnh nan y thời đại gia cầm bệnh Gumboro - suy giảm miễn dịch dịch thể thứ phát nhiễm virus Gumboro +Suy giảm miễn dịch thứ phát suy dinh dưỡng: Người ta thấy rõ rằng: thể bị suy dinh dưỡng xuất trạng thái suy giảm miễn dịch không đặc hiệu lẫn đặc hiệu mà chế bệnh sinh thiếu nguyên liệu sinh tổng hợp chất +Suy giảm miễn dịch thứ phát nhiễm trùng: •Trong tất trường hợp nhiễm khuẩn (virus, vi khuẩn, nấm hay ký sinh trùng) Nếu kộo dài đến gây suy dinh dưỡng dẫn đến suy giảm miễn dịch •Nhiễm vi rút dẫn đến rối loạn đáp ứng miễn dịch làm suy giảm miễn dịch dẫn đến bội nhiễm khác •Nhiễm khuẩn mạnh, đặc biệt nhiễm vi khuẩn nội tế bào hủi thí gây suy giảm miễn dịch tế bào •Ở gia cầm: Virut Gumboro làm tổn thương nặng nề túi Fabricius rối loạn biệt hoá lympho B dẫn đến suy giảm miễn dịch dịch thể trầm trọng Ở Vr tai xanh cơng vào tế bào ĐTB phế nang làm khả thực bào vi khuẩn nên ko có tế bào trính diện kháng nguyên -Suy giảm miễn dịch thứ phát số bệnh khác: +Các bệnh ác tình ung thư, bệnh máu ác tình bệnh thận suy thận, thận nhiễm mỡ dẫn đến suy giảm miễn dịch +Ngoài thể già, có thay đổi hoạt động miễn dịch, người ta thấy có suy giảm miễn dịch rõ rệt, ngời già thường thấy tăng khả nhiểm khuẩn, hay bị ung thư, mắc bệnh tự mẫn chình suy giảm miễn dịch Câu 37: Quá mẫn? a Khái niệm: -Quá mẫn: phản ứng mức thể miễn dịch KN chúng xâm nhập vào lần sau -Sự tương tác KN KT, KN lympho T mẫn cảm dẫn đến tổn thương rối loạn hoạt động cho thể từ mức độ nhẹ đến nặng tử vong b Phân loại: Có hai loại mẫn: mẫn nhanh mẫn muộn 36 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 1.Quá mẫn nhanh hay mẫn tức khắc: phản ứng sảy tức khắc không muộn 6h kể từ có tương tác gia KN KT đặc hiệu Quá mẫn tức khắc lại bao gồm phản vệ dị ứng: -Phản vệ (Anaphylaxia): +Phản vệ phản ứng miễn dịch bệnh lý hoàn toàn trái ngược với miễn dịch bảo vệ, xuất tất lồi động vật có vú, phản vệ gây tổn thương nặng nề cho thể Phản vệ chia làm: •Phản vệ tồn thân: xuất KN vào thể đường tĩnh mạch với tốc độ nhanh, thể thường bị truỵ mạch, tăng hơ hấp, khó thở, tăng tình thấm thành mạch, co trơn, rối loạn tuần hồn, tiêu hố, tiết, co giật chết Những biểu chất amin hoạt mạch Histamin, serotamin thoát từ TB Mast, bạch cầu kiềm •Phản vệ cục bộ: hay xảy da, xuất đưa KN vào thể qua da niêm mạc, KN KT kết hợp bề mặt tế bào tổ chức, hính thành phản ứng viêm cục bổ chất hoạt mạch đc tiết ạt cục +Cơ chế phản vệ: có hai lớp KT gây phản ứng IgE IgG Các KT xuất hiện, dù nồng độ thấp bám mạnh lên tế bào Mast tế bào bạch cầu kiềm KN kết hợp với KT bề mặt tế bào gây tìn hiệu làm thay đổi hoạt động màng tế bào làm tế bào giải phóng bọng chứa chất hoá học trung gian amin hoạt mạch Các chất trực tiếp tác động lên tế bào quan phủ tạng gây tổn thương nghiêm trọng -Dị ứng bệnh dị ứng +Dị ứng danh từ để trạng thái phản ứng khác thường thể với KN lạ, phản ứng miễn dịch bệnh lý sảy tượng phản vệ toàn thân hay cục KT IgE kết hợp với KN gây nên +KN gây nên dị ứng gọi dị ứng nguyên (allurgen) KT IgE gây dị ứng đc gọi KT dị ứng (reagin) người, dị ứng bệnh phổ biến thể có đáp ứng miễn dịch tạo IgE trội có dị nguyên xâm nhập Những thể cần tiếp xúc với lượng dị nguyên nhỏ thí tạo lượng IgE đủ gây biểu phản vệ +Các dị nguyên xâm nhập vào thể nhiều đường khác nhau, chủ yếu qua da hô hấp •Dị ứng toàn thân: biểu giống phản vệ toàn thân, thường xảy người, nguy hiểm, điển hính dị ứng penicilin, đặc biệt benzympenicilin Một biểu tai biến dùng huyết điều trị nhiều lần Một số thể sinh IgE gây dị ứng •Dị ứng cục bộ: hay gặp trường hợp : hen mề đay, eczema, viêm mũi dị ứng •Phịng chống dị ứng: Điều trị tai biến dị ứng có tình chất cấp cứu ví chết nhanh -Thuốc: dùng thuốc đối lập với tác dụng amin hoạt mạch Epiuephrin, isoproterenol - dùng thuốc kháng Histamin -Giải mẫn: tiêm dị nguyên thời gian dài với liều tăng dần Làm thể sinh IgG nhiều hơn, ngăn cản kết hợp dị nguyên IgE bám tế bào Mast 2.Quá mẫn muộn -Xảy lympho bào T mẫn cảm với KN xảy thể có đáp ứng tế bào gọi muộn phản ứng xảy chậm, sau đưa KN vào thể từ - 8h cường độ cao sau 24 48h hàng tuần Quá mẫn muộn thường khu trú cục dạng phản ứng viêm đặc trưng với thâm nhiễm đại thực bào lympho bào -Quá mẫn muộn với VSV hay dị ứng nhiễm trùng: +Điển hính mẫn muộn với vi khuẩn lao 37 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 +Thì nghiệm Koch: tiêm vi khuẩn lao vào chuột lang mẫn cảm, kết hợp vi khuẩn lao với lympho T mẫn cảm khu trú đc vi khuẩn lại gây phản ứng viêm nơi tiêm tạo u hạt +Cơ thể mẫn muộn kết hợp KN với lympho T mẫn cảm, T tiết lymphokin có tác dụng tập trung đại thực bào bạch cầu hạt đến để thực bào vi khuẩn Tại đại thực bào bạch cầu tiết enzym làm tổn thương tổ chức, lymphokin gây huỷ hoại tế bào +Hiện tượng đc ứng dụng chẩn đoán để phát số bệnh có miễn dịch tế bào bệnh lao -Quá mẫn tiếp xúc: Một số hóa chất, số kim loại nặng, tiếp xúc, xâm nhập qua da vào thể chúng kết hợp với protein thể tạo dị nguyên, kìch thìch thể sinh miễn dịch tế bào Nếu tiếp xúc lần sau gây tổn thương cục bổ: mụn, sưng cứng Câu 38: Hiểu biết phản ứng Sandwich Elisa (Sandwich Elisa trực tiếp, Sandwich Elisa gián tiếp)? Phản ứng Sandwich ELISA dùng để xác định kháng nguyên Phản ứng Sandwich gồm có dạng:  Sandwich ELISA trực tiếp: -Các bước tiến hành: +Gắn kháng thể chuẩn lên giá thể, ủ thời gian, rửa nc +Cho kháng nguyên nghi vào, để thời gian, rửa nc +Cho kháng thể có gắn enzyme vào để thời gian, rửa nc Sau cho chất vào để thời gian +Cho chất dừng phản ứng vào -Đọc kết quang phổ kế +Phản ứng dƣơng tính có xuất màu So màu quang phổ kế định lượng mức độ phản ứng +Âm tính: ko xuất màu  Sandwich ELISA gián tiếp: -Các bước tiến hành: +Gắn kháng thể chuẩn lên giá thể, ủ thời gian, rửa nc +Cho kháng nguyên chuẩn vào, để thời gian, rửa nc +Cho kháng thể có gắn enzyme vào để thời gian, rửa nc Sau cho chất vào để thời gian +Cho chất dừng phản ứng vào -Đọc kết quang phổ kế +Phản ứng dƣơng tính có xuất màu So màu quang phổ kế định lượng mức độ phản ứng +Âm tính: ko xuất màu Câu 39:Hiểu biết phản ứng Elisa cạnh tranh (để phát kháng nguyên để phát kháng thể)? Phản ứng Elisa cạnh tranh gồm loại: để phát kháng nguyên để phát kháng thể a Elisa cạnh tranh phát kháng thể: -Các bước tiến hành: +Gắn kháng thể biết lên giá thể, ủ thời gian, rửa nước  loại bỏ kháng nguyên thừa 38 Thạch Văn Mạnh TYD-K55 +Cho kháng thể nghi vào, để thời gian, rửa nước +Cho kháng thể chuẩn đặc hiệu với kháng nguyên gắn enzyme, để thời gian, rửa nc +Cho chất đặc hiệu với enzyme, cho chất dừng phản ứng vào -Đọc kết quả: +Phản ứng dƣơng tính: Phức hợp ko xuất màu kháng thể nghi phù hợp với kháng nguyên biết nên cạnh tranh kết hợp kháng thể chuẩn có gắn enzyme +Phản ứng âm tính: phức hợp xuất màu đặc trƣng kháng thể nghi ko phù hợp với kháng nguyên chuẩn nên bị rửa trôi Kháng thể biết có gắn enzyme trực tiếp kết hợp với kháng nguyên biết cho chất phù hợp vào tạo màu b Elisa cạnh tranh phát kháng nguyên: -Các bước tiến hành: +Gắn kháng thể biết lên giá thể, ủ thời gian, rửa nước +Cho kháng thể nghi vào, để thời gian, rửa nc nhằm loại bỏ kháng nguyên thừa +Cho kháng nguyên biết có gắn enzyme vào, để thời gian, rửa nước +Cho chất đặc hiệu với enzyme, để thời gian Cho chất dừng phản ứng vào -Đọc kết quang phổ kế: +Phản ứng dƣơng tính: Phức hợp ko xuất màu kháng nguyên nghi phù hợp với kháng thể biết nên cạnh tranh kết hợp kháng nguyên chuẩn có gắn enzyme +Phản ứng âm tính: phức hợp xuất màu đặc trƣng kháng nguyên nghi ko phù hợp với kháng thể nên bị rửa trôi Kháng nguyên biết có gắn enzyme trực tiếp kết hợp với kháng thể gắn kit Khi cho chất phù hợp vào tạo màu 39 ... đáp ứng miễn dịch gọi đáp ứng miễn dịch sơ cấp hay miễn dịch tiên phát -Kháng nguyên vào thể lần hai, đáp ứng miễn dịch gọi đáp ứng miễn dịch thứ cấp hay miễn dịch thứ phát -Khi kháng nguyên vào... - suy giảm miễn dịch dịch thể thứ phát nhiễm virus Gumboro +Suy giảm miễn dịch thứ phát suy dinh dưỡng: Người ta th? ?y rõ rằng: thể bị suy dinh dưỡng xuất trạng thái suy giảm miễn dịch không đặc... hóa TB lympho B t? ?y xương VD: người bị suy giảm miễn dịch dòng lympho B Nếu ghép t? ?y xương  miễn dịch dịch thể đc phục hồi Câu 16: Trình b? ?y hiểu biết quan lympho ngoại vi?  Cơ quan lympho ngoại