Đề cương ôn tập môn vi sinh vật thú y

Thạch Văn Mạnh TYD-K55 ĐỀ CƢƠNG ÔN THI HẾT HỌC PHẦN MÔN: Vi sinh vật thú y Học kỳ I năm học 2013-2014 Phần 1 : Vi khuẩn học chuyên khoa Nội dung Pasteurella multocida Staphylococcus aureus Bacillus anthracis Erysipelothrix rhusiopathiae E.coli Salmonella Mycobacterium tubercullosis Hình thái Cầu trực khuẩn nhỏ, trứng or bầu dục, 2 đầu tròn. Ko lông, ko di động, ko nha bào. Hình thành giáp mô trong cơ thể con vật khó phát hiện -VK có hình cầu -Không sinh nha bào và giáp mô, không có lông -Xếp thành từng đám nhỏ như chùm nho Trực khuẩn to, 2 đầu bằng. - Không có lông, không có khả năng di động. - Bắt màu gram (+): màu tím xếp thành chuỗi. - Khả năng sinh nha bào chỉ hình thành khi ở ngoài gia súc bệnh. Sinh nha bào không làm thay đổi kích thước. - VK có khả năng sinh giáp mô: Có thể bao bọc 1,2 trong tế bào đứng cạnh nhau. Trực khuẩn nhỏ, thẳng or hơi cong -Ko : (lông, di động, nha bào, giáp mô.) -Trong canh trùng non, bệnh phẩm lợn mắc thể cấp tính: VK hình gậy, đứng riêng lẻ hoặc nằm trong bạch cầu. -Trong canh trùng già, cơ thể lợn mắc thể mạn tính: VK hình sợi tơ dài. Trực khuẩn hình gậy ngắn, - Trong cơ thể, có hình trực khuẩn đứng riêng lẻ đôi khi xếp thành chuỗi ngắn - Trong canh khuẩn già có trực khuẩn dài 4 – 8 µm. - Phần lớn di động do có lông ở xung quanh thân, một số không di động. - VK không sinh nha bào, có thể có giáp mô -Trực khuẩn hình gậy ngắn, hai đầu tròn Không hình thành giáp mô và nha bào Đa số có khả năng di động mạnh do có 7-12 lông xung quanh thân - Trực khuẩn hình gậy mảnh, hơi cong- Đầu tròn, ko có lông, ko có nha bào, ko có giáp mô. - Canh khuẩn non Vk lao xếp thành chuỗi cong như chữ S, canh khuẩn già có hình sợi, có nhánh. - VK bắt màu không đều, có hạt tròn mầu sẫm xếp với nhau, có những khoảng sáng. - Vk có nhiều lipit, phức hợp lipit axit béo và chất sáp làm cho VK khó thấm nước, có tính kháng cồn, kháng axit nên khó nhuộm màu. Dùng phương pháp nhuộm Ziehl Nielsen. VK bắt màu đỏ trên nền xanh Kích thƣớc 0,25-0,4 x 0,4 -1,5 µm Đường kính 0.7- 1 μm 1 – 1,5 x 4 – 8 µm 0,2-0,4 x 1-1,5 μm 2 – 3 x 0,6 µm. 0,4 – 0,6 x 1 – 3 µm 0,2 – 0,5 x 1,5 – 5µm. Bắt màu Gram - Gram + Gram + Gram + Gram - Gram - Ziehl Nielsen Đặc tính nuôi cấy VK hiếu khí hoặc hiếu khí tùy tiện. Thích hợp: 370C, pH: 7,2-7,4. -Môi trƣờng thông thƣờng: mọc yếu, có thêm huyết thanh hoặc máu sẽ mọc tốt: +Nƣớc thịt: 24h, canh khuẩn đục vừa, lắc có vẩn như sương mù-> mất, đáy ống có cặn nhày, có khi sinh màng mỏng trên mặt. Có mùi tanh như nước dãi khô. Mọc tốt khi thêm -VK sinh sắc tố nên có màu sắc. Dễ mọc trong các môi trường thông thường : + Nƣớc thịt: sau cấy 5- 6h, VK làm đục môi trường. Sau cấy 24h, môi trường đục rõ hơn, lắng cặn nhiều, ko có màng. + Thạch thƣờng: Sau cấy 24h, khuẩn lạc to dạng S, mặt ướt, to đều, nhẵn. Staphylococcus - Hiếu khí, dễ nuôi cấy, nhiệt độ thích hợp : 37 0 C, (12 – 42 0 C), pH : 7,2 – 7,4; (6 – 9). - Môi trường nước thịt : 18 – 24h có những sợi bông lơ lửng dọc ống nghiệm, lắng xuống đáy thành cặn, có mùi thơm của bánh bích quy bơ. - Môi trường thạch thường : khuẩn lạc dạng R, to, nhám, xù xì, VK hiếu khí tùy tiện, 37oC, pH 7,2-7,6. -Môi trường: +Nƣớc thịt: 24h-> hơi đục rồi trong, lắc có vẩn lên như máy bay rồi mất ngay, đáy ống có cặn máu tro trắng. +Thạch thƣờng: diện tích nhỏ, như hạt sương +Thạch máu: ko dung huyết thạch máu, khuẩn lạc nhỏ li ti, tròn, óng anh như hạt sương. Môi trường nước thịt: phát triển tốt, môi trường rất đục, có cặn màu tro nhạt lắng xuống đáy, đôi khi có màu xám nhạt trên mặt môi trường, môi trường có mùi phân thối. Môi trường thạch thường: sau 24h, hình thành những khuẩn lạc tròn, ướt, không trong suốt, màu tro trắng - Salmonella vừa hiếu khí vừa kỵ khí không bắt buộc, dễ nuôi cấy, nhiệt độ 37 0 C, có thể 6 – 42 0 C, pH= 7,6, phát triển pH: 6 – 9. - Salmonella gây bệnh ở gia súc, sinh trưởng tốt trong điều kiện hiếu khí, kém hơn ở điều kiện kỵ khí. Môi trường nước thịt : cấy vài giờ đã đục nhẹ, sau 18h đục đều, nuôi lâu ở đáy ống nghiệm có cặn, - Trực khuẩn lao là loại hiếu khí, yếm khí cũng mọc nhưng thưa và cằn, nhiệt độ 37 0 C, pH: 6,7 – 7. - Môi trường nuôi cấy VK lao phải giàu chất dinh dưỡng, nhiều muối khoáng và có glyxerin. VK lao sinh trưởng chậm, sớm nhất cũng sau 1 – 2 tuần mới mọc. Môi trường nước thịt glyxerin: sau khi cấy 10 – Thạch Văn Mạnh TYD-K55 huyết thanh. +Thạch thƣờng: khuẩn lạc S, nhỏ, trong suốt, mặt vồng. Nuôi lâu có màu trắng ngà dính vào môi trường. +Thạch máu: không làm dung huyết, kích thước khuẩn lạc to, là môi trường thường dùng để giữ giống VK. +Thạch huyết thanh và huyết cầu tố: dùng để giám định, phân lập và xác định độc lực aureus khuẩn lạc màu vàng sẫm, có độc lực, có khả năng gây bệnh cho động vật. + Thạch máu: VK mọc rất tốt, khuẩn lạc dạng S, gây hiện tượng dung huyết. + Thạch Sapman: lên men đường Mannit làm pH thay đổi, trở nên vàng + Gelatin: cấy theo đường trích sâu, nuôi ở 200C, sau 2-3 ngày thấy gelatin bị tan chảy ra dạng hình phễu. -Tụ cầu sống hiếu khí hoặc kị khí tùy tiện. - Nhiệt độ sống thích hợp 32-37oC , pH 7,2- 7,6. đường kính 2 – 3 mm. - Môi trường thạch máu : VK không gây dung huyết, mọc tốt hơn trên môi trường thạch thường, khuẩn lạc dạng S nhiều hơn dạng R. - Môi trường gelatin : Cấy chích sâu, nuôi ở 28 0 C sau 1 – 2 ngày, VK mọc thành những nhánh ngang trông giống cây tùng lộn ngược. +Gelatin: chích sâu 5 ngày -> lan ngang như bàn chải. nhạt, hơi lồi đường kính 2 – 3 mm. Nuôi lâu khuẩn lạc trở thành gần như nâu nhạt và mọc rộng ra, có thể quan sát dạng R và M. Môi trường Endo: khuẩn lạc màu đỏ Môi trường EMB khuẩn lạc tím đen Môi trường thạch SS: khuẩn lạc đỏ. trên môi trường có màng mỏng. Môi trường thạch thường : Vk mọc thành các khuẩn lạc tròn, trong sáng hoặc xám, nhẵn bóng, hơi lồi lên ở giữa, nhỏ và trắng hơn khuẩn lạc của E. Coli ( đường kính: 1 – 1,5 mm) Thạch pepton: Sau 1-2 ngày khuẩn lạc hình thành 1 bờ chất dính lầy nhầy ở xung quanh. Thỉnh thoảng có thấy khuẩn lạc dạng R, nhám, mặt không bóng, không đều, mờ.(S.paratyphi B, S.cholerae suis) 15 ngày, VK mới mọc, trên mặt có màng mỏng dính lại với nhau, nước thịt trong suốt, khi lắc có những mảnh nhỏ chìm xuống đáy thành hình quả đậu trắng. Môi trường thạch glyxerin ( 2 – 3%):sau khi cấy 8 – 10 ngày hình thành khuẩn lạc khô hình hạt nhỏ, hay vảy khô trắng xám, dần dần thành cục bướu thô dính chặt vào môi trường. Môi trường khoai tây glyxerin (5%): VK mọc hình thành khuẩn lạc hình vảy khô, hình hạt, dần dần đông lại thành một lớp dày không đều, hình bướu, màu xám nhạt. Môi trường Lovensten ( Loweinstein): VK mọc sau khoảng 1 tháng tạo thành những khuẩn lạc khô, nhăn nheo trông giống hình súp lơ. Đặc tính sinh hóa Chuyển hóa đường: lên men không sinh hơi đường: Glucoza, saccaroza, mannit. -Phản ứng sinh hóa khác: Indol (+), VP (-), MR (-), Catalaza (+), Oxydaza (+), H2S bất thường - Chuyển hóa đường: lên men đường glucoz, lactoz, levuloz, mannoz, mannit, saccaroz, ko lên men galactoz. - Phản ứng catalaz dƣơng tính. - Khả năng lên men đường : lên men ko sinh hơi đường: glucoza, mantoza, saccaroza, manit. - Các phản ứng khác : + Indol : - + H 2 S: - + MR: + - + VP: + - Chuyển hóa đường: thay đổi tùy chủng, chủ yếu lên men: glucoza, galactoza, levuloza, mannoza. -Phản ứng khác: VP (-), MR (-), indol (-), H2S (+). - Chuyển hóa đƣờng: + Lên men sinh hơi các đường: fructoz, glucoz, levuloz, galactoz, xyloz, ramnoz, maniton, mannit, lactoz. + Không lên men: andonit, inozit - Các phản ứng khác: + Sữa: đông sau 24 – 72h ở 37 0 C. + Gelatin, huyết thanh đông, lòng trắng trứng đông: không tan chảy. + H 2 S: - + VP: - + MR: + Chuyển hóa đường: MT kiểm tra là MT nước thịt pepton cho thêm 1 loại đường với tỉ lệ 0,5% và chất chỉ thị màu như xanh bromotymon, tím bromocrezon, đỏ phenon. + Phần lớn Salmonella lên men đường có sinh hơi: glucoz, mannit, mantoz, galactoz, levuloz, arabinoz, xyloz, dechtrin, dunxit, ramnoz,…Một số cũng lên men nhưng ko sinh hơi: S.typhi suis, S.typhi, S. cholerae suis( ko lên men arabinoz). + Tất cả các Salmonell ko Thạch Văn Mạnh TYD-K55 + Indon: + + Khử nitrat thành nitrit. + Có men decacboxylaz với lyzin, denitin, acginin và glutamic. lên men: lactoz, saccarroz. - MT có kali xyanua: tất cả Salmonella ko mọc được. - Khử cacboxyn: lyzyn, octinin, acginin. - Không phân giải urê - Indon, VP: - - Phân giải xanh metylen - Catalaz, MR: + ( trừ S.cholerae suis, S. gallinarum – pullorum) - H2S: + ( trừ S.paratyphi A, S.typhi suis, S.abortus equi) - Dùng các môi trường đặc biệt EMB, Kauffman, SS, để phân lập Sal. Độc tố Các độc tố: 4 loại chính là các dung huyết tố: + Anpha: gây tan hồng cầu ở thỏ ở 370C, hoạt tử da và gây chết. Đây là 1 ngoại độc tố, bản chất Protein, bền với nhiệt độ. Là KN hoàn toàn, gây hình thành KT kết tủa và KT trung hòa dưới tác dụng của focmon và nhiệt độ nó biến thành giải độc tố có thể dùng làm vacxin. + Bêta: gây tan hồng cầu cừ ở 40C, kém độc hơn dung huyết tố anpha. +Đenta: gây tan hồng cầu người, thỏ, cừu, ngựa, gây hoại tử da. + Gamma: loại này không tác động lên hồng cầu ngựa. Dung huyết tố anpha là đặc điểm xác định tụ cầu có khả năng gây bệnh. a. Nội độc tố: + Rất mạnh, liều thích hợp I.V giết chết chuột bạch, chuột lang trong 48h. Bệnh tích: ruột non sung huyết, mảng payer phù nề, đôi khi hoại tử. + Độc tố ruột gây ngộ độc thần kinh, gây hôn mê, co giật, nội độc tố có hai loại: gây sung huyết và mụn loét. b. Ngoại độc tố: + Hình thành trong điều kiện invitro và nuôi cấy kị khí. + Ngoại độc tố tác dụng vào thần kinh và ruột. + Chế giải độc tố bằng cách trộn focmon 5% để 37 0 C trong 20 ngày. Khi tiêm cho thỏ thì tạo ra kháng thể ngưng kết nên thỏ có khả năng trung hòa với độc tố và VK. Khả năng gây bệnh Trong tự nhiên : +Gây chứng bại huyết kèm tụ huyết, xuất huyết cho gia súc, gia cầm. -Trong tự nhiên: + Tụ cầu kí sinh trên da, niêm mạc người và gia súc, có 30% người khỏa Trong tự nhiên: - Những loài ĐV ăn cỏ như trâu, bò, ngựa, dê, cừu, lạc đà, hươu nai,… Trong tự nhiên: +VK gây bệnh cho lợn: •3-4 tháng đến 1 năm: mẫn cảm nhất Trong tự nhiên - E.coli có sẵn trong ruột của ĐV, chỉ tác động gây bệnh khi sức Trong tự nhiên: - M.t.humanus: typ lao người gây bệnh lao cho người như: lao phổi, lao Thạch Văn Mạnh TYD-K55 +Gây bệnh tụ huyết trùng cho trâu bò : •Triệu chứng : thủy thũng, sưng hạch hầu, viêm phổi. •Bệnh có thể lây từ trâu bò sang ngựa, ở nước ta trâu thường mắc nặng hơn bò. +Gây bệnh THT cho lợn : •Lợn 3-6 tháng tuổi mắc nhiều •Bệnh tích: phổi viêm nhiều vùng gan hóa, viêm ngoại tâm mặc có tích nước, hạch hầu viêm, thủy thũng. •Có thể lây sang trâu bò, gà. +Gây bệnh THT cho gia cầm: •Gà vịt mắc với vụ dịch lớn. •Bệnh tích: tim sưng, viêm ngoại tâm mạc có tích nước, mỡ vành tim xuất huyết, gan có hoạt tử điểm bằng đầu mũi kim, màu vàng nhạt. •Có khả năng gây bệnh cho người, là 1 nhiễm trùng cục bộ, do bị động vậy bệnh cắn, cào hoặc vết thương nhiễm khuẩn. -Trong phòng TN: chuột bạch, thỏ cảm nhiễm nhất: +Với thỏ: •Tiêm dưới da, phúc mặc hoặc tĩnh mạch canh trùng 24h. Thỏ chết sau 24-48h. •Bệnh tích: nơi tiêm tụ máu, lồng ngực tích đầy nước, lách sưng to, phổi sưng tụ máu, khí quản xuất huyết. +Chuột bạch: •Tiêm dưới da, phúc mạc, canh khuẩn 24h. Sau 24- 36h chuột chết. mang loại VK này. Khi sức đề kháng của cơ thể giảm hoặc khi có tổn thương trên da và niêm mạc, VK sẽ âm nhập và gây bệnh. +Khi nhiếm trừng có nhiều biểu hiện khác nhau -Trong phòng TN: + Thỏ cảm nhiễm nhất: •Tiêm 1-2ml canh khuẩn tụ cầu 24h vào tĩnh mạch tai, sau 36-48h thỏ chết vì chứng huyết nhiễm mủ. Mổ khám thấy nhiều ổ áp xe trong phủ tạng. •Nếu tiêm dưới da gây áp xe dưới da rất mẫn cảm, thường bại huyết mà chết. + Lợn, chó ít cảm nhiễm, thường bị bệnh cục bộ ở họng và hạch. + Loài chim không cảm nhiễm. + Người rất cảm nhiễm và thường gặp 3 thể lâm sàng: thể da, thể ruột, thể phổi. ++ Thể da: VK xâm nhập vào da, tại chỗ xâm nhập xuất hiện nốt phỏng, giữa đen do hoại tử gọi là nốt mủ ác tính. Hay gặp, mức độ bệnh nhẹ. ++ Thể phổi: người bị mắc bệnh do hít phải nha bào nhiệt thán. Ít gặp hơn, mức độ nặng. ++ Thể ruột: người mắc bệnh do ăn phải thịt gia súc mắc bệnh nhiệt thán. Ít gặp, mức độ nặng. - Có 3 đường truyền bệnh chính: Tiêu hóa, da, hô hấp. Trong phòng TN - Chuột lang,bạch, thỏ là dễ cảm nhiễm. - Tiêm dưới da canh khuẩn hay bệnh phẩm sau 12h con vật bị sốt, nơi tiêm bị thủy thũng; sau 24h con vật mệt nhọc, khó thở, nhiệt độ hạ xuống 30 – 28 0 C sau 2 – 3 ngày chết. - Bệnh tích: + Nơi tiêm thủy thũng, có chất keo nhày như lòng trắng trứng. •1-2 tháng tuổi: ít mắc vì có miễn dịch thụ động •Trên 1 năm: có sức đề kháng cao, ít mắc vì có miễn dịch thu được. •Thời kì nung bệnh: 1-8 ngày, trung bình 3-5 ngày. +Chim cũng cảm thụ bệnh, thứ tự: bồ câu, gà, vịt, vẹt, sáo, chim sẻ. +Cũng mắc: trâu, bò, dê, cừu, chó. +Người mắc biểu hiện: sốt cao, nổi nốt đỏ trên da, sưng hạch, khớp. +Bệnh biểu hiện 3 thể: quá cấp tính, cấp tính, mạn tính. -Trong phòng TN: +Chuột bạch: cảm thụ nhất: •Tiêm dưới da 0,3-0,4 ml canh trùng 24h •2-6 ngày: chuột chết vì bại huyết •Mổ khám: chỗ tiêm sưng, phổi sưng, tụ máu, lá lách sưng, gan màu tro, nát. +Bồ câu: •Chết sau tiêm 3-4 ngày, trước khi chết bại chân, thở khó •Mổ khám: chỗ tiêm sưng tụ máu, tim sưng, viêm ngoại tâm mạc có tích nước, gan thận viêm tụ máu. •Tiêm qua bồ câu, độc lực của VK tăng cường. đề kháng con vật giảm sút( chăm sóc, nuôi dưỡng, cảm lạnh, cảm nắng). - Bệnh do E.coli có thể xảy ra như 1 bệnh truyền nhiễm kế phát trên cơ sở thiếu vitamin và mắc các bệnh virus và kí sinh trùng. - E.coli gây bệnh gia súc mới đẻ 2 – 3 ngày hoặc 4 – 8 ngày. - Bệnh Colibacillosis do E.coli gây ra trên ngựa, bê, cừu, lợn và gia cầm non. Biểu hiện của bệnh ở bê 3-12 ngày tuổi: sốt cao, đi tháo phân, đi tháo dạ, phân lúc đầu vàng đặc sệt, mùi chua, sau chuyển sang màu trắng xám, hôi thối, dính máu, bê đi ỉa nhiều lần và rặn nhiều. - Gia cầm: đi tháo dạ, phân xanh lá cây rất hôi thối, có hiện tượng viêm kết mạc mắt, viêm cuống phổi, viêm niêm mạc mũi làm GC thở khó. - Lợn con: giống bê, có thể lây lan cho cả ổ và cả ổ khác. ĐV lớn: VK gây bệnh viêm phúc mạc, gan, thận, bàng quang, túi mật, bầu vú, khớp xương. - Người, trẻ em dưới 1 tuổi: Vk gây viêm dạ dày ruột, gây nhiễm độc, viêm túi mật, bàng quang, đường niệu sinh dục và viêm não, đôi xương, khớp, thận, ruột, cơ quan sinh dục, da, màng não, tủy,… Có thể gây lao chó, mèo, bò, vượn. - M.t.bovinus: typ lao bò, gây bệnh cho bò, người, lợn, chó, mèo. - M.t.avium: typ lao gia cầm gây bệnh gia cầm, người, lợn, chó. - Đường xâm nhập: + Hô hấp: mầm bệnh dính vào bọt nước lơ lửng trong không khí, khi phân hoặc đờm khô đi, mầm bệnh dính vào các hạt bụi GS khỏe hít phải. + Tiêu hóa: Bê, lợn. Mầm bệnh từ cơ thể bị lao thải ra lẫn vào thức ăn, nước uống, GS khỏe ăn phải nên bị lây. + Bệnh có thể lây qua bú sữa, núm nhau, đường sinh dục do mầm bệnh ở tử cung hay ở dọc đường dẫn tinh vào. Trong phòng TN: - Chuột lang: mẫn cảm typ lao người và bò. + Tiêm S.C sau 6-10 ngày hạch lâm ba chỗ tiêm sưng, 8-12 ngày tuần con vật chết. + Mổ khám: hạch sưng, mủ như chất keo đặc, lách sưng to gấp 10 lần, hình thùy, màu vàng, gan sưng to có hạt, tụ máu có đốm vàng như lách, phổi có hạt. Typ gà làm cho phát bệnh cục bộ. - Thỏ: mẫn cảm typ lao bò, gà Thạch Văn Mạnh TYD-K55 •Bệnh tích: nơi tiêm tích nước tụ máu, lồng ngực đầy nước, lách sưng to, ruột phổi xuất huyết thành chấm đỏ nhỏ. + Hạch lympho sưng đỏ, thủy thũng xung quanh. + Máu đen, đặc, khó đông. + Lá lách sưng to, nhũn như bùn. + Tất cả các cơ quan tụ máu, bàng quang tích nước tiểu đỏ. khi nhiễm khuẩn huyết trầm trọng. *) Trong phòng TN: Tiêm S.C chuột bạch, chuột lang, thỏ có thể viêm cục bộ, liều lớn gây bại huyết, giết chết con vật. + Tiêm S.C sau 3-10 tuần thỏ chết do mắc lao toàn thân. + Typ lao người chỉ gây bệnh cục bộ. . Thạch Văn Mạnh TYD-K55 ĐỀ CƢƠNG ÔN THI HẾT HỌC PHẦN MÔN: Vi sinh vật thú y Học kỳ I năm học 2013-2014 Phần 1 : Vi khuẩn học chuyên khoa Nội dung. ng y khuẩn lạc hình thành 1 bờ chất dính l y nh y ở xung quanh. Thỉnh thoảng có th y khuẩn lạc dạng R, nhám, mặt không bóng, không đều, mờ.(S.paratyphi