- Nhóm ngƣời bình thƣờng: 60 người khỏe mạnh (30 nam và 30 nữ).
2.2.3.6. Kỹ thuật định lượng hs-CRP huyết thanh
Địa điểm thực hiện: Khoa Hóa sinh, Bệnh viện Trung ương Huế.
Mẫu bệnh phẩm để định lượng hs-CRP cũng là mẫu huyết thanh để định lượng TGF-beta1.
+ Nguyên lý định lượng hs-CRP huyết thanh:
hs-CRP được định lượng bằng phương pháp miễn dịch đo độ đục. Kháng thể kháng CRP trong thuốc thử kết hợp với CRP trong mẫu bệnh phẩm tạo thành phức hợp miễn dịch kháng nguyên - kháng thể khiến dung dịch phản ứng có độ đục. Nồng độ CRP trong mẫu thử tỷ lệ thuận với độ đục do phức hợp miễn dịch kháng nguyên - kháng thể tạo ra.
+ Phương tiện và hóa chất:
- Phương tiện: máy xét nghiệm OLYMPUS AU640, tại Khoa Hóa sinh, Bệnh viện Trung ương Huế.
- Hóa chất: hóa chất xét nghiệm hs-CRP, chất chuẩn hs-CRP, chất kiểm tra chất lượng hs-CRP.
Thuốc thử cung cấp bởi hãng Beckman Coulter (OLYMPUS). + Các bước tiến hành
- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: máy đã được cài đặt chương trình xét nghiệm hs-CRP. Máy đã được chuẩn với xét nghiệm hs-CRP. Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm hs-CRP đạt yêu cầu không nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng.
- Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tích. - Ra lệnh cho máy phân tích mẫu bệnh phẩm.
- Đợi máy phân tích mẫu bệnh phẩm theo chương trình của máy. - Ghi nhận kết quả hs-CRP huyết thanh của mẫu bệnh phẩm [24].
Sơ đồ 2.1. Sơ đồ thiết kế các bước thực hiện trong nghiên cứu
Đối chiếu tiêu chuẩn loại trừ Không phù hợp Phù hợp Có tiêu chuẩn loại trừ Không có tiêu chuẩn loại trừ
Đối chiếu tiêu chuẩn chọn bệnh Xác định có BTM do VCTM Loại khỏi nghiên cứu Quần thể bệnh nhân Loại khỏi nghiên cứu
Chọn vào đối tượng nghiên cứu Lấy bệnh phẩm: - Các xét nghiệm cơ bản - Định lượng TGF-beta1 và hs-CRP huyết thanh Xử lý và phân tích số liệu nghiên cứu