- Nhóm ngƣời bình thƣờng: 60 người khỏe mạnh (30 nam và 30 nữ).
2.2.3.4. Kỹ thuật xét nghiệm một số chỉ số sinh hóa liên quan trong nghiên cứu
nghiên cứu
Địa điểm thực hiện : Khoa Hóa sinh, Bệnh viện Hữu nghị đa khoa Nghệ An.
Phương tiện : Máy sinh hóa Cobas 6000. Kỹ thuật lấy máu :
Lấy máu tĩnh mạch lúc đói : lấy máu trước ăn sáng, bệnh nhân nhịn ăn 12 giờ trước khi lấy máu xét nghiệm.
Lấy 5 ml máu tĩnh mạch không chống đông, ly tâm với tốc độ 3000 vòng/phút để tách lấy huyết thanh.
- Kỹ thuật định lượng ure huyết thanh
Phương pháp : ure huyết thanh được định lượng bằng phương pháp enzyme với salicylate.
Nguyên lý: Dưới tác dụng thủy phân của urease, ure được thủy phân và phóng thích ra amoniac (NH3) và carbonic (CO2). Ion amoni sẽ phản ứng với hypochlorite và salicylate tạo thành phức hợp màu xanh. Đậm độ của màu xanh này sẽ tỷ lệ thuận với nồng độ của ure có trong mẫu xét nghiệm. Do vậy có thể đo được nồng độ ure thông qua máy quang kế ở bước sóng 580 nm.
Phương pháp: creatinin huyết thanh được định lượng theo phương pháp Jaffe.
Nguyên lý: creatinin trong dung dịch chứa picrat kiềm sẽ tạo ra một phức hợp màu đỏ da cam.
Đậm độ màu sắc của phức hợp này tỷ lệ thuận với nồng độ creatinin trong bệnh phẩm.
Đậm độ này được đo bằng máy quang kế ở bước sóng 492 nm. - Kỹ thuật định lượng protit toàn phần huyết thanh
Phương pháp: protit toàn phần được định lương bằng phương pháp Gornall
Nguyên lý: protit huyết thanh tác dụng với Cu2+ trong môi trường kiềm tạo thành một phức hợp màu xanh tím. Cường độ màu của phức hợp tỷ lệ với nồng độ protit huyết thanh.
- Kỹ thuật định lượng albumin huyết thanh
Nguyên lý: Albumin kết hợp với Bromocresol green đệm ở pH 4,2 tạo thành phức hợp có màu xanh đậm.
Đậm độ màu tỷ lệ với nồng độ albumin và được đo bằng quang kế ở bước sóng 628 nm.
- Định lượng protein niệu
Phương pháp: Phương pháp so độ đục bằng quang kế sau khi kết tủa protein bằng acid tricloroaxetic.
Nguyên lý: dùng acid tricloraxetic để kết tủa protein.
Tính protein niệu/24 giờ: protein niệu (g/24 giờ) = protein niệu (g/L) x thể tích nước tiểu (L/24 giờ).