Hình 23: Sơ đồ khối quá trình lập đường chuẩn và định lượng
Giá trị R2 đảm bảo nằm trong giới hạn cho phép, nếu vượt quá cần phải chuẩn bị lại đường chuẩn.
Ai diện tích peak của cấu tử cần phân tích trong dung dịch chuẩn Acsi diện tích peak của cấu tử IS tương ứng trong dung dịch chuẩn Cx lượng cấu tử cần đo có trong dung dịch chuẩn (đơn vị khối lượng)
R2 : hệ số tương quan (tính toán cho từng chất ở trong đường chuẩn , hệ số này cần càng sát 1 để giảm thiểu sai số.)
Sinh viên thực hiện: Trần Công Minh –KTHH2-K54 Page 58 Lập các đường chuẩn riêng rẽ đối với một cấu tử trong hỗn hợp bằng cách tiêm những thể tích bằng nhau của một loạt dung dịch chất chuẩn có nồng độ khác nhau. Như vậy một loạt các nồng độ của các chất chuẩn đã được phân tích và diện tích của chúng được xác định. Một đường chuẩn được dựng cho mỗi cấu tử với một trục nồng độ và trục kia là diện tích tương ứng để kiểm tra sự tuyến tính của đáp ứng của detector.
Tiêm cùng thể tích của mẫu có các cấu tử cần phân tích và phân tích sắc kí trong cùng điều kiện như khi phân tích chuẩn. Từ các diện tích thu được của các cấu tử cần phân tích và đường chuẩn vừa thiết lập suy ra được nồng độ của chúng.
Ở đây phản ứng ete hóa sử dụng dư TBA, độ chuyển hóa được tính theo Glycerol nên tiến hành lập đường chuẩn theo glycerol.
Tiến hành pha các dung dịch Glycerol theo nồng độ tuyến tính giảm dần và phân tích GCMS. Cách pha và nồng độ Glycerol của các mẫu được trình bày như sau:
Bước 1: cân chính xác lượng Glycerol mG = 0.5 g cho vào bình định mức 25 ml Bước 2: định mức bằng dung môi AcetoNitrile đến vạch 25 ml thu được dung dịch S1 Bước 3: tiến hành pha các mẫu dung dịch với nồng độ chính xác được cho trong bảng sau:
Bảng 10: Các mẫu dùng để xây dựng đường chuẩn Glycerol
Mẫu Thể tích (µl) Lượng Glycerol
(mg/ml mẫu) S1 Dung môi Tổng T1 1000 0 1000 20 T2 500 500 1000 10 T3 250 750 1000 5 T4 125 875 1000 2.5 T5 60 940 1000 1.2 T6 30 970 1000 0.6
Sinh viên thực hiện: Trần Công Minh –KTHH2-K54 Page 59