Để sửa lỗi có thể xảy ra khi khối lượng tiêm khác nhau hoặc điều kiện sắc ký thay đổi chút ít giữa các lần chạy, phương pháp nội chuẩn có thể được sử dụng. Trong phương pháp này, một chất nội chuẩn có tính chất hóa học tương tự như hóa chất cần phân tích định lượng và có peak tách biệt với các chất có trong dung dịch mẫu, được thêm vào một lượng không đổi cho tất cả các mẫu phân tích.
Các tính chất nội chuẩn lí tưởng đước tóm tắt trong bảng 3.1. Hầu như không có chất nội chuẩn nào đáp ứng được đầy đủ những tính chất đó mà chỉ có thể gần đạt đến yêu cầu khi chúng có tính chất tương tự với chất được xác định.
Các chất được dùng làm chất nội chuẩn gồm có các chất có cấu trúc giống nhau nhưng thành phần khác nhau một nguyên tố, chất đồng đẳng, chất đồng phân, chất đồng phân hình học, chất đồng vị của chất phân tích. Vì các chất có cấu trúc giống nhau nhưng thành phần khác nhau một nguyên tố hoặc chất đồng đẳng rất có sẵn nên được sử dụng nhiều hơn so với các chất khác. Các chất nội chuẩn đồng vị thường được dùng trong phương pháp sắc kí khí khối phổ vì phương pháp này có thể phân biệt được khối lượng của chất phân tích và chất nội chuẩn.
Sinh viên thực hiện: Trần Công Minh –KTHH2-K54 Page 55
Bảng 9: Các tính chất cần thiết của một chất nội chuẩn lí tưởng
STT Tính chất
1 Chất nội chuẩn càng giống với chất phân tích về thành phần hóa học và vật lí càng tốt
2 Chất nội chuẩn không có trong thành phần mẫu
3 Chất nội chuẩn phải được kết hợp với nền mẫu như chất phân tích
4 Chất nội chuẩn và chất phân tích phải được phân giải bằng sắc kí đến đường nền (ngoại trừ các mẫu đồng vị được xác định bằng sự phân biệt mảnh phổ hoặc phóng xạ, rửa giải ra rất sát nhau, tương thích với hệ thống phân tích và có nồng độ tương đương.
Chất nội chuẩn được sử dụng là Đietylen Glycol Mono Butyl ether. Có công thức:
Là một tạp chức có 2 chức ete và 1 chức rượu.