Địa điểm: Khoa Hóa sinh Bệnh viện Hữu Nghị.
Phương tiện: sử dụng máy Roche Elecsys 2010 .
Mẫu bệnh phẩm của bệnh nhân được thu thập trong các ống đựng mẫu chuẩn.
Chất thử :
Kháng thể đơn dòng kháng Troponin T gắn biotin 2,5 mg/L. Kháng thể đơn dòng kháng Troponin T gắn ruthenin 2,5 mg/L. Nguyên lý: Kỹ thuật điện hóa phát quang
ECL là kỹ thuật hiện đại sử dụng chất đánh dấu là Ruthenium(II) - tris(bipyridayl) [Ru(bys)32+] và Tripopylamine (TPA). Ruthenium được khởi động bằng điện, thông qua một điện áp dụng vào dịch mẫu. Phương pháp này loại bỏ vấn đề gì liên quan đến việc bổ sung và khuấy các thuốc thử, như vậy phản ứng có thể được kiểm soát chính xác hơn. Rutheniumtris (bipyridin) là những hợp chất bền tan trong nước. Khi phức hợp kháng nguyên - kháng thể có gắn chất đánh dấu được gắn lên bề mặt điện cực thì quá trình khởi động điện bắt đầu.
Dưới tác dụng của dòng điện áp 2V, hợp chất phát ra photon ánh sáng và giải phóng electron quay trở lại bỏm trên bề mặt điện cực. Cường độ ánh sáng tỷ lệ với nồng độ chất cần phân tích và là cơ sở cho việc tính toán nồng độ chất này. ECL đã khắc phục nhược điểm của hóa phát quang (Chemiluminescence) còn có độ nhạy và đặc hiệu cao hơn hóa phát quang do vậy kết quả xét nghiệm sử dụng công nghệ ECL có độ chính xác cao và tin cậy.
Phương pháp miễn dịch kiểu sandwich 39,40.
Nguyên tắc của phản ứng được thực hiện theo sơ đồ dưới đây.
Hình 2.1. Nguyên tắc phản ứng định lượng Troponin T
Tiến hành: Mẫu bệnh phẩm được lấy trong mẫu chuẩn chứa Heparin, sau đó được ly tâm rồi đưa vào hệ thống máy Roche Elecsys 2010. Máy chạy tự động theo phương pháp miễn dịch Sandwich và kỹ thuật điện hóa phát quang. Kết quả xét nghiệm được máy tự động in ra.