Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4.PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN CÁC HỢP CHẤT TỰ NHIÊN BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG
SẮC KÝ LỚP MỎNG
Sắc ký trên bản mỏng tráng sẵn silicagen Merck Alufolien 60 F254, với hệ dung môi TEAF (5:3:1:1). Sắc ký đồ của các phân đoạn dịch chiết từ ngọn rau Khoai lang cho nhiều băng vạch khác nhau khi nhuộm với thuốc nhuộm bằng H2SO4 10% và hơ nóng ở 1100C trong 5 phút.
Hình 3.2. Sắc ký đồ các phân đoạn dịch chiết rau Khoai lang
Nhìn trên sắc ký đồ ta thấy xuất hiện rất nhiều băng vạch khác nhau với màu sắc và Rf khác nhau. Về mặt lý thuyết mỗi vạch tương ứng với một chất nhất định. Song trên thực tế có rất nhiều chất có cùng Rf, thậm chí chúng có cùng màu sắc với nhau và nằm gối lên nhau (chẳng hạn các chất là đồng phân của nhau như: đồng phân quang học, đồng phân lập thể...). Do đó mỗi vạch chỉ có thể được coi là có ít nhất một chất trong đó.
1 2 3 4
Với:
1- Cao cồn tổng số. 2- Phân đoạn n – hexan. 3- Phân đoạn chlorofom. 4- Phân đoạn ethylacetate.
Trong sắc ký lớp mỏng, các chất có độ phân cực mạnh hơn và có khối lượng phân tử nhỏ hơn sẽ chạy nhanh hơn và có Rf lớn, ngược lại các chất có độ phân cực yếu và có khối lượng phân tử lớn sẽ chạy chậm hơn và có Rf nhỏ, thậm chí có nhiều chất còn không chạy nếu dung môi không thích hợp.
Đối với những vạch càng đậm thì chất có nồng độ càng lớn, còn vạch càng nhạt thì chất có nồng độ càng nhỏ.
Quan sát sắc kí đồ chúng tôi thấy có nhiều băng với nhiều màu sắc khác nhau như màu vàng (đặc trưng của flavonoid), màu tím (đặc trưng của tecpen), màu xanh (đặc trưng của diệp lục) chứng tỏ trong dịch chiết rau khoai lang có chứa khá đầy đủ các loại polyphenol.
Màu của các băng có độ đậm nhạt khác nhau, chứng tỏ tỉ lệ của các chất đó ở các phân đoạn dịch chiết là khác nhau. Phân đoạn cồn chứa nhiều băng nhất, với các màu tím, nâu đỏ, vàng nhạt và xanh. Tiếp đến là phân đoạn ethylacetat với màu vàng và tím trong đó chủ yếu là màu vàng. Điều này cho thấy phân đoạn ethylacetat chứa chủ yếu là flavonoid. Phân đoạn hexan chứa ít băng hơn với nhiều màu tím. Phân đoạn chloroform chứa ít băng nhất với các màu tím, vàng nhạt và xanh. Như vậy phân đoạn ethylacetat và cao cồn tổng số chiết được nhiều hợp chất polyphenol nhất. Phù hợp với kết quả định tính và định lượng.