Việc sử dụng lectin liờn kết với một dũng KT nào đú cú ý nghĩa rất quan trọng khi theo dừi sự biến động HL một KT của dịch cơ thể, trong nghiờn cứu biểu hiện bệnh lớ ở người và động vật. Chớnh vỡ thế chỳng tụi tiến hành nghiờn cứu khả năng bắt giữ KT IgG của lectin đậu dao biển.
Để chứng minh được khả năng bắt giữ IgG của ConM chỳng tụi tiến hành một quy trỡnh thực nghiệm trong đú cú sử dụng 5 loại khỏng thể khỏng lại từng lớp khỏng thể của người như sau:
1. Sử dụng KN gắn bản là ConM cho xột nghiệm ELISA đối với IgG từ HT người và dựng anti IgG cộng hợp với PO để nhận biết.
2. Sử dụng KN gắn bản là ConM cho xột nghiệm ELISA đối với IgA từ HT người và dựng anti IgA cộng hợp với PO để nhận biết.
3. Sử dụng KN gắn bản là ConM cho xột nghiệm ELISA đối với IgM từ HT người và dựng anti IgM cộng hợp với PO để nhận biết.
4. Sử dụng KN gắn bản là ConM cho xột nghiệm ELISA đối với IgE từ HT người và dựng anti IgE cộng hợp với PO để nhận biết.
5. Sử dụng KN gắn bản là ConM cho xột nghiệm ELISA đối với IgD từ HT người và dựng anti IgD cộng hợp với PO để nhận biết.
Kết quả như sau (hỡnh 3.21.): Thực hiện theo bước 1 thỡ thu được kết quả dương tớnh, cũn thực hiện theo cỏc bước 2, 3, 4, 5 thỡ kết quả thể hiện õm tớnh. Điều này đó chứng tỏ lectin ConM khụng liờn kết với cỏc KT khỏc của người mà chỉ liờn kết với KT IgG. Đõy là một đặc tớnh quý của lectin đậu dao biển, cần ứng dụng đặc tớnh này trong nghiờn cứu Hoỏ sinh và Y học.
Hỡnh 3.21. Kết quả bắt giữ IgG của lectin đậu dao biển ConM Chỳ thớch:
Hàng 1, 2, 5, 6. Lectin đậu dao biển ConM bắt giữ IgG nờn kết quả thu được dương tớnh, cú sự phõn biệt màu so với giếng đối chứng và cỏc lớp khỏng thể khỏc.
Hàng 3. Lectin đậu dao biển ConM khụng tương tỏc với IgA Hàng 4. Lectin đậu dao biển ConM khụng tương tỏc với IgM Hàng 7. Lectin đậu dao biển ConM khụng tương tỏc với IgE Hàng 8. Lectin đậu dao biển ConM khụng tương tỏc với IgD
Theo cỏc nghiờn cứu về cấu tạo của cỏc khỏng thể dịch thể, phõn tử chuỗi nặng của cỏc khỏng thể cú liờn kết với cỏc gốc đường. Sự biến đổi của cỏc gốc đường này là nguyờn nhõn dẫn đến một số bệnh tự miễn và biểu hiện của một số bệnh ung thư. Cỏc loại khỏng thể khỏc nhau thỡ liờn kết với cỏc gốc đường khỏc nhau, cỏc dưới lớp khỏng thể khỏc nhau cũng cú sự phõn biệt ở cỏc gốc đường này.
Tớnh chất quý của lectin là cú khả năng nhận biết tinh vi cỏc gốc đường trờn cỏc phõn tử khỏng thể. Như vậy chỉ cú gốc đường ở khỏng thể IgG đó được lectin ConM nhận biết, cũn cỏc gốc đường ở cỏc lớp khỏng thể khỏc thỡ khụng cú khả năng tương tỏc với ConM. Trờn cơ sở nghiờn cứu này, chỳng tụi đó điều chế cột ỏi lực ConM-Sepharose-4B để tinh chế IgG từ huyết thanh của người.