KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1.6.Áp dụng quy trình PCR multiplex trên một số mẫu lâm sàng
Chúng tôi áp dụng quy trình PCR multiplex để phát hiện và định týp gene H. pylori trên 204 bệnh phẩm viêm và ung thư dạ dày. Kết quả được trình bày trong bảng 3.3.
Bảng 3.3. Kết quả phát hiện và định týp H. pylori trên mẫu lâm sàng
H. pylori Định týp gene
cagA, vacA
Mẫu viêm dạ dày Mẫu ung thƣ dạ dày Dương tính cagA (+) vacA s1m1 37 (39,8 %) 51 (45,9 %) cagA (+) vacA s1m2 47 (50,5 %) 27 (24,4 %) cagA (-) vacA s1m2 4 (4,3 %) 0 (0 %) cagA (-) vacA s2m2 3 (3,2 %) 0 (0 %) Âm tính 2 (2,2 %) 33 (29,7 %) Tổng số mẫu 93 (100 %) 111 (100 %)
Kết quả cho thấy trong 93 mẫu viêm dạ dày, quy trình phát hiện được 91 mẫu (97,85 %) dương tính với H. pylori. Trong số các mẫu dương tính, có 37 mẫu (39,8 %) có týp gene là cagA (+) vacA s1m1; 47 mẫu (50,5 %) có týp gene là cagA (+) vacA
s1m2; 4 mẫu (4,3 %) có týp gene là cagA (-) vacA s1m2; và 3 mẫu (3,2 %) có týp gene là cagA (-) vacA s2m2.
Trong nhóm mẫu ung thư dạ dày, quy trình phát hiện được 78 mẫu (70,3 %) dương tính với H. pylori, tập trung vào hai loại týp gene chính là cagA (+) vacA s1m1
(51 mẫu) chiếm 65,38 %; và cagA (+) vacA s1m2 (27 mẫu) chiếm 34,6 %. Kết quả về tỉ lệ các týp gene phù hợp với một số nghiên cứu trước đây cho thấy “tính độc” của các
kiểu gene giảm dần theo thứ tự cagA (+) vacA s1m1 cagA (+) vacA s1m2 cagA (+)
hoặc cagA (-) với vacA s2m2 [9, 29]. Sự xuất hiện các mẫu âm tính trong nhóm ung thư khác biệt so với nhóm viêm có thể có nhiều nguyên nhân cần được làm rõ thêm mặc dù tất cả các mẫu khảo sát đều cho kết quả dương tính với thử nghiệm CLO test.
Như kết quả trình bày trong mục 3.1.1, do sự hiện diện của H. pylori không đồng đều trong các mẫu, ngay cả khi lấy từ cùng một bệnh nhân, nhất là trên nhóm mẫu ung thư, kết quả khác biệt chúng tôi nhận được trên các mẫu khảo sát cũng phản ánh điều này. Như vậy một số mẫu âm tính với H. pylori có thể là âm tính giả. Bên cạnh đó, một số công bố trước đây cho thấy một số vi sinh vật có khả năng sản sinh urease, dẫn đến kết quả CLO test dương tính. Một kết quả kiểm tra sơ bộ của chúng tôi cũng cho thấy sự hiện diện của DNA vi khuẩn Streptococcus và Prevotella trong mẫu sinh thiết dạ dày có CLO test dương tính (kết quả không trình bày ở đây) nhưng định týp gene cagA và vacA của H. pylori không cho kết quả. Như vậy không loại trừ khả năng kết quả CLO test
dương tính có thể là do sự hiện diện của những vi sinh vật khác không phải vi khuẩn H.
pylori.