Tiến trình nghiên cứu của luận án sẽ tập trung vào 2 mảng nội dung lớn:
- Nội dung thứ I:Nghiên cứu các điều kiện cơ bản của kỹ thuật stripping sóng vuông quét nhanh trên cực giọt chậm để định lượng erythromycin, trong đó quan tâm đến việc lựa chọn loại dung dịch nền, pH dung dịch nền, nồng độ dung dịch nền, dung môi hoà tan erythromycin, các thông số chạy máy ở chế độ stripping sóng vuông, các yếu tố gây nhiễu nền, xây dựng đường chuẩn, lựa chọn quy trình trích ly mẫu. Sau đó tiến hành đánh giá thẩm định hiệu năng phương pháp như xác định khoảng đo tuyến tính, giới hạn phát hiện trên dung dịch chuẩn và trên nền mẫu, độ chính xác, độ đúng, hiệu suất thu hồi, khả năng nhận danh, so sánh đối chứng với phương pháp LC-MS/MS. Cuối cùng là lấy mẫu tôm càng xanh, cá rô phi thực tế tại 10 tỉnh ĐBSCL để đánh giá bức tranh thực trạng nhiễm erythromycin.
- Nội dung thứ II: Các thí nghiệm được bố trí ở điều kiện hoàn toàn theo điều kiện nuôi thực tế, được khảo nghiệm ở 2 huyện của Tỉnh Sóc Trăng. Theo dõi quá trình đào thải theo thời gian khi kháng sinh này đi vào cơ thể tôm càng xanh và cá rô phi bằng con đường thức ăn từ đó rút ra quy luật thời gian ngưng thuốc an toàn trước thu hoạch. Song song đó cũng theo dõi quá trình chuyển hoá erythromycin A khi ở trong cơ thể của 2 loài thuỷ sản này, đánh giá xem liệu rằng kháng sinh erythromycin A có chuyển hoá sang các dẫn suất erythromycin B, C, D, E, F hay không; và nếu có thì các dẫn suất này có tồn dư ở mức nguy hại đối với an toàn của thực phẩm hay không.
Hình 2.1: Sơ đồ tổng hợp nội dung nghiên cứu
Quy trình trích ly mẫu Dựng đường chuẩn Yếu tố gây nhiễu nền
Độ chính xác, độ đúng, hiệu suất thu
hồi
Khả năng nhận danh So sánh đối chứng
SÓNG VUÔNG QUÉT NHANH TRÊN CỰC GIỌT CHẬM
ĐÀO THẢI, CHUYỂN HOÁ SINH HỌC ERYTHROMYCIN
ĐÀO THẢI
Stripping sóng vuông Dung môi hoà tan Loại và pH dung dịch
nền
Giới hạn phát hiện Khoảng tuyến tính
Cá rô phi
Tôm càng xanh Tôm càng xanh Cá rô phi
THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP CÁC ĐIỀU KIỆN
THÍCH HỢP
THỰC TRẠNG NHIỄM
ERYTHROMYCIN CHUYỂN HOÁ
Nồng độ dung dịch nền