3. Ý nghĩa của đề tài
1.5. Một số quy trình sản xuất collagen
Quy trình sản xuất collagen từ da cá tra của Trần Thị Huyền [3]
Sử dụng quy trình của tác giả Trần Thị Huyền để tham khảo và kế thừa một số công đoạn chính trong quá trình tách chiết collagen bao gồm: Xử lý cơ học, Khử tạp chất phi collagen, và kết tủa collagen. Ngoài ra, các thông số biên cũng được kế thừa để tìm thông số tối ưu hoá cho một số công đoạn trong quá trình tách chiết collagen từ da cá tra.
Chiết Collagen bằng acid acetic và tủa bằng NaCl
Sấy lạnh (12±20C, 12h) Collagen NaCl 2,05M Thời gian: 4 phút Xử lý- Rửa nước lạnh Da cá Tra Cắt miếng nhỏ NaOH 0,2M
Thời gian: 2,75 ngày
Rửa sạch
Sấy lạnh (12±20C, 12h)
CH3COOH 0,37M Thời gian: 2,5ngày
Xử lý Butyl alcohol (30%, w/v=1/10, 1ngày)
Rửa sạch Xử lý NaOH
Quy trình sản xuất colllagen từ da cá đỏ biển sâu của Wang [21]
Quy trình tách chiết collagen từ da cá đỏ biển sâu của được tham khảo và kế thừa thông số nồng độ NaCl 0,9 M làm thông số cho quá trình kết tủa khi tiến hành nghiên cứu công đoạn chiết collagen. Ngoài ra các thông số của quy trình còn được sử dụng để so sánh, bình luận trong suốt quá trình nghiên cứu.
Kết tủa collagen
Collagen NaCl 0,9 M
Cạo, rửa loại bỏ tạp chất, cắt nhỏ Da cá
NaOH 0,1 M Tỷ lệ 1:20 (w/v) Thời gian 24 giờ
CH3COOH 0,5 M Thời gian: 48 giờ
Rửa sạch
Loại bỏ thành phần phi collagen
Chiết collagen
Ly tâm thu dịch chiết
Ly tâm thu tủa
Thẩm tích
Đông khô
Tỷ lệ 1:10 Khuấy đảo
Quy trình tách chiết collagen từ da cá bò một gai lưng của Mehraj [26]
Quy trình tách chiết collagen từ da cá bò một gai lưng được tham khảo để so sánh, đánh giá nhằm xây dựng được quy trình tách các chiết collagen từ da cá tra phù hợp với điều kiện nghiên cứu.
Kết tủa collagen
Collagen Dung dịch NaCl 2,6 M
trong đệm tris 0,05 M
Cạo, rửa loại bỏ tạp chất, cắt nhỏ Da cá NaOH 0,1M Tỷ lệ 1:20 (w/v) CH3COOH 0,5M Tỷ lệ 1:15 (w/v) Rửa sạch
Loại bỏ thành phần phi collacen
Chiết collagen
Lọc thu dịch chiết
Ly tâm thu tủa
Thẩm tích
Đông khô Loại lipit Butyl alcohol 10% (v/v)
Tỷ lệ 1:10 (w/v) Thời gian 18 giờ
Thời gian 6 giờ Khuấy đảo
Thời gian 48 giờ Khuấy đảo
CHƯƠNG 2:
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU