Một số nghiên cứu về tác dụng chống tăng sinh tế bào, chống ung thư của chi
Aconitum được thực hiện đối với thành phần alcaloid, trên một số dòng tế bào ung thư cho thấy tác dụng gây ức chế sự tăng sinh, xâm lấn, di căn của tế bào ung thư. Theo Dacheng Hao và cs cao chiết ethanol từ củ A. vaginatum E. Pritz, có tác dụng ức chế sự tăng sinh, xâm lấn và di căn của dòng tế bào ung thư phổi A549. Alcaloid amid từ
A. taipeicum cho thấy hoạt động kháng u do ức chế các tế bào K562 [50]. Cao chiết ethanol từ củ một số loài Aconitum có tác dụng gây độc tế bào phụ thuộc vào liều, trên ba dòng tế bào ung thư: HepG2, Hela, sP2/0 [137]. Hợp chất bis [O-(14- benzoylaconine -8-yl)] suberat được tổng hợp từ aconitin, thử nghiệm thấy có tác dụng trên các dòng tế bào ung thư: SK - MEL -5 và SK - MEL -28, COLO -205 và HT - 29 (ung thư trực tràng) và MDA – MB - 468 (ung thư vú) [47]. Alcaloid 8-O-azeloyl-14- benzoylaconin phân lập từ A.karacolicum Rapaics, có tác dụng chống tăng sinh tế bào ung thư trên 3 dòng tế bào ở người [107]. Theo Hazawa HeLa, Raji và cs, dẫn xuất của alcaloid norditerpenoid có khung C-20 và C-19 từ chi Aconitum có tác dụng chống ung thư trên hai dòng tế bào A172, A549 [86].
1.3.1.6. Tác dụng trên tim mạch
Một số nghiên cứu về tác dụng trên tim mạch của chi Aconitum được thử nghiệm đối với thành các alcaloid, cho thấy các alcaloid này có tác động trên cơ tim, trên động mạch chủ làm ảnh hưởng tới nhịp tim, lực co bóp cơ tim và cung lượng tim. Higenamin là một benzylisoquinolin alcaloid làm tăng sức co bóp cơ tim, làm giãn động mạch chủ, ức chế epinephrine, ADP hoặc chống kết tập tiểu cầu, làm hạ huyết áp [50]. Mesaconin, hypaconin và beiwutinin cho thấy tác động trên tim mạnh, làm tăng khả năng tưới máu, cải thiện hiệu lực co bóp và chức năng thất trái nhưng không ảnh hưởng nhịp tim [94]. Alcaloid phân lập từ A. coreanum L. có tác dụng chống loạn nhịp tim [139]. Theo Dezso Csupor và cộng sự, 111 alcaloid diterpen chia thành 2 nhóm: gây loạn nhịp tim (Các alcaloid này có khung cấu trúc chung của nhóm aconitan. Khả năng gây loạn nhịp tim phụ thuộc vào nhóm thế như: β-OH trên C-13, α-aroyl trên C- 14, β-acetat trên C-8 và một nguyên tử nitơ trong phân tử) và chống loạn nhịp tim
24
(nhóm alcaloid diterpen – C18 có gốc acid acetylanthranilic hoặc anthranilic trên C-4, nhóm methoxy trên C-1, C-14, C-16 và một OH trên C-8) [52].
1.3.1.7. Tác dụng trên huyết áp
Kết quả nghiên cứu tác dụng trên huyết của chi Aconitum cho thấy nước sắc Ô đầu, Phụ tử hoặc alcaloid phân lập từ một số loài thuộc chi Aconitum có tác dụng làm hạ huyết do làm giãn mạch và giảm tần số tim. Theo Xian-Ju Huang và cs, ở liều nhỏ, nước sắc Phụ tử gây tăng huyết áp động vật đã được gây mê. Liều cao lúc đầu gây hạ, sau tăng huyết áp [137]. Nước sắc Ô đầu, Phụ tử có tác dụng hạ huyết áp khi tiêm tĩnh mạch chó và mèo đã gây mê. Tác dụng này nhanh và ngắn, thông qua cơ chế giãn mạch [48]. Aconitin và những chất tương tự tiêm tĩnh mạch mèo ở liều 0.01 mg/kg và chuột cống trắng ở liều 0.05 mg/kg, ban đầu có tác dụng hạ huyết áp [107]. Lappaconitin và N- desacetylappaconitin tiêm tĩnh mạch chó ở liều 0.15 mg/kg gây hạ huyết áp động mạch và giảm tần số tim [86].
1.3.1.8. Tác dụng chống viêm
Kết quả nghiên cứu về tác dụng chống viêmcủa cao chiết từ chi Aconitum cho thấy cao chiết này có tác dụng chống viêm cấp và chống viêm mạn trên mô hình in vivo và in vitro. Theo Nesterova. V và cs cao chiết cồn nước của củ (A.baicalense, A. septentrionale Koelle) làm giảm triệu chứng viêm như: giảm tiết dịch, đau và sốt với mức độ như thuốc kháng viêm không steroid. Cao chiết ethanol của các bộ phận trên mặt đất, ức chế các giai đoạn quá trình viêm trên mô hình viêm mạn tính [106]. Cao chiết ethanol từ củ một số loài thuộc chi Aconitum có tác dụng chống viêm in vitro ở mức liều từ 4 - 200 µg/ml [137]. Cao chiết ethanol từ củ loài A.coreanum được thử với liều 10, 100 mg/kg/ngày, cho chuột uống trong 14 ngày, thông qua đánh giá tính thấm thành mạch, tỷ lệ sưng khớp gối thấy có tác dụng chống viêm khớp [102]. Cao chiết ethanol từ củ loài A. heterophyllum làm giảm viêm, làm giảm trọng lượng u hạt trong chuột ở liều thử 225, 450 và 900 mg/kg đường uống [120].
1.3.1.9. Một số tác dụng khác
- Tác dụng chống tiêu chảy: Dịch chiết A. heterophyllum Wall. đã được nghiên cứu tác dụng chống tiêu chảy, làm se niêm mạc và làm thuốc bổ. Nó là thành phần chính
25
trong thuốc chống tiêu chảy Diarex Vet, có tác dụng mạnh khi thử trên chuột ở liều 750mg/kg [107].
- Tác dụng kháng khuẩn: Theo Nidhi Srivastava và cộng sự (2011) nghiên cứu dịch chiết methanol của Aconitum heterophyllum Wall. thấy có sự ức chế đáng kể sự phát triển của vi khuẩn Gram dương, Staphylococcus aureus và Bacillus subtilis [108]. Demethylenedelcorin, lepenin phân lập từ A. sinomontanum có tác dụng ức chế hoạt động của nấm và vi khuẩn. Cao chiết methanol 90% của A. chasmanthum Stapf. có tác dụng ức chế một số vi khuẩn gram âm. Dịch chiết A. tanguticum ức chế mạnh các loại vi khuẩn Fusarium semitectum và Staphylococcus aureus nhưng có tác dụng yếu với
Escherichia coli. Condelphin hydroclorid có tác dụng ức chế E. coli, Strept. haemolyticus,Staph. albus, Staph. aureus ở nồng độ 0.125 – 0.33 mg/ml [11].
- Tác dụng kháng nấm: Các phân đoạn dịch chiết có tác dụng mạnh trên nấm
Trichophyton mentagrophyte, đặc biệt phân đoạn etheyl acetat có tác dụng với hầu hết các loại nấm [11].
- Tác dụng kháng vi rút: Cao chiết Phụ tử, benzoylmesaconin, benzoylaconin, benzoylhypaconin, 14- anisoyaconin, neolin, ignavin, mesaconin, benzoylaconin, 16- pyromesaconin, pyraconin, 15 – α – hydroxyneolin, ajaconin hoặc benzoylmesaconin kết hợp với interleukin 12 (IL - 12) [107] đều có tác dụng chống nhiễm vi rút herpes simplex typ 1 và tăng tỉ lệ sống ở chuột nhắt trắng bị tổn thưởng bởi nhiệt. Benzoylmesaconin còn làm tăng tỉ lệ sống ở chuột nhắt trắng nhiễm vi rút gây suy giảm miễn dịch đồng thời nhiễm vi rút herpes simplex typ 1 hoặc ở chuột bị tổn thương bởi nhiệt và nhiễm Cytomegalo vi rút [108].
- Tác dụng với ký sinh trùng: Atisinium clorid, alcaloid chính phân lập từ A. orochryseum, có tác dụng ức chế hoạt động của TM4 và K1 của ký sinh trùng sốt rét
Plasmodium falciparum [107]
- Tác dụng ức chế emzym [108]: Thuốc ức chế enzym trên lâm sàng rất hữu ích. Chất ức chế tyrosinase, điều trị rối loạn sắc tố melanin, rất quan trọng trong mỹ phẩm làm trắng sau khi da bị cháy nắng. Một nghiên cứu tác dụng ức chế tyrosinase của 5 alcaloid cho thấy chỉ có lappaconitin và puberanin ức chế yếu enzyme tyrosinase với IC50 = 93.33 và 205.21 mg/kg. Hai alcaloid heterophyllin A và heterophyllin B phân
26
lập từ A. heterophyllum và nhận thấy chúng ức chế hiệp đồng enzym acetylcholineatrase và butyrylcholinestrase, giúp điều trị bệnh alzheimer.
- Tác dụng an thần: Phụ tử sống A. carmichaeli Debx. và A. japonicum Thunb. có tác dụng an thần trên chuột nhắt trắng. Phụ tử chế không có tác dụng này [11]. Một số thành phần có tác dụng an thần, giảm hoạt động tự nhiên, kéo dài thời gian ngủ do hexobarbital, làm hạ thân nhiệt ở chuột nhắt trắng như: aconitin, hypaconitin, mesaconitin, songoramin, benzoylhypaconin, benzoylaconin, benzoylmesaconin [27].
- Hạ sốt: Phụ tử sống với liều uống 1 g/kg gây hạ nhiệt độ trực tràng chuột cống trắng 1-1.5 oC trong hơn 3 giờ. Hypaconitin tiêm dưới da 0.3 mg/kg hoặc aconitin, mesaconitin 0.06 mg/kg gây hạ nhiệt độ trực tràng 1- 3 oC. Benzoylaconin cũng có tác dụng này nhưng ở liều 30 mg/kg [11]. Một số dẫn chất như 15-O-actyl-14-O- chlorobenzoylmesaconin và 15-O-acetyl-14-O-p-chlorobenzoyl-aconin cũng có tác dụng hạ sốt.
- Tác dụng lên cơ trơn: Phụ tử sống và các alcaloid như aconitin gây tăng co bóp cơ trơn hồi tràng chuột cống trắng cô lập nhưng sau khi chế biến thì không có tác dụng này. Tuy nhiên, alcaloid toàn phần của Bắc Ô đầu (A. kusnezoffii Reichb.) lại có tác dụng đối kháng với co thắt cơ trơn hồi tràng chuột lang cô lập do histamin, acetylcholin, albumin gây nên [11], [107].
1.3.1.10. Độc tính
Theo nghiên cứu của Sajan L Shyaula [116], ngộ độc do dùng củ của các loài thuộc chi Aconitum thường xảy ra do dùng sai liều, không chế biến dược liệu. Các triệu chứng xảy ra nhanh chóng trong vòng 10 đến 20 phút. Ban đầu là ngứa ran, nóng rát ở ngón tay, ngón chân, tiếp theo là đổ mồ hôi, ớn lạnh, khô miệng, mất cảm giác, nôn mửa, đau bụng dữ dội, tê liệt cơ xương, rối loạn nhịp tim. Nguyên nhân chính gây tử vong là trụy tim mạch, loạn nhịp thất. Tám giai đoạn khi bị ngộ độc được mô tả bởi Bhaisajya Ratnawali. Qua phân tích nước tiểu của bệnh nhân bị ngộ độc thấy rằng các trường hợp bị ngộ độc khi dùng các loài thuộc chi Aconitum ở Nepal trong nước tiểu thường có các alcaloid: bikhaaconitin, pseudoaconitin, indaconitin và yunaconitin. Xử lý ngộ độc các alcaloid trên cần thực hiện ngay và giám sát chặt chẽ nhịp tim, huyết áp. Nguyên nhân gây ra ngộ độc chủ yếu là các alcaloid diterpenoid có khung cấu trúc
27
C-19 và C-20. Các alcaloid chính có độc tính cao là: aconitin, mesaconitin, hypaconitin. Các alcaloid này có thể bị chuyển hóa thành dạng ít độc hoặc không còn độc tính. (aconitin→ benzoylaconin → aconin; mesaconitin→ benzoylmesaconin → mesaconin; hypaconitin→ benzoylhypaconin→ hypaconin) [56], [128]. Theo dõi 10 ca ngộ độc do sử dụng các loài thuộc chi Aconitum chủ yếu là A. kusnezoffii trong y học cổ truyền để chữa bệnh đau nhức xương khớp. Kiểm tra thấy trong các trường hợp đều phát hiện có alcaloid yunaconitin [73].
Giá trị LD50 của một số alcaloid được trình bày ở bảng 1.6.
Bảng 1.6. LD50 của một số alcaloid của chi Aconitum L. [11]
TT Tên Alcaloid LD50 (mg/kg) Uống Dưới da Màng bụng Tĩnh mạch 1 1- Benzoylnapellin 31.6-46.4 2 3- acetylaconitin 0.87 0.5 3 8- O- cinnamoylneonin 11.89 4 Aconifin 1.15 0.22 5 Aconin 120 6 Aconitin 1.8 0.27- 0.55 0.31 0.12 7 Benzoylaconin 1500 70 23 8 Benzoylaconitin 27 9 Benzoylhypaconin 830 130 120 23 10 Benzoylmesaconitin 810 230 240 21 11 Delavaconitin 106 12 Delsolin 550 13 Fuzilin 300 14 Guafu base A 422 134 15 Heteratisin 147-180 16 Higenamin 3350 300 48.9-58.9 17 Hypaconitin 5.8 1.19-1.9 1.1 0.47 18 Karacolin 298 51.5 19 Lappaconin 142-144 20 Lappaconitin 20 5.9-11.5 21 Magnoflorin 138 19.6 20
28 22 Mesaconitin 1.9 0.2-0.26 0.21-0.22 0.1-0.13 23 N- desacetyllappaconitin 67.1 23.5 24 Napellin >147 25 Sepaconitin 500 26 Songorin 1575 630 485 106-142 27 Talatisamin 115.5 28 Yunaconitin 0.26 0.59 0.05
Nhận xét: Qua tham khảo các nghiên cứu trước đây về tác dụng của chi Aconitum, cho thấy các loài thuộc chi này có nhiều tác dụng sinh học có thể ứng dụng trên lâm sàng. Đặc biệt là tác dụng chống viêm giảm đau, tác dụng chống oxy hóa bảo vệ gan và tác dụng tăng cường miễn dịch đang được các nhà khoa học tập trung nghiên cứu để ứng dụng trên lâm sàng. Hiện nay cây Ô đầu trồng ở Việt Nam mới được nghiên cứu về tác dụng chống viêm, giảm đau của dịch chiết nước, chiết từ phụ tử chế.Mặt khác, trên thế giới Ô đầu, Phụ tử không chỉ sử dụng trong y học cổ truyền mà còn sử dụng dưới các dạng bào chế hiện đại như dạng thuốc tiêm, viên, ống nước. Chính vì vậy, đề tài luận án định hướng tập trung nghiên cứu các tác dụng: tăng cường miễn dịch, chống oxy hóa bảo vệ gan, giảm đau trên phân đoạn dịch chiết có độc tính thấp, được chiết từ Ô đầu, Phụ tử sống. Điều này phù hợp với xu hướng sử dụng dược liệu trong y học hiện đại, cũng như điều kiện nghiên cứu phát triển sản phẩm từ dược liệu tại Việt Nam.
1.3.2. Công dụng
1.3.2.1. Ô đầu [3], [6], [27]
- Công năng: Khu phong, trừ thấp tý, ôn kinh chỉ thống - Chủ trị: Dùng trị đau khớp, tê mỏi cơ
- Cách dùng: Dùng ngoài xoa bóp dưới dạng thuốc ngâm rượu, không được uống.
1.3.2.2. Phụ tử [3], [6], [27]
- Công năng: hồi dương cứu nghịch, bổ hoả trợ dương, tán hàn, chỉ thống.
- Chủ trị: chứng vong dương, thoát dương, chân tay lạnh, đau nhức xương khớp, lưng gối đau lạnh, chân tay phù nề.
29
- Cách dùng, liều lượng: ngày dùng 4-12 g dược liệu đã bào chế đạt tiêu chuẩn giới hạn aconitin, dạng thuốc sắc.