PHẦN II: đỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4.1.Phương pháp lấy mẫu
Bệnh phẩm là biểu mô, mụn nước ở lưỡi, kẽ móng chân, niêm mạc mũi của bò, lợn.
Dung dịch bảo quản bệnh phẩm: Bệnh phẩm ựược ngâm trong dung dịch bảo quản ựựng trong lọ thủy tinh (kit của WRT-Pirbright) hoặc với thành phần dung dịch: Na2HPO4.H2O (3,05g), KH2PO4 (0,39g), nước cất vô trùng vừa ựủ: 500ml. Cộng thêm vào dung dịch trên: dung dịch Phenol 1%, kháng sinh gồm: penicillin (1000UI/ml), mycostatin (100UI/ml), neomycin (100UI/ml), polymycin (50UI/ml).
2.4.1.1. Phương pháp lấy mẫu máu
- Dùng xi lanh hút 3 ml máu từ vịnh tĩnh mạch của lợn.
- Tách huyết thanh vào ống Eppendorf, bảo quản ở nhiệt ựộ ựông ựá, gửi ựến phòng thắ nghiệm.
- Bảo quản huyết thanh ở 40C nếu xét nghiệm trong 1 tuần hoặc -300C nếu chưa xét nghiệm ngay.
2.4.1.2. Phương pháp lấy mẫu biểu mô
- Kiểm tra lâm sàng và chọn gia súc mới phát bệnh, bệnh phẩm ựược lấy từ các tổn thương mới (không lấy mẫu từ các tổn thương ở giai ựoạn lành sẹo hoặc ựã ựược sát trùng và ựiều trị).
- Thu thập mẫu biểu mô ở những gia súc có triệu chứng của bệnh LMLM. theo hướng dẫn của Cục Thú y và tuân thủ các quy tắc an toàn sinh học theo hướng dẫn của OIE ựể tiến hành xét nghiệm và ựịnh type virus (Tô Long Thành và cộng sự, 2004).
- Loại mẫu là biểu mô lưỡi, lợi, kẽ móng chân, viền móng chân bị bong tróc do mụn nước mới vỡ ra, dịch trong mụn nước và da bao quanh mụn nước lúc chưa vỡ.
- Mẫu bệnh phẩm ựược bảo quản 40C-8ồC trong hỗn hợp PBS 0,04M và Glycerin (tỷ lệ 1:1) pH = 7,2 - 7,6 trong suốt quá trình vận chuyển về phòng thắ nghiệm.
- Bảo quản mẫu bệnh phẩm ở 4ồC nếu xét nghiệm trong 1-3 ngày hoặc -80ồC nếu chưa xét nghiệm ngay.