II. Cỏc đặc điểm nghiờn cứu:
2.Quy trỡnh chọn người hiến tế bào gốc; huy động, thu gom và bảo quản tế bào gốc từ người hiến
2.1. Tiờu chuẩn chọn người hiến.
Những người hiến cú cỏc tiờu chuẩn sau được lựa chọn hiến tế bào gốc để
ghộp cho bệnh nhõn:
- Anh, chị em ruột của bệnh nhõn phự hợp về HLA-A, B và DR, tối thiểu 5/6 allen với bệnh nhõn.
- Khụng bị nhiễm HBV, HCV và HIV.
- Hoàn toàn khỏe mạnh, khụng mắc cỏc bệnh mạn tớnh. 2.2. Cỏc xột nghiệm trước ghộp của người hiến
Bước 1:
+ Xột nghiệm tổng phõn tớch tế bào mỏu, cỏc xột nghiệm về chức năng gan thận của người hiến;
+ Xột nghiệm định nhúm HLA-A, B, DR anh, chị em ruột bằng kỹ thuật sinh học phõn tử.
+ Xột nghiệm cỏc xột nghiệm về HBV, HCV, HIV bằng kỹ thuật ELISA. Bước 2: Nếu phự hợp HLA:
+ Xột nghiệm CMV và EBV bằng kỹ thuật ELISA. + Định nhúm mỏu hệ ABO, Rh.
127
2.3. Quy trỡnh huy động, thu gom và bảo quản tế bào gốc từ người hiến: hiến:
a. Người hiến tế bào gốc được tiờm dưới da G-CSF 10àg/kg cõn nặng/ngày, chia hai lần.
b. Tiến hành kiểm tra số lượng bạch cầu hàng ngày và số lượng tế bào CD34+ sau khi tiờm G-CSF và ngày thứ 4 bằng mỏy flow cytometry. Khi số
lượng tế bào CD34+ đạt trờn 10 tế bào/àl, tiến hành gạn tế bào gốc bằng mỏy tỏch tế bào loại COBE-Spectra. Mỗi lần tiến hành gạn ớt nhất là ba lần thể tớch mỏu của bệnh nhõn.
c. Sau quỏ trỡnh thu gom, cỏc mẫu sẽ được tiến hành đếm: Số lượng tế
bào mỏu, số lượng tế bào gốc CD34+ thu gom được. Thu gom sẽ kết thỳc nếu số
lượng CD34+ trờn và bằng 3 x 106/kg cõn nặng bệnh nhõn.
d. Trung bỡnh dự kiến cần ớt nhất hai buổi thu gom tế bào gốc. Cần tớnh toỏn thời gian sử dụng phỏc đồ điều kiện húa trờn bệnh nhõn để khớp với thời gian thu gom tế bào gốc cú nghĩa là thời kết thỳc phỏc đồ điều kiện húa cho bệnh nhõn cũng là thời gian kết thỳc quỏ trỡnh thu gom tế bào gốc ở người hiến.
Đơn vị tế bào gốc được bảo quản và lưu trữở nhiệt độ từ 2°C đến 8°C, cần ghộp
đơn vị tế bào gốc tạo mỏu cho bệnh nhõn trước thời hạn 72 giờ.