Khi tiến hành lấy mẫu để phân lập vi khuẩn E. coli, chúng tôi chọn những con lợn bị bệnh phù đầu có những triệu chứng sau: Phù mí mắt, đi lại loạng choạng, thay đổi tiếng kêu, chết đột ngột... Mổ khám lợn đã chết hoặc gần chết để lấy mẫu phân lập vi khuẩn. Bệnh phẩm gồm có dịch ruột non, chất chứa ruột non, gan, lách, hạnh ruột... Mẫu được đưa về phòng thí nghiệm Bộ môn Vi trùng - Trung tâm chẩn đoán thú y trung ương - Cục thú y, để phân lập vi khuẩn E. coli. Kết quả phân lập được trình bày ở bảng 3.13.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.13. Tỷ lệ phân lập vi khuẩn E. coli từ bệnh phẩm
Loại bệnh phẩm Kết quả phân lập Số mẫu phân lập (n) Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Dịch ruột non 95 95 100
Chất chứa ruột non 95 95 100
Hạch ruột 95 95 100
Gan, lách 95 93 97,89
Tính chung 95 95 100
Qua bảng 3.13 chúng tôi thấy rằng. Các mẫu bệnh phẩm là dịch ruột non, chất chứa ruột non, hạch ruột, gan và lách thu thập từ 95 lợn bị bệnh ở Phú Thọ, nuôi cấy phân lập trên môi trường thạch Macconkey, môi trường nước thịt-não-tim (BHI). Cho thấy: Trên môi trường thạch Macconkey, khuẩn lạc hình tròn, ướt, màu đỏ tím có ánh kim. Trong môi trường nước thịt, vi khuẩn phát triển làm đục môi trường, có mùi phân thối. Làm tiêu bản nhuộm Gram thấy vi khuẩn ở trong các môi trường hầu hết đều có hình dạng đặc trưng của vi khuẩn E. coli.
Như vậy, các bệnh phẩm của những lợn con có triệu chứng bệnh đều thấy vi khuẩn E. coli với tỷ lệ cao nhất ở dịch ruột non, chất chứa ruột non và hạch ruột là 100%, thấp nhất là ở gan, lách 97,89%. Theo chúng tôi hoàn toàn phù hợp với cơ chế gây bệnh của E. coli là vi khuẩn bám dính vào tế bào niêm mạc ruột. Xâm nhập vào lớp tế bào này, phát triển và gây bệnh
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với nghiên cứu của Nguyễn Ngọc Hải và cs, (2000) [8]; Phạm Trọng Hổ, (2007) [11] khi tiến
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
hành phân lập vi khuẩn E. coli từ 512 mẫu các loại bệnh phẩm có tỷ lệ bình quân 73,83% trong đó cao nhất ở dịch ruột non 79,69%, tiếp đến là chất chứa ruột non 77,34%, ở hạch ruột 71,88% và thấp nhất là ở gan, lách 66,41%. Trần Thị Phương Nga, (2006) [17], khi xác định tỷ lệ phân lập vi khuẩn E. coli từ lợn bị bệnh sưng phù đầu ở một số tỉnh phía Bắc có tỷ lệ bình quân như Hà Nội 76%, ở Thái Nguyên 77,36%, ở Hà Tây 81,25%, ở thành phố Hải Phòng 76,53%. Nguyễn Thị Kim Lan, (2004) [13], đã xác định tỷ lệ phân lập vi khuẩn E. coli gây bệnh Coli dung huyết trên các bệnh phẩm gan, lách, hạch ruột, ruột non ở tỉnh Bắc Giang có tỷ lệ bình quân 98,33% và ở tỉnh Thái Nguyên có tỷ lệ từ 95,56% - 100%. Nguyễn Khả Ngự, (2000) [19], có tỷ lệ phân lập vi khuẩn E. coli của lợn bị phù đầu ở hạch ruột, gan, lách, máu tim, phổi, dịch ruột non, chất chứa ruột bình quân là 94,76%.
Đặc điểm nổi bật trong các mẫu E. coli phân lập là khuẩn lạc phát triển, thuần và ít tạp khuẩn trên các môi trường nuôi cấy chuyên biệt, Theo
Moon H.W và cs, (1979) [65] vi khuẩn E. coli tác động lên bề mặt niêm mạc ruột non, đặc biệt là khoảng giữa không tràng và hồi tràng, rồi vào niêm mạc ruột, hệ thống lâm ba, vào máu và gây ra các bệnh tích xung huyết, xuất huyế và sưng phù. Vì vậy, tỷ lệ phân lập vi khuẩn E. coli cao từ các mẫu bệnh phẩm ở trên.