Các dung dịch sử dụng và môi trƣờng nghiên cứu

Một phần của tài liệu Tách dòng và biểu hiện gene mã hóa chitinase của Bacillus licheniformis KNUC213 trong nấm men Pichia pastoris (Trang 29 - 31)

* Các dung dịch đệm sử dụng trong điện di protein trên gel polyacrylamide có chứa sodium doecyl sulfate (SDS-PAGE)

Bis-Acrylamide 30%: cân 30 g acrylamide 99% và 0,8 g bis- acrylamide, hòa tan trong 100 ml nƣớc cất vô trùng, bảo quản ở 4oC. Đệm

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

Tris 1,5 M (pH 8,8): Tris 0,75 M; 0,2% SDS và dùng HCl để chỉnh pH đến 8,8. Đệm Tris 0,5 M (pH 6,8): Tris 0,25 M; 0,2% SDS và dùng HCl để chỉnh pH đến 6,8. SDS 10% (100 ml): cân 10 g SDS và bổ sung nƣớc cất tới thể tích 100 ml.

Đệm chạy điện di: Tris 0,05 M; glycine 0,192 M; 0,1% SDS. Dung dịch nhuộm gel: AgNO3 1%.

APS 10%: cân 10 mg amonium persulfate hòa vào 900 mg nƣớc cất. Đệm xử lý mẫu 6X: 7 ml Tris-HCl 1M (pH 6,8); 3 ml glycerol 100%; 1 g SDS; 0,6 ml 2-Mercapto-ethanol; 1,2 mg Bromophenol.

* Các dung dịch đệm sử dụng trong điện di DNA/RNA trên agarose gel

Dung dịch đệm TAE 50 lần (100 ml): 24,2% Tris-base; 5,71 ml acetic acid; 10 ml EDTA 0,5 M (pH 8).

Đệm tra mẫu (6X) (loading dye): 0,25% Bromophenol blue; 0,25% Xylen cyanol FF; 30% glycerol.

Dung dịch nhuộm gel Ethidium bromide (EtBr) 0,5 µg/ml.

* Môi trường

Môi trƣờng MS1 (g.L-1

): Cao nấm men 5,0; K2HPO4.3H2O 2,0; KH2PO4 1,0; MgSO4. 7H2O 0,7; NaCl 0,5; KCl 0,5; CaCl2 0,1; thạch 20,0; nƣớc cất 1000 ml; pH 6,0.

Môi trƣờng MS2 (g.L-1

): Cao nấm men 5,0; K2HPO4.3H2O 2,0; KH2PO4 1,0; Glucose 2,0; MgSO4. 7H2O 0,7; NaCl 0,5; KCl 0,5; CaCl2 0,1; thạch 20,0; nƣớc cất 1000 ml; pH 6,0.

Môi trƣờng MS3 (g.L-1

): (NH4)2SO4 2,0; Glucose 5,0; K2HPO4.3H2O 2,0; KH2PO4 1,0; MgSO4. 7H2O 0,7; NaCl 0,5; KCl 0,5; CaCl2 0,1; thạch 20,0; nƣớc cất 1000 ml; pH 7,0.

Môi trƣờng Luria-Bertani (LB): 1% Tryptone, 0,5% cao nấm men, 0,5% NaCl, pH 7-7,2.

Môi trƣờng YPDS: 1% cao nấm men, 2% peptone, 2% glucose, 1M sorbitol, 100 g/ml zeocine.

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

Môi trƣờng BMGY: 1% cao nấm men, 1% peptone; 100mM potassium phosphate, pH 6,0; 1,34% YNB; 4x10-5% biotin; 1% glycerol.

Môi trƣờng BMMY: 1% cao nấm men, 1% peptone; 100mM potassium phosphate, pH 6,0; 1,34% YNB; 4x10-5% biotin; 0,5 % methanol.

Một phần của tài liệu Tách dòng và biểu hiện gene mã hóa chitinase của Bacillus licheniformis KNUC213 trong nấm men Pichia pastoris (Trang 29 - 31)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(74 trang)