PHẨM LACTOVET
3.2.1 Kết quả lên men Lactobacillus TL4 trên thiết bị lên men Infors và tạo chế phẩm. chế phẩm.
Kết quả khảo sát các yếu tố ảnh hƣởng đến sự sinh trƣởng của chủng L.
plantarum TL4: Nhu cầu oxy, nồng độ glucose, pH, nhiệt độ, nồng độ NaCl
đƣợc tổng hợp ở bảng 3.6.
Bảng 3.6. Bảng tổng hợp các điều kiện tối ƣu cho sinh trƣởng
của chủng
L. plantarum TL4 khi lên men sục khí
Yếu tố khảo sát Điều kiện tối ƣu Các thông số cài đặt khi lên men
Nhiệt độ (o
C) 32oC Kiểm soát lên men ở 32o
C
pH môi trƣờng pH = 6 Kiểm soát dịch lên men ở pH = 6
Nồng độ glucose 2% Môi trƣờng MRS có bổ sung glucose 2%
Nồng độ NaCl 3% Môi trƣờng MRS có bổ sung NaCl 3%
Nhu cầu oxy oxy thấp Nhu cầu Tốc độ khuấy 300 v/p; sục khí 0,3vvm Kết quả động học lên men của chủng Lacbacillus plantarum TL4 đƣợc trình bày ở bảng 3.7
Bảng 3.7. Kết quả động học lên men của chủng L.plantarum TL4
trên thiết bị lên men Labfors
Giờ chạy
lên men Giá trị OD
Tốc độ khuấy (vòng/phút) pH Nồng độ oxy (%) Nhiệt độ 0 0,198 300 6 91,6 32oC 2 0,232 300 6,02 90,7 32oC 4 0,439 300 6,02 83,6 32oC 6 1,8 300 5,9 80,1 32oC
Formatted: Space Before: 4 pt, Line spacing: Multiple 1.55 li, Widow/Orphan control, Adjust space between Latin and Asian text
Formatted: Balloon Text, Space Before: 4 pt, Line spacing: Multiple 1.55 li, Widow/Orphan control
Formatted: None, Line spacing: single, Widow/Orphan control
Formatted Table
Formatted: Line spacing: single
Formatted: Line spacing: single, Adjust space between Latin and Asian text, Adjust space between Asian text and numbers
Formatted: Justified, None, Line spacing: single, Widow/Orphan control
8 2,32 300 6,03 75,2 32oC 10 4,42 300 5,85 60,6 32oC 12 5,8 300 5,95 45,7 32oC 13 6,78 300 6,02 34,3 32oC 13h20 7,2 300 5,84 26,6 32oC 13h40 7,38 300 5,8 22,4 32oC 14 7,44 300 5,95 20 32oC 14h20 7,46 300 6,05 19,2 32oC 14h40 7,47 300 5,95 19,5 32oC
Hình 3.5 Kết quả động học của chủng L.plantarum TL4
trên thiết bị lên men Labfors
Từ biểu đồ cho thấy ở pha lag ( từ 0 – 4h nuôi cấy ) chủng Lactobacillus
plantarum chƣa phân chia mạnh ( OD từ 0,198 – 0,439 ) và lƣợng oxy sử
Số hóa bởi trung tâm học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
trong môi trƣờng ≥80%). Trong pha này tế bào chƣa phân cắt nhƣng thể tích và khối lƣợng tăng lên rõ rệt do có sự tăng các thành phần mới của tế bào. Do điều kiện môi trƣờng mới không giống môi trƣờng cũ cho nên tế bào vi khuẩn cần một thời gian nhất định để tổng hợp các enzyme mới nhằm sử dụng đƣợc các chất dinh dƣỡng. Đến pha log ( 4 – 13h20’ nuôi cấy ) chủng Lactobacillus
plantarum sinh trƣởng và phát triển mạnh nhất ( giá trị OD từ 0,439 – 7,2 ) và
lƣợng oxy mà chủng sử dụng đạt 57%. Ở pha log nhịp độ sinh trƣởng của các tế bào là không thay đổi trong suốt giai đoạn này, các tế bào phân đôi một cách đều đặn. Đến pha ổn định (13h20’ – 14h40’) số lƣợng tế bào đạt trạng thái ổn định, chỉ số OD (7,2 – 7,47) dao động không đáng kể. Ở pha ổn định tế bào giữ đƣợc sự ổn định về kích thƣớc và khối lƣợng, kết quả là sinh khối đƣợc giữ ở mức ổn định, thƣờng thì việc ly tâm thu sinh khối tế bào đƣợc thực hiện ở đầu pha ổn định.
Sau khi lên men trên thiết bị Labfors, chúng tôi tiến hành kiểm tra số lƣợng tế bào có trong 1ml dịch lên men: Kết quả đạt khoảng 1011
CFU/ml. Sau đó chúng tôi tiến hành ly tâm (ở 4o
C, 7000 vòng trong 10 phút) thu sinh khối tế bào và bổ sung vào chất mang phù hợp. Sau khi phối trộn và sấy chất mang đạt độ ẩm <10%, số lƣợng tế bào có trong chế phẩm vào khoảng 8,5x109 CFU/g.
Formatted: Font color: Black, Condensed by 0.3 pt, Kern at 14 pt
Formatted: Font color: Black, Condensed by 0.3 pt, Kern at 14 pt
Formatted: Font color: Black, Kern at 14 pt
Formatted: Right, Line spacing: single, Widow/Orphan control, Adjust space between Latin and Asian text, Adjust space between Asian text and numbers
Hình 3.6 Chế phẩm Lactovet sử dụng cho vật nuôi